Застосування 1-(1-адамантил-1-етокси)-3-(n-метил морфоліній)-2-пропанол йодиду, який має кардіопротекторну дію

Реферат: Застосування 1-(1-адамантил-1-етокси)-3-(N-метил морфоліній)-2-пропанол йодиду (ЮК-76), який має кардіопротекторну дію. UA 114598 U (12) UA 114598 U UA 114598 U 5 10 15 Корисна модель належить до медицини, зокрема до фармакології і кардіології, та може бути використана для лікування адреналін-індукованого ішемічного ураження міокарда. Великий арсенал лікарських засобів, які використовуються у лікуванні ішемічної хвороби серця (ІХС), не завжди задовольняє запити клініцистів як через їх недостатню ефективність, так і наявність побічних реакцій. Тому сьогодні ведеться інтенсивний пошук нових молекул з кардіопротекторною дією, придатних для створення на їх основі більш ефективних та безпечних препаратів [Гуменюк А.Ф. Аспекти раціонального лікування серцево-судинних хворих з поліморбідними ураженнями / А.Ф.Гуменюк // Український медичний часопис. - 2009. - № 5 (73). - С. 25-32; Бобров В.О. Адаптаційні ішемічні і реперфузійні синдроми у хворих ішемічною хворобою серця: механізми, діагностика, обґрунтування терапії / В.О. Бобров, С.К. Кулішов. Полтава: Дивосвіт, 2004. - 240 с]. Як препарат порівняння вибрано кордарон, який широко використовується для лікування ІХС [Метаболитные и метаболитотропные препараты в системе кардио- и органопротекции / И.С. Чекман, Н.А. Горчакова, С.Б. Французова, Е.А. Нагорная. - К., 2009. - 155 с.]. У цьому плані нашу увагу привернуло похідне адамантану - 1-(1-адамантил-1-етокси)-3-(Nметил морфоліній)-2-пропанол йодид (ЮК-76) формули: OH + _ N O I O CH3 20 25 , ЮК-76, якій притаманна захисна дія на ішемізований мозок [Патент України на корисну модель № UA 97765 Застосування 1-(1-адамантил-1-етокси)-3-(N-метил діалкіламоній)-2-пропанол йодидів формули, як засобів, які мають церебропротекторну дію / Ю.В. Короткий, Г.І. Степанюк, Б.О. Коваль, Н.Г. Степанюк, О.А. Смертенко; Бюл. № 7, 2015]. Задачею корисної моделі є пошук хімічних сполук з вираженою кардіопротекторною активністю для розширення арсеналу сучасних лікарських засобів зазначеної дії. Поставлена задача була вирішена застосуванням відомої сполуки 1-(1-адамантил-1-етокси)3-(N-метил морфоліній)-2-пропанол йодиду формули: OH + N O CH3 _ O I , 30 35 40 45 50 яка має церебропротекторну активність. Синтез та фізико-хімічні властивості нами були описані в патенті [Патент України на корисну модель № 97765 Застосування 1-(1-адамантил-1-етокси)-3-(N-метил діалкіламоній)-2-пропанол йодидів формули, як засобів, які мають церебропротекторну дію / Ю.В. Короткий, Г.І. Степанюк, Б.О. Коваль, Н.Г. Степанюк, О.А. Смертенко; Бюл. № 7, 2015]. Корисна модель ілюструється наступним прикладом. Приклад. Дослідження проведене на 60 нелінійних щурах обох статей масою 165-220 г, розділених на 4 групи: I група (n=15) - інтактні щури; II група (n=15) - щури з експериментальною адреналіновою міокардіодистрофісю (АМД) без лікування (контроль); III група (n=15) - щурі з АМД, ліковані сполукою ЮК-76 (10 мг/кг, в/о); IV група (n=15) - щурі з АМД, ліковані кордароном (10 мг/кг, внутрішньоочеревинно (в/о)). Всі експериментальні дослідження над лабораторними тваринами проводили в атестованій Головною організацією метрологічної служби Міністерства охорони здоров'я (МОЗ) України лабораторії кафедри фармакології Вінницького національного медичного університету ім. М.І. Пирогова (ВНМУ ім. М.І. Пирогова; свідоцтво про атестацію № 023/13 від 05.03.2013 р.) з урахуванням вимог належної лабораторної практики GLP (Good Laboratory Practice) і з дотриманням основних положень Конвенції Ради Європи про охорону хребетних тварин, що використовуються в експериментах та в інших наукових цілях від 18 березня 1986 p., Директиви Європейського парламенту та Ради ЄЄ 2010/63/ЄС від 22 вересня 2010 р. про захист тварин, які використовуються для наукових цілей, наказу МОЗ України від 14 грудня 2009 р. № 944 "Про 1 UA 114598 U 5 10 15 20 25 30 35 40 затвердження Порядку проведення доклінічного вивчення лікарських засобів та експертизи матеріалів доклінічного вивчення лікарських засобів", та Закону України від 21 лютого 2006 р. № 3447-1V "Про захист тварин від жорстокого поводження" [Мельник В.