Спосіб одержання лікувального екстракту з трави звіробою

Реферат: Спосіб одержання лікувального екстракту з трави звіробою для лікування і профілактики гельмінтозів у тварин та птиці включає подрібнення лікарської сировини, екстракцію у три послідовні прийоми, фасування готового екстракту. Екстракт трави звіробою отримують шляхом розділення подрібненої маси трави на три рівні дози (частини), триразового внесення у першу дозу 70 % водного розчину етилового спирту та перенесення спиртової витяжки з першої дози у другу, а з другої - у третю. Здійснюють витримування у кожній дозі, злиття з третьої дози трьох фракцій витяжок, відстоювання при температурі 8-10 °C протягом 72 годин, випаровування до густої консистенції екстракту, сушіння при температурі 40 °C до вмісту залишкової вологості екстракту не більше 5 %, диспергування порошкоподібного екстракту в середовищі дистильованої води або 40 % водного розчину етилового спирту під дією ультразвуку протягом 30-120 секунд в кавітаційному режимі до розміру часток екстрагента менше 20 мкм. UA 111917 U (12) UA 111917 U UA 111917 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до фармакології, зокрема до способів отримання речовин, які мають лікувальні та профілактичні властивості, і може бути використана для виготовлення препаратів ветеринарного призначення, призначених переважно для лікування і профілактики гельмінтозів у тварин і птиці. Найбільш близьким за сукупністю суттєвих ознак до корисної моделі є спосіб отримання лікувального екстракту (Патент SU, № 1787439), який включає подрібнення лялечок шовкопряда, екстракцію дистильованою водою в три послідовних прийоми шляхом нагрівання до температури кипіння, передбачено перше екстрагування в співвідношенні маса-об'єм 1: 5 і злив отриманого екстракту, доливши до біомаси води в співвідношенні маса - об'єм 1:3 і злив другої фракції екстракту, доливши води до біомаси в співвідношенні маса-об'єм 1: 2 і змішування третьої фракції екстракту з попередніми, фільтрацію суміші екстрактів, витримування протягом 18-20 годин при температурі 2-5 °C, повторну фільтрацію, доведення обсягу фільтрату водою до 1 літра, введення в екстракт хлориду натрію до отримання ізотонічного розчину, розлив по флаконах та стерилізацію готового екстракту. Даний спосіб порівняно простий у виконанні, досить ефективний в отриманні екстрагованих речовин з біомаси і призначений переважно для виготовлення препаратів ветеринарного призначення, що володіють задовільною антитоксичною активністю. Заявлений спосіб і прототип мають спільні суттєві ознаки, а саме: включає подрібнення лікарської сировини, екстракцію у три послідовні прийоми, фасування готового екстракту. Суттєвим недоліком цього способу є те, що він в силу притаманних йому прийомів здійснення, наприклад застосування дистильованої води, наявність в операції додавання хлориду натрію, операції кип'ятіння і ін., має вузьку сферу застосування, тому що спочатку призначений для отримання препаратів з антитоксичною активністю, не забезпечує більш високу ефективність вилучення речовин, що екстрагуються, тому що використовується одна доза біомаси. Крім цього в процесі екстрагування використовуються досить дефіцитні і дорогі лялечки шовкопряда і хлорид натрію, що впливає на підвищення собівартості готового продукту, при цьому хлорид натрію в присутності води сприяє появі буро-чорного кольору, що погіршує зовнішній вигляд екстракту, а готовий екстракт має відносно великі розміри частинок, що негативно впливає на біодоступність, кратність застосування та терапевтичну ефективність препарату, що застосовується при лікуванні. Заявлений нами спосіб усуває вказані недоліки прототипу і забезпечує високу ефективність отримання екстракту для лікування і профілактики гельмінтозів у тварин, що має розширену область застосування і спектр дії, переважно