Застосування 1-(адамантил-1-метокси)-3-(2,2,6,6-тетраметилпіперидино)-2-пропанол гідрохлориду як антимікробного засобу

Застосування 1-(адамантил-1-метокси)-3(2,2,6,6-тетраметилпіперидино)-2-пропанол гідрохлориду формули: Винахід відноситься до органічної хімії, конкретно до речовини 1-(адамантил-1-метокси)-3(2,2,6,6-тетраметил піперидино)-2-пропанол гідрохлорид формули Задачею винаходу є пошук нових хімічних сполук з вираженими антимікробними властивостями з метою розширення арсеналу сучасних антимікробних засобів. Поставлена задача була вирішена застосуванням відомої сполуки 1-(адамантил-1-метокси)3-(2,2,6,6-тетраметил піперидино)-2-пропанол гідро-хлорид формули . CH2 OCH2 CHCH2N HCl OH (ІІІ) яка значно інгібує ріст грампозитивних мікроорганізмів та грамнегативних бактерій. Відомо, що для боротьби з бактеріальними інфекціями на теперішній час використовуються антибіотики та антимікробні препарати. Застосування антибіотиків часто викликає ускладнення, що потребує додаткових медикаментозних заходів. Крім того, в останній час набули широкого розповсюдження штами, які резистентні до антибіотиків та інших антимікробних засобів [1]. CH2OCH 2CHCH 2N . 85457 (11) HCl HCl OH (ІІІ) яка описана як засіб, що має противоаритмічну, адренолітичну, анестезуючу дії [2]. Зазначену речовину одержують наступним шляхом: UA . (19) CH2OCH2CHCH2N (13) C2 OH як антимікробного засобу. 3 85457 CH2OCH2CHCH2 + HN . 4 HCl CH2OCH2CHCH2N O . HCl OH І ІІ HCl CH2OCH2 CHCH2N . HCl OH ІІІ 1-(Адамантил-1-метокси)гліцидиловий етер (І) реагує в спиртовому середовищі з 2,2,6,6тетраметилпіперидином з утворенням відповідного алкоксидіалкіламінопропанолу (II) , який далі обробляють насиченим спиртовим розчином хлористоводневої кислоти, даючі кінцевий продукт (III). Методика одержання, фізикохімічні властивості даної сполуки були описані раніше [2]. Винахід ілюструється наступним прикладом. Приклад. Для визначення протимікробної активності досліджуваної сполуки та препарату порі вняння нами використовувались загальноприйняті референт-штами грампозитивних, грамнегативних патогенних та умовно-патогенних мікроорганізмів, отримані із Національного музею живих культур Інституту епідеміології та інфекційних хвороб імені Л.В. Громашевського. Протимікробна активність досліджувалась згідно вимог ДФУ МОЗ України та рекомендацій [3, 4]. Таблиця 1 Відомості про мікроорганізми, які використані для дослідження Мікроорганізми Кількість штамів S.aureus ATCC 25923 1 Enterococcus eaecalis ATCC 6873 Ps.aeruginosa ATCC 27853 E.coli ATCC 25922 Kl.pneumoniae ATCC 5055 Pr.vulgaris ATCC 034005 Sh.flexneri ATCC 2076 S.typhy ATCC 107088 1 1 1 1 1 1 1 Для кількісного і точного визначення антимікробної активності досліджуваної сполуки та препарату порівняння використали метод послідовних серійних розведень в рідкому живильному середовищі - м'ясо-пептонному бульйоні.. З метою швидкого і якісного визначення антимікробної активності досліджуваних сполук стосовно широкого спектру мікроорганізмів, а також для зменшення кількості витратних матеріалів та часу застосовано мікрометод з використанням стерильних одноразових 96 лункових полістеролових планшет з кришками та каліброваних мікропіпеток із стерильними наконечниками. В якості препарату порівняння обрано препарат офлоксацин - 9-фтор-2,3-дигідро-3-метил-10(4-метил-1-піперазинол)-7-оксо-7Н-піридо /1,2,3de/1,4-бензоксазин карбонова кислота. Основний розчин досліджуваних препаратів (матричний) готували в концентрації 1000,0мкг/мл. Офлоксацин розчиняли у фізіологічному розчині. Звідки одержано мікроорганізм Музей живих культур НДІ епідеміології та інфекційних хвороб імені Л.