Крем антимікробної дії для профілактики маститів та гігієнічного догляду за вим’ям великої рогатої худоби

Реферат: Крем антимікробної дії для профілактики маститів та гігієнічного догляду за вим’ям великої рогатої худоби містить срібла цитрат і воду, містить декспантенол та допоміжні речовини вазелінове масло, ізопропіміристат, ізопропілпальмітат, октилдодеканол, диметикон, емульгатор № 1, цетостеариловий спирт. UA 120437 U (12) UA 120437 U UA 120437 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до області ветеринарії та хіміко-фармацевтичної промисловості, а саме до антимікробного засобу у формі крему, що може бути призначений для профілактики та лікування великої рогатої худоби при ураженнях шкіри вимені (мікротравмах, тріщинах та ерозії дійок). Для лікування гострих форм маститів застосовується великий арсенал антибактеріальних препаратів (антибіотики, нітрофурани, сульфаніламіди). Їх недоліком є те, що при застосуванні даних препаратів розвиваються стійкі штами мікроорганізмів. Тому виникає потреба в розробці нових ветеринарних препаратів з широким спектром дії. Існує препарат для лікування гострих форм маститів Декамаст, який містить активнодіючу речовину і наповнювач, який відрізняється тим, що активною діючою речовиною є декаметоксин, а наповнювачем вазелінове масло (пат. UA, №23692, A61K 31/205, від 31.08.1998, бюл. № 4). Відома мазь (пат. RU№ №2233652, опуб. 10.08.2004, А61К 31/4164) призначена для лікування інфікованих ран і містить колоїдне срібло; полівінілпіролідон; прополіс; метронідазол; мінерал на основі алюмосилікатів; гель поліетиленоксид-1500 - інше. Мазь має широкий спектр дії, одночасно на грампозитивні і грамнегативні патогенні мікроорганізми, включаючи стафілококи і анаеробні штами. До складу мазі входить антисептик метронідазол, що, як показують останні токсикологічні дослідження, небезпечний для центральної нервової системи, органів кровотворення і шлунково-кишкового тракту, а також прополіс, що може викликати алергічні процеси. Колоїдне срібло, що входить до складу прототипу, проявляє антибактеріальну активність відносно поліасоціату патогенної мікрофлори. Проте, порівняно великий розмір часток срібла (1-10 мкм), і, отже, недостатньо розвинена поверхня масопередачі не дозволяє максимально виявити антисептичні властивості зазначеної активної субстанції. Відома мазь для лікування інфікованих ран (пат. RU, №2397752, опуб. 27.08.2010, А61К 9/06), що містить наночастинки срібла - 7,0-10,0 %, гель на основі поліетиленоксидів - 50,065,0 %, хімопсин, трипсин, хімотрипсин та воду. Недоліком препарату є те, що при застосовуваної високої концентрації може значно подразнювати тканини вимені. Існує препарат для лікування маститів у великої рогатої худоби (пат. RU 2073508, A61K31/00, від 1997.02.20), що містить срібло (коларгол) -1,5-2,0, імуностимулятор-пірогенал (до 0,00003 %) вуглекислотні екстракти: ромашки аптечної (1,0-2,0 %), деревію звичайного (1,02,0 %), норковий жир (20-24 %), димексид (60 %), ізотонічний розчин, хлорид натрію - інше. Недоліком цього препарату є те, що спосіб отримання композиції значною мірою трудомісткий, також у нього недостатня ефективність лікування. В основу корисної моделі поставлено задачу створити ветеринарний препарат у формі крему антимікробної дії для профілактики маститів та гігієнічного догляду за вим'ям великої рогатої худоби з таким якісним і кількісним складом компонентів, який би забезпечив екологічність і ефективність препарату за рахунок використання срібла у найбільш біодоступній та нетоксичній формі. Поставлена задача вирішується тим, що у крем антимікробної дії для профілактики маститів та гігієнічного догляду за вим'ям великої рогатої худоби, що містить срібла цитрат і воду, згідно з корисною моделлю, додатково містить декспантенол та допоміжні речовини - вазелінове масло, ізопропіміристат, ізопропілпальмітат, октилдодеканол, диметикон, емульгатор №1, цетостеариловий спирт в наступних співвідношеннях компонентів, мас. %: срібла цитрат 10,0 - 40,0 декспантенол 2,0 - 5,0 вазелінове масло 4,0 - 10,0 ізопропілміристат 3,0 - 7,0 ізопропілпальмітат 3,0 - 7,0 октилдодеканол 4,0 - 6,0 диметикон 0,05 - 3,0 емульгатор №1 3,0 - 6,0 цетостеариловий спирт 3,0 - 6,0 вода очищена до 100,0. Задача корисної моделі є підвищення ефективності лікування маститу тварин, зокрема корів шляхом розширення діапазону терапевтичної дії препарату і виключення негативного побічного впливу. Зовні вим'я ВРХ покрите тонкою еластичною шкірою з рідким волоссям. Волосся відсутнє на шкірі дійок, в ній немає сальних і потових залоз. Тому шкіра вимені і особливо дійок при несприятливих впливах зовнішнього середовища, поганому догляді за вим'ям (утриманні в 1 UA 120437 U 5 10 15 20 2530 35 40 45 50 55 60 сирих приміщеннях і загонах; вигоні на прогулянку взимку відразу після доїння; недбале доїння) легко пошкоджується, на ній можуть з'явитися тріщини, що є шляхом потрапляння мікроорганізмів у вим'я тварини та спричинення різних форм маститу. Срібла цитрат – компонент, що має антимікробну дію. Декспантенол або пантенол - аналог вітаміну В5. Потрапляючи на епідерміс, він перетворюється в пантотенову кислоту. При пошкодженні епідермісу потреба в пантотеновій кислоті істотно зростає. Пантотенова кислота відіграє ключову роль в жировому і вуглеводному обміні, активізує процес відновлення шкірних покривів і слизових оболонок, підтримує нормальний метаболізм в клітинах. Декспантенол виконує наступні функції: антибактеріальна; відновлення шкірних покривів; захист від негативного впливу ультрафіолету; усунення запалень. Вазелінове масло – співрозчинник. Має добрі зволожуючий і пом'якшувальний ефекти, воно корисно для сухої шкіри. Ізопропілміристат та ізопропілпальмітат належать до групи емолентів, речовин, які залишаються на поверхні шкіри і надають їй м'якість і гладкість. Добре емульгуються, дозволяють отримувати малов'язкі емульсії, легко вбираються в шкіру і не залишають відчуття жирності і липкості. Октилдодеканол широко використовують у фармацевтичній промисловості завдяки його змащувальним і пом'якшувальним властивостям, як емульгувальний агент. Диметикон є гідрофобною полімерною речовиною з низьким поверхневим натягом. Диметикон в технології кремів сприяє усуненню зайвої піни при емульгуванні. Емульгатор №1 - емульгатор. Цетостеариловий спирт - використовується у фармацевтичних і косметичних препаратах для місцевого застосування як пом'якшувальна, емульгувальна та підвищуюча в'язкість речовина. Співемульгатор в емульсіях в/о та о/в. Технологія приготування крему полягає в наступному. Окремо нагрівається водна фаза (вода очищена, розчин цитрату срібла, розчин пантенолу) і масляна фаза (ізопропілміристат, ізопропілпальмітат, вазелінове масло, октилдодеканол, диметикон, цетостеариловий спирт, емульгатор №1) до повного розплавлення емульгаторів 5060 °C. Потім змішуються фази і емульгуються (з використанням турбінної мішалки) при температурі 50-60 °C зі швидкістю 5000-7000 об./хв протягом 10-20 хв. Потім в сорочку реактора подається холодна вода для охолодження маси до кімнатної температури, але маса при цьому гомогенізується за допомогою комбінації мішалок рамної і турбінної (на меншій швидкості). Готовий крем фасують та упаковують. За даними науково-технічної і патентної літератури, не виявлена аналогічна сукупність ознак, що дозволяє судити про винахідницький рівень заявленого технічного рішення. Приклад 1. Дослідження антимікробної активності. Досліджували антимікробну активність шести зразків препарату, що містять як активний фармацевтичний інгредієнт цитрат срібла (Ag) у різних концентраціях на клінічні полірезистентні штами мікроорганізмів, надані ДУ "Інститутом епідеміології та інфекційних хвороб ім. Л.