М. Етичні та правові аспекти проведення наукових досліджень та випробувань лікарських засобів / В.М. Мельник // Український хіміотерапевтичний журнал. - 2002. - № 1 (13). - C. 11-15]. Біохімічні дослідження виконані в науково-дослідній клініко-діагностичній лабораторії ВНМУ ім. М.І. Пирогова, атестованій Головною організацією метрологічної служби МОЗ України (свідоцтво про переатестацію № 049/15 від 02.03.2015 р.). АМД моделювали за методикою Маркової О.О. (1998 р.) шляхом одноразового внутрішньом'язового введення 0,18 % розчину адреналіну тартрату (ПрАТ "Фармацевтична фірма "Дарниця", м. Київ) в дозі 1 мг/кг маси тіла [Маркова О.О. Міокардіодистрофія і реактивність організму. - Тернопіль: Укрмедкнига, 1998. - 150 с.]. Дози кордарону (10 мг/кг, ТОВ "Санофі-Авентіс Україна", м. Київ) та сполуки ЮК-76 (10 мг/кг) були запозичені з літератури [Патент України на корисну модель № UA 97765 Застосування 1(1-адамантил-1-етокси)-3-(N-метил діалкіламоній)-2-пропанол йодидів формули, як засобів, які мають церебропротекторну дію / Ю.В. Короткий, Г.І. Степанюк, Б.О. Коваль, Н.Г. Степанюк, О.А. Смертенко; Бюл. № 7, 2015; І.О. Петрик Моніторинг кардіопротекторних ефектів похідного 3,2'спіро-пірроло-2-оксиндолу сполуки R-86 при модельній кардіальній ішемії за різних режимів введення / І.О. Петрик // Вісник Вінницького національного медичного університету. - 2014. - Т. 18, № 2. - С. 441-444.]. Тварини контрольної групи отримували еквіоб'ємну кількість 0,9 % розчину натрію хлориду (NaCl, ПАТ "Галичфарм", м. Львів). Досліджувані речовини вводили групам тварин щоденно протягом 7 днів, перше введення через 30 хв. після моделювання АМД. Ефективність терапії оцінювали на 2 та 8 добу експерименту за динамікою вмісту в міокарді аденілових нуклеотидів, активності маркерів ішемічного пошкодження серця - креатинфосфокінази (КФК) та аспартатамінотрасферази (ACT) в сироватці крові та показником летальності в групах тварин. Евтаназію щурів здійснювали шляхом дислокації шийних хребців під легким ефірним наркозом. Видалене з грудної порожнини тварин серце відмивали від крові охолодженим 1,15 % ізотонічним розчином калію хлориду (КСl) та висушували фільтрувальним папером. Тканини серця гомогенізували при 3000 об/хв. (тефлон-скло) в середовищі 1,15 % розчину КСl у співвідношенні 1:10 (маса/об'єм) при температурі 4-6 °C. Гомогенат центрифугували 30 хв. при 600 g, відбирали аліквоти постядерного супернатанту в мікропробірки "Eppendorf" і до проведення досліджень зберігали при температурі -20 °C. Для визначення рівня аденілових нуклеотидів проводили десмоліз тканини серця 30 % розчином гідроксиду калію (КОН) із додаванням етилового спирту (С 2Н5ОН). Проби центрифугували 25 хв. при 1000 g. Вміст аденілових нуклеотидів визначали в депротеїнізованому трихлороцтовому супернатанті тканин серця 1:10 (10 % розчин трихлороцтової кислоти) хроматографічним методом на пластинах "Silufol" [Прохорова М.И. Современные методы биохимических исследований (липидный и энергетический обмен) / М.И. Прохорова. - Л.: Из-во Ленинградского ун-та, 1982. - 272 с.]. Енергетичний заряд розраховували за формулою: Енергетичн ий заряд  45 50 55 2АТФ  АДФ 2( АТФ  АДФ  АМФ ) . Активність ACT (КФ 2.6.1.1) в сироватці крові визначали методом Райтмана-Френкеля за утворенням гідразонів піровиноградної кислоти в лужному середовищі за набором "ACT" (Філісіт-Діагностика, Україна). Активність КФК (КФ 2.7.3.2) в сироватці крові визначали спектрофотометричним методом за швидкістю утворення НАДФН за набором "Креатинкіназакін." (СпайнЛаб, Україна). Цифрові данні наведені у вигляді "М±m" для первинної вибірки (n), де М - середнє арифметичне значення, m - стандартна похибка. Вірогідність розбіжностей визначали методом варіаційної статистики з використанням двовибіркового t-критерію Стьюдента. Розрахунки здійснювали за допомогою електронних таблиць Excel програмного забезпечення Microsoft Office-2010. Статистично достовірними вважали зміни при рівні вірогідності вище 95 % (р