Таблетковий препарат гепатопротекторної дії з кріопорошків рослинного походження

Реферат: Таблетковий препарат гепатопротекторної дії з кріопорошків рослинного походження містить флавоноїди плодів розторопші, та фармацевтично прийнятні носії. Додатково як активну речовину використовують кріоподрібнені порошки лікарської рослинної сировини. Як флавоноїди плодів розторопші препарат містить силімарин, як кріоподрібнені порошки лікарської рослинної сировини використовують бобівника трилистого листя, кульбаби лікарської коріння, м'яти перцевої листя, нагідок лікарських квітки, реп'яшка звичайного траву, рутки лікарської траву, полівінілпіролідон. Як фармацевтично прийнятні носії використовують крохмаль картопляний, целюлозу мікрокристалічну, кальцію стеарат. UA 74884 U (12) UA 74884 U UA 74884 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема до фармацевтичних композицій гепатопротекторної дії. Для лікування захворювань печінки використовують етіотропну і патогенетичну терапію: при вірусній етіології захворювань - противірусні препарати, при хімічних ураженнях гепатопротектори, дія яких спрямована на нормалізацію функціональної активності, підвищення стійкості до впливу патогенних факторів і стимуляцію репаративних процесів у печінці. Препарати-гепатопротектори класифікують на кілька груп: препарати, що містять природні або напівсинтетичні флавоноїди розторопші плямистої (Силібор, Гепабене, Легалон, Карсил); препарати, що містять природні або напівсинтетичні флавоноїди інших рослин (Катерген, Хофітол, ЛІВ-52); препарати, що містять есенційні фосфоліпіди (Есенціале, Фосфоглів, Еслівер, Еплір); органопрепарати тваринного походження (Сирепар, Гепатосан, Ербісол); препарати різних груп (Кислота ліпоєва). Одним з найбільш відомих і широко розповсюджених гепатопротекторних засобів є екстракти розторопші плямистої, активна речовина яких (силімарин) володіє доведеною лікувальною ефективністю при широкому колі токсичних уражень печінки. У зв'язку з цим силімарин нерідко включають у комбіновані схеми гепатопротекторної терапії, наприклад "силімарин+вітамін Е+фосфоліпіди". В даний час вважають, що при гепатопротекторній терапії доцільним є застосування комбінації препаратів з різнонаправленими механізмами гепатопротекторної дії, при цьому базисними повинні бути препарати з антиоксидантною активністю. Відомий гепатозахисний засіб "Прополін", що містить як активну речовину екстракт прополісу сухий, як допоміжні речовини - лактозу, глюкозу, цукрову пудру та стеарат кальцію у захисній оболонці (пат. UA, № 13347, 28.02.1997, бюл. № 1, кл. А61K 35/64). Гепатотропний засіб складається з ядра, що містить активну і допоміжні речовини і оболонки, що містить цукорпісок, полівінілпіролідон, аеросил, двоокис титану, олію вазелінову, віск, карбонат магнію основний, барвник. Ядро як активну речовину містить феноловий гідрофобний екстракт прополісу сухий. Як допоміжні речовини - лактозу, глюкозу, цукрову пудру, крохмаль, стеарат кальцію, а оболонка як барвник містить тартразин. Відомий гепатозахисний засіб (Патент РФ, № 2032419, кл. А61K 35/78. Офиц. бюл. № 10, 1995), який містить спиртовий екстракт приймочок шафрану посівного, кореневищ з коренями оману високого, коріння тирличу жовтого, трави чебрецю звичайного, коренів астрагалу шерстистоквіткового і плодів шипшини та глоду. Відомий засіб (А.С. СРСР № 1803120, кл. А61K 35/78. Офиц. бюл № 11, 1993), що має жовчогінну та гепатопротекторну дію і містить сухий екстракт коренів щавлю кінського, густий екстракт плодів горобини звичайної, сухий екстракт трави мачку жовтого і наповнювач сахарозу. Відомий гепатозахисний засіб (Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям. - М.: Медицина, 1985. - С. 445-446), що містить звіробій звичайний, пижмо звичайне, деревій звичайний, ромашку аптечну, лопух справжній, шипшину коричну, шавлію лікарську, оман високий, спориш звичайний та череду трироздільну. Відомі засоби "Карсил", "Легалон", "Лепротек", "Флавобіон", "Соматрон" та інші у формі капсул або драже, що містять діючі речовини плодів розторопші плямистої: флавоноїдні сполуки, які виявляють гепатотропну дію і об'єднані в групу під загальною назвою алізарин (Машковский М.