Спосіб корекції активності ензимів крові за фасціольозу сенсибілізованих атиповими мікобактеріями корів

Реферат: Спосіб корекції активності ензимів крові за фасціольозу сенсибілізованих атиповими мікобактеріями корів включає внутрішньом'язове введення хворим коровам клозаверму А у дозі 0,5 мл препарату на 10 кг маси тіла тварини. Крім цього, одночасно із клозавермом А додатково застосовують катозал внутрішньом'язово у дозі 10 мл препарату на тварину. UA 110853 U (12) UA 110853 U UA 110853 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до галузі ветеринарної медицини, зокрема ветеринарної паразитології та мікробіології, а саме до способів лікування трематодозних інвазій корів сенсибілізованих атиповими мікобактеріями. Заявлений спосіб може бути використаний у господарствах із різними формами власності, що вирощують і утримують велику рогату худобу в умовах трематодозних інвазій, для нормалізації обміну речовин у великої рогатої худоби з метою інтенсифікації галузі. Відомі способи лікування великої рогатої худоби при фасціольозній інвазії (Анаев М.С. Эпизоотологические особенности фасциолеза жвачных и опыт борьбы с ними в условиях Дагестанской АССР: Автореф. дис. … канд. вет. наук: 03.00.20 /Всесоюз. науч. - иссл. ин-т гельминтологии. - М, 1974. - 22 с.; Благов Н.А., Барышев М.Д., Фирсов В.Н. Некоторые показатели клеточного иммунитета у больных кишечными нематодами //Мед. паразитология и паразитарные болезни. - М., 1987. - № 5. - С. 53-57.; Ватников Ю.А. Эффекторные и регуляторные механизмы иммунитета при фасциолезе и пути его коррекции: Дис. … канд. вет. наук: 03.00.20. - М, 1993. - 148 с; Довгій Ю.Ю. Івомєк-плюс у лікуванні фасціольозу великої рогатої худоби //Тваринництво України. - 1998. - № 8-9. - С. 15-16.; Довгій Ю.Ю., Грищук Г.П., Мартиненко Д.Л. Вплив вермітану в комплексі з комбіфероном на жирні кислоти загальної фракції ліпідів, екстрагованих з лейкоцитів крові корів, хворих фасціольозом //Ветеринарна медицина: Міжвід. темат. зб. наук, праць. - Харків., 2003. - Вин. 82. – С. 209-212.; Клесов М.Д., Корж К.П. Биологические и агроклиматические основы профилактики фасциолеза овец и крупного рогатого скота //Тр. УИЭВ. - 1960. - Т. 27 - С. 13-23.; Матчанов Н.М., Гехтин В.М., Улугова СТ. Фасциолез и дикроцелиоз в Узбекистане //Методы профилактики и борьбы с трематодозами человека и животных: Тез. докл. Всес. науч. конф. (Сумы, 9-11 окт. 1991 г.). - М., 1991. - С. 76-79.), у яких використовуються різні лікувально-профілактичні засоби, що пригнічують ріст та розвиток фасціол, сприяють нормалізації морфологічних показників крові, нейтралізують продукти порушеного обміну речовин і забезпечують видужання великої рогатої худоби. Недоліком відомих способів є мала ефективність знешкодження продуктів метаболізму фасціол та недостатня корекція системи антиоксидантного захисту організму великої рогатої худоби. Найбільш близьким по суті до способу, що заявляється, є спосіб лікування тварин при фасціольозній інвазії (Методичні рекомендації щодо попередження та ліквідації інвазійних захворювань овець /Березовський А.В., Стибель В.В., Власенко О.