Набір для здійснення забарвлення біологічних зразків, змонтованих на предметних стеклах

Реферат: Набір для здійснення забарвлення біологічних зразків, змонтованих на предметних стеклах (препаратів), включає планшет для здійснення забарвлення препаратів, насадку на піпетку або автоматичну піпетку для нанесення рідин на препарати та пристрій для сушіння препаратів. Планшет для забарвлення препаратів має основу у вигляді решітки, на верхній частині якої закріплені подовжні фіксуючі направляючі. Комірки решітки мають вигляд порожніх камер без днища. Насадка на піпетку або автоматичну піпетку для нанесення рідин на препарати має лопаткоподібну форму з увігнутим нижнім краєм, всередині має отвір та пристосована для монтування на кінці піпетки або автоматичної піпетки. Пристрій для сушіння препаратів має стійку платформу у вигляді решітки з комірками, з бічними бортами, які оснащені направляючими для розміщення планшетів. UA 121998 U (12) UA 121998 U UA 121998 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до медицини та може бути використана при здійсненні забарвлення гістологічних, цитологічних, гематологічних, мікробіологічних препаратів та інших зразків, змонтованих на предметних стеклах, в клінічних, цитологічних та гістологічних лабораторіях, а також у медичних та біологічних науково-дослідних установах і навчальних закладах. У клінічній та дослідницькій роботі використовують методи діагностики біологічного матеріалу, змонтованого на предметному склі. Ці методи, як правило, полягають у приготуванні препарату біологічного зразка, забарвленні його методом відповідно до діагностичного завдання (критерію) та вивченні препаратів в мікроскопі. Виконання вказаних процедур в клінічній практиці та науково-дослідних лабораторіях проводять зазвичай з великою кількістю стекол, що забирає багато часу і є рутинною, трудомісткою процедурою. При виконанні діагностичних методів час має велике значення як для хворого, якому проводять діагностування, так і для достовірності отриманих результатів, коли мова йде про чітке виконання в часі пропису, за яким здійснюють власне забарвлення препаратів. Також важливим при виконанні діагностичних методик є умови, при яких проводять забарвлення, що по суті є хімічною реакцією застосованих реактивів з хімічними складовими біологічного матеріалу. Причому, велике значення має стандартизування об'ємів використаних реагентів при виконання однакових повторюваних дій. Під час забарвлення препаратів важливо рівномірно та в достатньому об'ємі нанести барвник на змонтовані на предметному склі зразки біологічного матеріалу. Процес приготування (забарвлення) цитологічних або гістологічних препаратів передбачає процедуру сушіння стекол, що є важливим етапом, який, в тому числі обумовлює якість готового препарату. Операції, які виконують при приготуванні та забарвленні біологічних зразків, особливо з великою кількістю стекол, потребують ретельності у виконанні, часу при перенесенні з одного реактиву в інший, обережного поводження зі зразками для уникнення пошкодження препаратів, а також економних витрат реактивів при проведенні процедур. Рівень техніки З рівня техніки відомі наступні розробки з вказаної тематики. Відомий спосіб одночасного забарвлення партії цитологічних препаратів, який передбачає фіксацію предметних стекол у прямокутній рамці еластичними кільцями, які вдягнені на кожне з них, з подальшим підвішуванням стекол у вертикальному положенні (патент RU 2125726, 03.03.1997). Вказаним способом можна забарвлювати одночасно декілька стекол. Однак спосіб має недоліки. Незручність завантаження та вивантаження, особливо швидкого, предметних стекол з касети при багаторазовому використанні, вертикальна нестійкість предметних стекол, обумовлена малою площею опори у вирізі утримувача. Крім того, проміжок між предметними стеклами відносно великий, що не дозволяє розміщувати їх достатньо близько один до одного, що призводить до збільшення використання реактивів. Також при підготовці предметних стекол для здійснення способу існує небезпека пошкодження препаратів. Відомий