В. Громашевського НАМН України". Як тест-об'єкти використовували клінічні штами Staphylococcus aureus 421, S. epidermidis 439, Escherichia coli 197, Pseudomonas aeruginosa 185, що характеризуються множинною резистентністю до антибіотиків, а також є збудниками патологічного стану, що вивчається. Досліджувані культури різних видів мікроорганізмів вирощували на середовищі МюллерХінтон при 37 ºС протягом доби. Готували мікробну завись у стерильному фізіологічному 2 6 4 розчині (5 см ) в концентраціях 10 , 10 кл/мл із використанням приладу денситометру DENSIMAT та стандартів McFarland (виробництва bioMerieux, Франція). Вибрані штами стафілококів характеризувались високими рівнями резистентності до оксациліну, які зумовлені продукцією кодованого геном mecA пеніцилінзв'язуючого білка ПЗБ2', що доведено методом латекс-аглютинації з використанням набору Slidex MRSA Detection (виробництва bioMerieux, Франція). Чутливість тест-штамів до досліджуваних зразків препарату вивчали із використанням стерильних дисків, які просочували препаратом у вигляді м'якого лікарського засобу, що містив цитрату срібла. Для інокуляції використовували приготовлені мікробні зависі зазначених вище культур двох концентрацій. Стандартний інокулюм наносили піпеткою на поверхню сердовища Мюллер-Хінтон рівномірно розподіляли на поверхні середовища, надлишок відсмоктували піпеткою і підсушували. Потім за допомогою стерильного пінцета клали диски, просочені зразками досліджуваного препарату. Як контроль використовували стерильні диски без 2 UA 120437 U 5 10 15 20 25 30 35 4045 50 55 просочування. Результати оцінювали за діаметрами зон затримки росту досліджуваних штамів навколо дисків, просочених препаратом, через 24 години інкубації в термостаті при 37 °C. Залежно від діаметрів зон затримки росту досліджуваних мікроорганізмів навколо дисків штами належали до чутливих, помірно стійких або стійких (резистентних). Результати досліджень антимікробної активності препарату срібла у МЛФ щодо клінічних штамів Staphylococcus aureus 421, Staphylococcus epidermidis 439, Escherichia coli 197, Pseudomonas aeruginosa 185 при різному мікробному навантаженні наведені на діаграмах (фіг.1, 2). На фіг. 1 показана чутливість клінічних штамів мікроорганізмів до досліджуваних зразків 4 препарату срібла у МЛФ при мікробному навантаженні 10 кл/мл. На фіг.2 Чутливість клінічних штамів мікроорганізмів до досліджуваних зразків препарату 6 срібла у МЛФ при мікробному навантаженні 10 кл/мл. Встановлено, що діаметри зон затримки росту культур навколо дисків, просочених зразками фармацевтичного препарату у МЛФ, залежать від концентрації мікробної зависі, нанесеної на поверхню середовища Мюллер-Хінтон, що збігається з даними зарубіжної літератури. Адже американськими вченими встановлено, що під час досліджень антимікробної активності на різних тест-штамах в різноманітних поживних середовищах, окрім властивостей, характеристик та концентрацій препарату срібла, на його антимікробну активність впливає численна кількість інших факторів. А саме: видові та штамові відмінності мікроорганізмів, рівень забрудненості або мікробне навантаження, наявність ростових або інгібуючих факторів в середовищі, тривалість та умови інкубації. Як видно з діаграм (фіг. 1 та 2), найменші значення діаметрів зон затримки росту культури 6 S.aureus 421 спостерігались при нанесенні культури в концентрації 10 кл/мл навколо дисків, просочених зразком №6. Діаметри зон затримки росту зразків №1-№6 зменшувалися по низхідній. Тоді як найбільші значення діаметрів зон затримки росту стафілококів виявлено при 4 мікробному навантаженню 10 кл/мл навколо дисків із зразком №1 та №2. 