Спосіб корекції порушень процесів знешкодження в печінці тварин, токсифікованих олігоефірами багатоатомних спиртів

Реферат: Спосіб корекції порушень процесів знешкодження в печінці щурів, токсифікованих олігоефірами (ОЕФ), включає використання комплексу антитоксичних речовин. Для корекції порушень процесів знешкодження в печінці тварин, токсифікованих ОЕФ багатоатомних спиртів технічної назви "Лапроли", зокрема марки 502 (ОЕФ-ЛП-502-2-10) в 1/10 та 1/100 його середньолетальної дози, вводять як комплекс антитоксичних речовин - препарат ремаксол. UA 115049 U (12) UA 115049 U UA 115049 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, а саме до токсикології, судової медицини, клінічної біохімії, терапії й профілактичної медицині, і може бути використана для корекції порушень процесів знешкодження в печінці тварин, токсифікованих олігоефірами багатоатомних спиртів. Актуальність предмету корисної моделі пов'язана зі значним поширенням уражень печінки в результаті дії на організм людини ксенобіотиків (КБ), кількість яких з кожним роком зростає. До останніх, як показали наші дослідження, слід віднести й олігоефіри (ОЕФ) багатоатомних спиртів технічної назви "Лапроли", зокрема марки 502 (ОЕФ-ЛП-502-2-10), тривалий вплив яких в 1/10 та 1/100 середньолетальної дози (ДЛ50) на організм щурів супроводжується суттєвим погіршенням функцій печінки, особливо - знешкоджувальної, що посилює ксенобіотичне навантаження й, як наслідок, викликає розвиток енергодефіцитних станів. Тому спроби пошуку засобів корекції порушень процесів знешкодження в печінці тварин, токсифікованих саме такими КБ, є вкрай важливими. Відомий спосіб корекції функціонального стану гепатоцитів у робітників, зайнятих у виробництві хімічних речовин, зокрема простих поліефірів, шляхом призначення їм протягом 10 діб, антиоксидантного препарату авеолу, імуномодулятора ехінацеї пурпурової, геаптопротектора силібору, вітамінних препаратів нікотинаміду й триовіту [Патент України на корисну модель № 106388. МПК А61К 31/00, А61Р 1/00. Спосіб профілактики й корекції печінково-клітинної недостатності в робітників виробництва хімічних речовин. Опубл. 25.04.2016, бюл. № 8]. Однак, в даному способі мова йде про дію на робітників екзогенних чинників декілька іншої природи, ніж ОЕФ багатоатомних спиртів, причому протягом значного терміну (від 5 до 20 років), тому слід очікувати й можливі особливості як зсувів показників, які характеризують печінково-клітинну недостатність, так і їх корекції. Існує також спосіб корекції ендогенної інтоксикації, зокрема епоксидовмісним ОЕФ Л-501-2100 в 1/100 його ДЛ50, у щурів шляхом паралельного з токсифікацією додавання як добавки до раціону нутрітивного комплексу, що містить антитоксичну речовину 1500 УО ретинолу, 4,5 мг αтокоферолу, по 15 мг - метіоніну, глутамінової, лимонної й аскорбінової кислот, 15 мг зеленого чаю й 75 мг фосфатидного концентрату на добу на 1 тварину протягом 60 днів [Патент України на корисну модель № 102939. МПК А61К 39/00. Спосіб корекції ендогенної інтоксикації олігоефірами у тварин. Опубл. 25.11.2015, бюл. № 22]. Даний спосіб є найбільш близьким до того, що заявляється, за технічною суттю й результатом, який може бути досягнутий, тому його вибрано в якості прототипу. До недоліків прототипу відноситься те, що в ньому констатується спочатку стимуляція вільнорадикальних процесів, перекисного окислення ліпідів та антиоксидантної системи до 40 доби експерименту, а потім інгібування останньої на 50 й 60 добу токсифікації щурів якимось лапроксидом Л-303 в 1/100 його ДЛ50, хоча фактично в дослідженні був використаний зовсім інший ОЕФ - Л-501-2-100, при дії якого, чомусь лише в такій же дозі, динамічне спостереження за станом тварин здійснювалося на 15, 30, 45 й 60 добу. Крім того, цей КБ характеризується своїми фізико-хімічними властивостями, зрозуміло, які відрізняються від таких ОЕФ, що вивчали ми, а тому слід очікувати й особливостей проявів його токсичного впливу, зокрема на печінку, у зв'язку з чим відомий антиоксидантний нутрітивний комплекс може бути й недостатньо ефективним для корекції наслідків токсифікації, викликаної саме ОЕФ багатоатомних спиртів. До того ж, що стосується запропонованої авторами антитоксичної речовини, то, знов же, вона не одна, а являє собою комплекс засобів, не всі з яких власне такі властивості й проявляють, а абсолютна більшість їх має конкретно антиоксидантну