Спосіб отримання екстракту звіробою, що має антидепресивну активність

Спосіб отримання екстракту звіробою, що має антидепресивну активність, шляхом екстракції трави звіробою, що полягає в обробці сировини 31616 містить 1,5% суми гіперіцинів у перерахунку на гіперіцин, що зумовлює його біологічну дію (кількісне визначення гіперіцинів - за методикою [3]), без залишку розчинний у воді, який є порошком темнокоричневого кольору із приємним терпким запахом. Вивчено токсичність та антидепресивну дію отриманого в результаті здійснення запропонованого способу екстракту зі звіробою в гострих та хронічних дослідах на тваринах (миші) із використанням двох моделей депресії. Визначення токсичності Токсичність визначали в гострих та хронічних дослідах на білих мишах-самцях вагою 12,0-27,0 г за методикою [5]. Екстракт звіробою у вигляді водного розчину вводили мишам перорально з використанням металічного зонду. Тривалість хронічних дослідів - 14 днів. Результати визначення токсичності екстракту, отриманого із використанням запропонованої методики; екстрактів зі звіробою, одержаних за способами [1] і [2]; та стандартних синтетичних антидепресантів (Амітриптилін, Флуоксетін) (LD50 в гострих дослідах та наявність візуальних ознак токсичної дії - в хронічних дослідах) наведено в табл. 1. Наведені в табл. 1 дані свідчать, що екстракт зі звіробою, отриманий згідно з запропонованим способом, має значно меншу токсичність у порівнянні як з екстрактами, отриманими зі звіробою, що використовуються для промислового виготовлення препаратів антидепресивної дії, так і зі стандартними синтетичними антидепресантами Амітриптиліном та Флуоксетіном (синонім - Прозак). LD50 екстракту, отриманого згідно зі способом, що пропонується, встановити не вдалось у зв'язку з відсутністю загибелі мишей навіть при пероральному введенні їм дози 2000 мг/кг. Як випливає з даних табл. 1, екстракти зі звіробою, одержані за методиками [1] та [2], мають низьку токсичність в гострих дослідах, але при хронічному застосуванні (що є необхідним для прояву вираженої антидепресивної активності) є досить токсичними. Синтетичні антидепресанти Амітриптилін та Флуоксетін відрізняються високою токсичністю в гострих дослідах, але не мають кумулятивної токсичної дії. Визначення антидепресивної активності Визначення антидепресивної активності шляхом плавального тесту (перша модель депресії) Антидепресивну активність вивчали на білих мишах-самцях вагою 15,0-38,0 г із використанням плавального тесту [6]. Ефективну дозу субстанції або препарату визначали, виходячи з ЛД50 (вона дорівнює 0,1 ЛД50). Тривалість досліду - 14 днів. Отримані результати визначення антидепресивної активності шляхом плавального тесту екстракту, отриманого із використанням запропонованої методики; екстрактів зі звіробою, одержаних за способами [1] і [2]; та стандартних синтетичних антидепресантів (Амітриптилін, Флуоксетін) наведені в табл. 2. Як свідчать результати табл. 2, екстракт зі звіробою, отриманий згідно з запропонованим способом, за результатами плавального тесту має більш високу антидепресивну активність у порівнянні з екстрактами, отриманими за методиками [1] і [2], і приблизно однакову - зі стандартними си нтетичними антидепресантами Амітриптиліном та Флуоксетіном (трохи поступається останнім за тривалістю періодів іммобілізації та перевищує за тривалістю латентного періоду). Визначення антидепресивної активності шляхом резерпінового тесту, комбінованого з плавальним тестом (друга модель депресії) Антидепресивну активність вивчали на білих мишах-самцях вагою 14,0-36,0 