Спосіб діагностики виражених стадій фіброзу у хворих на хронічний гепатит с

Спосіб діагностики виражених стадій фіброзу у хворих на хронічний гепатит С, що включає оцінку інтенсивності метаболічних зсувів в сироватці крові шляхом біохімічного дослідження сироватки, який відрізняється тим, що цей стан оцінюють по рівню спонтанної хемілюмінесценції, перекисіндукованої хемілюмінесценції сироватки крові, площі перекисіндукованої хемілюмінограми, концентрації середніх молекул І циркулюючих імунних комплексів, і якщо інтенсивність спонтанної, перекисіндукованої хемілюмінесценції і площа хемілюмінограми нижча, а концентрація середніх молекул і циркулюючих імунних комплексів вища, то діагностують більш високу ступінь фіброзу у Корисна модель відноситься до галузі медицини, конкретно до інфекційних хвороб і гепатології, а саме до лабораторної діагностики виражених стадій фіброзу (F2-F4) у хворих на хронічний гепатит С Актуальність проблеми корисної моделі пов'язана з високим рівнем захворюваності на хронічний вірусний гепатит С (ХГС), який є головною причиною розвитку цирозу і гепатоцелюлярного раку печінки. Хронічний гепатит С - хвороба, яка супроводжується клінічно малоси митом-ним прогресуванням фіброзу печінки. Адекватна оцінка стадії фіброзу у хворих на ХГС дозволяє не тільки прогнозувати перебіг хронічного гепатиту, діагностувати його ускладнення, а й своєчасно призначати етю-тропне і патогенетичне лікування. Необхідність проведення у більшості хворих на ХГС саме «біохімічної біопсії» печінки обумовлена неможливістю частого динамічного морфологічного обстеження пацієнтів, наявністю ускладнень при проведенні біопсій. хворих на хронічний гепатит С, причому після визначення лабораторних показників у хворих на хронічний гепатит С проводять обчислення двох рівнянь: -59,053, -39,809, де F0-i - показник фіброзу стадій F0-F1; F2.4 - показник фіброзу стадій F2-F4; А - площа перекисної хемілюмінограми, ум. од.; В - концентрація середніх молекул, г/л; С - рівень перекисіндукованої хемілюмінесценції, ум. од.; D - рівень спонтанної хемілюмінесценції, ум. од.; Е - концентрація циркулюючих імунних комплексів, г/л; і при перевищенні показника F2-4 над показником Fo-i діагностують стадії фіброзу F2 - F4, а при перевищенні показника Fo-i над показником F?-4 діагностують стадію фіброзу F0 - F1. Для діагностики стадії фіброзу у хворих на хронічний гепатит С існує спосіб, який включає в себе клінічні І ультразвукові ознаки хронічної патології печінки при ХГС. Визначені за допомогою уніваріантно-го логітрегресійного аналізу клінічні ознаки (вік пацієнта, наявність клінічних ознак хронічної патології печінки і ультразвукових ознак підвищення щільності паренхіми) при множинному аналізі лінейної регресії визначив модель оцінки інтенсивності фіброзу у хворих на ХГС з чутливістю - 42 % і специфічністю - 23 %. (Wong V., Caronia S., Wight D. et al. Importance of age in chronic hepatitis С virus infection // J. Viral. Hepat. 1997. - Jul;4(4). - P. 255 - 264). До недоліків запропонованого методу визначення інтенсивності фіброзу у хворих на ХГС слід віднести низьку чутливість (42%) і незначну специфічність (23%) метода. При його використанні значна доля пацієнтів в розгорнутих стадіях фіброзу може бути пречислена до групи з відсутністю фібротичних змін і в ній помилково 00 со со ю 5338 може бути призначена інтерферонотерапія, що може призвести, або до даремного витрачання високо коштовних препаратів, або до декомпенсації цирозу печінки на фоні інтерферонотерапп Також відомий спосіб використання ультразвукового дослідження для верифікації стадії фіброзу у хворих на ХГС На підставі дослідження 143 хворих на ХГС, яке включало оцінку поверхні печінки, стану паренхіми, судинної структури, розмірів