Спосіб консервування печінки тварин

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для хранения целых органов при 0°С с целью их последующей трансплантации. Наиболее близким к заявляемому является способ консервирования печени в растворе UW, содержащем: Лактобионат-К 100 мМ КН2РО4 25 мМ MgSO4 5 мМ Раффиноза 30 мМ Аденозин 5 мМ Глютатион 3 мМ Бактериум 0,5 мл Дексаметазон 8 мг Аллопуринол 1 мМ Гид рооксиэти л крахмал 50 гр Согласно способу печень перфузируют раствором UW со скоростью потока 5-10мл/мин при 0°С, затем помещают в бюксы и хранят при 0°С[1]. Недостатком способа является то, что он не обеспечивает высокой сохранности такого важного энергетического параметра клеток, как уровень адениннуклеотидов (АТФ). Уже после 2 ч хранения наблюдается резкое его падение. Это связано с тем, что используемый в способе консервирующий раствор содержит ряд проникающих в клетку компонентов (К+, РО4-, Мg2+, SCv которые в условиях гипотермического хранения вызывают изменение внутриклеточного осмотического давления в клетках, их набухание и резкий отек ткани. В основу изобретения поставлена задача создания такого способа консервирования печени животных, в котором изменение состава консервирующей среды позволяет предотвратить набухание клеток печени в процессе хранения и таким образом обеспечить сохранение высокого уровня АТФ. Эта задача решается тем, что в способе консервирования печени животных, включающем перфузию органа консервирующим раствором и последующее хранение в этом растворе при 0°С, в качестве консервирующего раствора используют 0,25 М раствор са харозы, содержащий 1 % бычьего сывороточного альбумина (БСА). Использование для перфузии и хранения изотонического раствора сахарозы, содержащего мембранный стабилизатор -1%-ный БСА, позволяет предотвратить набухание клеток ткани печени, поскольку и са хароза, и альбумин являются осмотически неактивными соединениями. Подавление набухания клеток способствует поддержанию барьерной функции мембран, сохранению ионной асимметрии и водного баланса, что обеспечивает сохранение высокого уровня АТФ в течение 24 ч. Способ осуществляют следующим образом. Печень через портальную вену перфузи-руют консервирующим раствором, содержащим 0,25 М сахарозы и 1 % БСА (pH 7,4) со скоростью потока 25-30 мл/мин. По окончании перфузии орган помещают в бюкс и ставят на лед, где хранят при 0°С. Пример, Печень крысы подключали к перфузионной системе и через портальную вену осуществляли перфузию органа консервирующим раствором, содержащим 0,25 М сахарозы и 1 % БСА, приготовленным на 50 мМ трис-НСІ-буфера. Объем перфузата составил 100 мм, скорость потока 30 мл/мин. После перфузии печень аккуратно извлекали из тела животного и переносили в стеклянный бюкс, наполненный криокон-сервирующим раствором и находящийся во льду. Печень была полностью покрыта этим раствором. Забор кусочков печени проводили через 30 мин, 2,4,10 и 24 ч хранения при 0°С. Оценку сохранности печени проводили путем определения уровня АТФ методом жидкостной хроматографии высокого давления (Н PLC) [2]. Сравнительные данные представлены в таблице. Из таблицы следует, что заявляемый способ обеспечивает высокий уровень АТФ в течение 24 ч хранения при 0°С, в то время, как в прототипе он падает уже после 2 ч хранения.