активність. Більш того, терміни введення даного комплексу засобів досить значні (60 діб). Нарешті, у прототипі так і не наведені власні експериментальні дані, що підтверджували б відновлення порушень під дією відомого комплексу засобів саме процесів знешкодження в гепатоцитах щурів, токсифікованих епоксидовмісним ОЕФ. В основу корисної моделі поставлена задача удосконалення способу корекції порушень процесів знешкодження в печінці тварин, токсифікованих досліджуваним КБ, шляхом введення їм лікувального комплексу, складові якого мають позитивний вплив на показники, що є патогенетично-значущими в разі дії саме ОЕФ багатоатомних спиртів. Поставлена задача вирішується тим, що у відомому способі корекції ендогенної інтоксикації епоксидовмісним ОЕФ у щурів, який включає введення їм антиоксидантного нутрітивного комплексу, згідно з корисною моделлю, експериментальним тваринам, токсифікованим ОЕФ багатоатомних спиртів, для корекції порушень процесів знешкодження в печінці вводять ремаксол. Ремаксол (ТОВ "НТФФ "ПОЛІСАН", РФ) - це збалансований інфузійний розчин, який чинить гепатопротекторну дію. Препарат зменшує розвиток внутрішньопечінкового холестазу й цитоліз, 1 UA 115049 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 що проявляється в зниженні активності індикаторних ферментів: аспартатамінотрансферази (АсАТ) та аланінамінотрансферази (АлАТ); сприяє зниженню білірубіну і його фракцій, покращує екскрецію прямого білірубіну в жовч; підвищує активність глутатіонпероксидази (ГПО) і каталази (КТ) до контрольних значень при зниженні рівня продуктів ліпопероксидації; знижує активність екскреторних ферментів гепатоцитів - лужної фосфатази (ЛФ) і γ-глутамілтранспептидази (γГТП); збільшує вміст відновленого глутатіону (ВГ) зі зберіганням рівня білкових тіолових груп у печінці; підтримує енергетичний обмін у гепатоцитах за рахунок нормалізації активності глюкозо-6-фосфатдегідрогенази; підвищує стійкість мембран гепатоцитів до перекисного окислення ліпідів; застосовується при порушеннях функції печінки, внаслідок гострого чи хронічного її пошкодження етиленгліколем, циклофосфаном та ін. Це полііонний сукцинатвмісний розчин, до складу якого додатково введені рибоксин, метіонін, нікотинамід, електроліти натрію хлорид, магнію хлорид, калію хлорид і сільстабілізуючий агент Nметилглюкамін. Позитивні ефекти складових ремаксолу: янтарна кислота (в організмі проявляє активність у вигляді солей - сукцинатів) приймає участь у циклі Кребса, процесах окисного фосфорилювання, відновлює й нормалізує обмін речовин, підвищує стійкість організму до токсичної дії цілої низки екотоксикантів (тетрахлорметану, двоокису кремнію, алюмінію, ртуті, свинцю, миш'яку, багатьох лікарських препаратів) і тому використовується як антидот після інтоксикації організму, надає антиоксидантний ефект, завдяки, наприклад, підвищенню активності супероксиддисмутази, КТ і ГПО, стимулює репаративні процеси в печінці; рибоксин сприяє протіканню окисно-відновних реакцій обміну речовин, збільшенню вмісту пулупуринових нуклеотидів, необхідних для ресинтезу АТФ і ГТФ, вторинних посередників - циклічних нуклеотидів, а також пригніченню активності ксантиноксидази, що супроводжується зниженням продукції активних форм кисню; метіонін має дезінтоксикаційний ефект, надає метаболічну гепатопротекторну дію, застосовується при лікуванні й профілактиці захворювань і токсичних уражень печінки; нікотинамід являє собою кодегідрогенази І (НАД) і II (НАДФ), які приймають участь в окисно-відновних процесах у клітині, активатор NAD-залежних ферментних систем, приймає участь у метаболізмі жирів, протеїнів, амінокислот, пуринів, тканинному диханні, глікогенолізі, застосовується при гострому й хронічному гепатиті, цирозі печінки; натрієві солі сприяють кращому надходженню сукцинату в клітини; сільстабілізуючий агент N-метилглюкамін (діюча речовина - меглумін) - детоксикуючий засіб, включаючи антидоти, використовують як наповнювач, рН-регулятор і солюбілізатор, головним чином у процесі підготовки розчинних солей, йодованих органічних кислот. Ремаксол зареєстрований в Україні як лікарський препарат (реєстраційне посвідчення № UA/14648/01/01) й дозволений до клінічного застосування Наказом МОЗ України № 614 від 21.09.2015 р. Наша пропозиція щодо використання ремаксолу як коректора порушень процесів знешкодження в печінці тварин, токсифікованих 1/10 та 1/100 ДЛ50 