ветеринарного призначення. В основу корисної моделі поставлена задача розробити ефективний спосіб одержання лікувального екстракту з трави звіробою для лікування і профілактики гельмінтозів у тварин та птиці, зручний в застосуванні, економічно вигідний для використання. Поставлена задача вирішується тим, що екстракт трави звіробою отримують шляхом розділення подрібненої маси трави на три рівні дози (частини), триразового внесення у першу дозу 70 % водного розчину етилового спирту та перенесення спиртової витяжки з першої дози у другу, а з другої у третю, витримування у кожній дозі, злиття з третьої дози трьох фракцій витяжок, відстоювання при температурі 8-10 °C протягом 72 годин, випаровування до густої консистенції екстракту, сушіння при температурі 40 °C до вмісту залишкової вологості екстракту не більше 5 %, диспергування порошкоподібного екстракту в середовищі дистильованої води або 40 % водного розчину етилового спирту під дією ультразвуку протягом 30-120 секунд в кавітаційному режимі до розміру часток екстрагента менше 20 мкм. Детальний аналіз показує, що спосіб одержання лікувального екстракту з трави звіробою, який заявляється, відрізняється від прототипу застосуванням екстрагенту 70 % -го етилового спирту, а також іншою тимчасовою витримкою суміші екстрактів і використанням ультразвукового диспергування, що вказує про наявність ознак, що відрізняють заявлену корисну модель від прототипу. В даному випадку використання як екстрагента спиртової витяжки попередніх фракцій в наступних забезпечує більш ефективний витяг екстрагованих речовин, при цьому ультразвукове диспергування сприяє високій біодоступності і терапевтичній ефективності при лікуванні широкого спектра гельмінтозів у тварин і птиці, що свідчить про досягнення неочевидного, більш високого технічного результату. Таким чином наведені інформативні відомості пояснюють технічний результат заявленого способу, підтверджуючи його ефективність і об'єктивність. При проведенні патентно-інформаційного пошуку авторами і заявником виявлено технічне рішення (Патент SU, № 1787439), що містить найбільшу кількість суттєвих ознак, спільних із 1 UA 111917 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 заявленим способом. Спосіб включає подрібнення лікарської сировини, екстракцію у три послідовні прийоми, фасування готового екстракту. Але наявність зазначених, спільних із прототипом ознак недостатня для одержання технічного результату, який забезпечує заявлений спосіб. Технічних рішень, які б за сукупністю ознак повністю б співпадали із заявленим, не виявлено. У патентній і науково-технічній літературі не знайдено технічних рішень, в яких були б описані відомості про ознаки, що відрізняють заявлений спосіб від прототипу і забезпечують досягнення технічного результату тим, що екстракт трави звіробою отримують шляхом розділення подрібненої маси трави на три рівні дози (частини), триразового внесення у першу дозу 70 % водного розчину етилового спирту та перенесення спиртової витяжки з першої дози у другу, а з другої у третю, витримування у кожній дозі, злиття з третьої дози трьох фракцій витяжок, відстоювання при температурі 8-10 °C протягом 72 годин, випаровування до густої консистенції екстракту, сушіння при температурі 40 °C до вмісту залишкової вологості екстракту не більше 5 %, диспергування порошкоподібного екстракту в середовищі дистильованої води або 40 % водного розчину етилового спирту під дією ультразвуку протягом 30-120 секунд в кавітаційному режимі до розміру часток екстрагента менше 20 мкм. Заявлений спосіб здійснюється наступним чином. Попередньо ретельно подрібнюють, наприклад 150 г трави звіробою звичайного, поділяють утворену біомасу на три рівноважні дози по 50 г. Кожну дозу біомаси поміщають у відповідну їй ємність. Першу дозу біомаси кількістю 50 г заливають 400 