г із використанням резерпінового тесту [4], у комбінації з плавальним тестом [6]. Ефективну дозу субстанції або препарату визначали, виходячи з ЛД50 (маса тварини, помножена на 0,02, мг/кг). Тривалість досліду – 15 днів. Отримані результати визначення антидепресивної активності шляхом резерпінового тесту, комбінованого з плавальним тестом, екстракту, отриманого із використанням запропонованої методики; екстрактів зі звіробою, одержаних за способами [1] і [2]; та стандартних синтетичних антидепресантів (Амітриптилін, Флуоксетін) наведені в табл. 3 За всіма показниками, наведеними в табл. 3, екстракт зі звіробою, отриманий згідно з запропонованим способом, має найвищу антидепресивну активність як у порівнянні з екстрактами зі звіробою, так і з синтетичними препаратами антидепресивної дії. Таким чином, екстракт, отриманий згідно зі способом, що пропонується, за результатами використання при двох моделях депресії має високу антидепресивну активність, вищу за всі досліджені субстанції зі звіробою, які застосовуються для виробництва фармацевтичних препаратів, і приблизно співпадаючу з активністю синтетичних антидепресантів Амітриптіліну та Флуоксетіну. Приклади здійснення запропонованого способу отримання екстракту зі звіробою Приклад 1 125 г трави звіробою звичайного Hypericum perforatum L., суха сировина, заливають 1000 мл ацетону, настоюють 3-4 доби при кімнатній температурі, отриманий ацетоновий екстракт відфільтровують. Знежирену ацетоном сировину звіробою висушують у термостаті до повного випарювання ацетону при 50°С. 100 г знежиреної ацетоном сировини звіробою заливають 3000 мл киплячої дистильованої води, екстрагують на киплячій водяній бані протягом 30 хв, настоюють 1 годину, відфільтровують крізь вату. Отриманий екстракт висушують до повного випарювання води. Отриманий екстракт зі звіробою є нетоксичним (токсичність в гострих дослідах – ЛД50 вище за 2000 мг/кг; в хронічних дослідах застосування ефективної дози екстракту протягом 14 діб не призводить до появи ознак токсичного впливу) та має високу антидепресивну активність. Приклад 2 125 г трави звіробою звичайного Hypericum perforatum L., суха сировина, заливають 800 мл ацетону, настоюють 3-4 доби при кімнатній температурі, отриманий ацетоновий екстракт відфільтровують. Знежирену ацетоном сировину звіробою висушують у термостаті до повного випарювання ацетону при 50°С. 100 г знежиреної ацетоном сировини звіробою заливають 3000 мл киплячої дистильованої води, екстрагують на киплячій водяній 2 31616 бані протягом 30 хв, настоюють 1 годину, відфільтровують крізь вату. Отриманий екстракт висушують до повного випарювання води. Отриманий екстракт зі звіробою є малотоксичним (токсичність в гострих дослідах – ЛД50 дорівнює 2000 мг/кг; в хронічних дослідах на 10 добу застосування ефективної дози екстракту призводить до появи ознак токсичного впливу - у 10% тварин з'являються виразки кінцівок) та має високу антидепресивну активність, але дещо нижчу за екстракт, отриманий згідно з прикладом 1. Приклад 3 125 г трави звіробою звичайного Hypericum perforatum L., суха сировина, заливають 1200 мл ацетону, настоюють 3-4 доби при кімнатній температурі, отриманий ацетоновий екстракт відфільтровують. Знежирену ацетоном сировину звіробою висушують у термостаті до повного випарювання ацетону при 50°С. 100 г знежиреної ацетоном сировини звіробою заливають 3000 мл киплячої дистильованої води, екстрагують на киплячій водяній бані протягом 30 хв, настоюють 1 годину, відфільтровують крізь вату. Отриманий екстракт висушують до повного випарювання