Спосіб екстракції b-амілази

1. Спосіб екстракції β-амілази з зерна, який відрізняється тим, що зерно екстрагують в присутності целюлази, ферментативного препарату, який має щонайменше активність целюлази, геміцелюлази і β-глюканази, у водному середовищі, щоб отримати екстракт, що містить β-амілазу, з наступним відділенням вказаної β-амілази від вказаного середовища. 2. Спосіб за п.1, який відрізняється тим, що βамілазу екстрагують з ячменю, пшениці чи жита. 3. Спосіб за п.1, який відрізняється тим, що βамілазу екстрагують з ячменю, очищеного від плівки. 4. Спосіб за п.1, який відрізняється тим, що βамілазу екстрагують з зерна злаків, яке було попередньо оброблене способом, вибраним із групи: очищення від плівки і/або розмелу. 5. Спосіб за п.1, який відрізняється тим, що βамілазу екстрагують з зерна злаків, яке було попередньо оброблене способом, вибраним із групи: полірування або дроблення. 6. Спосіб за будь-яким з пп.1-5, який відрізняється тим, що екстракцію проводять у відновлювальних умовах. 7. Спосіб за п.6, який відрізняється тим, що вка C2 2 UA 1 3 75632 4 ретворює живильний запас зерен, а сама крохвання альгінату натрію і відокремлення коагульомаль, на цукор, коли це необхідно. В зернах крохваного ферменту (JP 60 027 383) або за рахунок маль запасається головним чином у вигляді амілоутворення кальцій фосфатного гелю, який адсорзи і амілопектину, β-амілаза перетворює всю бує фермент і від якого його потім відділяють [JP амілозу на мальтозу, в той час як тільки 60% амі63 248 389]. Рідкі відходи виробництва крохмалю лопектину перетворюється на мальтозу, решта ж не є добрим джерелом β-амілази, оскільки вони є на декстрин. дуже розведеними і містять у великих кількостях β-амілаза є ферментом промислового масшінші компоненти, що утруднює очищення і концентабу, який використовується, наприклад, в харчотрування, в результаті чого вихід є низьким. вій промисловості для отримання мальтози. ПроЩоб отримати більш чистий сирий екстракт і дукти, що містять велику кількість мальтози, уникнути труднощів наступної обробки, було зазастосовуються, наприклад, в кондитерській та пропоновано екстрагувати β-амілазу з зерна, частхарчовій промисловості, β-амілазу було виділено ково чи повністю очищеного від плівки. Коли, наяк з бактерій, так і з рослин. Наприклад, її було приклад, ячмінні зерна очищують у такий спосіб, отримано з бактерій Bacillus [US 4 970 158 і JP 60 що їх ендосперм не руйнується, то найбільш зов126 080[ та з термостійких бактерій Clostridium [US нішні шари такого ендосперму функціонують як 4 647 538]. Крім мальтози, β-амілази, отримані з свого роду фільтр, який запобігає доступу нерозбактерій, використовуються у виробництві в значчинних речовин до замкової води і обмежує доступ них кількостях мальтотріози, в той час як βрозчинних речовин. Краще проводити екстракцію в амілази рослинного походження йдуть на виробприсутності речовини, що має відновлювальні ництво відносно більшої кількості мальтози і, відвластивості і здатна вивільнити β-амілазу від інповідно, вони є більш придатними для процесів, ших протеїнів зерна [FI 61 516 та US 4 675 296]. метою яких є отримання можливо більшої кількості Тепер винайдено спосіб екстракції β-амілази із солодощів та/або продуктів, здатних викликати злаків, який скорочує тривалість екстракції і побродіння. До того ж, великомасштабне виробництліпшує вихід ферменту. Цей спосіб є простим у во β-амілази з бактерій є важкою задачею. Та