А. - К.: Ветінформ, 2010. - 35 с.). Відомий спосіб включає внутрішньомязове введення препарату клозаверм А у дозі 0,5 мл препарату на 10 кг маси тіла тварини. Спосіб базується на здатності клозаверму А порушувати метаболічні процеси у фасціол, що призводить до паралічу і їх загибелі. Заявлений спосіб і прототип мають суттєві спільні ознаки: обидва способи включають внутрішньомязове введення препарату клозаверм А у дозі 0,5 мл препарату на 10 кг маси тіла тварини. Недоліком відомого способу є недостатня корекція ензимів крові великої рогатої худоби, які відіграють важливе значення у патогенезі трематодозних інвазій та ефективності лікування. Заявлений нами спосіб усуває вказані недоліки прототипу і забезпечує високу ефективність видужання тварин. Заявлений спосіб прискорює корекцію активності ензимів у сироватці крові корів за умов трематодозної інвазії. Таким чином, запропонований спосіб сприяє корекції активності ензимів у сироватці крові корів, а це, у свою чергу, прискорює видужання хворих і потребує менших економічних затрат на їх лікування. В основу корисної моделі покладено завдання розробити ефективний спосіб корекції активності ензимів крові при лікуванні трематодозних інвазій, зручний в застосуванні, економічно вигідний для використання в господарствах з різними формами власності, що утримують велику рогату худобу. Технічний результат досягають тим, що одночасно з клозавермом А додатково застосовують катозал внутрішньом'язово у дозі 10 мл препарату на тварину. Серед найбільш розповсюджених патологій паразитарної етіології у жуйних тварин чільне місце за ступенем ураження та заподіянням економічних збитків займають трематодозні захворювання, а саме: фасціольоз. Фасціольоз (Fasciolosis) - досить поширене, переважно з хронічним перебігом трематодозне захворювання жуйних тварин. Збудниками його є Fasciola hepatica (звичайна) та Fasciola gigantica - (гігантська) з родини Fasciolidal. Збудником фасціольозу в Україні є Fasciola hepatica. 1 UA 110853 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Улюблене місце локалізації фасціол - жовчні ходи печінки, жовчний міхур. Також фасціоли можуть зустрічатися і в легенях, підшлунковій залозі, серці та лімфатичних вузлах, що пов'язано з їхніми міграціями. В організмі тварини патогенна дія фасціол складається із механічного, інокуляторного, антигенного, токсичного та трофічного впливів. Своїми рухами та продуктами життєдіяльності фасціоли подразнюють оболонку жовчних ходів, спричинюючи спочатку гостре, а потім хронічне запалення. Такі травми супроводжуються кровотечею, особливо печінковою, а також гострими запаленнями пошкоджених органів. Через гострий гепатит та прогресуюче, внаслідок кровотечі, малокрів'я хворі тварини іноді гинуть. За останні десять років дослідники часто вказують про випадки неідентифікованих захворювань, які за клінічним перебігом подібні до туберкульозу, однак при застосуванні протитуберкульозних препаратів вони не піддаються лікуванню. Мікобактеріоз - це захворювання, викликане не туберкульозними мікобактеріями, що відрізняються від них більш швидким ростом на поживних середовищах і деякими іншими властивостями (здатністю до пігментоутворення, активністю деяких ферментів). Захворювання реєструють у різних холоднокровних і теплокровних тварин; найбільш характерні ураження шкіри, легенів і лімфатичних вузлів. Збудниками мікобактеріозу є так звані потенційно патогенні мікобактерії, а саме: "атипові", анонімні або некласифіковані. Вони характеризуються широким спектром природної стійкості до лікарських препаратів. За основними біологічними властивостями збудники мікобактеріозу відрізняються від мікобактерій туберкульозу. Для мікобактерій характерний високий вміст фосфатидів та ліпідів у клітинних стінках (до 60 %), що визначає їх лужно-, спирто- і кислотостійкість. Слід відзначити, що дана ознака особливо виражена у патогенних мікобактерій. В процесі розвитку інвазії паразити виділяють в