Спосіб корекції антиоксидантної системи у молодняку великої рогатої худоби за гострого нітратно-нітритного токсикозу

Реферат: Спосіб корекції стану антиоксидантного захисту у молодняку великої рогатої худоби при нітратних навантаженнях включає внутрішньовенне введення аскорбінової кислоти в дозі 0,03 г/кг маси тіла розчиненої у 200 мл 5 % розчину глюкози протягом 2-х діб через кожні 6 годин. Одночасно з аскорбіновою кислотою додатково вводять підшкірно урсовіт АДЕ у дозі 2,0 мл на тварину. UA 103242 U (12) UA 103242 U UA 103242 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 1. Галузь техніки, до якої належить корисна модель Корисна модель належить до галузі ветеринарної медицини, зокрема ветеринарної фармакології, а саме до способів знешкодження токсичної дії нітритів і нітратів на організм молодняку великої рогатої худоби. Заявлений спосіб може бути використаний у господарствах із різними формами власності, що вирощують і утримують молодняк великої рогатої худоби в умовах нітратного навантаження, тобто при підвищенні рівня нітратів і нітритів у кормах і воді. 2. Рівень техніки Відомі способи лікування сільськогосподарських тварин при нітратному отруєнні (Винярська А.В. Ефективність використання тетравіту при нітратно-нітритних навантаженнях тільних корів // Наук. - техн. бюл. Ін-ту біол. тварин. - Львів, 2006. - С. 62-66; Внутрішні хвороби тварин / В.І. Левченко, І.П. Кондрахін, В.В. Влізло та ін.; За ред. B.I. Левченка. - Біла Церква, 2001. - Ч. 2. 544 с.; Гунчак В.М. Застосування метіоніну для зменшення токсичної дії нітратів // Науковий вісник Львівської національної академії ветеринарної медицини ім. С.З. Ґжицького. - Львів, 2004. - Т. 6, № 3, Ч. 1. - С. 84-88; Методичні рекомендації з профілактики, діагностики та лікування тварин при отруєнні нітратами і нітритами. - Харків, 2001. - 58 с.; Мусієнко М.Т. Особливості хронічного нітратного токсикозу корів // Наук. вісн. НАУ. - К., 2002. - № 55. - С. 120-123; Хмельницький Г.О., Вовк Д.М., Панько М.Ф. Тривале згодовування підвищених доз нітратів та клініко-біохімічний статус організму нетелів // Вісник с.-г. науки. - 1986. - № 12. - С. 58-60), в яких використовуються різні біологічно активні речовини, які гальмують надходження токсичних нітратних сполук з шлунково-кишкового тракту в кров, сприяють виведенню нітратних сполук з організму, а також нейтралізують продукти порушеного обміну речовин і забезпечують видужання тварин, які отруїлися нітратними сполуками. Недоліком цих способів є мала ефективність виведення ксенобіотиків з організму у початковій стадії токсикозу і недостатня корекція системи антиоксидантного захисту організму молодняку великої рогатої худоби. Найбільш близьким по суті до способу, що заявляється, є спосіб лікування жуйних при нітратних токсикозах (Гуфрий Д.Ф. Коррекция нитратно-нитритных отравлений у молодняка крупного рогатого скота фармакологическими препаратами // Тез. докл. 4-й Межгосуд. науч.