βвиконанні і особливо придатним для обробки зерамілаза, що використовується промисловістю, має на без плівки, а також забезпечує подальше очирослинне походження. В якості джерела цього щення ферменту. ферменту звичайно використовують злаки, зокреСпосіб екстракції β-амілази за даним винахома пшеницю і ячмінь, але також і соєві боби. дом характеризується екстракцією злаків у присуПід час росту рослин β-амілаза утворюється в тності целюлази у водному середовищі з отриманзернах, де й запасається. Зерно складається з ням екстракту, що містить β-амілазу. Даний зародку та ендосперми, що містить крохмаль, тобвинахід також стосується використання целюлази то серцевини, між якими знаходиться скутелум. при екстракції β-амілази зі злаків. Ендосперм оточує алейроновий шар, а все зерно Целюлаза використовується, наприклад, у виоточене шаром перікарпу, шаром тести та власне робництві крохмалю з меленого зерна для зменплівкою (лузгою). Пшениця не має власне плівки, шення в'язкості крохмальної суспензії і відокремнатомість перікарп і теста утворюють тверду зовлення крохмалю від протеїну. Нами вперше було нішню оболонку, β-амілазанакопичується головвстановлено, що додавання целюлази до води при ним чином в ендоспермі та скутелумі. В найбільекстракції β-амілази поліпшує вихід β-амілази і ших кількостях β-амілазу знаходять в самих дозволяє скоротити тривалість екстракції. зовнішніх частинах ендосперму, безпосередньо Фіг.1 показує вплив температури на вихід βпід алейроновим шаром. амілази як функцію часу. β-амілаза з ячменю вивчалась досить ретельСпосіб за даним винаходом призначений для но. Ця β-амілаза та її виробництво описані, наприекстракції різних злаків, що містять β-амілазу, наклад, в таких публікаціях: [D.E. Briggs, Barley, приклад для обробки пшениці, ячменю, жита, а Chapman & Hall, London, 1978; Cook, Barley and також соєвих бобів. Краще використовувати його Malt, Academic Press, London, 1962; J.R.A. Pollock, для екстракції β-амілази з пшениці й жита, а особBrewing Science, Academic Press, London, 1979]. ливо з ячменю. Позбавлені зародків зерна не місНазвою цього ферменту в систематиці є 1,4тять значних кількостей ферментів, крім β-амілази, альфа-D-глюкан мальтогідролаза [EC 3.2.1.2]. В так що β-амілазу варто екстрагувати саме з таких минулому, β-амілазу зернових відділяли, спочатку зерен. Цей фермент можна екстрагувати з зерна в розтираючи або перемелюючи зерна, а потім експлівці, але краще використовувати зерно без плівтрагуючи β-амілазу водою або буферним розчиці, мелене, розтерте чи поліроване. Рекомендуном. Очищення ферменту з екстракту такого виду ється очищати жито і ячмінь від плівки. Найкращі є, природно, нелегкою і трудомісткою справою, результати досягаються при екстракції очищеного оскільки, крім ферменту, про який йдеться, екствід плівки ячменю. ракт містить кілька інших розчинних компонентів Щоб запобігти переходу крохмалю з ендоспезерна. Робилися спроби поліпшити відокремлення рми зерна в екстракт, очищення від плівки слід β-амілази від розчину, що його містить, наприклад здійснювати таким чином, щоб не пошкодити дійсшляхом адсорбції ферменту полімером в присутно живе зерно. Однак і саме плівку слід видаляти ності сульфату амонію [US 5 294 341]. Відомі екстак ретельно, як це тільки можливо. Це пов'язано з перименти по вивільненню β-амілази з глютену за тією обставиною, що плівка зерна є настільки допомогою протеази [JP 63 079 590]. щільною, що перешкоджає