селезінки цироз в цій групі був знайдений у 51 (36%) хворого Коефіцієнт УЗД корелював з морфологічним показником інтенсивності фіброзу (Р < 0,05) У групі хворих на ХГС дільником був показник - 6 і діагностичні показники були чутливість 82, 4% специфічність - 70, 7%о, позитивне прогнозуюче значення - 60,9%, негативне прогнозуюче значення - 87, 8%о, точність - 74,8% (Hung С Н , Lu S N , Wang J H et al Correlation between ultrasonographic and pathologic diagnoses of hepatitis В and С virus-related cirrhosis // J Gastroenterol 2003 -№38(2) -P 153-157) Проте запропонований ультрасонографічний метод веріфікаци фіброзу у хворих на ХГС має високі діагностичні спроможності лише до виявлення 4 стадії фіброзу - цирозу (F4) Цей метод не дозволяє провести диференціацію між відсутністю або початковими морфологічними проявами фіброзу (F0-F1) з одного боку і суттєвим фіброзом паренхіми печінки у хворих на ХГС з другого боку, що не дає можливості після використання запропонованого методу вирішити питання про доцільність проведення інтерферонотерапп у потенційно чутливих групах пацієнтів із ХГС з стадіями фіброзу F0-F1 Відомий також метод визначення початкових стадій фіброзу за допомогою ультразвукових методів дослідження При ретельному відборі ультразвукових ознак інтенсивності фіброзу у 225 хворих на ХГС були проаналізовані 44 УЗД симптома З них відібрані такі ознаки, як характер поверхні печінки, ехогенність печінкової паренхіми, товщина стінки жовчного міхура, як маркери інтенсивності фіброзу у хворих на ХГС, починаючи з початкових фібротичних змін в паренхімі печінки при ХГС (Zheng R Q , Wang Q H , Lu M D et al Liver fibrosis in chronic viral hepatitis an ultrasonographic study // World J Gastroenterol - 2003 -Nov,9(H) -P 24842489) До недоліків запропонованого методу слід віднести включення такого УЗД-симптому фіброзу при ХГС, як товщина стінки жовчного міхура Цей ультразвуковий симптом з одного боку може спостерігатися у хворих на хронічну патологію жовчного міхура і жовчновивідних шляхів і без наявності фіброзу у хворих на хронічні гепатити, а з другого боку запропоновані симптоми дають можливість лише якісно оцінити наявність чи відсутність фібротичних змін без визначення інтенсивності фіброзу у хворих на хронічний гепатит С Серед методів, які були запропоновані для визначення стадії фіброзу у хворих на ХГС і які б використовували малокоштовні скринінгові методики слід відмітити набір біохімічних методів, який включав визначення концентрацій фібронектину, протромбіну, активності псевдохолі-нестерази, АлАТ, перекис марганцю дисмутази та N - ацетіл бета -глюкозамінідази Запропонований метод правильно класифікував 93 7 % пацієнтів (94 3 % хронічного гепатиту і 92 9 % пацієнтів з цирозом) (Fortunate G , Castaldo G , Опапі G et al Multivanate discriminant function based on six biochemical markers in blood can predict the cirrhotic evolution of chronic hepatitis // Clin Chem - 2001 - Sep,47(9) P 1696-1700) До недоліків запропонованого методу слід віднести неможливість виявлення за його допомогою проміжних стадій фіброзу (F1-F3) у хворих на ХГС, а тільки кінцевої стадії фіброзу F4 - цирозу, і включення до набору методів визначення активності N - ацетіл - бета - глюкозамінідази суттєво підвищує терміни і коштовність проведення лабораторної діагностики фіброзу Була запропонована біохімічна модель визначення інтенсивності фіброзу у хворих на ХГС за допомогою 5 біохімічних маркерів (альфа2 макроглобуліну, аполіпопротеїну А1, гаптоглобіну, загального білірубіну, ГГТП) Для можливого покращання цієї діагностичної модепі у 323 пацієнтів із ХГС був співставлений коефіцієнт 5 маркерів із показниками - протромбіновий час, КІЛЬКІСТЬ тромбоцитів, індекс віку тромбоциту) для