Д. Лекарственные средства. Пособие для врачей. - Харьков: Торсинг, 1997. - Т. 1. - С. 514-515). Як найближчий аналог вибрано таблетований засіб "Карсил" (AT "Софарма, Болгарія). Він містить діючу речовину силімарин, а як допоміжні речовини - крохмаль картопляний, полівінілпіролідон, магнію кальцію стеарат, мікрокристалічну целюлозу. До недоліків найближчого аналога слід віднести недостатньо широкий спектр та високий рівень специфічної активності, сполука її компонентів не сприяє забезпеченню високої терапевтичної ефективності препарату. В основу корисної моделі поставлена задача удосконалення засобу гепатопротекторної дії, в якому шляхом створення оригінальної композиції з діючої та допоміжних речовин досягається оптимальне поєднання технологічних властивостей лікарської форми, в результаті чого отримують новий препарат в ряді гепатотропних засобів, який відновлює синтез білка і володіє антицитолітичною, антихолестатичною і мембраностабілізуючою активністю. Поставлена задача вирішується таким чином, що як активну речовину використовують кріоподрібнені порошки лікарської рослинної сировини (бобівника трилистого листя, кульбаби лікарської коріння, м'яти перцевої листя, нагідок лікарських квітки, реп'яшка звичайного трава, рутки лікарської трава) та субстанцію силімарин, яка містить суму флаволігнанів з плодів розторопші плямистої не менше 70 %. Як допоміжні речовини використовують 1 UA 74884 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 полівінілпіролідон, мікрокристалічну целюлозу, крохмаль картопляний, кальцію стеарат, при наступному співвідношенні компонентів мас. %: бобівника трилистого листя 4,5-5,5 кульбаби лікарської коріння 19,2-21,0 м'яти перцевої листя 14,5-16,0 нагідок лікарських квітки 8,5-11,2 реп'яшка звичайного трава 14,5-16,5 рутки лікарської трава 9,5-10,5 силімарин (вміст основної речовини 70 %) 15,5-17,0 полівінілпіролідон 2,0-2,8 мікрокристалічна целюлоза 2,0-2,5 крохмаль картопляний 2,0-2,8 кальцію стеарат 0,8-1,2. Силімарин - гепатопротектор. Взаємодіє з вільними радикалами в печінці та переводить їх у менш токсичні сполуки, перериваючи процес перекисного окиснення ліпідів; перешкоджає подальшому руйнуванню клітинних структур. У пошкоджених гепатоцитах стимулює синтез структурних та функціональних білків і фосфоліпідів (за рахунок специфічної стимуляції РНКполімерази А), стабілізує клітинні мембрани, запобігає втраті компонентів клітини (трансаміназ), прискорює регенерацію клітин печінки. Гальмує проникнення у клітину деяких гепатотоксичних речовин (отрути гриба блідої поганки). Клінічно дія проявляється покращанням загального стану хворих із захворюваннями печінки, зменшенням суб'єктивних скарг, покращанням лабораторних показників (зниження активності "печінкових" трансаміназ і ЛФ, вмісту білірубіну). Таблетки на основі суміші зазначеного складу виготовляють наступним чином. Відважують та змішують кріоподрібнені порошки лікарської рослинної сировини (бобівника листя, кульбаби коріння, м'яти листя, нагідок квітки, реп'яшка трава, рутки трава), субстанцію силімарин, яка містить суму флаволігнанів з плодів розторопші плямистої не менше 70 %, і мікрокристалічну целюлозу. Отриману суміш зволожують водним розчином полівінілпіролідону. Зволожену суміш гранулюють, потім гранули висушують. Сухі гранули опудрюють сумішшю крохмалю картопляного та кальцію стеарату. З готового грануляту пресують таблетки діаметром 10 мм, масою 0,3 г. Таблетки мають світло-зелений колір з вкрапленнями більш темного відтінку. Приклад. Гепатопротекторна активність таблеток досліджена на моделі гепатиту у щурів, викликаного уведенням парацетамолу (таблиця). Гостре ураження печінки моделювали за допомогою розповсюдженого лікарського препарату парацетамолу, відомого своєю гепатотоксичністю. Експеримент проведено