В. Громашевського -II-II-II-II-II-II-II До 5мг препарату (III) додавали 0,2мл розчинника (етиловий спирт), потім рідке живильне середовище до кінцевого об'єму 5мл (в 1мл - 1мг препарату). Для інокуляції використовували мікробну суспензію, еквівалентну 0,5 за стандартом Мак Фарланда, розведену в 100 разів на поживному бульйоні, після чого концентрація мікроорганізмів в ній становила приблизно 106 КУО/мл. Тестування проводилось в об'ємі 0,2мл. У кожну лунку 96 лункової полістеролової планшети вносили по 0,1мл 5-годинної культури мікроорганізмів (1мл середовища містило 106 КУО/мл). Потім, в першу лунку мікропіпеткою в об'ємі 0,1мл вносили матричний розчин дослідного препарату, концентрація якого дорівнювала 1000мкг/мл, ретельно перемішували і послідовно переносили по 0,1мл суспензії в наступні лунки. В результаті такого двократного розведення отримували ряд лунок з розчинами від 500мкг/мл до 0,24мкг/мл. Кін 5 85457 цева концентрація мікроорганізмів в кожній лунці досягала необхідної - приблизно 5x105 КУО/мл. Після цього планшети поміщали у вологу камеру в термостат при температурі 37°С і витримували 24 години. Облік результатів проводили візуально, порівнюючи ріст мікроорганізму у присутності досліджуваної речовини із ростом культури у лунці без неї. Визначали мінімальну 6 інгібуючу концентрацію (МІК) і мінімальну бактерицидну концентрацію (МБК) препаратів. За МІК приймали мінімальну концентрацію досліджуваної речовини, що забезпечувала повне пригнічення видимого росту мікроорганізму, за МБК приймали ту мінімальну концентрацію препарату, висів з якої не давав росту на відповідному щільному поживному середовищі. Таблиця 2 Порівняння антимікробної дії препарату (III) та стандарту офлоксацину №п/п 1 2 3 4 5 6 7 8 Штам мікроорганізму S.aureus ATCC 25923 Enterococcus eaecalis ATCC 6873 Ps.aeruginosa ATCC 27853 E.coli ATCC 25922 Kl.pneumoniae 5055 Pr.vulgaris 034005 Sh.flexneri 2076 S.typhy 107088 MIK (мкг/мл) 15,6 ≥125 ≥31,25 3,8 7,8 7,8 3,8 1,9 Таким чином, досліджувана речовина проявляє антимікробну дію по відношенню до грампозитивних мікроорганізмів (S.aureus, Enterococcus faecalis), та грамнегативних бактерій (Ps.aeruginosa, E.coli, Kl.pneumoniae). МІК досліджуваної речовини (III) практично відповідає МІК офлоксацину, а для бактерій Pr.vulgaris перевищує тест-препарат офлоксацин в 4 рази. Література: 1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М. - Медицина. - 2000г. -Т. 2.-С. 608. Комп’ютерна в ерстка В. Клюкін (III) МБК (мкг/мл) 15,6 250 62,5 3,8 7,8 7,8 7,8 1,9 офлоксацин МІК (мкг/мл) МБК (мкг/мл) 0,48 0,95 250 250 62,5 62,5 1,9 1,9 7,8 7,8 31,2 31,2 0,95 0,95 0,95 0,95 2. Pedrazzoli A., Dall'asta L., Guzzon V., Ferrero E. Syntesied attvita farmacologica di al luni derivati dell'adamantano. Farmaco. Ed.Sci 1970, 25, №11, 822-829; Рж.Хим. 1971, №7 ж 249. 3. Ме тодичні рекомендації по вивченню специфічної активності протимікробних лікарських засобів, ДФЦ МОЗ України, 30.10.2003р. 4. Европейское руководство по клинической оценке противоинфекционных лекарственных средств: пер. С англ.. под ред.. акад.. А.Г. Чучалина и Л.С. Страчунского. - Смоленск: Амипресс, 1996. - 319с. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601