Засіб боротьби з вірусами рослин

УКРАЇНА ) .D 6 5 2 4 п з) _ __. - ~ —^.^ (5D5 Л Ої N 63/00/Z(A_OLN_63ZQOL13I64L. ДЕРЖАВНЕ ПАТЕНТНЕ ВІДОМСТВО НА ВИНАХІД (54) ЗАСІБ БОРОТЬБИ З ВІРУСАМИ РОСЛИН 1 (20)94301179.07.07.93 (21)4897673/04 (22) O2.O1.91,SU . (46)29.12.94. Бюл. № 8-І (56) 1. Патент ГДР Ьк 251487, А 01 N 47/42, 43/66, опублик. 1987. 2. Патент ГДР № 251486, А 01 N 47/36. опублик. 1987. 3. Авторское свидетельство СССР №302368, С 12р 1/02, 1971 (прототип). (71) Інститут мікробіології та вірусології їм. Д.К.Заболотного АН УРСР (72) Готфрід Шустер (DE), ЗІгфрід Клуге (DE), Коваленко Олексій Григорович (UA) (73) Інститут мікробіології та вірусології їм, Д.К Заболотного АН України (UA) (5/) Средство борьбы с вирусами растений, включающее 2,4-диоксогексагидро-1,3,5триазин и синергист, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что в качестве синергиста используют маннаны из клеток дрожжей Candida sp при следующем весовом соотношении 0.02П1:1. С > Изобретение относится к области химических средств защиты растений, а именно к синергитическим средствам борьбы с вирусами растений на основе 2,4-диоксогекса- ° гидро~1,3,5-триазина ЩГТ). Известны средства борьбы с вирусами растений, включающие синтетические соединения, в частности ДГТ, комбинируемый с комплексами металлов с N-амил ГхГ-2-пиридилтиокарбамидом и Ы-фенил-Ы'-2-пиридилтиокарбамидом [2] или с бис-тио карбам идами, [1], являющимися синергистами ДГТ. Однако эти средства обладают узким спектром действия и недостаточно эффективные. Наиболее близким является решение, согласно которому в качестве антивирусного средства используют физиологически активны е соед ин ения , прод уц иру емы е дрожжами Candida sp., в частности клеточные дрожжевые маннаны (ДМ) [3]. Недостаток этого средства состоит в малой эффективности в отношении системных вирусных инфекций растений, имеющих экономическое значение для растениевод ства. Так, локальная вирусная инфекция подавляется ДМ в 0,001 %-ной концентрации, а системная - лишь в 0,1 %-ной концентрации растворов действующих веществ, В основу настоящего изобретения поставлена задача создания средства борьбы с вирусами растений, в котором благодаря комбинированию ДГТ с ДМ обеспечивается высокая эффективность в отношении системных и локальных вирусных инфекций и широкий спектр антивирусного действия и за счет этого уменьшается вредоносность болезней и повышается продуктивность с.-х. растений. Поставленная задала решается тем, что в средство борьбы с вирусами растений, содержащее 2,4-диоксогидро-1,3,5-триазин (ДГТ) и синергист, согласно изобретению, еводятся в качестве синергистов манкаты из клеток дрожжей Candida sp. при следующем весовом соотношении: ДМ.ДГТ - 0,025-1:1. Для характеристики предлагаемого средства привлекают приближенные к практике опыты на растениях сем Solanacea, в 6624 частности на табаке (Nicotians tabacum L) сортов Самсун или Иммунный 580, табаке липком JNIcotlana glutlnosa) и дурмане (Datura stramonium L). В качестве модельных используют вирусы, устойчивые к химиоте- 5 рапевтическим воздействиям, а именно: - вирус бропзовости томатов (ВБТ), группа ВБТ, особенно вредоносный и широ ко распространенный в странах и регионах с теплым и сухим летом: о ряде европейских 