води. Отриманий екстракт зі звіробою є нетоксичним (токсичність в гострих дослідах - ЛД50 вище за 2000 мг/кг; в хронічних дослідах застосування ефективної дози екстракту протягом 14 діб не призводить до появи ознак токсичного впливу) та має високу антидепресивну активність. Приклад 4 125 г трави звіробою звичайного Hypericum perforatum L., суха сировина, заливають 800 мл ацетону, настоюють 2 доби при кімнатній температурі, отриманий ацетоновий екстракт відфільтровують. Знежирену ацетоном сировину звіробою висушують у термостаті до повного випарювання ацетону при 50°С. 100 г знежиреної ацетоном сировини звіробою заливають 3000 мл киплячої дистильованої води, екстрагують на киплячій водяній бані протягом 30 хв, настоюють 1 годину, відфільтровують крізь вату. Отриманий екстракт висушують до повного випарювання води. Отриманий екстракт зі звіробою є малотоксичним (токсичність в гострих дослідах - ЛД50 дорівнює 1000 мг/кг; в хронічних дослідах на 8 добу застосування ефективної дози екстракту призводить до появи ознак токсичного впливу - у 10% тварин з'являються виразки кінцівок, на 12 добу застосування у 15% тварин з'являються пухлини) та має не дуже високу антидепресивну активність, значно нижчу за екстракт, отриманий згідно з прикладом 1. Приклад 5 125 г трави звіробою звичайного Hypericum perforatum L., суха сировина, заливають 800 мл ацетону, настоюють 2 доби при кімнатній температурі, отриманий ацетоновий екстракт відфільтровують. Знежирену ацетоном сировину звіробою висушують у термостаті до повного випарювання ацетону при 50°С. 100 г знежиреної ацетоном сировини звіробою заливають 2000 мл киплячої дистильованої води, екстрагують на киплячій водяній бані протягом 30 хв, настоюють 1 годину, відфільтровують крізь вату. Отриманий екстракт висушують до повного випарювання води. Отриманий екстракт зі звіробою є нетоксичним (токсичність в гострих дослідах – ЛД50 вище за 2000 мг/кг; в хронічних дослідах застосування ефективної дози екстракту протягом 14 діб не призводить до появи ознак токсичного впливу) та має антидепресивну активність, меншу за екстракт, отриманий згідно з прикладом 1 (див. табл. 4). Приклад 6 125 г трави звіробою звичайного Hypericum perforatum L., суха сировина, заливають 800 мл ацетону, настоюють 2 доби при кімнатній температурі, отриманий ацетоновий екстракт відфільтровують. Знежирену ацетоном сировину звіробою висушують у термостаті до повного випарювання ацетону при 50°С. 100 г знежиреної ацетоном сировини звіробою заливають 4000 мл киплячої дистильованої води, екстрагують на киплячій водяній бані протягом 30 хв, настоюють 1 годину, відфільтровують крізь вату. Отриманий екстракт висушують до повного випарювання води. Отриманий екстракт зі звіробою є нетоксичним (токсичність в гострих дослідах - ЛД50 вище за 2000 мг/кг; в хронічних дослідах застосування ефективної дози екстракту протягом 14 діб не призводить до появи ознак токсичного впливу) та має антидепресивну активність, меншу за екстракт, отриманий згідно з прикладом 1 (див. табл. 5). Приклад 7 125 г трави звіробою звичайного Hypericum perforatum L., суха сировина, заливають 800 мл ацетону, настоюють 2 доби при кімнатній температурі, отриманий ацетоновий екстракт відфільтровують. Знежирену ацетоном сировину звіробою висушують у термостаті до повного випарювання ацетону при 50°С. 100 г знежиреної ацетоном сировини звіробою заливають 3000 мл киплячої дистильованої води, екстрагують на киплячій водяній бані протягом 15 хв, настоюють 1 годину, відфільтровують крізь вату. Отриманий екстракт висушують до повного випарювання