проникненню ββ-амілазу також отримували з рідких відходів амілази. Таким чином, ячмінь, очищений від пліввиробництва пшеничного крохмалю шляхом додаки, означає ячмінь, з якого видалено саме плівку 5 75632 6 зерна, але ендосперм залишений інтактним. На Myceliopthora, Aspergillus, Penicillium та практиці це означає, що щонайбільше близько Trichoderma. Деякі з продуктивних штамів були 20% ваги неочищенного зерна видаляється при генетично модифіковані. В даному винаході перейого очищенні від плівки. Звичайно 10-20% вихідважно використовується целюлаза, отримана з ної кількості зерна видаляється як плівка. В цьому плісенних грибків, зокрема з Trichoderma. випадку найбільш зовнішні шари (перікарп, теста і Ферментативні препарати, що випускаються алейроновий шар) ендосперма функціонують як промисловістю, містять активність кількох фермесвоєрідний ультрафільтр, який запобігає доступу нтів, кількість і співвідношення яких можуть злегка нерозчинних речовин і суттєво також і розчинних варіювати від одного виробника до іншого. Для речовин в екстракційну воду. Екстракт, отриманий даного винаходу є суттєвим, щоб цей продукт мав із зерна, обробленого у такий спосіб, є відносно щонайменше активність целюлази, геміцелюлази чистим, що полегшує його подальшу обробку, таку та β-глюканази. Іншими словами, в даному коняк очищення і концентрування ферменту. В податексті термін целюлаза відноситься до ферментальшій обробці можуть використовуватись такі зативного препарату, який здатний розкладати, щогальновідомі в цій галузі процеси, як фільтрація найменше, целюлозу, геміцелюлозу і β-глюкан. Всі під тиском та ультрафільтрація. випробувані заявником препарати целюлази, що Зерно екстрагують у водному середовищі, тавипускаються промисловістю (виробники Genencor кому як вода, або, можливе, у буферному розчині. International, Rohm Enzymer GmbH і Νονo Nordisk), Під час екстракції величина рН звичайно станополіпшували вихід β-амілази. Активність целюлавить від 6,0 до 6,5. Екстракцію краще проводити у зи, геміцелюлази і β-глюканази описана, напривідновлювальних умовах. Використовується така клад, в Довіднику з практичної біотехнології (Νονo, відновлювальна активність, щоб β-амілаза, зв'яза1986). на зі структурним протеїном зерна, вивільнилась. Целюлази можна розділити, наприклад, на енВідновлювальні умови створюють відомим по сводоцелюлази, екзоцелюлази, екзоцелобіогідролази їй суті способом, на практиці часто за допомогою та целобіази. Ендоцелюлази, а саме 1,4-β-DSO2, наприклад шляхом додавання натрію метабіглюкан глюканогідролази, випадковим чином розсульфіту та/або натрію сульфіту. Співвідношення щеплюють зв'язки β-1,4 целюлози всередині молеміж очищеним від плівки зерном і водним середокули з утворенням полісахсридів. Екзоцелюлази, а вищем переважно становить від 5:8 до 2:3 (васаме 1,4-β-D-глюкан глюкогідролази, розщеплюга/об'єм). Спосіб за даним винаходом є придатним ють зв'язки β-1,4 в кінці молекули з вивільненням для використання у промислових масштабах, де глюкози. їхній вплив на целобіоз є повільним. Екекстракцію проводять в сталевій вежі, куди заванзоцелобіогідролази, а саме 1,4-β-D-глюкан целобітажують, скажімо, 19 тонн очищеного від оболонки огідролази, розщеплюють вище згадані зв'язки на ячменю і 29м3 води, що містить 0,5% натрію метаневідновлювальному кінці молекули з утворенням бісульфіту і 0,5% натрію сульфіту. целобіози, а целобіази, а саме β-D-глюкозид глюШляхом екстракції ячменю