Спосіб профілактики вірусної діареї великої рогатої худоби

Спосіб профілактики вірусної діареї великої рогатої худоби, що включає введення живої вак цини, який відрізняється тим, що використовують живу вакцину з модифікованого штаму "ВК-1 В1М", адаптованого до перещеплюваних культур клітин (коронарних судин теляти, трахеї" теляти, нирки вівці) з дворазовим уведенням внутрішньом'язово з Інтервалом 14 діб дозою 2 см 3 та окремо одночасно вводять внутрішньом'язово лужний гідролізат Bac.alvei дозою 1 см 3 як імуностимулятор. Корисна модель, що передбачається, відноситься до вірусології, а саме до виготовлення вакцин на підприємствах біологічної промисловості та профілактики великої рогатої худоби проти вірусної діареї. Спосіб профілактики вірусної діареї-хвороби слизових великої рогатої худоби, призначений для профілактики вірусної діареї (ВД) щепленням молодняка великої рогатої худоби (ВРХ), тільних корів і нетелів Основними споживачами вакцини є господарства, де існує ВРХ. Існують вакцини для профілактики ВД" (Белявская Т.В. "Бивалентная вакцина против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота", автореферат диссертации на соискание ученой степени канд. вет. наук, Минск 1998г. Академия агр. наук Респ. Беларусь; Беларусский научно-исслед. институт эксперим. ветеринарии им С.Н Вы шел веского); ("Живая вакцина из аттенуироваиного штамма (RIT 4350) ВД-БС" Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьев Б.В., Фомина Н.В Вирусные болезни животных / Москва, ВНИТИБП, 1998, стр.154). Для профілактики вірусної діареї існує "Живая вакцина против вирусной диареи - болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота и способ профилактики вирусной диареи - болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота".(патент SU №1538304 от 28 05.86, кл. А61К 39/12, г. Москва) це рішення є прототипом. Недоліком цього рішення є те, що вакцина міс тить російський штам. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити спосіб профілактики вірусної діареї ВРХ, що включає введення живої вакцини шляхом використання живої вакцини з модифікованого штаму "ВК-1В-1М", адаптованого до перещеплюваних культур клітин (коронарних судин теляти, трахеї теляти, нирки вівці) внутрішньом'язово дворазове з інтервалом 14 діб у дозі 2см 3 та з окремим одночасним внутрішньом'язовим введенням імуностимулятору (лужного гідролізату Вас alvei) у дозі 1см3, щоб забезпечити процес профілактики вірусної діареї' великої рогатої худоби. Вакцину готують із штаму "ВК-1В-1М" вірусу діареї, що адаптований до перещеплювальних культур клітин коронарних судин теляти, трахеї теляти і нирки вівці. Вакцина ліофільно висушена в захисному середовищі (суміш сахарози та желатину). Склад вакцини: Вірусутримуюча рідина з вірусом діареї "ВК 1 В-1 М" з титром 6-7lg ТЦД50/мл, сахароза, желатин, пеніцилін, стрептоміцин, а як імуностимулятор використовують лужний гідролізат Вас. alvei (Л ПС). Вакцину вводять дворазове з інтервалом 14 діб у дозі 2см 3 внутрішньом'язово з одночасним окремим внутрішньом'язовим введенням Імуностимулятора в дозі 1см3. Приклад 1. Для перевірки якості вакцини проводили вибірку із різних місць кожної серії у кількості що ви ю ю 5153 значена в формулі П = 0,4A/N , де Гі - необхідна для контролю кількість упаковок (об'єм вибірки); N - кількість упаковок у серії. Із вибірки відбирали 6 флаконів препарату методом випадкового відбору, 3 з яких використовували для проведення випробування, решту 3 флакони направляли в архів контролера ВБК для зберігання 18 місяців. Проби, які направляли в архів контролера, опечатували і супроводжували документом встановленої форми, де вказували: найменування