на 50-ти білих безпородних щурах масою 190-220 г по 10 тварин у групі. Тварини були розподілені на 5 груп: 1-а - інтактний контроль, 2-а - позитивний контроль, 3-я група - тварини, яким уводили капсули "Гепабене", 4-а та 5-а групи - тварини, яким уводили досліджуваний тест-зразок. Щурам групи позитивного контролю та дослідних груп внутрішньошлунково уводили гепатотоксин дозою 2,5 г/кг у 2 % крохмальному клейстері протягом 2-х днів. Досліджуваний тест-зразок таблетки дозами 49,5 і 99 мг/кг та референтний зразок дозою 88 мг/кг уводили внутрішньошлунково через 1 годину після введення токсичного агента та щодня протягом 2-х тижнів до уведення гепатотоксину. Результати експерименту показали, що гострий гепатит, викликаний парацетамолом, характеризувався достовірною зміною функціонально-біохімічних показників тварин групи позитивного контролю. Зафіксовано тільки 80 % виживання тварин у групі позитивного контролю. Спостерігали достовірне відносно інтактного контролю підвищення масового коефіцієнта печінки (МКП), що свідчить про розвиток інфільтраційних процесів в органі. Наслідком підсилення процесу деградації мембранних структур виявилося достовірне підвищення трансаміназної та фосфотазної активності в сироватці крові. Тяжкість перебігу патології підтверджувалася зростанням у 1,8 разів коефіцієнту аланін амінотрансфераза /аспартатамінотрансфераза (АлАТ/АсАТ) порівняно з інтактним контролем. Достовірне підвищення вмісту лужної фосфатази (ЛФ) при захворюваннях печінки пов'язано зі звільненням цього ферменту з ушкоджених гепатоцитів, а також з його індуктивним синтезом в жовчних канальцях. 2 UA 74884 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Спостерігали достовірне відносно інтактного контролю підвищення рівня загальних ліпідів та тенденцію до підвищення рівня глюкози в сироватці крові, як наслідок порушень поглинальноекскреторної, метаболічної та синтетичної функцій печінки. Розвиток патології не супроводжувався порушенням жовчовидільної функції печінки. Достовірне зниження вмісту холестерину відносно інтактного контролю на тлі збереженого пулу жовчних кислот в жовчі, характеризує активацію фізіологічного компенсаторного антиоксидантного захисту (АОЗ) організму, що відбилося на зміні біохімічних показників в гомогенаті печінки, а саме достовірному зниженню вмісту реактантів тіобарбітурової кислоти (ТБК-реактантів) на тлі тенденції до збільшення пулу відновленого глутатіону (ВГ). Порушення холестерин-синтетичної функції печінки відбилося на достовірному збільшенні майже у 7,5 разів холатохолестеринового коефіцієнта (ХХК). Достовірне накопичення дієнових кон'югатів (ДК) в гомогенаті печінки та достовірне зниження ТБК-реактантів, на тлі недостовірно підвищеного рівня ВГ, як показників стану системи "перекисне окиснення ліпідів / антиоксидантна система" (ПОЛ/АОС), свідчить про інтенсифікацію процесів ПОЛ та функціональної дієспроможності глютатіонового захисту. В групі тварин, яким уводили капсули "Гепабене" дозою 88 мг/кг, на тлі патології спостерігали 100 % виживання тварин, достовірне відносно позитивного контролю зниження МКП, що свідчить про зменшення інфільтраційно-деструктивних процесів у печінці. Позитивний вплив референтного зразка на біохімічні показники в сироватці крові відбився у достовірному зниженні цитолітичного процесу (активність АлАТ та АсАТ знизилась до рівня інтактного контролю), що свідчить про відновлення структури мембранних компонентів гепатоцитів під впливом капсул "Гепабене". Однак, уведення капсул "Гепабене" не вплинуло на показники холестазу - рівень ЛФ залишився на рівні показника позитивного контролю достовірно збільшеним відносно інтактного контролю та недостовірно збільшився вміст холестерину в сироватці крові. Достовірне відносно інтактного контролю зниження рівня холестерину в жовчі на тлі достовірного зниження відносно інтактного та позитивного контролів вмісту жовчних кислот (ЖК) свідчить про перерозподіл холестерину до ферментного механізму антиоксидантного