кров продукти метаболізму, які діють токсично на гепатоцити, що призводить до зниження активності системи антиоксидантного захисту. Поряд з цим підвищується проникність біологічних мембран клітинних оболонок, що спричиняє гіперферментемію у сироватці крові, зокрема амінотрансфераз (АсАТ і АлАТ). Технічний результат заявленого способу обумовлений одночасним застосування протипаразитарного препарату клозаверму А та катозалу, механізмом впливу цих препаратів на організм корів сенсибілізованих атиповими мікобактеріями за фасціольозної інвазії та роллю цих препаратів у процесах обміну речовин і, зокрема, впливом їх на активність ферментів у сироватці крові корів. Так, Клозаверм А - це масляниста однорідна прозора рідина жовтого кольору зі специфічним запахом, до якого входить аверсектин С та клозантел. Компоненти препарату є синергістами. Аверсектин С сприяє вироблення нейромедіатора - гамма-аміномасляної кислоти, порушуючи тим самим передачу нервових імпульсів. Клозантел порушує обмінні процеси у паразитів, пригнічуючи активність ензимів, що у подальшому веде до паралічу і загибелі паразитів. Катозал - це комплексний лікарський засіб, що містить в 100 мл: бутафосфан (10г), ціанокобаламін (0,005 г), метил-4-гідроксибензоат (0,1 г), а також воду для ін'єкцій. Даний препарат підвищує опірність організму до несприятливих факторів зовнішнього середовища, токсинів, інфекцій тощо. Стимулює жировий, вуглеводний та білковий обміни, нормалізує регенеративні та метаболічні процеси в організмі тварин. Поєднаний вплив препаратів Клозаверму А і Катозалу на обмін речовин у корів за трематодозних інвазій обумовлює нормалізацію функціонування систем і органів, що проявляється у корекції активності ензимів крові. Таким чином наведені інформативні відомості пояснюють технічний результат заявленого способу, підтверджуючи його ефективність і об'єктивність. При проведені патентно-інформаційного пошуку авторами і заявником виявлено технічне рішення (Методичні рекомендації щодо попередження та ліквідації інвазійних захворювань овець /Березовський А.В., Стибель В.В., Власенко О.А. - К.: Ветінформ, 2010. - 35 с.), що містить найбільшу кількість суттєвих ознак, спільних із заявленим способом. Спосіб включає внутрішньомязове введення препарату клозаверм А у дозі 0,5 мл препарату на 10 кг маси тіла тварини. Але наявність зазначених, спільних із прототипом ознак недостатня для одержання технічного результату, який забезпечує заявлений спосіб. Технічних рішень, які б за сукупністю ознак повністю б співпадали із заявленим, не виявлено. 2 UA 110853 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Це дозволяє зробити висновок про відповідність заявленого технічного рішення критерію винаходу (корисної моделі) "новизна". У патентній і науково-технічній літературі не знайдено технічних рішень, в яких були б описані відомості про ознаки, що відрізняють заявлений спосіб від прототипу і забезпечують досягнення технічного результату тим, що одночасно з клозавермом А додатково застосовують катозал внутрішньом'язово у дозі 10 мл препарату на тварину. Отже, заявлене технічне рішення не випливає явним чином з рівня техніки, що дозволяє зробити висновок про його відповідність критерію винаходу (корисної моделі) - "винахідницький рівень". Корисна модель належить до галузі ветеринарної медицини, зокрема ветеринарної паразитології та мікробіології, а саме до способів лікування трематодозних інвазій великої рогатої худоби. Заявлений спосіб може бути використаний у господарствах із різними формами