препарату, дату виготовлення, номер серії, дату відбору проби, загальну кількість одиниць в упаковці, масу нетто, посаду й підпис особи, яка відбирала пробу, та позначення цих ТУ У, посаду, підпис особи, яка відбирала проби, на архівних зразках ставили штамп "Архів". В разі отримання незадовільних результатів випробувань хоча б по одному з показників, по якому проводили повторні випробування на подвійній кількості зразків з цієї ж серії і на подвійній кількості тварин. Результати повторних випробувань вважали кінцевими і поширювали на всю серію В разі отримання незадовільних результатів повторних випробувань серію препарату вважали такою, що не відповідає вимогам ТУ У її бракували ізнищували. Приклад 2. Визначали зовнішній вигляд, колір, порушення герметичності флаконів. Вакцина являла собою суху пористу масу рожевого кольору (леофільно висушену ). Флакони з вакциною були ретельно закупорені, без тріщин. Приклад 3. Визначення контамінації бактериальною і грибковою мікрофлорою проводили згідно ГОСТ 28085-89 "Препарати біологічні. Методи бактеріологічного контролю стерильності". Для дослідження контамінації мікоплазм використовували три флакони з вакциною. Вакцину в кожному флаконі розчиняли дистильованою водою в об'ємі, що відповідає початковому об'єму до висушування. Вакцину з кожного флакона об'єднува ли у одній стерильній ємності и проводили посів по 0,5 см у 3 пробірки з напіврідким (0,3% агару) та густим (1,3% агару) середовищем Едварда, основою якого є триптичний перевар серцевого м'яза великої рогатої худоби з додаванням 10% дріжджового екстракту, 20% нормальної кінської сироватки (без консерванта) і 100ОД пеніциліну з розрахунку на 1см 3 середовища. Проводили три ПОСЛІДОВНІ пасажі. Посіви витримували при (37-38)°С 7 діб Вакцина не була контамінована бактеріальною, грибковою мікрофлорою і мікоплазмами. Приклад 4. Визначення нешкідливості. Для досліджень використовували 3 флакони з вакциною. Після розчинення їх об'єднували в одному стерильному флаконі, струшували і застосовували для досліджень. Вакцину вводили 10 білим мишам підшкірно по 0,2см3. Вакцина не викликала захворювання та загибель мишей за 10 діб спостереження, що підтверджує її нешкідливість. Приклад 5 Визначення імуногенності. Вакцину з 3-х флаконів (після розчинення) об'єднували в одному стерильному флаконі і вводили внутрішньом'язово в стегно п'яти морським свинкам в дозі 2см 3 Через 14 діб проводили повторну вакцинацію, а через 28 діб від тварин отримували сироватку крові Проби сироватки крові від кожної тварини в рівному співвідношенні об'єднували в одній ємності й досліджували в реакції нейтралізації з вірусом діареї ВРХ (штам "ВК-1В-1М") у пробірочних культурах клітин нирки теляти. Вакцину вважали такою, що вона пройшла контроль, якщо в сироватці крові вакцинованих морських свинок у реакції нейтралізації виявлено антитіла до вірусу ВД у титрах не нижче 1:16. Приклад 6. Динаміка титрів специфічних антитіл у телят на введення дослідних зразків живої вакцини проти Вірусної діареї та імуностимулятора представлена в таблиці. Процес профілактики вірусної діареї великої рогатої худоби забезпечить достатній імунний захист тварин. Таблиця Зразки вакцини з вірусу Імуностимулятор Телята (кільТитри антитіл в РН (Іодг) діареї штам "ВК-1В-1М" кість голів) 14 діб після другого лпс J до введення введення № доза (CMJ) доза (CM ) КІЛЬКІСТЬ ГОЛІВ 1 5 15 4,0±0 7,0±0 2 15 2 3,5±0,5 5,25±0,25 3 2 1 15 2,5±0,25 6,5±0,5 L 4 1 15 2,0 ±0,5 3,25±0,25 Контроль 5 15 2,5+0,25 2,5±0,25 Комп'ютерна верстка М Мацело Підписне тіл 3,0 1,75 4,0 1,25 Тираж 37 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Глазунова, 1, м. Київ - 42, 01601