мл 70 %-ним етиловим спиртом у співвідношенні відповідно маса - об'єм 1:8 і настоюють 2 години. Потім віджимають і отриманий обсяг спиртової витяжки кількістю 300 мл переносять в ємність, де знаходиться друга доза біомаси, також рівна 50 г, в співвідношенні відповідно маса - об'єм 1: 6 і настоюють 2 години, а в першу дозу додають свіжий спиртової екстрагент кількістю 100 мл, в співвідношенні відповідно маса - об'єм 1:2. Після цього спиртову витяжку другої дози кількістю 200 мл переносять в ємність з третьою дозою в співвідношенні маса - об'єм 1:4, а в звільнену від екстрагента другу дозу переносять обсяг вилучення з першої і знову заповнюють її свіжим екстрагентом, кількістю 100 мл. Тепер, коли всі дози біомаси заповнені екстрагентом їх витримують 24 години. Потім з третьої дози зливають першу фракцію екстракту, кількістю 100 мл. Далі обсяг вилучення з другої дози переносять в звільнену третю, а в звільнену другу з першої і настоюють 2 години. Потім з третьої дози зливають другу фракцію екстракту, кількістю 100 мл. Далі обсяг вилучення з другої дози переносять в звільнену третю і настоюють 2 години. Потім з третьої дози зливають третю останню фракцію екстракту, кількістю 100 мл. Всі три фракції об'єднують і суміш екстракту витримують при 8 °C протягом 72 годин, наприклад в холодильнику, фільтрують, наприклад через воронку Бюхнера, і випарюють до отримання маси з консистенцією густого екстракту, наприклад у вакуумній печі. Густоподібний екстракт сушать при температурі 40° С до залишкової вологості не більше 5 %. Отриману масу, наприклад 0,1-0,2 г диспергують в 30 мл дистильованої води накладенням ультразвукових коливань з амплітудою не більше 20 мкм з частотою 22 кГц до розміру часток в екстракті менше 20 мкн. Отриманий таким чином екстракт розфасовують по флаконах і використовують як засіб для лікування і профілактики гельмінтозів у тварин. Ефективність заявленого способу та його переваги перед прототипом підтверджені прикладом конкретного виконання. Досліди на коровах Можливість застосування засобу, отриманого на основі способу, що заявляється, для лікування і профілактики нематодозів, трематодозов і еймеріозу у тварин підтверджується клінічними випробуваннями, в яких брали участь п'ять груп корів масою 450 кг по 10 тварин в кожній групі (4 піддослідні і 1 контрольна). Тварини всіх груп були спонтанно інвазовані стронгілятами шлунково-кишкового тракту, фасціолами і дикроцеліями. Тваринам першої групи вводили сухий екстракт звіробою звичайного дозою 25 мг/кг двоктратно, тваринам другої групи вводили сухий екстракт, оброблений ультразвуком, дозою 10 мг/кг одноразово, тваринам третьої групи вводили сухий екстракт, оброблений ультразвуком, дозою 20 мг/кг одноразово, тварини 4 групи отримували базовий препарат - альбом у дозі 10 мг/кг одноразово, тварини п'ятої групи служили контролем і препарати не отримували. Ефективність оцінювали на 1, 5, 7 і 14 день експерименту, при лікуванні стронгілятозу для цього використовували метод Дарлінга, при лікуванні фасціольозу і дикроцеліозу оцінку проводили на 5, 15, 30, 45 і 60 день, застосовуючи для цього метод послідовних промивань. Аналіз отриманих результатів показує, що застосування сухого екстракту, обробленого ультразвуком, в порівнянні з сухим екстрактом і базовим препаратом дозволяє досягти 100 % 2 UA 111917 U 5 10 15 20 25 30 35 40 терапевтичної ефективності. Сухий екстракт звіробою звичайного практично не впливає на фасціоли і дикроцелії, а базовий препарат Альбен, показуючи високу терапевтичну ефективність, має ряд обмежень щодо застосування тваринницької продукції (молоко і м'ясо) в їжу людям. Таким чином, сухий екстракт оброблений ультразвуком дозволяє досягти 100 % терапевтичної ефективності, водночас характеризується істотно високою біодоступністю і зниженням кратності прийому препарату