4 Стосовно штаму S. epidermidis 439 спостерігали наступне: при мікробному навантаженні 10 кл/мл зразки №2 та №3 проявили помірну активність, а зразок №1 виявив достатньо високу антимікробну активність. Зразки №4 та №5 мали зони затримки росту 16 мм. Найменше значення зон затримки росту було у зразка №6 (13 мм). При нанесенні культури в концентрації 6 10 кл/мл зразки №4 та №5 мали однакові зони затримки росту, а зразок №1 проявив помірну антимікробну активність (19 мм). Таким чином, з досліджуваних зразків препарату срібла у МЛФ найвищу протимікробну активність стосовно клінічних множиннорезистентних штамів роду Staphylococcus в концентрації 4 10 кл/мл виявив зразок №1 та №2. Дані щодо протимікробної активності препарату стосовно клінічних штамів грамнегативних 4 мікроорганізмів E. сoli 197 та P. aeruginosa 185 наступні: зразок №1 (мікробне навантаження 10 кл/мл) пригнічує ріст колоній E. сoli 197 (зона затримки росту 17 мм), в той час як зразки №2, №3, №4 мали однакову активність, що складала 15 мм. Щодо діаметрів зон затримки росту E. 6 сoli 197 при мікробному навантаженні 10 кл/мл, зразок №1 характеризується протимікробною активністю (зона затримки росту 15 мм), у зразках № 2 та №3 зони затримки росту не перевищували 14 мм, а у зразках №4 та №5 – 13 мм. Досліджувані зразки срібловмісних м'яких лікарських засобів характеризувались вищими протимікробними властивостями щодо клінічного штаму P. aeruginosa 185, на відміну від штаму E. сoli 197. Найбільші значення діаметрів зон затримки росту штаму синьогнійної палички спостерігались навколо дисків, просочених усіма досліджуваними зразками препарату стосовно 4 6 мікробних концентрацій 10 , 10 кл/мл культури P. aeruginosa 185. Встановлено, що діаметри зон затримки росту досліджуваних культур Staphylococcus aureus 421, S. epidermidis 439, Escherichia coli 197, Pseudomonas aeruginosa 185 навколо дисків, просочених зразками препарату срібла у м'якій лікарській формі, залежать від концентрації мікробної зависі, нанесеної на поверхню середовища Мюллер-Хінтон та від концентрації активного фармацевтичного інгредієнта. Із досліджуваних зразків препарату у м'якій лікарській формі найвищими протимікробними властивостями характеризувалися зразки №1 та №2. Найбільші значення діаметрів зон затримки росту стафілококів спостерігались при нанесенні 4 мікробної зависі у концентрації 10 кл/мл навколо дисків, просочених зразками препарату №1 та №2. Розроблений препарат срібла у вигляді крему виявив високу антимікробну активність в усіх досліджуваних концентраціях щодо культури P. aeruginosa 185. 3 UA 120437 U 5 10 15 20 25 30 35 Досліджуваний срібловмісний м'який лікарський засіб проявляє бактеріостатичну та бактерицидну дію відносно полірезистентних клінічних штамів різних видів мікроорганізмів. Приклад 2. дослідження стабільності крему. М'які ветеринарні лікарські засоби для зовнішнього застосування контролюють за такими показниками якості, як опис, ідентифікація, однорідність, маса вмісту контейнера, мікробіологічна чистота, кількісне визначення. За необхідності додатково контролюють розмір часток, рН, кислотне число, характерні властивості основи, вміст супровідних домішок, герметичність контейнера. Вивчення стабільності крему проводили на п'яти серіях препарату, розфасованого в туби алюмінієві з внутрішнім лаковим покриттям Расіас 11015-000, а також у банки із дроту жовтогарячого скла типу БДС-20-27,5-ОС-1 з кришками що натягуються типу 1 (ОСТ 64-2-87-81) протягом 27 місяців кожні 6 місяців Термін зберігання крему визначали при двох температурних режимах – при кімнатних умовах (15-25)°С і в прохолодному місці при (8-15)°С. Результати досліджень наведені в таблицях 1 та 2. Дослідження проводили на базі кафедр Національного фармацевтичного університету (НФаУ) в рамках угоди про співпрацю між НФаУ та Національним медичним університетом ім. О.О.