захисту. Такий вплив характеризує активацію АОС, пригнічення процесів ліпопероксидації, що підтверджується біохімічними показниками, які визначали в гомогенаті органу; на тлі уведення референтного зразка достовірно відносно інтактного контролю знижується рівень вторинних (ТБК-реактантів) та спостерігається тенденція до зниження відносно позитивного контролю вмісту первинних ДК продуктів ПОЛ на тлі недостовірно підвищеного пулу ВГ. Під впливом таблеток дозами 49,5 та 99 мг/кг, як і під впливом референтного зразка, знижуються інфільтраційно-запальні процеси в органі, про що свідчить зниження показника МКП достовірно відносно позитивного контролю на тлі 100 % виживання тварин. Позитивний вплив таблеток дозою 99 мг/кг на цитолітичні процеси в печінці відбився у достовірному зниженні показників АлАТ та тенденції до зниження показника АсАТ. На тлі уведення досліджуваного тест-зразка дозою 49,5 мг/кг спостерігали недостовірне зниження маркерних ферментів цитолізу. Однак, спостерігали зниження в 1,2 разу відносно позитивного контролю коефіцієнту АлАТ/АсАТ. Таким чином, аналіз проведеного дослідження виявив тенденцію до відновлення цілісності гепатоцитів при уведенні таблеток дозами 49,5 та 99 мг/кг на рівні референтного зразка. При уведенні таблеток дозою 49,5 мг/кг достовірно відносно показника позитивного контролю та дозою 99 мг/кг достовірно відносно показника позитивного контролю та референтного зразка знижується рівень загальних ліпідів в сироватці крові, що свідчить про нормалізацію метаболічних процесів, а саме ліпідного обміну. На тлі уведення досліджуваного тест-зразка в обох досліджених дозах достовірно підвищений відносно інтактного контролю залишається рівень ЛФ - ферменту, який характеризує наявність холестазу. Показники білкового та вуглеводного обмінів на тлі уведення таблеток дозою 49,5 мг/кг залишаються на рівні інтактного контролю. Під впливом досліджуваного зразка дозою 99 мг/кг достовірно відносно інтактного контролю та референтного зразка знижується рівень загального білка в сироватці крові, що свідчить про відновлення мембранних структур гепатоцитів за рахунок перерозподілу білка в печінці. Під час проведення експерименту визначено позитивний вплив таблеток на синтетичні процеси в печінці, а саме: достовірне зниження концентрації ЖК в жовчі відносно показників інтактного та позитивного контролів при уведенні досліджуваного тест-зразка дозами 49,5 та 99 мг/кг; достовірному підвищенні концентрації холестерину в жовчі дозою 49,5 мг/кг відносно позитивного контролю більше ніж у 3 рази та капсул "Гепабене" майже у 2,5 рази та дозою 99 мг/кг цей показник достовірно підвищувався відносно позитивного контролю лише у 1,7 разу і 3 UA 74884 U 5 10 15 20 25 30 35 залишався достовірно зниженим відносно інтактного контролю. Такий вплив досліджуваного тест-зразка відбився у достовірному зниженні ХХК відносно позитивного контролю в усіх досліджених дозах, але найбільш ефективно дозою 49,5 мг/кг - до рівня інтактного контролю, що свідчить про більш відновлений функціональний стан печінки та позитивні зрушення в системі ПОЛ/АОС під впливом запропонованих таблеток. Дослідження біохімічних показників в гомогенаті печінки підтверджує активацію АОС організму: при уведенні таблеток дозою 49,5 мг/кг на тлі недостовірного підвищення пулу ВГ відбувається достовірне відносно інтактного контролю зниження ТБК-реактантів, хоча вміст первинних ДК продуктів ПОЛ залишається достовірно збільшеним. Більш ефективно на систему ліпопероксидації впливає досліджуваний тест-зразок дозою 99 мг/кг, про що свідчить достовірне зниження відносно інтактного та позитивного контролів первинних (ДК) та відносно інтактного контролю вторинних (ТБК-реактантів) продуктів ПОЛ на тлі виснаженого пулу ВГ. Таким чином, аналіз проведених досліджень показав, що більш ефективно досліджуваний тест-зразок - розроблені таблетки, на моделі гепатиту, викликаного парацетамолом, впливає на запальні, синтетичні, метаболічні та функціональні процеси у печінці