власності, що вирощують і утримують велику рогату худобу в умовах трематодозної інвазії, а тому відповідає критерію винаходу (корисної моделі) "промислова придатність". Отже, заявлене технічне рішення є новим, має винахідницький рівень, є промислово придатним, тобто відповідає всім умовам патентоспроможності винаходу (корисної моделі) відповідно до статті 7 розділу II "Закону України про охорону прав на винаходи і корисні моделі" № 1771-III, 2000. Реалізацію заявленого способу здійснюють у такий спосіб. У господарствах, в яких велика рогата худоба хворіє на фасціольозну інвазію та мікобактеріоз, лікування проводять шляхом поєднаного застосування Клозаверму А та Катозалу. У день постановки діагнозу на фасціольозну інвазію та мікобактеріоз великій рогатій худобі застосовують внутрішньомязово клозаверм А у дозі 0,5 мл препарату на 10 кг маси тіла тварини сукупно з катозалом у дозі 10 мл препарату на тварину. Ефективність заявленого способу та його переваги перед прототипом підтверджені прикладом конкретного виконання. У ТОВ "Молочні ріки" і СВК імені В. Стефаника Бродівського району Львівської області було відібрано 15 корів 4-5 річного віку, чорно-рябої породи, яких розподілили на 3 групи, по 5 тварин у кожній: контрольну і дві дослідні групи. Тварини контрольної групи (К) були ураженні фасціольозом та мікобактеріозом. Тваринам першої дослідної групи (Д 1), які були ураженні фасціольозом та мікобактеріозом, внутрішньомязово вводили клозаверм А у дозі 0,5 мл препарату на 10 кг маси тіла тварини. Тваринам другої дослідної групи (Д 2), які були ураженні фасціольозом та мікобактеріозом, внутрішньомязово вводили клозаверм А у дозі 0,5 мл препарату на 10 кг маси тіла тварини та катозал у дозі 10 мл препарату на тварину. Матеріалом для дослідження слугувала кров. З яремної вени венозну кров відбирали на 7, 14, 21 та 28 доби після застосування вищезгаданих препаратів. В крові визначали: активність аспартат-амінотрансферази, аланін-амінотрансферази, каталазу та супероксиддисмутазу. Вплив клозаверму А та катозалу на активність ензимів у сироватці крові корів за асоціації мікобактеріозів та фасціольозу наведений у табл. 1. Після застосування клозаверму А для лікування корів, що уражені мікобактеріозом та фасціольозом встановлено поступову нормалізацію активності амінотрансфераз і фосфатаз у сироватці крові Після застосування дослідного препарату клозаверму А, активність ензиму АлАТ у крові корів на 14 добу була нижчою на 8 % відносно контрольної групи корів, яких не лікували. Вона дещо знизилася на 21 добу досліду і на 28 добу досліду відповідно становила 167,4±10,0 нкат/л, що на 16 % є нижчою за контроль. Натомість, активність АсАТ в сироватці крові дослідної групи Дι на 14 добу досліду становила 291,2±13,3 нкат/л, а на 28 добу досліду відповідно знизилася до 280,1±13,9 нкат/л. Застосування клозаверму А та катозалу коровам дослідної групи Д 2 сприяло кращій нормалізації амінотрансфераз у сироватці крові ніж застосування тільки клозаверму А, так на 14 добу досліду активність АлАТ знизилася на 12 %, а активність АсАТ - на 7 % відносно контрольної групи корів, яких не лікували. На 21 і 28 доби досліду активність амінотрансфераз коливалася у межах фізіологічних величин. 55 3 UA 110853 U Таблиця 1 Вплив клозаверму А та катозалу на активність ензимів у сироватці крові корів за асоціації мікобактеріозів та фасціольозу (M±m; n=5) Показник АлАТ, нкат/л АсАТ, нкат/л КТ, мкат/л СОД, у.