практ. конф. "Новые фармакологические средства в ветеринарии". - Санкт-Петербург, 1992. - С. 69-70). Відомий спосіб включає внутрішньовенне введення аскорбінової кислоти в дозі 0,03 г/кг, розчиненої у 200 мл 5 %-ного розчину глюкози впродовж двох діб через кожні шість годин і забезпечує видужання 72 % хворих тварин у завершальній стадії токсикозу. Спосіб базується на здатності аскорбінової кислоти прискорювати перебіг окисно-відновних процесів в організмі і сприяє перетворенню метгемоглобіну, що утворюється при отруєнні тварин нітратами, в гемоглобін у декомпенсаторній стадії токсикозу. Заявлений спосіб і прототип мають суттєві спільні ознаки: обидва способи включають внутрішньовенне ведення аскорбінової кислоти в дозі 0,03 г/кг маси тіла, розчиненої у 200 мл 5 % розчину глюкози протягом 2-х діб через кожні 6 годин. Недоліком даного способу є недостатня корекція функцій антиоксидантної системи та інтенсивності перекисного окиснення ліпідів, які відіграють важливе значення у патогенезі нітратно-нітритного токсикозу. Заявлений нами спосіб усуває вказані недоліки прототипу і забезпечує високу ефективність видужання тварин (до 85 % від загальної кількості хворих). Заявлений спосіб прискорює відновлення рівноваги активності функцій системи антиоксидантного захисту та інтенсивності перекисного окиснення ліпідів у крові молодняку великої рогатої худоби. Таким чином, запропонований спосіб сприяє корекції системи антиоксидантного захисту організму молодняку великої рогатої худоби, а це, у свою чергу, прискорює видужання хворих і потребує менших економічних затрат на їх лікування. 3. Суть корисної моделі 3.1 Суть корисної моделі і суттєві ознаки В основу корисної моделі поставлено задачу - розробити ефективний спосіб корекції антиоксидантної системи у молодняку великої рогатої худоби за нітратно-нітритного токсикозу, простий та доступний у застосуванні, економічно вигідний для господарств, в яких він застосовується. Технічний результат досягають тим, що одночасно з аскорбіновою кислотою додатково вводять підшкірно урсовіт АДЕ в дозі 2,0 мл на тварину. Дія нітритів на організм тварин супроводжується утворенням в крові метгемоглобіну, де двовалентне залізо гемоглобіну окиснюється до тривалентного. Процес окиснення гемоглобіну реалізується через взаємодію його оксиформи з нітрит-іоном по ланцюговому шляху. При 1 UA 103242 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 окисненні гемоглобіну утворюється цілий ряд радикальних метаболітів, які є активними окисниками біологічних субстратів, надають виражену цитотоксичну дію, ініціюють процеси перекисного окиснення ліпідів. Даному патологічному процесу запобігає багатокомпонентна система антиоксидантного захисту організму. Велику роль відіграє глутатіонова система (глутатіон, глутатіонредуктаза, глутатіонпероксидаза, глюкозо-6-фосфатдегідрогеназа). Глюкозо-6-фосфатдегідрогеназа - пусковий ензим пентозофосфатного циклу окиснення вуглеводів як джерело відновленої форми NADPH та пентозних основ для синтезу нуклеїнових кислот. Глутатіонредуктаза входить до складу глутатіонової системи антиоксидантного захисту. Даний фермент не каталізує знешкодження радикалів кисню та продуктів пероксидації ліпідів, проте активність глутатіонової системи антиоксидантного захисту у значній мірі залежить від інтенсивності відновлення глутатіону. Глутатіонредуктаза забезпечує відновлення глутатіону за допомогою NADPHH, NADPH, що виступають донорами водню. Глутатіонпероксидаза - каталізує розклад гідроперекисів ліпідів нерадикальним шляхом за допомогою глутатіону відновленого, а саме каталізує розпад перекису водню і окиснює глутатіон. Глутатіонпероксидаза разом з іншими антиоксидантами сприяє видаленню первинних продуктів частково редукованого кисню. Глюкозо-6-фосфатдегідрогеназа - пусковий ензим пентозофосфатного циклу окиснення вуглеводів як джерела відновленої форми NADPH та пентозних основ для синтезу нуклеїнових кислот. Технічний результат заявленого