описаним вище когідролази, розщеплюють целобіозу на глюкозу. способом можна отримати вихід, який відповідає Гідролізація целюлози на глюкозу вимагає ендогприблизно 45-50% загального вмісту β-амілази в люканази (1,4-β-D-глюкан глюканогідролази, EC зерні, без відділення води, що залишається все3.2.1.4), яка розщеплює молекулу зсередини, а редині зерна. В цьому випадку тривалість екстрактакож заміщені субстрати, але не розкладає крисції становить біля 72 годин. В разі ж додавання до талізовану целюлозу, целобіогідролази (1,4-β-Dекстракційної води целюлази можна екстрагувати глюкан целобіогідролаза, EC 3.2.1.91), яка розщецілих 65% загального вмісту β-амілази в зерні при плює кристалізовану целюлозу, та β-глюкозидази скороченні тривалості екстракції приблизно до 60 (β-D-глюкозид глюкогідролази, EC 3.2.1.21), яка годин. розщеплює целобіозу і цело-олігосахариди на Целюлоза - це лінійний полісахарид глюкози, в глюкозу. якому глюкозні одиниці з'єднані β-l,4Групу ферментів, які розкладають геміцелюглюкозидними зв'язками. її знаходять в стінках лозу, тобто полісахариди, які існують в природі і клітин рослин, де вона часто присутня разом з містять пентози, наприклад арабінани, галактани, лігніном і геміцелюлозою. Ферменти, які приймаманани і ксилани, називають геміцелюлазами. βють участь в реакціях розкладу целюлози, назиглюканази розщеплюють β-D-глюкани, тобто полівають целюлазами. Целюлази використовуються в мери глюкози, які можуть бути розгалуженими і промислових масштабах, наприклад у виробництві містять як β-1,3, так і β-1,4 зв'язки, β-глюкан знакрохмалю, обробці паперової маси, обробці тексходиться, наприклад, в стінках клітин ендосперму тилю, для розкладу β-глюкану при виготовленні в зернах. Ліхеназа - це ендо-β-глюканаза (1,31,4пива, а також для покращання якості муки у хлібоβ-D-глюкан-4-глюканогідролаза), яка розщеплює βпекарній промисловості. В способі за цим винахо1,4 зв'язки β-глюкану, що має як β-1,3, так і β-1,4 дом целюлаза розриває поверхневі структури під зв'язки. Ламінаріназа (1,3-β-D-глюкан-3плівкою живого зерна. глюканогідролаза) розщеплює β-глюкан, який має Целюлаза промислового виробництва похотільки β-1,3 зв'язки, такі як β-1,3 зв'язки вуглеводів дить з бактерій, таких як рід Bacillus, або з грибків, типу ламінаріну, а екзоглюканаза (1,3-β-D-глюкантаких як дріжджі (наприклад, Saccharomyces) або 3-глюкогідролаза) розщеплює β-1,3 зв'язки β-1,3плісень. Великі кількості целюлаз отримували, глюканів з утворенням головним чином глюкози. зокрема, з плісенних грибків. Плісені, які найчастіВ екстракції β-амілази багатообіцяючих реше використовуються для отримання целюлаз, зультатів було досягнуто при використанні таких належать до родів Humicola, Fusarium, препаратів целюлази, як Spezyme СЕ і GC 440, 7 75632 8 виробництва фірми Genencor International. Другий муку, 10г якої переносять в 100-мл лабораторну з цих препаратів виробляється з генетично модиконічну пляшку. Додають 100мл 0,5% (вага/об'єм) фікованого штаму Trichoderma longibrachiatum і розчину натрію сульфіту і добре перемішують. розщеплює целюлозу, геміцелюлозу та β-глюкан Суміші дають постояти в пляшці впродовж 24 гоособливо ефективно. Його активність проявляєтьдин, час від часу струшуючи. Після цього суміш ся як вплив на карбоксиметил целюлозу (RBBзнову добре перемішують і фільтрують через тонCMC), у випадку чого RBB-CMC активність станокий фільтрувальний папір (ΜΝ 640W) . Фільтрат вить щонайменше 1400МО/г. На