Богомольця (кафедрою аптечної та промислової технології ліків). Визначення та контроль зовнішнього вигляду та органолептичних властивостей зразків крему (колір, запах, консистенцію тощо) проводили візуальним і органолептичним методами згідно з ДФУ (1-е вид., 2.2.3). Крем має бути однорідним (не мати видимих часток, сторонніх включень, ознак фізичної нестабільності: агрегації, коалесценції, коагуляції часток). Експериментальні дослідження щодо визначення стабільності емульсійного крему найбільш об'єктивно характеризують їх стійкість до перепадів температури та центрифугування (колоїдна та термостабільність). Для визначення колоїдної стабільності ВП використовували лабораторну центрифугу з набором пробірок, ртутним термометром з інтервалом вимірювання температур від 0 до 100 °C і ціною поділки 1 °C, а також секундомір і водяну баню. Пробірку наповнювали на 2/3 об'єму досліджуваними зразками ветеринарного крему. Потім пробірки поміщали на водяну баню при температурі 45±2 °C на 20 хв. Центрифугували протягом 5 хв. Зразок вважали стабільним, якщо після центрифугування в пробірках не спостерігали розшарування. Визначення термостабільності проводили за методикою, наведеною в Національному стандарті України "Креми косметичні. Загальні технічні умови: ДСТУ 4765:2007. – [Чинний від 2009-01-01]». Пробірку з 10 г крему вміщували у термостат ТВ-80-1 з температурою 40-42 °C, залишали протягом одного тижня, потім переносили у холодильник з температурою 10-12 °C на той самий термін, після чого витримували протягом 3-х днів при кімнатній температурі. В результаті експерименту встановлено, що усі серії зразків ветеринарного крему витримують випробування на термо- та колоїдну стабільність. Таблиця 1 Результати вивчення стабільності крему у процесі зберігання у банках з жовтогарячого скла протягом 2-х років 3 місяців. Найменування показника Початок за МКЯ досліду 0 при температурі (8±15) С Зовнішній вигляд Однорідність Колоїдна стабільність Термостабільність Індентифікація: іони арґентуму (від 0,510 до 0,525 мг/г) Кількісний вміст декспантенолу в 1 г крему (від 5,100 до 5,250 г) Мікробіологічна чистота: аеробних бактерій та грибів сумарно Термін зберігання, міс. 6 12 18 24 27 Крем білого кольору з легким запахом лимонної кислоти Однорідний за вмістом Стабільний Стабільний 0,525±0,01 0,524±0,02 0,524±0,01 0,523±0,01 0,523±0,01 0,522±0,02 5,103±0,04 5,104±0,03 5,104±0,05 5,103±0,01 5,104±0,01 5,101±0,04  10 КУО 2 4 UA 120437 U P.aeruginosa, S.aureus Відсутність росту 0 при температурі (15±25) С Зовнішній вигляд Однорідність Колоїдна стабільність Термостабільність Індентифікація: іони арґентуму (від 0,510 до 0,525 мг/г) Кількісний вміст декспантенолу в 1 г крему (від 5,100 до 5,250 г) Мікробіологічна чистота: аеробних бактерій та грибів сумарно P.aeruginosa, S.aureus Крем білого кольору з легким запахом лимонної кислоти Однорідний за вмістом Стабільний Стабільний 0,515±0,01 0,514±0,02 0,514±0,01 0,513±0,01 0,513±0,01 0,512±0,02 5,104±0,02 5,105±0,03 5,102±0,01 5,101±0,02 5,102±0,03 5,101±0,04  10 КУО 2 Відсутність росту Примітка: Р±95 %, n=5. 5 10 15 20 25 Збереження якості лікарських препаратів для застосування у ветеринарії є важливим показником якості, адже зменшення кількісного вмісту активних фармацевтичних інгредієнтів в препараті вказує на його нестабільність. Кількісний вміст іонів срібла в ВП визначали тіоціанометрично. Кількісне визначення декспантенолу проводили методом рідинної хроматографії (Державна Фармакопея України (ДФУ)). Одержані дані свідчили про стабільність ветеринарного крему. До ветеринарних препаратів для догляду за дійками вимені корів пред'являються такі специфічні вимоги, як захист соскового каналу від патогенних мікроорганізмів та сприятливий вплив на шкіру вимені тварин. Особливого значення набуває такий фактор, як рН препарату. Шведська компанія DeLaval, що з1883 року займається проблемою продуктивного довголіття корів, при розробці засобів для догляду за вименем великої рогатої худоби (ВРХ), приділяє пильну увагу усім факторам, що можуть вплинути на "здоров'я вимені". Визначення рН крему дало можливість встановити, що залежно від серії цей показник становить 6,3–7,0, що узгоджується з фізіологічними даними рН шкіри вимені тварини. Визначення рН проводили за ДФУ. Визначення рН водних витяжок. Для цього 5,0 