веріфікацм стадії фіброзу і співставлення із результатами METAVIR Множинним лопт-регрессом було визначено, що тільки коефіцієнт 5-ти маркерів (Р < 0,0001) і протромбіновий час (Р < 0,02) були незалежно прогнозуючими факторами суттєвого фіброзу (F2-F4) Площа під характеристичною кривою (ROC) для індекса 5-ти біохімічних маркерів була 0,836 ± 0,024 і перевищувала цей показник для КІЛЬКОСТІ тромбоцитів і протромбінового часу (Р < 0,001), що підтверджувало більше діагностичне значення цього індексу Приєднання цих двох маркерів до індексу 5 - т и маркерів було визнане недоцільним, тому що не підвищувало діагностичну точність (Myers R P . D e Torres M , Imbert-Bismut F et al Biochemical markers of fibrosis in patients with chronic hepatitis С a comparison with prothrombin time, platelet count, and age-platelet index//Dig Dis Sci -2003 -Jan,48(l) P 146- 153) До недоліків запропонованого способу слід віднести використання багатошарового персептрону нейронних мереж у побудові цієї біохімічної моделі Для використання цього способу з метою лабораторної діагностики стадії фіброзу, результати обстеження кожного пацієнта необхідно вносити до запропонованої нейронної мережі, яка повинна бути інстальована разом із програмою NEURAL NETWORK і операційною оболонкою на високовоштовному компьютер', що вимагає суттєвих матеріальних ресурсів і професійної компьютерно'" кваліфікації у кожного лікаря Також відомий біохімічний метод визначення інтенсивності фіброзу у хворих на хронічний гепатит С за допомогою обчислення коефіцієнту співвідношення активності аспартатамінотрансферази і аланінамшотра-нсферази сироватки При ретроспективному аналізі результатів обстеження 173 хворих на ХГС було встановлено, що перевищення коефіцієнту AST/ALT значення 1 свідчило про наявність у пацієнтів цир S 5338 розу із специфічністю 95, 9 %, чутливістю 46, 7 %, chronic hepatitis C: correlation with pathological прогнозуючою позитивною цінністю 73, 7 %, негаfeatures // J. Clin. Pathol. -1997.- May; 50(5).тивною прогнозуючою цінністю 88, 1 %. При чому у P. 401 -406]. ЗО пацієнтів з цирозом значення коефіцієнту До недоліків оцінки стадії фіброзу у хворих на AST/ALT складало 0.99 ± 0.06, а у 123 пацієнтів ХГС за допомогою імуногістохімічних методів вибез цирозу 0.60 ± 0.02 (Р < 0,001) [Park G.J., Lin значення концентрації МДА слід віднести травмаВ.P., Ngu M.C. et al. Aspartate aminotransferase: тичність пункційно'і біопсії, висококоштовність alanine aminotransferase ratio in chronic hepatitis імуногістохімічних методів дослідження з викориС infection: is it a useful predictor of cirrhosis? станням антитіл до малонового діальдегіду, висо// J. Gastroenterol. Hepatol. - 2000. - Apr; 15(4). ка тривалість і потреба у високо коштовному P. 386 - 390]. спеціалізованому лабораторному обладнанні. Щоб уникнути пукційного втручання у хворих Поряд з тим, що коефіцієнт АсАТ/АлАТ - це на ХГС був запропонований спосіб оцінки стадії високоспецифічний метод, він має малу чутливість фіброзу за допомогою визначення маркеру окисі тому відсутність перевищення цього показника 1 дативного стресу - концентрації малонового альне означає відсутності у хворого циротичних змін в дегіду в сироватці крові. Було встановлено, що печінці. Це може призвести до невірного прогнозу Існує вірогідний корелятивний взаємозв'язок між перебігу захворювання і невиправданого признасироватковим рівнем малонового альдегіду (МДА) чення етіотропного лікування хворим на ХГС із І стадією фіброзу (г = 0,51; Р < 0,03). Крім того, цей цир-роттичними змінами в печінці показник має високу ступінь кореляції із сироватінтерферонотерапії тощо. ковим маркером фіброзу аміно - граничним проВідомий спосіб оцінки стадії фіброзу у хворих пептидом проколагену III (г = 0,57; Р < 0,03). на ХГС за допомогою визначення концентрацій [Serejo F., Emerit I., Filipe P.M. et. al. Oxidative серологічних маркерів: N-терминального пептиду stress in chronic hepatitis C: The effect of interпроколагену (PIIINP), 7S - фрагменту IV типа колferon therapy and correlation with pathological лагену (PIVNP), гіалуронової кислоти (ГК), матриці features // Can. J. Gastroenterol. - 2003. - Nov;17(l металлопротенази (ММР-1, ММР-2) та тканинного 1).