додаток до актирозводять у співвідношенні 1:50 дистильованою вності целюлази, препарат GC 440 має активність водою, і визначають активність ферменту спосоβ-глюканази, β-глюкозідази, β-ксилозідази, ксилабом, описаним далі. нази і ацетилестерази. Типова партія препарату В принципі, β-амілазу визначали так, як описаGC 440 містить в середньому близько 7000но в Харчовому хімічному кодексі IV, Загальний 9000O/мл DNS-CMC, близько 6000-8000O/мл βтест і апарат, 485. глюканази, близько 500-600nkat/ml β-ксилозідази, В даному описі одиниця ДС (діастатичної сиблизько 1700-2000nkat/ml ацетилестерази, близьли) визначається, як кількість ферменту в 0,1мл ко 700-1400O/мл RBB ксиланази та близько 19005% розведення зразка, яка продукує кількість від2100O/мл DNS ксиланази. Дуже добрих результановлювальних цукрів, достатню для відновлення тів було досягнуто при використанні целюлази 5мл розчину Феглінга зі 100мл субстрату при 20°С виробництва Röhm Enzymer GmbH, яка продаєтьза 1 годину. (Спосіб кількісного визначення не відся під торговою маркою Roha-lase®Sep. Цей преповідає цій дефініції ДС.) парат виробляється зі штаму Trichoderma reesei і Активність ферменту визначали шляхом гідмає в значній кількості активність β-1,4ролізу крохмалю при 20°С, рН 4,6 впродовж 30 ендоглюканази (щонайменше 4700 CU/g) та ксихвилин. Отримані відновлювальні цукри визначали ланази (щонайменше 3000 ХуІН/g) і в меншій кільшляхом титрування лужним феріціанідом. Для кості активність целобіогідролази. Він також вклютого, щоб отримати крохмальний субстрат, 20г чає активність β-1,3-глюканази, тобто (сухої речовини) крохмалю (Baker 1130) змішували ламінаріназу. При використанні цих ферментативз близько 50 мл води. Додавали близько 500мл них препаратів прийнятна кількість целюлази стакиплячої води, і кип'ятили суміш точно 2 хвилини. новить щонайменше 0,015%, а краще щонайменДо охолодженого крохмального розчину додавали ше 0,020%, наприклад від 0,018 до 0,040%, а 20мл ацетатного буферу (0,5М; рН4,6) і розводили особливо від 0,024 до 0,030% від ваги зерна. дистильованою водою до 1 літра. 200мл крохмаβ-амілазу можна екстрагувати в присутності льного субстрату при 20°С переносили піпеткою в целюлази при температурі 20-45°С. Краще, щоб 250-мл мірну колбу, додавали 10мл розведеного температура підтримувалась в межах 25-32°С, зразка ферменту і добре змішували. Зразок інкунаприклад 29-31°С. Тривалість екстракції може бували точно 30 хвилин у водяній бані при 20°С, і становити від 30 до 72 годин, звичайно щонаймедодавали 20мл 0,5N NaOH. Добре перемішували і нше 48 годин, наприклад 48-66 годин, а зокрема розводили до 250мл. 10мл розведення ферменту і 55-62 години. Прийнятна тривалість екстракції при 20мл 0,5N NaOH переносили піпеткою в 250-мл 30°С становить біля 60 годин. Після закінчення мірну колбу, щоб слугувати 0-зразком. Добре пеекстракції зерно, крупу або муку відокремлюють ремішували, додавали 200мл крохмального субвід екстракційної води, наприклад за допомогою страту і розводили до 250мл. сита, а β-амілазу виділяють з екстракційної води, Реактив 0,05N феріціанід готували шляхом ровід якої її очищають та/або концентрують, якщо це зчинення 16,5г калію феріціаніду (K3Fe(CN)6) і 22г бажано. натрію карбонату (Nа2СО3) у воді і розведення до Після екстракції зерно, екстраговане і відокре1 літра. Розчин A-P-Z готували шляхом розчиненмлене у такий спосіб, може бути використане, наня 70г калію хлориду (KСl) і 20г цинку