Спосіб одержання засобу з діуретичною, антимікробною та анаболічною активністю

Спосіб одержання засобу з діуретичною, антимікробною та анаболічною активністю шляхом трикратної екстракції рослинної сировини водою при загальному співвідношенні сировини до екстрагенту 1:20 при постійно підтримуваній температурі 90 °С з подальшою фільтрацією та упарюванням у вакуумі об'єднаних екстрактів до сухого порошку, який відрізняється тим, що екстракції піддають листя півників болотяних, першу екстракцію проводять при співвідношенні сировина:екстрагент 1:10 протягом 2,0 годин, другу та третю - при 1:5 відповідно по 1 годині кожну. Винахід належить до хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема до способів одержання засобів рослинного походження з діуретичною, антимікробною та анаболічною активністю, які можуть бути використані як активні субстанції при створенні відповідних лікарських препаратів у різних лікарських формах, придатних для лікування і профілактики захворювань сечовидільної системи. Терапія урологічних захворювань передбачає тривале застосування лікувальних засобів. У цьому випадку доцільне використання препаратів рослинного походження, які, на відміну від синтетичних, практично не мають побічної дії, як правило не викликають алергічної реакції, є не токсичними і придатними до тривалого застосування без формування залежності тощо. Лікування більшості захворювань сечовидільної системи потребує засобів з комплексною, переважно діуретичною, антимікробною та анаболічною дією. Проте арсенал таких препаратів рослинного походження є досить обмеженим. Відомий спосіб одержання засобу з протизапальною, антимікробною та діуретичною дією з листя груші звичайної [1] шляхом багаторазової екстракції рослинної сировини 10 % спиртом етиловим при співвідношенні сировина:екстрагент 1:9-1:11 протягом 9-11 годин з подальшим упарюванням об'єднаного екстракту до 1/18-1/20 попереднього об'єму. Вміст сухого залишку у готовому продукті становить 24,3 %. Недоліком наведеного способу є багатостадійність, що ускладнює його здійснення у виробничих умовах, надмірні витрати спирту етилового [1]. Відомий спосіб одержання засобу з протизапальною, імуномоделюючою та антигіпоксантною дією з трави півників молочно-білих [2] шляхом екстракції рослинної сировини 35-45 % спиртом етиловим при співвідношенні сировина:екстрагент 1:10-1:12 протягом 10-12 годин з подальшою концентрацією та сушінням цільового продукту. Отриманий комплекс має низьку токсичність та проявляє протизапальну, імуномодулюючу та антигіпоксичну активність. Недоліком наведеного способу є надмірні витрати спирту етилового. Крім того, спосіб не до (19) UA (11) 97192 (13) (21) a201010256 (22) 20.08.2010 (24) 10.01.2012 (46) 10.01.2012, Бюл.№ 1, 2012 р. (72) КОВАЛЬОВ СЕРГІЙ ВОЛОДИМИРОВИЧ, ЗАТИЛЬНІКОВА ОЛЬГА ОЛЕКСАНДРІВНА, ДЕРКАЧ НАТАЛЬЯ ВОЛОДИМИРІВНА, ОСОЛОДЧЕНКО ТАТЬЯНА ПАВЛІВНА (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ (56) RU 2300387 C2, 10.06.2007. RU 2140277 C1, 27.10.1999. RU 2123349 C1, 20.12.1998. UA 33401 U, 25.06.2008. C2 1 3 зволяє одержати засіб з комплексною діуретичною, антимікробною та анаболічною активністю [2]. Найближчим до заявленого способу за сукупністю ознак є спосіб одержання біологічно активної субстанції з трави сої щетинистої з анаболічною дією [3], який передбачає двоступеневу екстракцію рослинної сировини гарячою водою при постійно підтримуваній температурі 100-105 °C при співвідношенні сировина:екстрагент 1:39-1:41 протягом 2 та 0,5 години відповідно з подальшою фільтрацією та упарюванням об'єднаних екстрактів до густої консистенції з вмістом сухого залишку 65-75 %. Загальний вихід екстрактивних речовин становить 32,44 % від повітряно-сухої сировини. Вищезазначений спосіб не дозволяє одержати засіб з комплексною діуретичною, антимікробною та анаболічною активністю [3]. Задачею винаходу є створення нового способу одержання засобу з діуретичною, антимікробною та анаболічною активністю шляхом екстракції листя півників болотяних при заданих умовах, в результаті чого одержують ефективний природний засіб з вираженою фармакологічною дією для лікування захворювань сечовидільної системи. Поставлена задача вирішується таким чином, що у способі одержання засобу з діуретичною, антимікробною та анаболічною дією шляхом трикратної екстракції рослинної сировини дистильованою водою при температурі 90 °C з подальшою фільтрацією та упарюванням у вакуумі об'єднаних екстрактів до сухого порошку згідно з винаходом передбачено, що як рослинну сировину використовують листя півників болотяних, першу екстракцію здійснюють при співвідношенні сировина:екстрагент 1:10 протягом 2,0 годин, другу та третю - по 