Фітопрепарат “вітастим” для підвищення природної резистентності та імунокорекції організму тварин

Фітопрепарат для підвищення природної резистентності та імунокорекцм організму тварин, який містить водний екстракт листя і гілок дубу звичайного (Quercus robur), що одержаний автоклавуванням, який відрізняється тим, що додають екстракт деревної зелені (ОДНОЛІТНІ пагони) сосни лісової (Pmus silvestns), подрібнюють кожний вид сировини, заливають дистильованою водою у співвідношенні 1 5 (вага об'єм), фільтрати змішують у співвідношенні 1 1 (в перерахунку на суху речовину) Винахід, що передбачається, відноситься до ветеринарної медицини Значне поширення набули вторинні імунодефіцитні стани організму сільськогосподарських тварин, в тому числі птиці, що зумовлює розповсюдження інфекційних захворювань, спричинених умовно-патогенними бактеріями Серед останніх переважають ентеробактерм (сальмонели, ешерихм, цитробактер, протей) Для терапії сільськогосподарських тварин застосовують антимікробні препарати нітрофурани, сульфаніламіди, антибіотики тощо Але застосування їх обмежується, по-перше, шкідливим впливом на організм, зокрема мутагенною та тератогенною дією нітрофурани, в т ч фуразолідон, хлорамфенікол (левоміцетин), диметридазол, колхіцин, метронідазол та ш , по-друге, в птахівництві - напруженою технологічною схемою вакцинації проти вірусних інфекцій, яка передбачає виключення антимікробних препаратів за 3-5 діб до вакцинації і такий самий термін після вакцинації Для підвищення природної резистентності і терапії сільськогосподарських тварин застосовують також фітопрепарати, в тому числі екстракти дубу та хвої Кора Дубу звичайного або черешкового (Quercus robur) вміщує дубильні речовини (до 29%), флавоноїди (кверцетин та ш), галлову та еллагову кислоти (до 1,6%), флобафен, пентозани (14%), пектини, цукри, слиз, білок, крохмаль, вітаміни В-і, Вг, Вб, РР, С (Универсальная энциклопе дия лекарственных растений / Сост И Пустырский, В Прохоров - Мн Книжный дом, М Махаон, 2000 - 656с , ил - (Мир энциклопедий) В листях виявлені кверцетин, кверцетирин, дубильні речовини та пентозани Галеновим препаратам кори дубу притаманні в'яжучі, протизапальні та протигнилостні властивості Дубильні речовини (танін) зумовлюють головну дубильну дію У разі нанесення галенових препаратів дубу або таніну на рани чи слизові оболонки спостерігають взаємодію з білками, в наслідок чого утворюється захисна плівка, яка захищає тканини від місцевого подразнення Це гальмує процес запалення і зменшує біль Дубильні речовини денатурують плазматичні білки патогенних мікроорганізмів, що призводить до затримки їх розвитку або загибелі Кору молодих гілок дубу застосовують як в'яжуче у вигляді настою при гастритах та ентеритах, язві шлунку, шлункових кровотечах, колітах, шлунковокишкових захворюваннях (в т ч дизентерії, холері), захворюваннях печінки і селезінки Листя справляють в'яжучу, протизапальну і кровозупиняючу дію В ветеринарній медицині відвари з молодих гілок застосовують як в'яжучий і протизапальний засіб при диспепсіях, гастритах та ентеритах у сільськогосподарських тварин Хвоя Сосни лісової (Сосна обыкновенная, Pmus silvestns) вміщує аскорбінову кислоту (до 0,3%), каротин, вітаміни К та Вг, дубильні речовини (до 5%), крохмаль, ефірне масло (до 1,3%), алкалоїди, смолу (до 12%), флавоноїди - міріцит 1 00 ю 58722 рин, токсифолін, кемпферол (Универсальная энциклопедия лекарственных растений / Сост И Пустырский, В Прохоров - Мн Книжный дом, М Махаон, 2000 - 656с , ил - (Мир энциклопедий) Препаратам з хвої притаманні протимікробні, дезінфікуючі, відхаркувальні, сечогінні, антицинготні, болеугамовуючі властивості Водний настій та відвар хвої застосовують для профілактики і терапії ппо- та авітамінозу С, а відвар з пагонів (молодих верхівок) - при захворюваннях органів дихання Є бюстимулюючий засіб, який вміщує Юмг екстракту з гілок дубу, Юмг янтарної кислоти, 20мг шивиртушу, тобто цеоліту (RU, № 94036666, 1997 06 10, А61К35/78) Існує також спосіб приготування екстракту дубу для лікування сільськогосподарських тварин, який складається з екстракції подрібненого рослинного матеріалу киплячою водою і доведенням екстракту до випускної форми, котрий відрізняється тим, що, з метою підвищення протизапальної активності екстракту дубу, екстракт перед доведенням до випускної форми обробляють при температурі кипіння з хлорним залізом і фосфатним буфером, який складається з натрію фосфорнокислого двозаміщеного і калію фосфорнокислого однозаміщеного при масовому співвідношенні сухих речовин екстракту, хлорного заліза і фосфатного буферу 60 1 7,5 - 14 1 3,5 і співвідношенні натрію фосфорнокислого двозаміщеного і калію фосфорнокислого однозаміщеного в фосфатному буфері 10 1 - 2 5 1 (Бескровный A M , Буланкин А Л , Бибиков Ф А , Северин Н