сульфату приклад, для отримання крохмалю. Згідно з даним (ZnSO47Н2О) в 700мл дистильованої води, додавинаходом, β-амілазу екстрагують, і екстракт відованням 200мл концентрованої оцтової кислоти і кремлюють від зерна перед тим, як крохмаль фрарозведенням до 1 літра. Розчин калію йодиду гокціонують і відділяють від зерна. Якщо фермент тували шляхом розчинення 50г калію йодиду (KJ) екстрагують з цілого зерна, то екстраговане зерно в 100мл дистильованої води і додавання 2 краспочатку розмелюють, після чого починають пропель 50% гідроокису натрію (NaOH). 10мл феріціцес отримання крохмалю у спосіб, який сам по анідного реактиву і 5мл зразка переносили піпетсобі є відомим. Для цього змелене зерно перемікою в 250-мл мірну колбу. Добре змішували і шують у воді і фракціонують, використовуючи сита нагрівали у ванні з киплячою водою точно 20 хвиі відцентрову силу. Під час розмелу звичайно долин. Отриманий розчин охолоджували і додавали дають целюлазу разом з β-глюканазою, щоб зме25мл реактиву A-P-Z та 1мл розчину KJ. Суміш ншити в'язкість і відокремити крохмаль від протеїтитрували 0,05N розчином натрію сульфату до ну. зникнення синього забарвлення (темноНаступні приклади ілюструють винахід, не обсинєбіле). межуючи його описаними тут втіленнями. Активність β-амілази вираховували за формуПриклад 1 лою: Кількісне визначення β-амілази ( V  V1)  23  K Активність  0 ДС / мл Перед визначенням загальної кількості β100 амілази, отриманої з зерна, зерно позбавляють де: V0=Об'єм, спожитий на титрування 0всякої плівки, змелюють в сухому стані на тонку 9 75632 10 зразка (мл) Подібну екстракцію було проведено в присутV1=Об'єм, спожитий на титрування зразка (мл) ності целюлази - кількість доданого препарату K = Коефіцієнт розведення GC440 становила 0,025% від ваги очищеного зерПриклад 2 на. Тривалість екстракції склала 60 годин. ЗагальДосліджувався вплив целюлази на тривалість на активність використаної кількості зерна склала екстракції β-амілази. β-амілазу екстрагували з яч1550кДС. Було отримано 9825мл екстракту з актименю без целюлази і з додаванням целюлази. 10кг вністю 102ДС/мл після відділення екстракту проячменю, очищеного від плівки машинним спосопусканням через сито. Загальна активність отрибом, екстрагували в 15 літрах води, яка містила маного екстракту склала 1002,2кДС/мл, а вихід 0,5% натрію метабісульфіту і 0,5% натрію сульфіекстракту становив 64,7%. ту. В другому експерименті додавали ще й целюОтримані результати показують, що додаванлазу GC440 фірми Genencor в кількості, яка відпоня целюлази до екстракційної води значно збільвідала 0,029% від ваги очищеного ячменю. шує вихід β-амілази. Екстракцію проводили при 30°С. Активність зерна, Приклад 4 яке використовувалось для екстракції, становила Вивчався вплив температури на екстракцію β155ДС/мл, що було визначено згідно з прикладом амілази. Очищений від плівки ячмінь екстрагували 1. Результати наведені в Таблицях 1 і 2. способом, описаним в попередніх прикладах, в присутності целюлази при різних температурах. Таблиця 1 Доза доданої целюлази GC440 становила 0,027% від ваги очищеного ячменю, а температура екстЕкстракція без целюлази ракції складала 20°С, 25°С, 30°С або 40°С. Результати наведені на Фіг.1. Найкращих результатів було досягнуто при 30°С. Активність β-амілази в ДС/мл екстЧас, години Приклад 5 ракційного розчину Вивчався вплив целюлази на вихід β-амілази з 10 20 пшениці. 