Лістеріозний антиген іеквм для реакції зв’язування комплементу (рзк)

Корисна модель відноситься до ветеринарії та медицини, а саме до мікробіології та імунології, до виявлення специфічних протилістеріозних антитіл. Антиген лістеріозний ІЕКВМ призначений для прижиттєвої діагностики лістеріозу сільськогосподарських тварин в реакції зв'язування комплементу (РЗК). Лістеріозний антиген повинен бути специфічним, а саме - давати позитивну реакцію з лістеріозними сироватками та не давати позитивних реакцій з нормальними сироватками та без сироваток, а також не мати гемотоксичних властивостей. Існують лістеріозні антигени в яких використовуються російські штами. Так є лістеріозний антиген зі штаму "Listeria monocytogenes " ВГНКИ №D/73 [SU №1238293 от 29.04.83, кл. А61К39/02] та лістеріозний антиген зі штаму "Listeria monocytogenes ВГНКИ №D/7-2" [SU №1238292, от 29.04.83, кл. А61К39/02]. Недоліком є саме використання російських штамів. Є лістеріозний антиген для постановки ІФА [Заявка №92003435, Россия, кл. А61К39/00, от 02.10.1995]. Це рішення може бути прототипом. Недоліком цього рішення є те, що цей антиген застосовується тільки для постановки ІФА (імуноферментного аналізу). В основу корисної моделі поставлено задачу розробити лістеріозний антиген, що містить вирощену на живильному середовищі суміш бактерій штамів шляхом використання суміші бактерій зі штамів "Буринь", "Тернопіль", №1 та К№17 у S формі, а використання як живильного середовища агару Мартена з глюкозою 0,51%, щоб забезпечити якість лістеріозного антигену ІЕКВМ для реакції зв'язування комплементу (РЗК). Лістеріозний антиген - безбарвна рідина з осадом молочно-білого кольору з дещо сіруватим відтінком, який розбивається при збовтуванні в однорідну суспензію. Культури лістерій кожного штаму вирощують роздільно, завісі, що отримані, змішують та центрифугують кілька разів. Приклад 1. 3 3-х флаконів робили посіви на МПА, МПБ, МППБ під вазелиновим маслом та агаром Сабуро в пробірках; для посівного матеріалу в пробірку 0,1-0,2мл. Посіви витримували в термостаті при 37°С (посів на агар Саберопри кімнатній температурі - 22-24°С) протягом 5 діб. Таким чином визначали стерильність. Приклад 2. Активність(титр) і специфічність лістеріозного антигену визначали одночасно в РЗК з двома позитивними та двома негативними сироватками крові кролів або овець, виготовлених на підприємстві, або відібраних від хворих на лістеріоз тварин. Таким чином визначали активність та специфічність. Приклад 3. Для випробування використовували 3 флакони з антигеном. Антиген збовтували і розводили 1:50, 1:100, 1:200 і 1:400 по 10мл кожного розведення з кожного флакону. Для цього в першу пробірку (флакон) наливали 19,6мл фізіологічного розчину, а в решту - 3 пробірки по 10мл фізіологічного розчину. Потім знову в першу пробірку(флакон) вносили 0,4мл. збовтаного антигену, який утримував 50млрд бактерійних клітин в 1-му мл і ретельно змішували. З першої пробірки переносили 10мл суспензії в другу, змішували, потім з другої переносили в третю, а з третьої, після змішування, в четверту. Робочим титром лістеріозного антигену вважали подвоєну його концентрацію проти граничного титру, тобто розведення 1:100. Лістеріозний антиген є специфічним, дає позитивну реакцію з лістеріозними сироватками і не дає позитивну реакцію з нормальними сироватками та без сироваток, а також не мають гематоксичних властивостей. Лістеріозний антиген можливо використовувати для реакції зв'язування комплементу при діагностиці лістеріозу у тварин усіх видів.