води. Отриманий екстракт зі звіробою є нетоксичним (токсичність в гострих дослідах - ЛД50 вище за 2000 мг/кг; в хронічних дослідах застосування ефективної дози екстракту протягом 14 діб не призводить до появи ознак токсичного впливу) та має антидепресивну активність, меншу за екстракт, отриманий згідно з прикладом 1 (див. табл. 6). Приклад 8 125 г трави звіробою звичайного Hypericum perforatum L., суха сировина, заливають 800 мл ацетону, настоюють 2 доби при кімнатній температурі, отриманий ацетоновий екстракт відфільтровують. Знежирену ацетоном сировину звіробою висушують у термостаті до повного випарювання ацетону при 50°С. 100 г знежиреної ацетоном сировини звіробою заливають 3000 мл киплячої дистильованої води, екстрагують на киплячій водяній бані протягом 45 хв, настоюють 1 годину, відфільтровують крізь вату. Отриманий екстракт висушують до повного випарювання води. Отриманий екстракт зі звіробою є нетоксичним (токсичність в гострих дослідах - ЛД50 вище за 2000 мг/кг; в хронічних дослідах застосування ефективної дози екстракту протягом 14 діб не призводить до появи ознак токсичного впливу) та має високу антидепресивну активність. 3 31616 близно однаковою за результатами двох тестів антидепресивною активністю. Запропонований спосіб отримання екстракту із звіробою є новим і дозволяє значно підвищити ефективність застосування сировини рослини в медичній практиці. Спосіб, що пропонується, є достатньо простим та доступним будь-який лабораторії, не вимагає значних витрат і попередньої підготовки. Все вищезазначене дозволить значно поширити можливості медицини в терапії депресивних станів. Приклад 9 125 г трави звіробою звичайного Hypericum perforatum L., суха сировина, заливають 800 мл ацетону, настоюють 2 доби при кімнатній температурі, отриманий ацетоновий екстракт відфільтровують. Знежирену ацетоном сировину звіробою висушують у термостаті до повного випарювання ацетону при 50°С. 100 г знежиреної ацетоном сировини звіробою заливають 3000 мл киплячої дистильованої води, екстрагують на киплячій водяній бані протягом 30 хв, настоюють 30 хв, відфільтровують крізь вату. Отриманий екстракт висушують до повного випарювання води. Отриманий екстракт зі звіробою є нетоксичним (токсичність в гострих дослідах – ЛД50 вище за 2000 мг/кг; в хронічних дослідах застосування ефективної дози екстракту протягом 14 діб не призводить до появи ознак токсичного впливу) та має антидепресивну активність, меншу за екстракт, отриманий згідно з прикладом 1 (див. табл. 7). Приклад 10 125 г трави звіробою звичайного Hypericum perforatum L., суха сировина, заливають 800 мл ацетону, настоюють 2 доби при кімнатній температурі, отриманий ацетоновий екстракт відфільтровують. Знежирену ацетоном сировину звіробою висушують у термостаті до повного випарювання ацетону при 50°С. 100 г знежиреної ацетоном сировини звіробою заливають 3000 мл киплячої дистильованої води, екстрагують на водяній бані 70°С протягом 30 хв, настоюють 1 годину, відфільтровують крізь вату. Отриманий екстракт висушують до повного випарювання води. Отриманий екстракт зі звіробою є нетоксичним (токсичність в гострих дослідах - ЛД50 вище за 2000 мг/кг; в хронічних дослідах застосування ефективної дози екстракту протягом 14 діб не призводить до появи ознак токсичного впливу) та має антидепресивну активність, меншу за екстракт, отриманий згідно з прикладом 1 (див. табл. 8). Приклад 11 100 г сухої трави звіробою заливають 3000 мл киплячої дистильованої води, екстрагують на киплячій водяній бані протягом 30 хв, настоюють 1 годину, відфільтровують крізь