10кг меленої пшениці з активністю β24 47 амілази 128ДС/г екстрагували в 15 літрах води, 30 55 яка містила 0,5% натрію метабісульфіту і 0,5% 48 83 натрію сульфіту. Екстракцію проводили при 30°С 60 92 без целюлази і в присутності целюлази. 66 98 Тривалість екстракції без целюлази становила 72 102 72 години. Загальна активність використаної кіль96 86 кості пшениці склала 1280кДС. Було отримано 9175мл екстракту з активністю 55ДС/мл після відТаблиця 2 ділення екстракту пропусканням через сито. Загальна активність отриманого екстракту склала Екстракція з целюлазою 504,6кДС/мл, а вихід екстракту становив 39,4%. Подібну екстракцію було проведено в присутАктивність β-амілази в ДС/мл екстності целюлази - кількість доданого препарату Час, години ракційного розчину GC440 становила 0,036% від ваги несіяної пшени10 23 чної муки грубого помелу. Тривалість екстракції 24 55 склала 60 годин. Загальна активність використаної 30 70 кількості зерна склала 1280кДС. Було отримано 48 92 10080мл екстракту з активністю 72ДС/мл після 60 104 відділення екстракту пропусканням через сито. 66 104 Загальна активність отриманого екстракту склала 72 100 725,8кДС/мл, а вихід екстракту становив 56,7%. 96 90 Отримані результати показують, що додавання целюлази до екстракційної води значно збільОтримані результати показують, що додаваншує вихід β-амілази. ня целюлази до екстракційної води скорочує триПриклад 6 валість екстракції β-амілази. Вивчався вплив целюлази на вихід β-амілази з Приклад 3 полірованої пшениці. Пшеницю полірували на маВивчався вплив целюлази на вихід екстракції. шині для полірування рису шляхом руйнування 10кг очищеного ячменю з активністю β-амілази поверхні зерна і видалення самої зовнішньої його 155ДС/г екстрагували в 15 літрах води, яка містичастини. Таким чином, більша частина перикарду ла 0,5% натрію метабісульфіту і 0,5% натрію сувидалялась, а теста була частково порушеною. льфіту. Екстракцію проводили при 30°С без целю10кг полірованої пшениці з активністю β-амілази лази і в присутності целюлази. 128ДС/г екстрагували в 15 літрах води, яка містиТривалість екстракції без целюлази становила ла 0,5% натрію метабісульфіту і 0,5% натрію су72 години. Загальна активність використаної кільльфіту. Екстракцію проводили при 30°С без целюкості зерна склала 1550кДС. Було отримано 8175 лази і в присутності целюлази. мл екстракту з активністю 95ДС/мл після відділенТривалість екстракції без целюлази становила ня екстракту пропусканням через сито. Загальна 72 години. Загальна активність використаної кільактивність отриманого екстракту склала кості пшениці склала 1280кДС. Було отримано 776,6кДС/мл, а вихід екстракту становив 50,1%. 9780мл екстракту з активністю 15ДС/мл після від 11 75632 12 ділення екстракту пропусканням через сито. Загасклала 1280кДС. Було отримано 9250мл екстракту льна активність отриманого екстракту склала з активністю 35ДС/мл після відділення екстракту 146,7кДС/мл, а вихід екстракту становив 11,5%. пропусканням через сито. Загальна активність Подібну екстракцію було проведено в присутотриманого екстракту склала 323,8кДС/мл, а вихід ності целюлази - кількість доданого препарату екстракту становив 25,3%. GC440 становила 0,036% від ваги полірованої Отримані результати показують, що додаванпшениці. Тривалість екстракції склала 60 годин. ня целюлази до екстракційної води значно збільЗагальна активність використаної кількості зерна шує вихід β-амілази. Комп’ютерна верстка Т. Чепелева Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601