10 стран является карантинным объектом: - Y-вирус картофеля (YBK), группа потивирусов, широко распространенный на кар тофеле, табаке, томатах и других культурах; -Х-вирус картофеля(ХВК), группа потек- 15 свирусов, широко распространенный на многих пасленовых культурах; - вирус табачной мозаики (ВТМ), группа тобамовирусов, широко распространенный в природе, наиболее изученный и наиболее 20 часто привлекаемый в качестве модельного объекта в экспериментах по химиотерапии вирусных инфекций. Предлагаемые комбинации препаратов применяет путем опрыскивания растений. 25 Концентрации составных компонентов действующих веществ, сроки и способы обработки растений указаны ниже при изложении конкретных примеров. Контрольные растения обрабатывают водой. В 30 разные сроки до и/или после опрыскивания нижние листья опытных и контрольных растений инокулируют вирусами в присутствии карборунда. О результатах действия Deществ судят по снижению пораженности 35 растений локально и системно (локальная и системная некротизация, мозаика), а также по снижению содержания вирусного антигена, определяемого в инокулированных и пораженных системно листьях с помощью 40 вирусоспецифических антисывороток. В каждом варианте опыта и контроля используют не менее 10 растений. Результаты выражают в средних значениях концентрации вирусного антигена, количества 45 локальных поражений на листьях или количества системно пораженных растений в опыте (О) и контроле (К). Затем определяют отношение О/К в процентах или степень ингибирования (И) вируса (в %) по формуле: 50 И= х100 К - 0 Полученные результаты оценивают по 55 t-тесту и значимость различий их в опыте и контроле выражают символами: о :р>5 %: *:5 % р>1%:**:1% , р >0.1%: *♦*: р 0,1%. Эффективность предлагаемого средства иллюстрируют нижеследующие примеры. П р и м е р 1. Растения табака сорта Иммунный 580 в возрасте 4-6 недель опрыскивают 3 раза (за 1, 2 иЗ дня до инокуляции - и 1-м опыте: за 2,4 и 6 дней до и через 2,4 и 6 дней после инокуляции ВБТ во втором опыте) растворами ДМ, ДГТ и их смесями в различных концентрациях (даны в табл.1). Растения инокулируют ВБТ, а через 23 дня после инокуіяции определяют количество растений с симптомами тотального некроза (Н), мозаики (М) и без симптомов (здоровые - 3), а также концентрацию инфекционного ВБТ путем инокуляции листьев табака клей кого, реагирующего нэ этот вирус локальны ми некрозами. Результаты опытов представлены в табл.1. П р ' м е р 2. Растения дурмана в возрасте 3-4 недель опрыскивают растворами ДМ, ДГТ и их смесями (концентрации веществ указаны в табл.2) за 2 дня до и через 2 и 7 дней после инокуляции ВБТ. Концентрацию вируса и пораженность растений определяют через 24 дня после инокуляции по методикам, указанным в примере 1. Результаты испытаний приредены в табл.2. П риме рЗ. Этот пример демонстрирует эффективность предлагаемого средства в отношена ' ВТМ. Растения таГака сорта Самсун (системный хозяин) и сор,а Иммунный 580 (сверхчувствительный хозяин) в возрасте 4-6 настоящих листьев обрабатывают растворами ДМ, ДГТ и их смесями (концентрации указаны в табл.3.) за 6,4, 2 дня до и через 2, 4, 6 дней после инокуляции ВТМ. Через 10 дней после инокуляции определяют серологически наличие и