способу обумовлений одночасним парентеральним використанням вітамінних препаратів урсовіту АДЕ та аскорбінової кислоти, розведеної у 5 % розчині глюкози. Аскорбінова кислота є важливим антиоксидантом та імуностимулятором, що сприяє підвищенню опірності організму до різних захворювань, зокрема до токсикозів різної етіології. Відіграє велике значення в синтезі кортикостероїдних гормонів і гормонів щитовидної залози, відповідальних за стійкість і адаптацію організму до умов зовнішнього середовища, що змінюються. Покращує метаболізм ліпідів, сприяючи нормалізації обміну холестерину. Цей вітамін нормалізує порушення синтетичних і енергетичних процесів, покращує діяльність печінки, приймає участь у всіх ланках обміну речовин, синтезі адреналіну, інсуліну, глікогену, знешкодженні токсичних речовин. Вітамін С разом із продуктом окислення дегідроаскорбіновою кислотою утворюють окисно-відновну систему, яка бере участь у відновленні різних біосубстратів, впливає на синтез нуклеїнових кислот, обмін амінокислот, кровотворення, зменшує проникливість стінок судин. Глюкоза забезпечує субстратне поповнення енерговитрат організму. 5 % розчин глюкози ізотонічний відносно плазми крові і при його внутрішньовенному введенні добре поповнює об'єм циркулюючої крові при її втраті. Низька осмолярність розчину дозволяє використовувати його як розчинник лікарських засобів для парентерального застосування за умови їхньої хімічної сумісності. Енергетична цінність 1л розчину глюкози 5 % становить 170 ккал. Урсовіт АДЕ ін'єкційний розчин в 1 мл олії містить 100 000 ОД ретинолу ацетату, 5 000 кальциферолу, 20 мг токоферолу ацетату. Вітаміни А, Д, Е активізують метаболічні процеси й обмін речовин, підвищують продуктивність, поліпшують ріст молодих тварин. Вітамін А бере активну участь в окисно-відновних процесах, регуляції синтезу білків, сприяє нормальному обміну речовин, функції клітинних і субклітинних мембран. Вітамін А є потужним акцептором перекисних радикалів, що пов'язано із його здатністю активно перехоплювати пероксидні сполуки. Антиоксидантні ефекти даного вітаміну мають також і опосередкований характер, оскільки ретинол, як відомо, бере активну участь в синтезі сірковмісних амінокислот в організмі, зокрема L-цистеїну. Вітамін Е (токоферол) охороняє вітамін А від окиснення як в кишечнику, так і в тканинах. Якщо є нестача вітаміну Е, то вітамін А не буде засвоюватись у відповідній кількість, і тому ці два вітаміни потрібно приймати разом. Механізм фармакологічної дії вітаміну Е полягає у тому, що він запобігає окисненню жирів, жирних кислот та стеринів. Антиоксидантна дія вітаміну зберігається за високих концентрацій активних форм кисню. Біологічна роль кальциферолів пов'язана з їх активною участю в обміні кальцію. Вони стимулюють засвоєння цього елемента з відкладанням його у кістках. Таким чином наведені інформативні відомості пояснюють технічний результат заявленого способу, підтверджуючи його ефективність і об'єктивність. 3.2. Відомості, що розкривають суть корисної моделі 2 UA 103242 U 5 10 15 20 25 30 35 При проведені патентно-інформаційного пошуку авторами і заявником виявлено технічне рішення (Гуфрий Д.Ф. Коррекция нитратно-нитритных отравлений у молодняка крупного рогатого скота фармакологическими препаратами // Тез. докл. 4-й Межгосуд. науч.