дозою 99 мг/кг, ніж дозою 49,5 мг/кг та за гепатопротекторною активністю перевищує референтний зразок. Дозою 49,5 мг/кг таблетки діють на рівні референтного зразка - капсул "Гепабене" дозою 88 мг/кг. Слід відмітити, що перш за все тест-зразок корегував показники, які значно змінювались в результаті токсичної дії парацетамолу: в зазначених дозах тест-зразок достовірно знижував активність АлАТ у сироватці крові і МКП, що свідчить про зниження цитолітичної та запальної реакції, а також про поліпшення загальнотрофічних процесів у печінці. Так, при збільшенні дози до 99 мг/кг досліджуваний тест-зразок пригнічував процеси ПОЛ на ранніх етапах їх інтенсифікації, що підтвердилось достовірним зниженням рівня ДК в гомогенаті печінки. У зв'язку зі стабілізацією мембран гепатоцитів під впливом таблеток покращився ліпідний обмін. Також на рівні референтного зразка розроблені таблетки дозою 49,5 мг/кг поліпшували функціональний стан печінки. Таким чином, результати проведеного дослідження, підтвердили дозозалежний ефект досліджуваного тест-зразка і показали його гепатозахисну активність більш виразну дозою 99 мг/кг на моделі гострого гепатиту, викликаного парацетамолом. Це підтвердило можливість застосування препарату в терапії гострих гепатитів і стало обґрунтуванням рекомендації до застосування розроблених таблеток при лікуванні захворювань гепатитів, викликаних лікарськими засобами. За умов даної патології підтверджено ефективні дози - 49,5 та 99 мг/кг. Корисна модель, що заявляється, являє собою фармацевтичну композицію гепатопротекторної дії, що завдяки підбору і комплексній дії компонентів дозволяє забезпечити проведення ефективного і безпечного методу терапії захворювань печінки, має високу терапевтичну ефективність і являє собою препарат, альтернативний препаратам подібного призначення. Таблиця Вплив розроблених таблеток на функціонально-біохімічні показники печінки щурів в умовах гострого гепатиту, викликаного уведенням парацетамолу Показники n Виживання, 10 % МКП 7-8 Сироватка крові АлАТ, 7-8 ммоль/л АсАТ, 6-9 ммоль/л АлАТ/АсАТ 6-9 ЛФ, 6-9 мкмоль/л Умови досліду Парацетамол+ Парацетамол+ Парацетамол розроблені розроблені + Гепабене таблетки дозою таблетки дозою дозою 88 мг/кг 49,5 мг/кг 99 мг/кг Інтактний контроль Позитивний контроль (Парацетамол) 100 80 100 100 100 3,03±0,07 4,04±0,11* 3,49±0,26** 3,30±0,12** 3,19+0,07** 0,47±0,05 1,03±0,10* 0,65±0,11** 0,74+0,11* 0,67+0,11** 0,61±0,03 0,83±0,06* 0,61±0,05** 0,73±0,03 0,65+0,06 0,70 1,24 1,07 1,01 1,03 8,25±1,11 15,45+1,65* 15,15±1,50* 15,98+1,02* 14,81+0,99* 4 оо UA 74884 U Продовження Таблиці Вплив розроблених таблеток на функціонально-біохімічні показники печінки щурів в умовах гострого гепатиту, викликаного уведенням парацетамолу Показники Холестерин, ммоль/л Загальні ліпіди, г/л Загальний білок, г/л Глюкоза, г/л Жовч Швидкість секреції жовчі, мг/хв./100 Жовчні кислоти, мг % Холестерин, мг % ХХК Умови досліду Парацетамол+ Парацетамол+ Парацетамол розроблені розроблені + Гепабене таблетки дозою таблетки дозою дозою 88 мг/кг 49,5 мг/кг 99 мг/кг n Інтактний контроль Позитивний контроль (Парацетамол) 6-8 2,41±0,14 2,62±0,16 5,17±2,28 3,00+0,79 2,44±0,U 7-9 0,46±0,12 1,60+0,25* 1,06±0,30 0,76±0,27** 0,40+0,10**/*** 7-9 69,57±1,39 66,31±2,43 71,70+2,14 67,66±1,97 63,45+1,65*/** * 5-7 3,53±0,15 4,52±0,86° 3,80±0,24 4,15+0,28 4,49+0,31* 6-7 3,61±0,25 5,03±1,43 5,08±0,67 3,98+0,81 4,21+1,21 6-7 849,95±54,26 945,82+99,40 643,61+55,20* /** 587,43+54,64*/ 597,82+52,95*/ ** ** 12,05±2,46 6,11+0,44*/** */**/*** 65,24±16,21**/ 6-7 46,98±4,54 344,48+96,05* 152,92+30,53*/** 101,43+14,93*/** *** 6-7 18,95±1,79 Гомогенат ТБКреактантів, 6-9 94,71±6,82 мкмоль/г ВГ, мг % 6-9 36,79±8,10 ДК, мкмоль/г 6-8 8,72±0,71 3,57±0,71* 4,99±0,88* 64,25+3,99* 73,08±5,49* 54,34±9,95 51,51±9,42* 58,33±3,14* 50,05±9,17 53,47+17,08 32,18±4,70*/°° 64,09+16,50*/*** 59,62+9,74* 37,20+5,56 23,33+1,26*/** Примітки: * - відхилення показника достовірне відносно показника групи інтактного контролю, р