-P. 644-650]. інігібітору металлолротеінази (ТІМР -1). Було встановлено, що ці методи більш інформативні Даний спосіб лабораторної діагностики стадії при диференціації стадії F2 від стадії F1, ніж для фіброзу у хворих на ХГС є найбільш близький по встановлення відмінностей стадій F3 від F2. технічній суті і результату, який може бути досягНабільш корисним для визначення стадії бшьшей нутий, тому його обрано в якості прототипу. ніж F2 був критерій - гіалуро-нова кислота Основним недоліком прототипу є те, що висо(зібльшення 50 нг/мл; чутливість - 75 %; спека ступінь відповідності концентрації МДА морфоцифічність -80%), далі за значимістю йде сироватлогічній стадії фіброзу спостерігається лише при ковий рівень металопротеїнази ММР-2 вираженому фіброзі і цирозі (стадії F3 - F4) і не (збільшення рівню - 550 нг/мл; чутливість - 75%, має вірогідних корелятивних зв'язків із стадіями специфічність -70%). Для диференціації незначнофіброзу F0 - F2, що не дозволяє провести лабораго фіброзу (F0-F1) та вираженого фіброзу (F2-F4) торну диференційну діагностику незначного запропоновано використання таких маркерів, як фіброзу (F1) і його відсутності (F0) з помірним і гіалуро-нова кислота (перевищення концентрації вираженим фіброзом (F2 - F3) і цирозом (F4) 60 мг/мл; чутливість 77 %; специфічність - 74 %) та печінки, що утруднює використання запропоновафрагмент типа IV коллагену (PIVNP) (перевищенного методу в інфектології, зокрема при ня концентрації 6, 5 нг/мл; чутливість 74 %, спевідокремленні групи пацієнтів з стадіями фіброзу цифічність -75% [Murawaki Y., Ikuta Y., Okamoto К. (F2 - F4), яким протипоказано проведення спеet al. Diagnostic value of serum markers of connecцифічного лікування (інтерферонотерапії), tive tissue turnover for predicting histological staging внаслідок або його неефективності або небезпечand grading in patients with chronic hepatitis С ності від групи хворих на ХГС Із початковою // J. Gastroenterol. - 2001. - 36(6). - P. 399 - 406]. стадією (F1) або відсутністю фіброзу (F0), у яких проведення віруселімінуючого лікування дає найкЗапропоновані методи визначення ращі результати. інтенсивності фіброзу у хворих на ХГС мають високу чутливість і специфічність навіть щодо визнаУ зв'язку з вищевикладеним, в основу корисної чення початкових стадій фіброзу печінки. Проте моделі покладено задачу підвищення точності більшість з наведених методів висококоштовні, лабораторної діагностики стадій фіброзу (F2-F4) у довготривалі, трудоміські та їх проведення можлихворих на ХГС шляхом встановлення зв'язку між во тільки в спеціалізованих, добре оснащених лахарактером вираженості фібротичних морфобораторіях. логічних змін в печінці і хемілюмінесцентних ознак Інтенсивності оксидативного стресу і вираженості Для оцінки інтенсивності фіброзу в печінці у метаболічних зсувів в сироватці хворих на ХГС, хворих на хронічний гепатит С були використані що дозволить суттєво скоротити численність показники оксидативного стресу. При обстеженні пацієнтів, які потребують проведення пункційної 43 хворих на ХГС за допомогою імунопстохімічних біопсії печінки. методів було встановлено, що концентрація кінцевого продукту перекисного окислення ліпідів Поставлена задача вирішується в способі малонового діальдепду в паренхімі