спосіб фіксації предметних стекол, де у касеті середню частину однієї з довгих еластичних планок відводять у бік та у довгий паз П-подібного профілю протилежної планки вставляють предметні стекла по всій довжині, крайні з них фіксують у П-подібних пазах коротких жорстких планок. Після заповнення касети еластичну планку повертають на місце та накривають довгим пазом П-подібного профілю верхні краї предметних стекол. Стекла фіксують шляхом притиснення обох довгих еластичних планок (RU2456220, 20.07.2012). Пристосування, використане для здійснення способу, є досить простим, економічним, але спосіб має ряд недоліків. Профіль може витримати обмежену кількість стекол, між стеклами немає проміжку, що призводить до перетікання розчинів на інші стекла. Також не забезпечено швидке завантаження та вивантаження стекол, що не дозволяє, наприклад, провести контроль під мікроскопом при диференціації за одним склом. Відомий лоток одноразового використання для забарвлення певної кількості стекол (https://web.archive.org/web/20150303224652/https://proscitech.com/?navaction=show page&chapter=h&page=4, Код Н540). Він виготовлений з міцного пластику, основа має випуклу форму та колодязь для рідини. Конструкція проста у виготовлені, міцна й легка, розрахована на 8 стекол. Однак, для здійснення забарвлення більшої кількості препаратів необхідно використовувати декілька лотків, а такі процедури як, наприклад, змивання барвника або диференціацію у спеціальних розчинах треба проводити окремо для кожного скла, що забирає багато часу. Також не передбачено багаторазового використання лотка, що не призводить до позитивного економічного ефекту. 1 UA 121998 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 З рівня техніки також відома інкубаційна система для імуногістохімічного забарвлення (https://web.archive.org/web/20150303224652/https://proscitech.com/?avaction=show page&chapter=h&page=4, H429), що має основу, виготовлену з міцного пластику, який витримує вплив великої кількості хімічних речовин, вміщує до 20 стекол на 4 пластикових рейках, вкритих полімерною стрічкою, здатною утримувати скло при зміні кута поверхні. Між рейками існує проміжок для рідини для забезпечення вологості, рейки не дозволяють стеклам торкатися рідини у лотку. Недоліком даної конструкції є те, що вона має монолітний дизайн рейок та лотку для рідини, що не дозволяє проводити операцію зливу рідини одночасно для всіх стекол. Відомий лоток для забарвлення препаратів (https://web.archive.org/web/20060316163212/ https://www. emsdiasum.com/microscopv/products/histology/staining.aspx, 16.03.2006), що являє собою ємність, на якій закріплені стелажі для препаратів, оснащену механізмом для обертання. Недоліком даної конструкції для використання з метою забарвлення діагностичних препаратів є те, що вся конструкція разом з предметними стеклами стаціонарно зафіксована, що не дозволяє розділити партію препаратів для різних методик, не дозволяє зберігати фіксовані умови реакцій у камері, якщо проводити інкубацію у певному середовищі, фіксований об'єм судка обмежує кількість зливної рідини, тобто, промивання або обробка у різних середовищах буде обмежена базовим лотком. Під час забарвлення препаратів важливо рівномірно та в достатньому об'ємі нанести барвник на змонтовані на предметному склі зразки біологічного матеріалу. З рівня техніки відоме обладнання для вказаних цілей. Наприклад, описано піпетку для очних крапель, що містить трубку, виконану із світлопрозорого матеріалу зі звуженим дистальним кінцем, та балончик з пружного матеріалу, встановлений на проксимальному кінці трубки (RU 55282 U1, 10.08.2006). Цей прилад дозволяє наносити реактив на предметне скло лише окремими краплями, а не розподіляє його рівномірно по всій поверхні зразка біологічного матеріалу. Також відома автоматична піпетка-дозатор (SU 1763002, 23.09.1992), що складається з корпусу, дозуючого вузла, що містить закріплену у нижній частині корпусу насадку з осьовим каналом, та встановлений з можливістю осьового переміщення підпружинений шток, на торцевій