-практ. конф. "Новые фармакологические средства в ветеринарии". - Санкт-Петербург, 1992. - С. 69-70), що містить найбільшу кількість суттєвих ознак, спільних із заявленим способом. Спосіб включає внутрішньовенне введення аскорбінової кислоти в дозі 0,03 г/кг маси тіла, розчиненої у 200 мл 5 % розчину глюкози протягом 2-х діб через кожні 6 годин. Але наявність зазначених, спільних із прототипом ознак недостатня для одержання технічного результату, який забезпечує заявлений спосіб. Технічних рішень, які б за сукупністю ознак повністю б співпадали із заявленим, не виявлено. Це дозволяє зробити висновок про відповідність заявленого технічного рішення критерію корисної моделі "новизна". В патентній і науково-технічній літературі не знайдено технічних рішень, в яких були б описані відомості про ознаки, що відрізняють заявлений спосіб від прототипу і забезпечують досягнення технічного результату тим, що одночасно з аскорбіновою кислотою додатково вводять підшкірно урсовіт АДЕ в дозі 2,0 мл на тварину. Корисна модель належить до галузі ветеринарної медицини, зокрема ветеринарної фармакології, а саме до способів корекції стану антиоксидантного захисту у молодняку великої рогатої худоби за нітратно-нітритного токсикозу. Заявлений спосіб може бути використаний у господарствах із різними формами власності, що вирощують молодняк великої рогатої худоби в умовах нітратного навантаження, а тому відповідає критерію корисної моделі "промислова придатність". 4 Відомості, що підтверджують можливість здійснення корисної моделі 4.1 Порядок здійснення способу Реалізацію заявленого способу здійснюють у такий спосіб. У господарствах, в яких молодняк великої рогатої худоби хворіє на нітратно-нітритний токсикоз, лікування проводять застосуванням вітамінних препаратів. У день постановки діагнозу на нітратно-нітритний токсикоз вводять урсовіт АДЕ в дозі 2,0 мл на тварину (підшкірно) та аскорбінову кислоту (0,03 г/кг) розчиненої у 200 мл 5 % розчину глюкози (внутрішньовенно) чотири рази на добу протягом двох діб. 4.2. Приклад конкретного виконання способу Ефективність заявленого способу та його переваги перед прототипом підтверджені прикладом конкретного виконання. У навчально-науково-виробничому центрі "Комарнівський" Городоцького району, Львівської області було відібрано 15 телят шестимісячного віку, яким створювали штучне навантаження  нітратами, згодовуючи одноразово нітрат натрію у дозі 0,4 г NO 3 /кг маси тіла тварин. За принципом аналогів тварини були поділені на 3 групи по 5 тварин у кожній (контрольну і дві  дослідні). Тваринам контрольної групи одноразово згодовували нітрат натрію у дозі 0,4 г NO 3 /кг 40 45  маси тіла. Тваринам дослідних груп з комбікормом згодовували нітрат натрію у дозі 0,4 г NO 3 /кг маси тіла та вводили аскорбінову кислоту і урсовіт АДЕ. Матеріалом для дослідження слугувала кров. З яремної вени венозну кров відбирали на початку досліду та через 3 години після згодовування бичкам нітрату натрію, а також через 1, 2, 3, 6, 9, 12 годин після введення вітамінних препаратів. Перша дослідна група (Д1) - прототип. Бичкам згодовували один раз з кормом нітрат натрію  у дозі 0,4 г NO 3 /кг маси тіла, через 3 години вводили аскорбінову кислоту в/в у дозі 0,03 г/кг з 200 мл 5 % розчину глюкози. Друга дослідна група (Д2) - новий спосіб. Бичкам згодовували один раз з кормом нітрат 50  натрію у дозі 0,4 г NO 3 /кг маси тіла, через 3 години підшкірно ввели урсовіт АДЕ у дозі 2,0 мл на тварину. Одержані показники активності ферментів як дослідних так і контрольної груп подані у таблиці. 