при широкому спектрі застосування. Досліди на курчатах-бройлерах Можливість застосування засобу на основі заявленого способу для лікування і профілактики еймеріозу у курчат-бройлерів підтверджується клінічними випробуваннями, в яких брали участь 5 груп курчат-бройлерів по 20 голів у кожній, за принципом умовних аналогів. Перша група птахів отримувала турококс (базовий препарат) в терапевтичній дозі. Друга група отримувала сухий екстракт, оброблений ультразвуком, звіробою звичайного ентерально дозою 5 мг/кг триразово з водою, інтервал 24 години. Третя група отримувала сухий екстракт, оброблений ультразвуком, звіробою звичайного ентерально дозою 10 мг/кг триразово з водою, інтервал 24 години. Четвертій групі задавали сухий екстракт, оброблений ультразвуком, звіробою звичайного ентерально дозою 20 мг/кг триразово з водою, інтервал 24 години. П'ята група служила контролем і препарати не отримувала. У першій дослідній групі, де застосовували базовий препарат, еймерії виявляли протягом усього експерименту, проте до кінця лікування спостерігалося значне зниження кількості ооцист: до початку дослідження 3922±376,17 яєць еймерій в 1 г фекалій, до 14 дня - 111±60, 61. Екстенсивність склала 40 %, інтенсивність - 69,1 %. У другій групі, де застосовувався оригінальний препарат звіробою дозою 5 мг/кг також спостерігалося зниження кількості ооцист: до початку дослідження 4070±319,86 яєць еймерій в 1 г фекалій, до 14 дня - 444±83,16. При цьому екстенсивність склала - 90 %, а інтенсивність в групі - 80,7 %. Застосування препарату в третій групі, де застосовувався оригінальний препарат звіробою дозою 10 мг/кг, відбулося зниження кількості ооцист в 1 г фекалій від 4033±399,85 і 296±83,16 до 9 дня і повне звільнення до 11 дня дослідження. Екстенсивність і інтенсивність склала 100 %. У четвертій групі, де застосовували оригінальний препарат звіробою дозою 20 мг/кг, дослідження показало значне зниження кількості ооцист: з 4218±318,05 яєць еймерій в 1 г фекалій, до 9 дня до 185±91,027 ооцист і повного визволення до 14 дня. Екстенсивність і інтенсивність в цій групі склали 100 %. У контрольній групі птиця була інвазована еймеріями протягом усього часу експерименту. Таким чином, можна зробити висновок, що застосування сухого екстракту звіробою звичайного, обробленого ультразвуком, дозою 10 мг/кг не поступається за ефективністю базовому препарату і має високу терапевтичну ефективність при лікуванні еймеріозної інвазії у курчат-бройлерів в умовах виробництва. Отже, ефективність заявленого способу і його переваги перед відомим способом (прототипом) при лікуванні тварин за гельмінтозної інвазії підтверджена результатами прикладу конкретного застосування способу. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 45 50 55 Спосіб одержання лікувального екстракту з трави звіробою для лікування і профілактики гельмінтозів у тварин та птиці, що включає подрібнення лікарської сировини, екстракцію у три послідовні прийоми, фасування готового екстракту, який відрізняється тим, що екстракт трави звіробою отримують шляхом розділення подрібненої маси трави на три рівні дози (частини), триразового внесення у першу дозу 70 % водного розчину етилового спирту та перенесення спиртової витяжки з першої дози у другу, а з другої - у третю, витримування у кожній дозі, злиття з третьої дози трьох фракцій витяжок, відстоювання при температурі 8-10 °C протягом 72 годин, випаровування до густої консистенції екстракту, сушіння при температурі 40 °C до вмісту залишкової вологості екстракту не більше 5 %, диспергування порошкоподібного екстракту в середовищі дистильованої води або 40 % водного розчину етилового спирту під дією ультразвуку протягом 30-120 секунд в кавітаційному режимі до розміру часток екстрагента менше 20 мкм. 3 UA 111917 U Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4