частині якого закріплена пружна накладка та змінний наконечник, встановлений під насадкою. У верхній частині насадки виконана порожнина у формі сферичного сегмента. Недоліком даної конструкції є складність виконання пристрою. В документі RU 1018711, 23.05.1983 розкрито піпетку, що складається з циліндричного корпусу, що на одному кінці має носик з вхідним отвором. Верхня частина піпетки з'єднана з гумовою грушею. Ця піпетка не дозволяє швидко покрити препарат рівномірним шаром реактиву. Загальним недоліком вказаних пристроїв є те, що під час нанесення барвника на скло існує небезпека пошкодження біологічного матеріалу, змонтованого на склі, та нерівномірне розподілення реактиву по препарату. Рівень техніки містить інформацію про інший пристрій для нанесення барвника на препарат шпатель Ейре (ГОСТ Р 57005-2016 Диагностика в онкологии; https://web.archive.org/web/20120504110414/http://medfarm.org/katalog/zondv-rogenitalnve/shpatelejra), що має увігнуту форму нижнього краю шпателя, завдяки чому барвник рівномірно та безпечно для закріпленого на склі біологічного зразка розподіляють по склу. Недоліком зазначеного технічного рішення є те, що шпатель використовують для рівномірного розподілення вже нанесеного на скло реагенту. Таким чином, необхідно витратити час спочатку на нанесення на кожне окреме скло піпеткою барвника, а потім на розподілення барвника по кожному склу за допомогою шпателя. Під час забарвлення цитологічних або гістологічних препаратів є важливою процедура сушіння стекол, яка в тому числі обумовлює якість готового препарату. Для цього, як правило, використовують спеціально пристосовані планшети, які мають або окремі проміжки, або лотки з прорізями для стекол. (http://www.biovitrum.ru/product/morfologiva/gistolo.giya/arhivirovanie/ rashodnye_materialy/planshety_papki_i_planshetykorobki/), або ж стекла просто висушують на тих же рейках, на яких здійснюють забарвлення. Таке обладнання має ряд недоліків. По-перше, сушінню передує стадія забарвлення та промивання кожного окремого препарату, що забирає багато часу. По-друге, при складанні та вийманні стекол після сушіння є небезпека пошкодити препарати. По-третє, витрачається багато часу для обробки кожного скла. Отже, задачею корисної моделі було створити набір, завдяки якому при здійсненні забарвлення великої кількості біологічних зразків, змонтованих на предметних стеклах, можна ефективно виконувати етапи нанесення необхідної кількості реагентів на препарати, рівномірного розподілу реагенту по поверхні препаратів, зручного та швидкого промивання без 2 UA 121998 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 пошкодження препаратів, без обмежень кількості зливних рідин та забезпечення стабільних умов інкубації, швидкого контролю в мікроскопі, зручного висушування. Також набір має бути виконаним з доступних матеріалів, що обумовить економічний ефект його застосування в будьякій лабораторії. Поставлена задача вирішується шляхом створення набору для здійснення забарвлення біологічних зразків, змонтованих на предметних стеклах (препаратів), який включає планшет для здійснення забарвлення препаратів, насадку на піпетку або автоматичну піпетку для нанесення рідин на зразок та пристрій для сушіння препаратів. Планшет для забарвлення препаратів Планшет для забарвлення препаратів має основу у вигляді решітки, на верхній частині якої закріплені подовжні фіксуючі направляючі, комірки решітки мають вигляд порожніх камер без днища, виготовлений з твердого матеріалу, стійкого до води та хімічних речовин, які застосовують при забарвленні препаратів. Основа планшета має вигляд решітки із стільниками, наскрізь порожніх, тобто які не мають днища (Фіг. 1). Висота стільників решітки є такою, щоб рідина, яка буде застосовуватись до препаратів та потрапляти у лоток під решіткою, не досягала стекол, що будуть розміщені на поверхні планшета. На верхній частині планшета закріплені подовжні фіксуючі направляючі (Фіг. 2), висота яких є достатньою для фіксації стекол на планшеті. Розмір планшета обумовлений розмірами лотка, на який його