печінки має діагностики виражених стадій фіброзу (F2 -F4) у високий корелятивний зв'язок з стадією фіброзу хворих ан ХГС за допомогою додаткового вклюпри ХГС (р < 0.001) [Paradis V., Mathurin P., Kollinчення до лабораторного обстеження хворих на ger M. et al. In sttu detection of lipid peroxidation in ХГС таких методів, як визначення спонтанної 5338 хемілюмінесенцп', перекис індукованої хемілюмінесценції, площі перекисної хемілюмінограми, концентрації середніх молекул і циркулюючих імунних комплексів, математичного обчислення запропонованих рівнянь При перевищенні значення F2-4 над F0-1 у хворих на ХГС констатують наявність виражених стадій фіброзу (F2 - F4), при переважанні коефіцієнту F0-1 над F2-4 веріфікують початкові стадії фіброзу або його відсутність Підставою для цієї пропозиції була вперше встановлена закономірність, яка полягає в тому, що при наявності суттєвого фіброзу (F2-F4) у хворих на ХГС відбувається значне зменшення прооксидантних властивостей сироватки крові і збільшення концентрації циркулюючих імунних комплексів і середніх молекул в сироватці крові Під час численних досліджень встановлено, що вказаний спосіб є вірогідним діагностичним методом визначення виражених стадій фіброзу печінки {F2 - F4) у хворих на ХГС, незалежно від віку, статі хворого і відзначається тільки стадією фіброзу Спосіб здійснюється таким чином після визначення лабораторних показників у хворих на хронічний гепатит С проводять очислення двох рівнянь Fo-1 = 0, 138 * А + 3, 944 * В + 1, 819 * С + +5, 081 * D +1, 435 * Е - 59, 053 F2 4 - 0, 081 * А + 6, 558 * В + 1, 239 * С + +3, 934 * D +1, 776 * Е - 39, 809, Де А - Площа ХЛ Од , В - СМ, г/л, С - ІХЛ, Од , D СХЛ, Од , Е - ЦІК, г/л При перевищенні показника F24 значення F O i, то ми можемо констатувати наявність стадії фіброзу F2 - F4 у обстеженого пацієнта, а причисельному перевищенні значення Fo-i над F24 ми встановлюємо стадік фіброзу F0 - F1. При розробці заявленого способу для його клінічного і патогенетичного обгрунтування було обстежено 36 хворих на хронічний гепатит С Діагноз ХГС був встановлений на підставі комплексу клініко-бюхімічних, ультразвукових ознак, підтверджувався визначенням антитіл - анти - HCV і полімеразною ланцюговою реакцією - HCV - RNA Для виключення вірусних гепатитів іншої етіології проводилось обстеження хворих на HbsAg, HbeAg, анти - HbeAg сумарні, анти - Hbclg M і анти -Hbclg G, анти - Hbs, энти - HDV Для біохімічної верифікації фіброзу у хворих на ХГС нами були співставлені результати лабораторного і морфологічного обстеження цих хворих Для оцінки стадії нами була використана система METAVIR [The French METAVIR Cooperative Study Group Intraobserver and interobserver variations in liver biopsy interpretation in patients with chronic hepatitis С // Hepatology - 1994 - № 20 - P 1 5 - 2 0 ] БІОПСІЯ печінки проводилась під контролем ультразвукового дослідження під місцевою анестезією Кожен екземпляр біопсії був оціненений від F0 до F4 за стандартною шкалою F0 = фіброзу немає, F1 = портальний фіброз без перетинок, F2 = поодинокі перетинки, F3 = численні перетинки без цирозу, F4 = цироз печінки 8 Вивчення показників хемілюмінесценції (ХЛ) здійснювалось в сироватці крові [Сидорик Е П , Баглей Е А , Данко М И Биохемилюми-несценция клеток при опухолевом процессе - Киев Наук думка, 1989 -219 с ] Хемілюмінесценція вивчалася за допомогою хемілюмінометра «Emilite-1105» спільного виробництва Німеччина-Росія, який був звязаний інтерфейсом з комп'ютером IBM 486 DX2-80, для реєстрації показників приладу в реальному масштабі часу До відкриття шторки фотоелектронного множника нами визначалося фонове СВІТІННЯ приладу Потім у кювету вносилося 0,45 мл негепаринизованої сироватки крові При постійному