Штам mycoplasma gallisepticum s6

Корисна модель відноситься до ветеринарної імунології та мікробіології, зокрема до виробничих штамів для виготовлення біопрепаратів для діагностики та профілактики Mycoplasma gallisepticum-інфекції птиці. У великій кількості захворювань птиці, які протікають з ознаками ураження органів дихання, найбільш складними у діагностичному відношенні є респіраторний мікоплазмоз, який характеризується розвитком респіраторного синдрому, полісерозитами та запальними процесами суставів та сухожиллів. Відомо, що мікоплазмені інфекції у тварин можуть бути визваними 24 видами мікоплазм. Особливе значення для діагностики мікаплазмозів птиці мають Mycoplasma gallisepticum та Mycoplasma synoviae. В основу корисної моделі поставлено задачу отримати штам Mycoplasma gallisepticum S6, який є продуцентом антигену для виготовлення біопрепратів. Штам Mycoplasma gallisepticum S6 є збудником респіраторного мікоплазмозу (Mycoplasma gallisepticumінфекції) птиці. Володіє високими антигенними та імуногенними властивостями, стимулює у імунізованих тварин наробку аглютинуючих антитіл. Штам Mycoplasma gallisepticum S6 ізольований з проби патологічного матеріалу (головного мозку) курки та відібраний за сукупністю наступних біологічних характеристик: високі культуральні властивості, високі антигенні та імуногенні властивості. Штам виділений та зареєстрований 12.04.1978р. під №4 в лабораторії вивчення бактеріальних хвороб птиці та зберігається в колекції штамів мікроорганізмів ННЦ «ІЕКВМ». Рід Mycoplasma, вид Mycoplasma gallisepticum, родина Mycoplasmataceae. Штам Mycoplasma gallisepticum S6 характеризується наступними властивостями. 1. Культурально-морфологічні властивості. В мазках, що пофарбовані за Романовським-Гімзе, виглядає як поліморфні кокоподібні тільця розміром 0,2-0,5нм рожево-фіолетового кольору. Культивується на середовищі Едварда, рідкому та щільному поживних середовищах для ізоляції та культивування мікоплазм від ссавців та птиці (ННЦ «ІЕКВМ»), перещеплюваних лініях культур клітин нирки собаки (MDCK), нирки африканської зеленої мавпи (Vero) та SPEV (нирка ембріона свині). При рості на рідких поживних середовищах формує легку опалесценцію та незначний осад у вигляді дрібних грудочок. На щільних поживних середовищах формує характерні дрібні колонії з випуклим сосочкоподібним центром та ніжними краями. При рості на перещеплюваних лініях культур клітин проявляє цитопатичну дію через 24-48 годин. 2. Фізіологічні властивості. Факультативний аероб. Оптимальна температура культивування (38±0,5)°С, рН середовища знаходиться в межах 7,8-8,2, вимагає наявності у складі середовища сироватки крові ссавців або птиці, глюкози та джерела вітамінів (гідролізат печінки ВРХ та дріжджовий аутолізат). 3. Біохімічні властивості. Ферментує глюкозу, сахарозу та мальтозу. Не чутливий до ацетату талія та антибіотиків пеніцилінового ряду. Високочутливий до тетрациклінів. 4. Гемаглютинаційні властивості. Штам утримує гемаглютиноген, що спричиняє когломерацію курячих еритроцитів та зумовлює ефект гемаглютинації при постановці РГА або гемадсорбції при нашаруванні курячих еритроцитів на поверхню щільного поживного середовища. 5. Патогенні властивості. Штам є патогенним для курчат та викликає захворювання на респіраторний мікоплазмоз при аерозольному або інтратрахеальному зараженні. Корисна модель характеризується наступними прикладами. Приклад 1 Отримання гіперімунної сироватки до штаму Mycoplasma gallisepticum S6 на курчатах. В якості імунізуючого препарату використовували бактерини з штаму М. gallisepticum S6, що культивували на рідкому поживному середовищі для ізоляції та культивування мікоплазм від ссавців та птиці (ННЦ «ІЕКВМ»). Бактерійна маса мікоплазм була тричі відмита фосфатно-буферним фізіологічним розчином. Режим центрифугування 20хв. при 5тис.об/хв. Осад був стандартизований до концентрації 30млрд.м.т./см3. Схема імунізації курчат. Курчатам введено бактерии тричі у віці 22-х, 27-ми та 32-х діб інтратрахеально та інтраторакально (у грудний повітроносний міхур) в объемах 0,2см3 із додаванням 5% пенетранту димексиду (диметилсульфоксиду). Через 14 діб після останньої імунізації курчата знекровлені, сироватку крові отримано за стандартними методиками. Отримані гіперімунні сироватки перевірені на активність та специфічність в СКРА та пробірковій РА із бактерином імунізуючого штаму та стандартним антигеном фірми Nobilis (титри становили 1:1280). Із гетерологічними антигенами (сальмонельозний полівалентний, іерсиніозний) сироватки давали негативну реакцію. Таким чином, штам володіє високими імуногенними властивостями. Приклад 2 Отримання антигенів з штаму Mycoplasma gallisepticum S6 при культивуванні його на різних поживних субстратах. Було накопичено бактерійну масу штаму при культивуванні його на рідкому поживному середовищі для ізоляції та культивування мікоплазм від ссавців та птиці (ННЦ «ІЕКВМ») та на перещеплюваних культурах клітин нирки собаки (MDCK), нирки африканської зеленої мавпи (Vero) та SPEV (нирка ембріона свині). З отриманих бактеринів було виготовлено антигени для ІФА (імуноферментний аналіз) за стандартними методиками. При визначенні активності та специфічності антигенів виявлено, що вони дають позитивний результат високої достовірності у концентрації (370мкг/мл) та є специфічними щодо Мікоплазма галлісептікум-сироватки. Таким чином, штам Mycoplasma gallisepticum S6, що заявляється, володіє високими антигенними та імуногенними властивостями та може бути використаний для виготовлення біопрепаратів для діагностики та профілактики респіраторного мікоплазмозу птиці.