г крему (точна наважка) вносили в хімічну склянку місткістю 100 мл і розчиняли у 50 мл води очищеної при перемішуванні скляною паличкою, залишали на 10 хвилин для седиментації нерозчинних компонентів, після чого визначали величину рН одержаної водної дисперсії потенціометрично (ДФУ І вид., доп. 1 (2004), п. 2.2.3, стор. 17). Герметичність контейнера також визначали за методикою ДФУ, витримуючи необхідну о кількість туб з кремом (10 або 30) у термостаті при температурі (60±3) С протягом 8 годин. Дане випробування пов'язано з тим, що негерметичність контейнера може привести до втрати препарату, його мікробному забрудненню, а також зниженню стабільності під впливом факторів зовнішнього середовища, які одержали доступ до вмісту контейнера. Було проведено визначення маси вмісту упаковки згідно з методикою ДФУ. Усі випробувані зразки ветеринарного крему відповідали проекту АНД на препарат. Таблиця 2 Результати вивчення стабільності крему у процесі зберігання у тубах алюмінієвих протягом 2-х років 3 місяців. Найменування показника за МКЯ 0 при температурі (8±15) С Зовнішній вигляд Однорідність Колоїдна стабільність Термостабільність Початок досліду Термін зберігання, міс. 6 12 18 24 Крем білого кольору з легким запахом лимонної кислоти Однорідний за вмістом Стабільний Стабільний 5 27 UA 120437 U Індентифікація: іони арґентуму (від 0,510 до 0,515±0,01 0,510±0,02 0,510±0,01 0,510±0,01 0,510±0,01 0,510±0,02 0,525 мг/г) Кількісний вміст декспантенолу в 1 г 5,105±0,04 5,105±0,03 5,104±0,05 5,103±0,01 5,104±0,01 5,101±0,04 крему (від 5,100 до 5,250 г) Мікробіологічна чистота: 2 аеробних бактерій та  10 КУО грибів сумарно P.aeruginosa, S.aureus Відсутність росту 0 при температурі (15±25) С Зовнішній вигляд Однорідність Колоїдна стабільність Термостабільність Індентифікація: іони арґентуму (від 0,510 до 0,525 мг/г) Кількісний вміст декспантенолу в 1 г крему (від 5,100 до 5,250 г) Мікробіологічна чистота: аеробних бактерій та грибів сумарно P.aeruginosa, S.aureus Крем білого кольору з легким запахом лимонної кислоти Однорідний за вмістом Стабільний Стабільний 0,515±0,01 0,514±0,02 0,514±0,01 0,513±0,01 0,513±0,01 0,512±0,02 5,104±0,02 5,105±0,03 5,102±0,01 5,101±0,02 5,102±0,03 5,101±0,04  10 КУО 2 Відсутність росту Примітка: Р±95 %, n=5. 5 10 15 20 25 30 Проблема контамінації м'яких лікарських форм є вкрай важливою. Навіть наявність у складі ветеринарних препаратів речовин, що проявляють антимікробну активність (в нашому випадку цитрат срібла), значною мірою може вплинути на життєдіяльність мікроорганізмів. Однак антимікробні речовини не завжди гарантують мікробіологічну чистоту препаратів, що може бути зумовлено відсутністю самостерилізуючого ефекту відносно мікроорганізмів, які не входять до спектра його специфічної дії. Також причиною контамінації можуть бути допоміжні речовини, що входять до складу ветеринарного препарату. Причиною мікробної контамінації найчастіше є сировина природного походження, менш забруднені мікроорганізмами синтетичні речовини, хоча серед них є й дуже контаміновані. Саме тому наступним етапом експерименту постали випробування зразків ветеринарного крему на мікробіологічну чистоту. Дослідження проводили в Інститут мікробіології і вірусології імені Д. К. Заболотного НАН України згідно з вимогами ДФУ (випробування на мікробіологічну чистоту). Випробування здійснювали з використанням методу прямого висіювання. Маса зразка складала 10,0 г, розведення - 1:10. Оцінка ступеня мікробного забруднення дослідних зразків мазей складалася з визначення загального числа аеробних бактерій і грибів в 1,0 зразка, а також з відсутності бактерій родини Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus і Pseudomonas aeruginosa. Результати мікробіологічних досліджень свідчать, що у зразках крему протягом терміну спостереження не виявлено бактерій родини Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus і Pseudomonas