термостату ванні вивчався вихідний рівень над слабкого СВІТІННЯ проби без внесення ініціаторів Цей період СВІТІННЯ сироватки фіксувався, як початкова ділянка хемілюмінограми, що відображає інтенсивність спонтанної хемілюмінесценції (СХЛ) Цей показник відображає інтенсивність процесів перекисного окислення ЛІПІДІВ, що відбуваються в сироватці крові Потім у кювету вводився ініціатор - перекис водню (3% розчин) у співвідношенні до проби - 1 2 Виникав різкий підйом світіння, що виражається на хемілюмінограмі піком індукованої хемілюмінесценції {ІХЛ) Після досягнення максимуму відбувалося повільне зниження інтенсивності СВІТІННЯ, що фіксувалося комп'ютером протягом 5 хвилин За допомогою спеціалізованої комп'ютерної програми "Emilite Manager V 2 00" обчислювалась площа під кривою над-слабкого СВІТІННЯ і цей показник означався як площа хемілюмінограми Концентрацію циркулюючих імунних комплексів (ЦІК) було визначено за допомогою методу преципітації в розчині поліетилен гліколю з молекулярною масою 6000 дальтон [Фролов В М , Рычнев В Е Исследование циркулирующих иммуных коппексов диагностическое и прогностическое значение // Лаборат дело - 1986 - № 3 - С 159 161) Рівень «середніх молекул» в сироватці крові хворих на хронічний гепатит С визначався за методикою (Николайчик В В , Моин В М , Кирковский В В и др Способ определения «средних молекул» //Лаб дело -1991 -№10 -С 13-18] Всі результати лабораторного обстеження статистичне оброблялися за допомогою електронних таблиць EXCEL 97 в операційній системі Windows 98 на комп'ютері IBM - 486 PC AT DX-2-80 Обстежені хворі на ХГС були розподілені на 2 групи за вираженіс-тю фіброзу До 1 групи увійшло 15 пацієнтів (41, 7 %) із стадією фіброзу F0 - F1, до другої - 21 хворий (58, 3 %) із стадією F2 - F4 Віковий І статевий склад першої і другої групи вірогідно не відрізнявся Контрольною групою були результати обстеження 63 практично здорових донорів Луганської обласної станції перепивання крові При співставленні 16 біохімічних показників 1 і 2 групи хворих на ХГС за допомогою критерію Манна - УІТНІ (непараметрична статистика) і лопстичного регресійного аналізу (логгг - регресія) було встановлено, що вірогідну міжгрупову ВІДМІННІСТЬ мають лише 10 ознак Збільшення інтенсивності фіброзу у хворих на ХГС супроводжувалось підвищенням активності маркерів ци 5338 толізу - ферментів АлАТ і АсАТ відповідно в 1, З рази (р < 0,039) і 1,5 рази (р < 0,0012). В другій групі було встановлено вірогідне зменшення білковосинтетичної функції печінки, яке супроводжувалось зменшенням концентрації альбуміна в 1,3 рази (р < 0,033) і розвитком диспротеінеміі зменшенням коефіцієнту альбумін / гама - глобуліни в 1, 4 рази (р < 0, 012). Висока інтенсивність фіброзу також супроводжується збільшенням рівню «метаболічної інтоксикації» -зростанням концентрації середніх молекул до 2, 53 ± 0, 17 г/л (р < 0, 0076) і підвищенням концентрації циркулюючих імунних комплексів в 2, 8 рази (р < 0, 0042). При незначному фіброзі (F0-F1) відбувається зростання прооксидантних властивостей сироватки крові, яке підтверджується збільшенням інтенсивності індукованої хемілюмінесценції у співставленні із показниками практично здорових (в 3, 3 рази; р < 0,0001), зростанням інтенсивності перекисного окислення ліпідів, про що свідчило підвищення рівню спонтанної ХЛ (в 4, 1 рази; р < 0, 0001). Проте при аналізі показників 2 групи було встановлено, що при стадії F2 - F4 інтенсивність СХЛ знизилась у порівнянні з 1 групою у 1, 3 рази (р < 0, 0034), а індукована ХЛ знизилась в 1, 5 рази (р < 0,0053). Загальна площа хемілюмінограми при стадії F0-F1 була більша ніж у донорів в 4, 7 рази (р < 0, 0001), а при F2 - F4 зменшилась в 1,9 разів, що свідчить про пригнічення інтенсивності надслабкого