Спосіб консервування сперм риб

Союз Советских ' Социалистических Республик ЕТЕ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное кает.сеид-оу (2^)Заявлено 04.01.79 . Кл.3 (21) 2710095/28-13 с присоединением заявки № Государственный комитет СССР по делам изобретений и открытий (23) Приоритет А 01 К 61/00 Опубликовано 15.12.80. Бюллетень № 46 Дата опубликования описания (S3) УДК 6 3 9 . 3 . .034.2(088,8) (72) Авторы изобретения Н.С.Пуі'ікарь, Л.М.Белоус, А.Н,Новиков, и С.Т.Олейник (71) Заявитель Институт проблем криобиологии и криомедицнны АН УССР Е,Ф.Копейка (Г>4) СПОСОВ КОНСЕРВИРОВАНИЯ СПЕРМЫ РЫБ t Изобретение относится к рыборазведению, а именно к способу консервирования спермы рыб, в частности осетровых , и может быть использовано при воспроизводстве и селекции новых пород рыб. Известен способ консервирования спермы рыб, заключающийся в смешивании ее с защитным раствором, содержащим трис- НСЕ буфер, яичный желток и криопротектор - диметилсульфон сид, и в последующем эамораживаНИИ [lj . Данный способ имеет недостаток, состоящий в том, что при замораживании гибнет большая часть клеток (до 30-40%), вследствие чего нельзя использовать для замораживания сперму с активностью ниже 80%, Целью изобретения является повышение сохранности клеток в процессе консервирования и повышение производительности процесса замораживания. Для достижения этой цели в защитный раствор вводят тонкодисперсный кристаллический иодид серебра, при этом замораживание осуществляют сначала до минус 35-45 С со скоростью. снижения 8-12°С/мин, а затем до минус 1Э6°С со скоростью ІЗО-іБО^С/мин, Кроме того, компоненты защитного раствора берут в следующем соотношении, %: диметилсульфоксид 18-25, 0,1 н.трис- НСС буфер 65-75, яичный желток 7-10, кристаллический иодид серебра 0,004-0,0008. Способ осуществляют следующим 10 образом, Сперму разбавляют в соотношении 1:1 раствором, содержащим трис- НСб буфер, яичный желток, криопротектор (диметилсульфоксид) и тонкодисперс15 ный кристаллический иодид серебра. После этого разбавленную сперму разливают в ампулы и помещают в замораживающую установку для охлаждения со скоростью 10-12вС/мин до минус 35гО 45°С, а затем со скоростью 130 150°С/мин до температуры хранения минус 196°С. П р и м е р , От самца севрюги после гипофизарной инъекции получа25 ют сперму с начальной активностью не ниже 70%, К 100 мл спермы приливают 100 мл раствора, состоящего из 32,5 мл раствора гриса (24,33 гтрис-(оксиметил)-аминометана в 30 1000 мл HtO),32,5 мл 0,1 н. НОЄ 10 мл 786947 желтка куриного яйца, 2,5 мл диметилсульфоксида и 0,0004 г тонкодисперс™ ного кристаллического иодида серебра. После перемешивания сперму разливают по ампулам емкостью 1 мл, которые ' помещают в замораживающую установку и охлаждают со скоростью 10°С/мин до минус 40 С, а затем со скоростью 150°С/мин до температуры хранения минус 196°С. Технико-экономический эффект способа заключается в повышении сохранноеJ0 ти клеток при замораживании (активность деконсервированной спермь) повышается в 1,4 раза), кроме того, для замораживания может быть использована сперма с исходной активностью 70%, 15 При данном способе консервирования повышается производительность работы, так как длительность процесса замораживания сокращается на 40% за счет высоких скоростей охлаждения. 20 Формула изобретения 1. Способ консервирования спермы рыб путем смешивания ее с защитным раствором, содержащим трис- НСЙ бу J Редактор Т.Кинь фер, яичный желток и криопротектордиметилсульфоксид,и последующего з а мораживания^ т л и ч а ю щ и й с я т е м , ч т о , с целью повышения сохранности клеток в процессе консервирования и повышения^производительности замораживания, в заьцитный раствор вводят тонкодисперсный кристаллический иодид серебра, при этом замораживание осуществляют сначала до минус 35-45°С со скоростью снижения 8-12 С/мин, а затем до минус 196° С со скоростью снижения 130-150°С/мин. 2, Способ п о п , ^ о т л и ч а ю щ и й с я тем, что компоненты защитного раствора берут в следующем соотношении, %: Диметилсульфоксид 1П-2 5 0,1н.трис-НС# буфер 65-75 Яичный желток 7-Ю Кристаллический иодид серебра 0,004-0,0008. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Авторское свидетельство СССР № 591164, кл, А 01 К 61/00, 1976. Составитель Е.Лебедюк Техред А.Щепанская КорректорГ.Решетник Заказ 8204/1 Тирал 723 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП " П а т е н т 1 1 , г. Ужгород, ул. Проектная, 4