вату. Отриманий екстракт висушують до повного випарювання води. Отриманий екстракт зі звіробою є малотоксичним (токсичність в гострих дослідах - ЛД50 дорівнює 2000 мг/кг; в хронічних дослідах на 8 добу застосування ефективної дози екстракту призводить до появи ознак токсичного впливу - у 10% тварин з'являються пухлини) та має антидепресивну активність, меншу за екстракт, отриманий згідно з прикладом 1 (див. табл. 9). Таким чином, запропонований спосіб забезпечує підвищення біологічної дії та зменшення токсичності отриманого в результаті його застосування екстракту зі звіробою у порівнянні з екстрактами, отриманими зі звіробою, які використовуються для промислового виготовлення препаратів антидепресивної дії. Токсичність отриманого згідно з запропонованим способом екстракту зі звіробою значно менша за токсичність синтетичних антидепресантів (Амітриптилін, Флуоксетін) поряд із при Джерела інформації: 1. Okpanyi S.N., Lidzba H., Scholl B.C., Miltenburger H.G. Genotoxizitat eines standardisierten Hypericum-Extraktes // Arzneimittelforschung. - 1990. Bd. 40, N 8. - S. 851-855. 2. Hansel R., Keller K., Rimpler H., Schneider G. Hypericum // Hagers Handbuch der Pharmazeutischen Praxis, 5th ed. Vol. 5. Drogen E-O. Beriin: Springler-Verlag, 1993. - S. 474-495. (прототип). 3. Маковецкая Е.Ю., Аксютина Н.П., Четверня С.А. Количественное определение антраценпроизводных у видов Hypericum L. на некоторых фазах онтогенеза // Ресурсоведческое и фитохимическое изучение лекарственной флоры СССР. Науч. тр. ВНИИ фармации. - М.,1991. - Т.29. - С. 156-163. 4. Машковский М.Д., Андреева Н.И., Полежаева А.И. Фармакология антидепрессантов. - М.: Медицина. - 240 с. 5. Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.М. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки // Фармакол. и токсикол. -1978. - № 4. - С. 497-502. 6. Русаков Д.Ю., Вальдман А.В. Применение плавательного теста для выявления антидепрес- сивной активности при однократном и хроническом введении веществ // Фармакол. и токсикол. -1983. - № 5. - С. 107-111. 7. Butterweck V., Wall A., Lieflander-Wulf U. et al. Effects of the total extract and fractions of Hypericum perforatum in animal assays for antidepressant activity // Pharmacopsychiatry. -1997. - Vol. 30, Suppl. 2. - P. 117-124. 8 Chatterjee S.S., Noldner М., Koch E. et al. Antidepressant activity of hypericum perforatum and hyperforin: the neglected possibility // Pharmacopsychiatry. - 1998. - Vol. 31, Suppl. 1. - P. 7-15. 9. Dimpfel W., Schober F., Mannel М. Effects of a methanolic extract and a hyperforin-enriched C02 extract of St. John's Wort (Hypericum perforatum) on intracerebral field potentials in the freely moving rat (Tele-Stereo-EEG) // Pharmacopsychiatry. - 1998. Vol. 31, Suppl. 1. - P. 30-35. 10. Ernst E.S.O. St. John's Wort as antidepressive therapy // Fortschritte der Medizin. - 1995. - Bd. 113, N 25. - S. 354-355. 11. Müller W.E., Schäfer C.S. St. John's wort: In-vitro study about hypericum extract, hypericin and kaempferol as antidepressants Deutsche Apotheker Zeitung. 1996. - Bd. 136, N 13. - S. 1015-1022. 12. (No authors listed). Therapy of mild to medium degree depression // Nervenarzt. - 1998. - Vol. 69, 5 Suppl. Therapie D. - P. 1-8. 