світіння сироватки при прогресуванні фіброзу. Далі був проведений дискриминантний аналіз 10 лабораторних ознак, які мали вірогідні відмінності між 1 і 2 групами за результатами непара-метрич ної статистики (коефіцієнт Манна УІтні) і логіт - регресу. Найбільше значення F - коефіцієнту мали такі ознаки: площа ХЛ (F = 5555, 38; Р < 0,0001), концентрація середніх молекул (F = 2251, 94; Р < 0,0001), рівень ІХЛ (F=1187, 75; Р < 0,0001), СХЛ (F = 1125,6; Р < 0,0001), концентрація циркулюючих імунних комплексів (F = 1076, 7; Р < 0,0001). Таким чином, до ознак, які мають найбільшу класифікаційну дисперсію між показниками груп F0-F1 і F2-F4 увійшли переважно ознаки інтенсивності «метаболічної інтоксикації», в меншій мірі на визначення стадії фіброзу впливали ознаки диспротеінемії і цитолітичного синдрому. Для розробки диференційного алгоритму ми використали множинний дискриминантний аналіз біохімічних ознак. Була отримана система рівнянь: Fo-i =0, 138*А+3,944*В+ 1, 819 * С+5, 081 * ' D+1, 435 * Е - 59, 053 F2-4 = 0, 081 " А + 6, 558 * В + 1, 239 * С + + 3, 9 3 4 - D + 1 , 7 7 6 * Е-39, 809, Де: А-ПлощаХЛ.Од. В - СМ, г/л С - ІХЛ, Од. D - СХЛ, Од. Е - ЦІК, г/л Якщо у хворого обчислений показник F2-4 математично перевищує значення Fo-i, то ми можемо констатувати наявність стадії фіброзу F2 -F4 у 10 обстеженого пацієнта. При чисельному перевищенні значення Fo-1 над F2-4 ми встановлюємо стадію фіброзу F0 - F1. Запропонований спосіб має специфічність 93%, чутливість - 48 %, точність - 66%, позитивне прогнозуюче значення (90, 1%) і негативне прогнозуюче значення (66, 7%) у визначенні стадії фіброзу F2 - F4. Поряд з використанням запропонованого способу і проведенням хемілюмінесцентного, імунологічного і біохімічного обстеження хворих на XFC в сироватці крові паралельно, згідно способу прототипу, визначалася концентрація кінцевого продукту перекисного окислення ліпідів - малонового діальдегіду (МДА) [Гаврилов В. Б., Мишк орудная М.И. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови // Лаб. дело. - 1983. - № 3. С. 3 3 - 3 6 ] . Було встановлено, що в групі пацієнтів із стадіями фіброзу F2 - F4 концентрація МДА складає 7, 07 ± 0,24 мкмоль/л, що вірогідно перевищує рівень цієї сполуки в сироватці крові хворих на ХГС із стадіями F0-F1 (6, 39 ± 0,19 мкмоль/л; Р < 0,05), дільником між показниками МДА в групах пацієнтів із незначним фіброзом (F0-F1) і вираженим фіброзом (F2-F4) є - 6,72 мкмоль/л . При перевищенні у хворого концентрації МДА значення дільника (6, 72 мкмоль/л) цей пацієнт відносився до групи з вираженим фіброзом (F2-P4). При визначенні якості діагностики способа - прототипа нами було встановлено, що чутливість способа щодо віднесення хворого до групи з вираженим фіброзом (F2-F4) складає -47, 6%, специфічність 60%, точність - 52, 8%, позитивне прогнозуюче значення - 62, 5 %, негативне прогнозуюче значення - 45 %. Таким чином, порівнюючи діагностичні можливості існуючого способу - прототипу і запропонованого способу можна відзначити, що специфічність запропонованого способу (93, 3%) суттєво перевищує цей показник прототипа (60, 0%), позитивне прогнозуюче значення складає 90, 1 % і 62, 5 % відповідно, негативне прогнозуюче значення складає 56% і 45 % ВІДПОВІДНО, чутливість практично не відрізняється між запропонованим способом і способом - прототипом (47, 6 %) і загальна точність запропонованого способа перевищує цей показник прототипа (66%; 52, S % відповідно). Таким чином, запропонований спосіб діагностики стадій фіброзу печінки має високу специфічність (93,3%) і позитивне прогнозуюче значення (90, 1%) у встановленні стадії фіброзу F2-F4 і дозволяє суттєво скоротити кількість хворих на ХГС, які потребують проведення пунк-ційної біопсії печінки І надійно