о/мг білка 5 10 15 20 25 30 35 40 Групи тварин К Д1 Д2 К Д1 Д2 К Д1 Д2 К Д1 Д2 До зараження 160,3±10,2 161,0±10,1 160,4±10,0 272,2±17,4 270,9±13,4 270,5±13,4 47,18±1,10 47,20±1,11 47,31±1,10 1,31±0,02 1,33±0,02 1,30±0,01 Термін досліджень (доби) 7 14 182,5±10,5 196,4±10,2 176,4±10,0 180,4±10,1 171,1±10,1 173,5±10,0 297,4±15,1 306,2±15,9 285,1±14,1 291,2±13,3 280,4±13,4 284,3±12,5 40,10±1,11 38,75±1,12 43,40±1,12 44,95±1,13 45,12±1,14 46,40±1,10 1,17±0,03 1,08±0,03 1,21±0,04 1,12±0,02 1,25±0,01 1,27±0,05 21 212,5±10,5 171,1±9,6 165,2±9,5 330,8±15,0 285,5±16,0 273,2±10,4 36,15±1,15 45,50±1,16 46,9±1,18 0,96±0,03 1,15±0,03 1,29±0,04 28 200,3±10,0 167,4±10,0 160,3±9,6 302,5±13,6 280,1±13,9 270,6±12,5 38,14±1,13 46,30±1,17 47,40±1,17 1,05±0,02 1,27±0,04 1,31±0,02 У крові хворих корів також встановлено низьку активність каталази - на 23 % нижче ніж у клінічно здорових тварин. Після лікування корів, уражених мікобактеріозом та фасціольозом, препаратом клозаверм А, відзначаємо нормалізацію активності ензиму у сироватці крові з 14 доби досліду. На 21 добу досліду активність каталази у сироватці крові дослідної групи Д 1 зросла на 26 %, а на 28 добу досліду відповідно на 21 % відносно величин контрольної групи корів. Застосування тваринам дослідної групи Д2 катозалу сприяло кращому підвищенню активності каталази, вже починаючи з 7 доби досліду. На 21 і 28 добу досліду активність досліджуваного ензиму коливалася у межах фізіологічних величин. Разом з тим, у певному взаємозв'язку з інтенсивністю окисно-відновних процесів у тканинах тварин знаходиться активність СОД. Супероксиддисмутаза є ключовим ферментом в системі антиоксидантного захисту. Зниження активності СОД у тварин контрольної групи корів, які були ураженні асоціацією мікобактеріозу і фасціольозу, під впливом різноманітних факторів може привести до збільшення вмісту перекисів ліпідів внаслідок активації процесів вільнорадикального окиснення. Нами встановлено, що на початок і кінець досліду активність СОД коливалася у межах 1,31±0,02-0,96±0,03 у.о/мг білка. Застосування коровам дослідних груп препаратів клозаверму А та катозалу сприяло активізації активності супероксиддисмутази у їх сироватці крові, так на 21 добу досліду активність ензиму у дослідної групи Д 1 збільшилася на 20 %, а у дослідної групи Д2 - на 34 % відносно контрольної групи. Найвищою активність СОД була у сироватці крові тварин групи Д2 на 28 добу досліду, де відповідно вона становила 1,31±0,02 у.о/мг білка, що на 25 % є вищою від величин контрольної групи корів. Аналіз одержаних результатів вказує, що супероксиддисмутазна активність в сироватці крові корів дослідних груп позитивно корелює з активністю каталази. Отже, застосування хворим тваринам клозаверму А та катозалу сприяє нормалізації активності ензимів у сироватці крові дослідних груп. Також слід відзначити кращий нормалізуючий ефект на ензимну ланки при одночасному застосуванні клозаверму А та катозалу. Таким чином, дані одержані в прикладі конкретного виконання способу підтверджують ефективність заявленого способу щодо корекції активності ферментів крові та лікувального ефекту заявленого способу. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб корекції активності ензимів крові за фасціольозу сенсибілізованих атиповими мікобактеріями корів, який включає внутрішньом'язове введення хворим коровам клозаверму А у дозі 0,5 мл препарату на 10 кг маси тіла тварини, який відрізняється тим, що одночасно із клозавермом А додатково застосовують катозал внутрішньом'язово у дозі 10 мл препарату на тварину. 4 UA 110853 U Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 5