ОЕФ-ЛП-502-2-10, базується на отриманих дослідним шляхом даних, які дозволили встановити закономірність, що введення їм полііонного сукцинатвмісного розчину - ремаксолу приводить до позитивної динаміки змін попередньо виявлених нами патогенетично-значущих показників, які характеризують саме досліджувані порушення. Раніше з метою корекції порушень процесів знешкодження в печінці щурів, токсифікованих досліджуваним ОЕФ, ремаксол не використовувався. Технічний ефект способу корекції порушень біохімічних механізмів знешкодження в печінці щурів, токсифікованих 1/10 та 1/100 ДЛ50 досліджуваного ОЕФ багатоатомних спиртів, обумовлений високою терапевтичною ефективністю складових комплексу, який заявляється, що підтверджується покращенням функціонального стану мікросом гепатоцитів і процесів кон'югації, а також відсутністю їх негативного впливу на організм. Вибір ОЕФ багатоатомних спиртів був обумовлений великими обсягами їх виробництва, широким контактом з населенням у виробничих умовах і в побуті, необхідністю розкриття патогенетичних механізмів дії, обґрунтування прогнозу їх потенційної небезпеки для організму теплокровних тварин і навколишнього середовища, а також розробки заходів щодо корекції порушень процесів знешкодження в печінці в умовах їх тривалого субтоксичного впливу на організм. Нами використано ОЕФ з регламентованими фізико-хімічними характеристиками - ОЕФ-ЛП-502-2-10 (поліоксипропіленгліколь) - прозора рідина світло-жовтого кольору, добре розчинна у воді й 3 органічних розчинниках, з молекулярною масою - 500, щільністю при 25 °C - 1020 кг/м , рН (метанол:вода=70:30) - 5-6, кислотним числом - не більше 0,2 мг КОН/г, вмістом гідроксильних груп - не більше (6-7)%, функціональністю - 2, температурою спалаху – 235 °C. На підставі результатів гострої токсичності ОЕФ-ЛП-502-2-10 належить до помірно токсичних сполук (3 клас небезпеки), має слабкі кумулятивні властивості. Його ДЛ 50 для білих щурів перебуває на рівні 1,83 г/кг маси тварини, а коефіцієнт кумуляції - на рівні 6,85 ум. од. 2 UA 115049 U 5 10 15 20 25 30 Спосіб виконують наступним чином. Щурам-самцям популяції WAG щодня вранці, до годівлі й за дві години до введення ОЕФ-ЛП-502-2-10 в 1/10 та 1/100 його ДЛ50, починаючи з 31 по 45 добу токсифікації даним КБ (тобто протягом 15 днів), внутрішньочеревно вводять ремаксол у дозі 2,5 мл/кг маси тіла тварини. Ефективність способу встановлена експериментально на статевозрілих щурах, масою 180190 г, яких утримували у стандартних умовах віварію й піддавали щоденному впливу досліджуваного КБ, водні розчини якого вводили внутрішньошлунково за допомогою металевого зонда вранці до годівлі тварин. Щури були розділені на 2 групи: І група - тварини, яким на тлі 45-добового введення ОЕФ-ЛП-502-2-10 в 1/10 його ДЛ50, починаючи з 31 по 45 добу токсифікації цим КБ, щодня внутрішньочеревно вводили ремаксол у дозі 2,5 мл/кг маси тіла щурів; II група - тварини, яким на тлі 45-добового введення КБ в 1/100 його ДЛ50, також починаючи з 31 по 45 добу токсифікації, вводили ремаксол. III група щурів (контрольна) була представлена інтактними, здоровими тваринами. Для біохімічних досліджень використовували гомогенат печінки й сироватку крові щурів. Щурів виводили з експерименту після закінчення токсифікації й корекції (на 45 добу) шляхом декапітації під тіопенталовим наркозом. Одночасно виводили з експерименту й тварин контрольної групи. Результати порівнювали з показниками в щурів, які піддавалися лише токсифікації КБ в 1/10 та 1/100 ДЛ50 (позначили відповідно як Іа й ІІа групи) і з показниками в контрольній групі тварин. Для оцінки наявності й вираженості порушень функціонального стану гепатоцитів у щурів на 45 добу введення їм ОЕФ-ЛП-502-2-10 в 1/10 та 1/100 ДЛ50, попередньо проведено визначання активності загальноприйнятих індикаторних (АсАТ та АлАТ) та екскреторних (γ-ГТП, ЛФ) ферментів у сироватці крові (табл. 1). Так, на даний термін введення тваринам досліджуваного КБ в 1/10 його ДЛ50 суттєво й вірогідно підвищувалась активність АсАТ (у 3,60 разу) та АлАТ (у 5,77 разу). Під дією 1/100 ДЛ50 ОЕФ-ЛП-502-2-10 спостерігалася така ж динаміка змін активності ферментів, але менш виразна - відповідно в 2,13 і 3,75 разу. При цьому значення коефіцієнта де Рітіса (співвідношення активності АсАТ до активності АлАТ; у контрольній групі - 1,01) у випадку впливу КБ в 1/10 (0,63) та 1/100 ДЛ50 (0,57) було вірогідно зниженим (р