визначати клінічні групи хворих на XFC із стадією фіброзу F2 - F4 за допомогою запропонованого способу. Ефективність запропонованого способу може бути підкріплена такими прикладами його використання. Приклад Хворий К., 37 років поступив в інфекційне відділення 3 міської баra-топрофільної лікарні м. Луганська з скаргами на виражену слабкість, нудо 11 5338 12 складає 5,9 мкмоль/л і відповідає наявності невиту, тяжкість в правому підребіррі, сухость у роті, ражених стадій фіброзу F0-F1. гіркоту у роті, жов-тушність слизових оболонок і шкіри, потемніння сечі. Погіршення стану відмічає При використанні запропонованого способу тиждень тому, коли з'явилась слабкість, сухість у нами були отримані такі результати: роті, важкість у правому підребіррі, погіршення Fo-1 =0,138*141 +3,944 "2,6+ 1,819*7,4 + апетиту. За медичною допомогою не звертався. + 5,081*6,9 + 1,435*7,6 - 59, 053 = 30,085 Під час первинного огляду була виявлена F2-4 = 0,081 *141 + 6,558* 2,6 + 1,239*7,4 + Іктеричність слизових оболонок і шкіри, язик, об+ 3,934*6,9 + 1,776*7,6 - 39, 809 = 38,474. ложений темний налітом, гепатомегалія + 2 см з Після обчисленні дискриминантних копід краю реберної дуги, болісний, гладкий, плотефіцієнтів нами встановлено, що F2-4 (38,474) ноеластичної консистенції край печінки, позитивні суттєво перевищує Fo-i (30,085), що свідчить із симптоми Ортнера, френікус - симптом, печінкові специфічністю 93% наявність виражених стадій долоні, телеангіоектазії на поверхні тулуба. Аналіз фіброзу (F2-F4) у обстеженого хворого, що було крові біохімічний: білірубін загальний - 160 підтверджено морфологічним обстеженням цього мкмоль/л, білірубін прямий - 140 мкмоль/л, АлАТ пацієнта. 6, 82 ммоль/л*г, АлАТ в розведенні - 25, 6 Таким чином, при використанні способу протоммоль/п*г, АсАТ - 6, 3 мм.оль/л*г, тимолова проба типу обстежений хворий був би віднесений до груЗ Од.; протеінограма - загальний білок - 84, 9 г/л, пи хворих на ХГС Із невираженим фіброзом (F0альбуміни - 48 r/л. Клін аи. крові: Нв - 136 г/л, L F1), щоб дало б змогу лікарю призначити йому А 7,4*1 0 , ШОЕ - 10 мм/г. Загальний аналіз сечі: специфічне ві-руселімінуюче лікування колір - темний, питома вага - 1025 г/л, білок - не інтерферонотерапію. Можливими наслідками цієї визначений, лейкоцити - 4 - 5 в полі зору, епітелій діагностичної помилки могло б стати або даремне одинічні в полі зору. Результати дослідження марвитрачання висо-кокоштовних препаратів і часу, керів вірусних гепатитів: HbsAg - негатив., анти або б могло призвести до декомпенсації" гепатиту і НВс Ig M - негатив., анти - HCV сумарні - позитив., розвитку гепатаргії у хворого з вираженим анти - HCV Ід М - негатив., анти - HAV ІдМ - негафіброзом на фоні інтерферонотерапії. тив., RNA PCR - позитив. Концентрація МДА в сиТаким чином, запропонований спосіб роватці 5,9 мкмопь/п. Перекисна діагностики виражених стадій фіброзу печінки (F2хемілюмінесценція: СХЛ - 6, 0 ум.од., ІХЛ - 7, 4 ум. F4) у хворих на ХГС дозволяє суттєво скоротити од., площа ХЛ -141 од., CM - 2, 6 г/л, ЦІК - 7,6 г/л. кількість пацієнтів, які потребують проведення Гістологічно: ІГА - 7 од., стадія METAVIR - F3. пункційної біопсії печінки і дозволяє надійно виКлінічний діагноз: хронічний вірусний гепатит С, значати клінічні групи хворих на ХГС із стадією висока активність, виражений фіброз (F3), середня фіброзу F2-F4, яким проведення етіотропного тяжкість перебігу, фаза загострення. вірусел і мінуючого лікування - інтерферонотерапії в ряді випадків - неефективне, а в ряді - небезПри використанні способу - прототипу було печно. встановлено, що концентрація МДА у хворого К., Комп'ютерна верстка М. Клкжін Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул, Глазунова, 1, м. Київ - 42, 01601