1;5 відповідно по 1 годині кожна. Пошук нових видів рослин з заданою біологічною активністю дозволяє одержувати з них засоби, які розширюють арсенал існуючих лікарських препаратів і сприяють здійсненню індивідуального підходу до лікування хворих. Як рослинну сировину для заявленого способу авторами було вибрано листя півників болотяних (Iris pseudacorus L.). Півники болотяні - багаторічна трав'яниста рослина родини півникові (Iridaceae) є перспективним об'єктом фармакогностичного та фармакологічного вивчення. У народній медицині використовують корені півників болотяних як відхаркувальні, в'яжучі, протизапальні, сечогінні, кровоспинні засоби [4]. Використання листя півників болотяних як лікарської рослинної сировини для одержання лікувальних засобів, зокрема з діуретичною, антибактеріальною та анаболічною дією, є невідомим з джерел інформації та неочевидним. Всі параметри заявленого способу визначено експериментальним шляхом з урахуванням біологічної активності одержаного засобу, ефективності, доступності та нешкідливості реактивів, практичного відтворення способу у промислових умовах. Вибір екстрагента було здійснено експериментальним шляхом, виходячи з кількості одержаних екстрактивних речовин, вартості та екологічної безпечності екстрагента. Такий екстрагент є дешевим, доступним та екологічно безпечним. 97192 4 Сумарне співвідношення сировина екстрагент 1:20 встановлено експериментальним шляхом та є оптимальним для даного виду сировини. При зменшенні кількості екстрагенту погіршується процес екстракції. Збільшення екстрагенту понад задане співвідношення економічно недоцільне. Загальна тривалість усіх етапів екстракції складає 4 години і є достатньою для вичерпного вилучення з сировини екстракту з діуретичною, антибактеріальною та анаболічною активністю. Заявлений спосіб здійснюють наступним чином. Повітряно-сухе листя півників болотяних піддають трикратній екстракції дистильованою водою при загальному співвідношенні сировина:екстрагент 1:20 та загальній тривалості екстракції - 4 години при температурі 90 °C. Першу екстракцію здійснюють при співвідношенні сировина:екстрагент 1:10 протягом 2,0 годин, другу та третю при співвідношенні - по 1:5 відповідно протягом 1 години кожна. Одержані водні екстракти об'єднують, відфільтровують та упарюють у вакуумі до одержання сухого темно-жовтого з характерним запахом порошку. Вихід готового продукту становить 21,5 % від повітряно-сухої сировини. Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1. 1,0 кг повітряно-сухого подрібненого листя півників болотяних залили 10,0 л дистильованої води і екстрагували при періодичному перемішуванні та постійно підтримуваній температурі 90 °C протягом 2,0 годин. Процес повторили ще двічі порціями екстрагенту по 5,0 л протягом 1 години після кожного додавання екстрагенту. Одержані екстракти відфільтрували під вакуумом, об'єднали і упарили у вакуум-ротаційному апараті при температурі 90-100 °C до отримання сухого продукту. Вихід сухого екстракту склав 21,5 %. Приклад 2. Вивчення діуретичної активності екстракту з листя півників болотяних, одержаного за заявленим способом, проводили на білих нелінійних щурах чоловічої та жіночої статі масою 180-200 г у дослідах за методом Є.Б. Берхіна [5]. Тварин було поділено на групи в залежності від одержуваного препарату. Тварини першої, другої та третьої групи одержували екстракт з листя півників болотяних у вигляді водно-олійної суспензії (розчинник ТВИН-80 та дистильована вода) у дозі 25, 40, 150 мл/кг від маси тварин відповідно. Тварини четвертої групи одержували препарат порівняння - настойку листя ортосифону тичинкового у дозі 40 мл/кг. П'ята група - контрольні тварини. Досліджувані препарати вводили перорально внутрішньошлунково за допомогою спеціального зонду. Усі тварини одержували водяне навантаження через шлунковий зонд, яке складало 3 % від маси тіла тварини. Після введення речовин тварин поміщали в "обмінні клітки" для збору сечі та реєстрували діурез через 4 години. Активність діурезу розраховували за формулою: Д  100% , A о Дк де 5 97192 A - діуретивність діуреза, %; Д о - діурез у досліді з досліджуваним препаратом, мл; Д к - діурез у контрольному досліді, мл. 6 Результати експерименту наведені у таблиці 1. Таблиця 1 Вивчення діуретичної активності засобу, одержаного за заявленим способом Досліджувані препарати Об'єм сечі, мл Екстракт з листя півників болотяних, 25 4,2±0,3*/** мг/кг Екстракт з листя півників болотяних, 40 4,3±0,2*/** мг/кг Екстракт з листя півників болотяних, 150 4,15±0,2*/** мг/кг Настойка листя ортосифону тичинково3,9±0,3* го, 40 мг/кг Контроль 2,6±0,2 Діуретична активність, % 61,5 65 59,6 50 100 Примітка: *р