4 31616 Таблиця 1 Токсичність деяких екстрактів зі звіробою у порівнянні зі стандартними синтетичними антидепресантами №№ 1 2 3 4 5 Субстанція або препарат Екстракт, отриманий згідно з запропонованим способом Екстракт, отриманий за методикою [1] Екстракт, отриманий за методикою [2] Амітриптилін Флуоксетін LD50, мг/кг Токсичність Ознаки токсичної дії після хронічного введення речовин в ефективній дозі (14 діб) кількість тванаявність характеристика ознак рин, % >2000 2000 + 40% 2000 + 30% 200 60 Ознаки токсичної дії відсутні. Загибель - 10%, виразки кінці- вок 20%, пухлини - 10% Дерматити - 20%, виразки кінцівок 10% Ознаки токсичної дії відсутні Ознаки токсичної дії відсутні Таблиця 2 Результати визначення антидепресивної активності деяких екстрактів зі звіробою у порівнянні зі стандартними синтетичними антидепресантами плавальний тест) №№ 1 Субстанція або препарат Екстракт, отриманий згідно з запропонованим способом 2 Екстракт, отриманий за методикою [1] 3 Екстракт, отриманий за методикою [2] 4 Амітриптилін 5 Флуоксетін 6 Контроль (тварини без навантаження препарату) Тривалість латентного періоду, с до введення субстанції – 32" після введення – 48" індекс співвідношення - 0,67 до введення субстанції – 47" після введення – 45" індекс співвідношення - 1,04 до введення субстанції – ЗІ" після введення – 37" індекс співвідношення - 0,84 до введення препарату – 45" після введення – 47" індекс співвідношення - 0,96 Характеристика періодів мобілізації кількість тривалість, с до введення - 10 до введення – 204" після – 123" після - 9 індекс - 1,66 індекс - 1,11 до введення - 10, до введення – 148" після – 141" після - 7, індекс -1,05 індекс - 1,43 до введення -10 до введення –219" після - 10 після – 194" індекс - 1,00 індекс -1,13 до введення - 11 до введення – 191" після - 10 після - 101" індекс - 1,10 індекс - 1,89 до введення препарату – 50" після введення – 55" індекс співвідношення - 0,91 перший день досліду – 45" 15-й день досліду – 43" індекс співвідношення - 1,05 до введення - 11 після - 9 індекс - 1,22 до введення – 182" після – 98" індекс - 1,86 перший день - 11 15-й день - 11 індекс -1,00 перший день –191" 15-й день-201" індекс - 0,95 5 31616 Таблиця З Результати визначення антидепресивної активності деяких екстрактів зі звіробою у порівнянні зі стандартними синтетичними антидепресантами (резерпіновий тест, комбінований з плавальним тестом) Характеристика періодів іммобілізації 36" 10 Резерпін 11" 13 Після введення 39" 9 0,92 1,11 38" 11 Резерпін Екстракт, отриманий згідно з запропонованим способом Тривалість латентного періоду, с Індекс (співвідношення на 1 та 15 день досліду) 1 Субстанція або препарат Умови досліду До введення препаратів №№ 14" 15 Після введення 25" 13 1,52 0,85 До введення препаратів 2 Екстракт, отриманий за методикою [1] Індекс кількість 6 Прояви дії резерпіну в групі тварин та антирезерпінова дія при використанні тривалість с препарату Симптоми дії резерпіну через 105 хв після введення 207" (блефароптоз у 40%, зменшення рухливості (сонливість), втрата цікавості до їжі - 100%, через 2,5 години - у 10% діарея. Через 4,5 328" год. - діарея у 40%, у 90% блефароптоз. На момент введення препарату - діарея у 40%, птоз та сонливість – у 100%. Антирезерпінова дія екст93" ракту - через 1 год після введення - зменшення діареї, птозу, деяке збільшення рухливості. Через 1,5 год птоз практично не виявля2,24 ється. Через 2,5 год - припинення діареї Симптоми дії резерпіну через 70 хв після введення 182" (блефароптоз у 20%, через 90 хв - зменшення рухливості (сонливість), втрата цікавості до їжі - 100%, через 3 години - у 30% діарея. Через 5 год - діарея у 40%, у 301" 100% блефароптоз. На момент введення препарату діарея у 60%, птоз та сонливість - у 100%. Антирезерпінова дія екст235" ракту - через 90 хв після введення - зменшення діареї, птозу, деяке збільшення рухливості. Через 3,5 год птоз практично не виявля0,77 ється. Через 4 год - припинення діареї. 