3 UA 103242 U Таблиця Активність ферментів антиоксидантної системи у крові бичків за розвитку гострого нітратно-нітритного токсикозу, (M±m, n=5) Групи До Після згодовування згодовування нітрату нітрату натрію натрію Після введення антиоксидантів Перша Друга Третя Шоста Дев'ята Дванадцята година година година година година година Активність глутатіонредуктази, нмоль NADPH/xв на 1 мг білка 1,59± 1,69± 1,37± 1,34± 1,30± 1,35± 1,42± 1,46± 0,050 0,060 0,050 0,042 0,025 0,033 0,043 0,045 1,58± 1,63± 1,39± 1,41± 1,43± 1,46± 1,48± 1,54± 0,055 0,065 0,055 0,045 0,050* 0,046* 0,058 0,061 1,59± 1,67± 1,41± 1,45± 1,49± 1,51± 1,55± 1,58± 0,050 0,060 0,050 0,045 0,048** 0,060* 0,055 0,064 Активність глутатіонпероксидази, нмоль NADPH/xв. на 1 мг білка 37,1 38,4 34,2 31,6± 29,5± 34,6± 35,5± 36,2± ±1,5 ±1,5 ±1,2 1,2 1,1 1,3 1,4 1,4 37,2 38,2 34,4 33,9± 34,9± 35,3± 35,7± 36,4± ±1,2 ±1,4 ±1,6 1,5 1,4** 1,5 1,4 1,4 37,1 38,2 34,4 34,7± 35,3± 35,7± 36,2± 37,0± ±1,3 ±1,5 ±1,5 2,5 1,6** 1,4 1,5 1,6 Активність глюкозо-6-фосфатдегідрогенази, нмоль NADPH/xв на 1 мг білка 0,73± 0,62± 0,53± 0,50± 0,48± 0,52± 0,56± 0,60±0,0 0,025 0,025 0,021 0,020 0,017 0,017 0,019 21 0,75± 0,60± 0,55± 0,57± 0,59± 0,60± 0,54± 0,67± 0,023 0,023 0,022 0,021* 0,021*** 0,023** 0,024* 0,024* 0,74± 0,61± 0,57± 0,59± 0,63± 0,67± 0,69± 0,71± 0,024 0,025 0,021 0,023** 0,022*** 0,023*** 0,025*** 0,025*** Активність каталази, одиниці 6,53± 5,40± 5,27± 5,11± 4,90± 5,35± 5,58± 5,71± 0,14 0,11 0,15 0,16 0,10 0,10 0,16 0,14 6,55± 5,34± 5,36± 5,42± 5,55± 5,56± 5,89± 6,09± 0,16 0,15 0,14 0,15 0,14*** 0,13 0,16 0,16 5,70± 6,54± 5,37± 5,40± 5,57± 5,62± 5,99± 6,32± 0,16 0,16 0,15 0,15* 0,14*** 0,16 0,15** 0,16 Третя година К Д1 Д2 К Д1 Д2 К Д1 Д2 К Д1 Д2 5 10 15 Результати досліджень, що наведені в таблиці, свідчать, що застосування вітамінних препаратів за умов розвитку гострого нітратно-нітритного токсикозу бичків сприяли підвищенню активності ферментів антиоксидантної системи (глутатіонпероксидази, глутатіонредуктази, глюкозо-6-фосфатдегідрогенази та каталази) у крові дослідних тварин, крім того аскорбінова кислота з урсовітом АДЕ проявляла кращу дію на систему антиоксидантного захисту організму бичків ніж застосування аскорбінової кислоти. Отже, біохімічні показники крові лікованих телят, наведені в таблиці свідчать, що за умов нітратно-нітритного токсикозу, сукупне застосування аскорбінової кислоти з урсовітом АДЕ проявляє кращу лікувальну ефективність та активуючу функцію на антиоксидантну систему захисту організму телят. Отже, ефективність заявленого способу і його переваги перед відомим способом (прототип) при лікуванні телят, хворих на нітратно-нітритний токсикоз підтверджена прикладами конкретного застосування. Заявлений спосіб доцільно використовувати для лікування телят, хворих на нітратнонітритний токсикоз. Даний спосіб можна використовувати у господарствах з різними формами власності при різних способах утримання телят. 4 UA 103242 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 Спосіб корекції стану антиоксидантного захисту у молодняку великої рогатої худоби при нітратних навантаженнях, який включає внутрішньовенне введення аскорбінової кислоти в дозі 0,03 г/кг маси тіла розчиненої у 200 мл 5 % розчину глюкози протягом 2-х діб через кожні 6 годин, який відрізняється тим, що одночасно з аскорбіновою кислотою додатково вводять підшкірно урсовіт АДЕ у дозі 2,0 мл на тварину. Комп’ютерна верстка Л. Бурлак Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 5