встановлюють. Відстань між горизонтальними направляючими на 2 см більша за довжину стекол, що будуть розміщені на поверхні планшета (Фіг. 3). Насадка для піпетки Виготовлена насадка має вигляд шпателя з отвором в середині, сплющеного та увігнутого по нижньому краю. Насадку монтують отвором на нижній кінець піпетки, верхній кінець піпетки оснащено гумовим балоном або іншим пристроєм для набирання (всмоктування) рідини. Насадка, піпетка та балон містять співвісну внутрішню порожнину, що дозволяє набирати рідину (розчин барвника) (Фіг. 4). Насадка дозволяє без ушкоджень біологічного зразка наносити барвник на предметне скло та одночасно розподіляти рівномірно по його поверхні. Розмір насадки відповідає ширині предметного скла з біологічним зразком. Балон (грушу) обирають такого розміру, щоб набраного розчину вистачило на одне скло або на кілька препаратів (стекол) (Фіг. 5). Пристрій для сушіння препаратів Пристрій має вигляд платформи (1) з комірками (2), які утворюють решітку (Фіг.6). Глибина комірок повинна бути достатньою, щоб змивні рідини не торкалися планшета зі стеклами. Бічні направляючі (4) на бортах (3) платформи розміщені таким чином, щоб утримати у рівновазі будь-яку кількість планшетів, що може бути розміщена на платформі, і в той же час забезпечити достатній проміжок між планшетами, аби між ними вільно проходило повітря. Приклад здійснення корисної моделі На предметних стеклах монтують зразки біологічного матеріалу (цитологічний мазок або відбиток, гістологічний зріз, мікробіологічний мазок тощо) та фіксують їх. Препарати переносять на планшет для забарвлення таким чином, щоб вони знаходились в проміжку між направляючими, не торкаючись останніх своїм краєм, та встановлюють його горизонтально у лоток або піддон. Готовий барвник набирають у пристрій з насадкою, застосовуючи балон або автоматичну піпетку. Потім прикладають нижній край насадки до краю предметного скла і просувають від цього краю вздовж скла до поля для напису. Під час цієї дії натискають на балон з барвником. Останній проходить по внутрішній порожнині пристрою, потрапляє в проміжок між увігнутим краєм насадки та склом. В результаті розчин барвника рівномірно розподіляється по поверхні предметного скла, тобто власне по поверхні біологічного зразка. Операцію проводять почергово на всіх препаратах. Використовують однаковий об'єм барвника. Біологічний матеріал при цьому не ушкоджується, оскільки увігнутий край насадки завжди залишає вільним проміжок між поверхнею предметного скла та насадкою. Змивання відповідно до прописів проводять одночасно зі всіма препаратами на планшеті. Після останньої промивки препаратів промивні води одночасно зливають з усіх стекол, піднімаючи один край планшета, паралельний направляючим. Планшет при цьому розташовують під кутом до горизонталі. При цьому рідина зливається зі стекол, а стекла не падають з планшета, оскільки спираються своїм нижнім краєм на направляючі. Тобто, стекла зафіксовані на планшеті досить жорстко, щоб проводити необхідні процедури одночасно на всіх препаратах. 3 UA 121998 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Набір для здійснення забарвлення біологічних зразків, змонтованих на предметних стеклах (препаратів), що включає планшет для здійснення забарвлення препаратів, насадку на піпетку або автоматичну піпетку для нанесення рідин на препарати та пристрій для сушіння препаратів, де планшет для забарвлення препаратів має основу у вигляді решітки, на верхній частині якої закріплені подовжні фіксуючі направляючі, комірки решітки мають вигляд порожніх камер без днища; насадка на піпетку або автоматичну піпетку для нанесення рідин на препарати має лопаткоподібну форму з увігнутим нижнім краєм, всередині має отвір та пристосована для монтування на кінці піпетки або автоматичної піпетки; пристрій для сушіння препаратів має стійку платформу у вигляді решітки з комірками, з бічними бортами, які оснащені направляючими для розміщення планшетів. 4 UA 121998 U 5 UA 121998 U Комп’ютерна верстка О. Рябко Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 6