концентрацию вируса в инокулированных (первичная инфекция) и системно инфицированных (вторичная инфекция) листьях табака Самсун. На инокулированных листьях сверхчувствительного табака Иммунный 580 учитывают количество локальных поражений. Данные этих опытов представлены в табл.3. П риме р4. Нижние листья табака сорта Самсун, выращенные в климатической камере, обрабатывают растворами ДМ, ДГТ и их смесями (концентрации веществ указаны в табл.4) за 2 дня до и через 2 и 7 дней после инокуляции ХВ К. Листья контрольных растений аналогично обрабатывают водой. Концентрацию вирусного антигена определяют через 5 дней в первично инокулированном и через 13 дней после инокуляции ХВК - в системно инфицированном листе. опыта суммированы в табл.4. 6524 6 ют УВК и тестируют содержание вирусного антигена, как указано в примере Л. Данные опыта суммированы в табл.5. П р и м е р 5. Растения табака Самсун обрабатывают ДМ (0,04%). ДГТ (0,2%) или смесью ДМ+ДГТ (0,02% +0.1%). инокулиру Таблица 1 Антивирусное действие ДМ и ДГТ против ВБТ при раздельном и комбинированном применении на табаке Варианты Концентрация ве О И н м 3 ществ, % Опыт 1 100 Контроль 0 100 0 0 85** 10° 90° 0 67° 0 0*** 33° 100*** 0 ДМ 0,02 '5А* ДГТ 0.1 16" Дм+дгт 0,01+0,05 4,5*** 95,5*** Опыт 2 Контроль 1G0 0 67 33 0 дм 0.04 51* 0*** 6*" 80° 20° 67* 27* 0*** 50* 50* ДГТ 0.2 49* 95*** ДМ+ДГТ 0.02+0,1 100*** П р и м е ч а н и я , О- инфекционность бБТ в опыте. % от контроля; И - ингибирование инфекционное™ ВБТ, %; количество растений, %; Н - с симптомами тотального некроза; М - мозаичных; 3 -здоровых. Таблица 2 Антивирусное действие ДМ и ДГТ против ВБТ при раздельном и комбинированном применении на дурмане Варианты Концентрация веществ, % О и н м Контроль 100 0 100 0 ДМ 0,01 з.Г" 96,9*** 25*" 75*" Дгт дм+дгт 0,08 0,005+0,04 70* 30* 100*** 100° 0*" 100*" П р и м е ч а н и е : условные обозначений см. в табл.1, 0° 6524 Таблица 3* Антивирусное действие ДМ и ДГТ в отношении ВТМ при раздельном и комбинированном применении на табаке Варианты Концентра Инокулированный ция, % лист О Системно инфицированный лист И О И Опыт 1 (сорт Самсун) Контроль 0,02 0,2 100 ДМ ДГТ 0,01+0,1 0 50* 88*" 50* 100 13*" 0 і8 ДМ+ДГТ Опыт 2 (сорт Иммунный 580) Контроль 0,01 0,08 ДМ ДГТ 0,005+0,04 0 100 3,25*" ДМ+ДГТ 99.93*" j 47** 0,07** Примечание. Условные обозначения см. в табл.1. Таблица 4 Антивирусное действие ДМ и ДГТ против ХВК при раздельном и комбинированном применении на табаке Варианты Конц., Инокулированный Системно инфицирован. % лист лист О И О И Контроль 100 0 100 0 ДМ 0,2 29° 0,005 20** SO" ДМ+ДГТ 0,1+0,0025 62* 19° 24° 38* 71° ДГТ 81° 76° 7,7**** 92,3*" Примечание. Условные обозначения см. в табл.1 6524 10 Таблица 5 Действия ДМ и ДГТ против УВК при раздельном и комбинированном применении препаратов на табаке сорта Самсун Варианты Конц., Инокулированный Системно инфицированный % лист лист О 1 И О И Контроль 100 0 100 0 дм 0.04 0.2 15° 0° 76* 72** 24* ДГТ 85° 100° гв" ДМ+ДГТ 0,02+0,1 39** 71* 29* П р и м е ч а н и е . Условные обозначения см. в табл.1 Техред М.Моргбнтал Коректор Тираж . Підписне Державне патентне відомство України. 254655, ГСП. КиІв-53, Львівська пл.. 8 Виробчи- о видавничий комбінат "Патент", м. Ужгород, вул Гагаріна. 101