31616 Продовження табл. 3 Характеристика періодів іммобілізації Тривалість латентного періоду, с 36" 10 Резерпін 12" 16 Після введення 28" 10 1,29 1,00 42" 10 Резерпін 3 Екстракт, отриманий за методикою [2] Умови досліду До введення препаратів Субстанція №№ або препарат 12" 13 Після введення 49" 9 0,86 1,11 Індекс До введення препаратів 4 кількість Амітриптилін Індекс 7 Прояви дії резерпіну в групі тварин та антирезерпінова дія при використанні тривалість с препарату Симптоми дії резерпіну через 85 хв. Після введення 201" (блефароптоз у 30%, зменшення рухливості (сонливість), втрата цікавості до їжі - 100%, через 1,5 години - у 20% діарея. Через 4 год. 286 - діарея у 60%, у 100% блефароптоз. На момент введення препарату - діарея у 80%, птоз та сонливість – у 100%. 194" Антирезерпінова дія екстракту - через 80 хв. після введення - зменшення діареї, птозу, деяке збільшення рухливості. Через 2,5 год. птоз практично не виявля1,04 ється. Через 3 год. - припинення діареї Симптоми дії резерпіну через 100 хв після введення 155" (блефароптоз у 30%, зменшення рухливості (сонливість), втрата цікавості до їжі - 100%, через 2 години у 20% діарея. Через 4 год 318 діарея у 50%, у 100% блефароптоз. На момент введення препарату - діарея у 50%, птоз та сонливість – у 100% Антирезерпінова дія пре107" парату - через 80 хв після введення - зменшення діареї, птозу, деяке збільшення рухливості. Через 2 год птоз практично не виявля1,45 ється. Через 3 год - припинення діареї 31616 Продовження табл. 3 Характеристика періодів іммобілізації Прояви дії резерпіну в групі тварин та антирезерпінова дія при використанні тривалість с препарату Симптоми дії резерпіну через 110 хв після введення (блефароптоз у 60%, змен189" шення рухливості (сонливість), втрата цікавості до їжі - 100%, через 120 хв- у 50% діарея. Через 4,5 год діарея у 80%, у 10% - кри329 вава діарея, у 100% блефароптоз. На момент введення препарату - діарея у 80%, птоз та сонливість – у 100%. 164" Антирезерпінова дія препарату - через 1 год після введення - зменшення діареї, птозу, деяке збільшення рухливості. Через 2 год 1,15 птоз практично не виявляється. Через 5 год - припинення діареї Симптоми дії резерпіну 189" через 90 хв після введення (блефароптоз у 20%, зменшення рухливості (сонли329" вість), втрата цікавості до їжі - 100%, через 2,5 години - у 40% діарея. Через 4 год 272" у 90% блефароптоз Діарея у 30% тварин тривала 48 год., у 10% - 29 год, птоз 0,69 та сонливість тривали 72 год Умови досліду Тривалість латентного періоду, с До введення препаратів 32" 10 Резерпін 13" 12 Після введення 27" 9 1,19 1,11 38" 11 12" 14 18" 12 2,11 0,92 37" 11 196" 32" 11 211" 1,16 1,00 0,93 Субстанція №№ або препарат 5 Флуоксетін Індекс До введення резерпіну 6 Резерпін, Резерпін без подальшого наван15-й день таження предосліду парату Індекс 7 кількість 1-й день Контроль (тварини без досліду 15-й день навантаження препара- досліду ту) Індекс Таблиця 4 Результати визначення антидепресивної активності деяких екстрактів зі звіробою із застосуванням плавального тесту Тривалість латентного періоду, с Характеристика періодів іммобілізації кількість тривалість, с №№ Субстанція 1 Екстракт, отриманий згідно з запропонованим способом (приклад 1) до введення субстанції - 32" після введення - 48" індекс співвідношення - 0,67 до введення -10 після - 9 індекс -1,11 до введення -204" після - 123" індекс - 1,66 2 Екстракт, отриманий за прикладом 5 до введення субстанції - 37" після введення - 44" індекс співвідношення - 0,84 до введення -10, після - 10, індекс - 1,00 до введення -196" після - 155" індекс - 1,26 8 31616 Таблиця 5 Результати визначення антидепресивної активності деяких екстрактів зі звіробою із застосуванням плавального тесту №№ Субстанція Тривалість латентного періоду, с Характеристика періодів імобілізації кількість тривалість, с 1 Екстракт, отриманий згідно з запропонованим способом (приклад 1) до введення субстанції – 32" після введення – 48" індекс співвідношення - 0,67 до введення –10 після – 9 індекс - 1,11 до введення - 204" після - 123" індекс -1,66 2 Екстракт, отриманий за прикладом 6 до введення субстанції - 40" після введення - 42" індекс співвідношення - 0,95 до введення –10 після –10 індекс - 1,00 до введення - 204" після - 184" індекс - 1,15 Таблиця 6 Результати визначення антидепресивної активності деяких екстрактів зі звіробою із застосуванням плавального тесту Характеристика періодів іммобілізації кількість тривалість, с №№ Субстанція Тривалість латентного періоду, с 1 Екстракт, отриманий згідно з запропонованим способом (приклад 1) до введення субстанції - 32" після введення - 48" індекс співвідношення - 0,67 до введення –10 після – 9 індекс - 1,11 до введення -204" після - 123" індекс - 1,66 2 Екстракт, отриманий за прикладом 7 до введення субстанції - 38" після введення - 41" індекс співвідношення - 0,93 до введення –10 після – 9 індекс -1,11 до введення -185" після - 139" індекс - 1,33 Таблиця 7 Результати визначення антидепресивної активності деяких екстрактів зі звіробою із застосуванням плавального тесту Характеристика періодів іммобілізації кількість тривалість, с №№ Субстанція Тривалість латентного періоду, с 1 Екстракт, отриманий згідно з запропонованим способом (приклад 1) до введення субстанції - 32" після введення - 48" індекс співвідношення - 0,67 до введення –10 після – 9 індекс - 1,11 до введення -204". після-123", індекс 1,66 2 Екстракт, отриманий за прикладом 9 до введення субстанції - 40" після введення - 45" індекс співвідношення - 0,89 до введення - 11 після – 10 індекс - 1,10 до введення -212" після - 152" індекс -1,39 Таблиця 8 Результати визначення антидепресивної активності деяких екстрактів зі звіробою із застосуванням плавального тесту №№ Субстанція Тривалість латентного періоду, с 1 Екстракт, отриманий згідно з запропонованим способом (приклад 1) до введення субстанції - 32" після введення - 48" індекс співвідношення - 0,67 до введення –10 після – 9 індекс -1,11 до введення -204" після- 123" індекс - 1,66 2 Екстракт, отриманий за прикладом 10 до введення субстанції - 35" після введення - 44" індекс співвідношення - 0,80 до введення - 9 після - 9 індекс - 1,00 до введення - 182" після - 137" індекс - 1,33 9 Характеристика періодів іммобілізації кількість тривалість, с 31616 Таблиця 9 Результати визначення антидепресивної активності деяких екстрактів зі звіробою із застосуванням плавального тесту Характеристика періодів іммобілізації кількість тривалість, с №№ Субстанція Тривалість латентного періоду, с 1 Екстракт, отриманий згідно з запропонованим способом (приклад 1) до введення субстанції - 32" після введення - 48" індекс співвідношення - 0,67 до введення –10 після – 9 індекс - 1,11 до введення - 204" після-123" індекс - 1,66 2 Екстракт, отриманий за прикладом 11 до введення субстанції - 57" після введення - 60" і індекс співвідношення - 0,95 до введення –9 після – 7 індекс - 1,29 до введення -157" після - 139" індекс -1,13 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 35 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 10