aeruginosa. За ступенем мікробної контамінації препарат відповідає вимогам ДФУ для препаратів місцевого застосування. Для нестерильних ВП, крім належних умов виробництва, основним фактором, який забезпечує мікробіологічну чистоту при виробництві та зберіганні, є ефективність дії антимікробних консервантів. У відповідності з сучасними вимогами на етапі реєстрації препарату необхідно представити експериментальні дані, які підтверджують ефективність антимікробних консервантів. Цитрат срібла, що входить до складу ветеринарного крему є широковживаним консервантом в Європі та США у виробництві косметичної продукції. Випробування ефективності антимікробних консервантів проведено відповідно до вимог ДФУ. Для цього згідно з методиками були використані стандартні живильні середовища й такі тест 6 UA 120437 U 5 10 15 20 25 30 мікроорганізми: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Staphylococcus aureus АТСС 6538, Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus niger АТСС 16404. Критерієм оцінки ефективності консерванту у лікарській формі слугує зниження кількості життєздатних клітин тест-мікроорганізмів у препараті за певний період часу після його контамінації. У відповідності з вимогами ДФУ логарифм зниження кількості життєздатних клітин бактерій через 14 діб має становити не менше трьох, у подальшому кількість життєздатних клітин бактерій не повинна збільшуватися; логарифм зниження кількості життєздатних клітин грибів через 14 діб має становити не менше одиниці, в подальшому кількість життєздатних клітин грибів не повинна збільшуватися. Встановлено, що цитрат срібла, який входить до складу крему, у досліджуваній концентрації пригнічує ріст мікроорганізмів. Крем для догляду за дійками вимені корів не потребує введення до складу додаткових антимікробних консервантів. В ході дослідження були використані сучасні фармако-технологічні, фізико-хімічні, та мікробіологічні методи досліджень, що дозволили здійснити об'єктивну оцінку зразків ветеринарного препарату під умовною назвою. В результаті дослідження зразків встановлено, що за органолептичними та фізико-хімічними властивостями (колоїдна та темрмостабільність) крем відповідає всім показникам, передбаченим проектом методик контролю якості та вимогам ДФУ як відразу після виготовлення, так і після всього терміну зберігання в алюмінієвих тубах та у банках з жовтогарячого скла. Дослідили кількісний вміст активних фармацевтичних інгредієнтів – цитрату срібла та декспантенолу, що входять до складу крему. Одержані дані свідчать про стабільність препарату протягом усього терміну зберігання. Мікробіологічними дослідженнями встановлено, що за ступенем мікробної контамінації препарат відповідає вимогам ДФУ для препаратів місцевого застосування. Цитрат срібла, який входить до складу крему, у досліджуваній концентрації має консервуючи дію. Встановлено термін придатності - 2 роки та 3 місяці Результати дають можливість прогнозувати термін зберігання препарату протягом двох років при температурі 8-25 °C та можуть бути враховані при розробці проекту методик контролю якості на крем для застосування у ветеринарії. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Крем антимікробної дії для профілактики маститів та гігієнічного догляду за вим’ям великої рогатої худоби, що містить срібла цитрат і воду, який відрізняється тим, що додатково містить декспантенол та допоміжні речовини - вазелінове масло, ізопропіміристат, ізопропілпальмітат, октилдодеканол, диметикон, емульгатор № 1, цетостеариловий спирт, в наступних співвідношеннях компонентів, мас. %: срібла цитрат 10,0-40,0 декспантенол 2,0-5,0 вазелінове масло 4,0-10,0 ізопропілміристат 3,0-7,0 ізопропілпальмітат 3,0-7,0 октилдодеканол 4,0-6,0 диметикон 0,05-3,0 емульгатор № 1 3,0-6,0 цетостеариловий спирт 3,0-6,0 вода очищена до 100,0. 7 UA 120437 U Комп’ютерна верстка Л. Бурлак Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 8