Індуктор інтерферону в клітинах ссавців, які культивуються

Изобретение относится к биотехнологии и может использоваться в производстве ветеринарных и медицинских биопрепаратов. Известные как индукторы интерферона синтетические аналоги двухспиральных рибонуклеиновых кислот, например, "поли И: поли Ц" чрезвычайно дороги и малопригодны для крупномасштабного производства интерферона. Природная двухспиральная РНК бактериофага Г-2 ("Ларифан") в концентрации 100-500 мкГ/см 3 не обеспечивает получения высоких титров интерферона (не более 1550-2000 МЕ/см 3). Задача настоящего изобретения состоит в изыскании эффективного и доступного индуктора интерферона, пригодного для крупномасштабного производства. Поставленная задача решается тем, что, согласно изобретению, в качестве индуктора интерферона в клетках млекопитающих используют рибонуклеиновую кислоту ротавируса свиней или телят. Количество сырья для получения индуктора практически неограниченно, а самое сырье доступно и дешево. Изобретение осуществляется следующим образом. Ротавирус свиней или телят получают из фекалий и (или) содержимого кишечника животных, болеющих ротавирусной диареей в естественных условиях или зараженных свободным от посторонней микрофлоры очищенным ротавирусом. Наличие ротавируса устанавливают с помощью электронного микроскопа. Вирус концентрируют, внося в 20%-ную суспензию фекалий на 0,9%-ном растворе хлористого натрия 8-12% полиэтиленоксида (вес/объем) с молекулярной массой 4-6 тысяч дальтон после осветления суспензии низкоскоростным центрифугированием в течение 15-20 минут. Смесь выдерживают при + 4°С в течение 1-10 часов и отделяют осадок низкоскоростным центрифугированием. Концентрат вируса очищают хлороформом и подвергают фенольной депротеинизации (Гринин А.С., Титов И.Н., 1971. "Колос", М. С. 160-162). Рибонуклеиновую кислоту ротавируса трижды переосаждают дважды перегнанным этанолом и хранят в 70%ном этаноле до использования при -20°С или используют немедленно. Индукцию интерферона осуществляют, внося в культур у клеток млекопитающих, например, в суспензию спленоцитов свиней или крупного рогатого скота 1,0-10,0 мкГ/см 3 суспензии, содержащей 107 жизнеспособных клеток в одном см 3. Титр интерферона определяют стандартным методом по подавлению цитопатического эффекта в системе "культура гомологичных клеток - вирус везикулярного стоматита" микрометодом (Соловьев В.Д., Бектемиров Т.А. Интерфероны в теории и практике медицины. 1981, "Медицина", М. С.90). Результаты испытания индуктора приведены в таблице. Удельная активность предлагаемого индуктора превосходит известные, по меньшей мере, на 1 порядок ("поли И: поли Ц (ФРГ) индуцирует образование 250-500 ME интерферона/см 3 при внесении 1 мкГ/см 3, "Ларифан"(Росия)-4-20 МЕ/см 3 в аналогичной дозе, рибонуклеиновая кислота ротавируса (предлагаемый индуктор) - 4096-16384 МЕ/см 3).