Ф , Кацеба М Т , Котляренко И П , Столяров В Д , Сукачева О А, Ковпак Л А "Способ получения экстракта дуба для лечения сельскохозяйственных животных", А с СССР, №1239920,1996 0100, А61К35/78) Відвари кори дубу готують шляхом кип'ятіння сировини, залитої в співвідношенні 1 5-1 10 водою, протягом ЗОхв , з наступним настоюванням протягом 10 хвилин або 2 годин при кімнатній температурі і проціджуванням (Универсальная энциклопедия лекарственных растений / Сост И Пустырский, В Прохоров - Мн Книжный дом, М Махаон, 2000 - 656с , ил - (Мир энциклопедий) Виготовлений відвар зберігають не більше двох діб у прохолодному МІСЦІ Це рішення може служити прототипом Недоліком відварів і настоїв з хвої сосни та кори і листя дубу є те, що вони повинні бути використані протягом двох діб Крім того, кожний з цих засобів використовують окремо В ветеринарній медицині використовують хвойне борошно - вітамінний концентрат для сільськогосподарських тварин, а також настій хвої Для приготування настою хвою подрібнюють на частинки розміром 2-Змм або пропускають через м'ясорубку, поміщають в емальований посуд і заливають перевареною водою (75-80 °С) із розрахунку 1 5, закривають кришкою і кип'ятять 25-30 хвилин, потім проціджують у свіжому вигляді і застосовують телятам по 25-ЗОсм3, ягнятам і поросятам - по 5-10см3 у суміші з теплою водою або молоком три рази на день протягом 3-4 днів Зберігають настій у темному прохолодному МІСЦІ не більше двох діб (Ю Томко Свіжа хвоя - джерело вітамінів - Ветеринарна медицина України 1997, №4 -С7-8) В основу винаходу, що передбачається поставлено задачу - розробити фітопрепарат, шляхом додавання водного екстракту деревної зеленини (ОДНОЛІТНІ пагони) Сосни лісової (Pinus silvestns) та листя і гілок Дубу звичайного (Quercus robur), щоб забезпечити підвищення природної резистентності організму тварин і імунокорегувальними властивостями при використанні препарату „Вітастим" Фітопрепарат „Вітастим" одержують шляхом автоклавування протягом 45хв під тиском 1,51,8атм і відфільтровані, змішують в співвідношенні 1 1 (в перерахунку на суху речовину) і висушують методом ліофілізації або розпилення (Приклад 1 Деревну зеленину (ОДНОЛІТНІ пагони) Сосни лісової (Pinus silvestns) подрібнюють, помішують у скляний чи емальований посуд, додають дистильовану воду у співвідношенні 1 4 1 5 і екстрагують шляхом автоклавування протягом 45хв під тиском 1,5 - 1,8атм , охолоджують до 80-90°С, екстракт зливають і фільтрують через ватно-марлевий фільтр або бельтінг-тканину Листя і дрібні гілки Дубу звичайного (Quercus robur) подрібнюють і одержують екстракт у такий же спосіб, як і з деревної зеленини Сосни лісової Екстракти змішують у співвідношенні 1 1 (в перерахунку на суху речовину) і висушують методом ліофілізації або розпилювання (при температурі не вище 60°С) Одержаний препарат використовують для підвищення природної резистентності організму і як імуностимулюючий засіб Для визначення вмісту сухої речовини в водних екстрактах по 10см кожного екстракту вміщують окремо в чашки для випарювання, попередньо виважені на аналітичних вагах, і висушують при температурі 45-60°С до постійної ваги Вагу сухої речовини обчислюють за формулою РЕ-Ро=Е, де РЕ - вага чашки з сухою речовиною з екстракту після висушування, г, Ро - вага чашки для випарювання без екстракту, г, Е - вага сухої речовини з екстракту, г Наприклад, вага чашки з сухою речовиною з екстракту деревної зеленини сосни становить 10,7846г, а вага чашки без екстракту - 10,7798г, тоді вага сухої речовини з екстракту деревної зеленини сосни становить 10,7846-10,7798=0,0048 (г), вага чашки з сухою речовиною з екстракту листя і дрібних гілок дубу становить 10,9143г, а вага чашки без екстракту - 10,9071г, тоді вага сухої речовини з екстракту листя і дрібних гілок дубу становить 10,9143-10,9071=0,0072 (г), для визначення співвідношення екстрактів складаємо пропорцію в 10см3 екстракту деревної зеленини сосни 0,0048г сухої речовини, в А см 3 екстракту деревної зеленини сосни 0,0072г сухої речовини, тоді А = (10-0,0072) 0,0048 = 15 (см 3 ) Тобто, для отримання в готовому препараті співвідношення екстрактів деревної зеленини сосни і листя та дрібних гілок дубу 1 1 в перерахунку на суху речовину необхідно перед висушуванням 58722 змішати екстракти з розрахунку на кожні 10см водного екстракту дубу - 15см 3 водного екстракту сосни, іншими словами, у співвідношенні ВІДПОВІДНО 2 З (об'єм об'єм) Приклад 2 Проведення досліджень антибактеріальних властивостей екстрактів з деревної зеленини сосни (далі - хвої сосни) і листя та дрібних гілок дубу (далі - листя дубу) щодо Staphylococcus aureus 209, Proteus mirabihs, Eschenchia coh, Citrobacter freundn, Salmonella ententidis in vitro В результаті встановлено, що екстракт з хвої сосни справляв бактеріостатичну дію при ВМІСТІ 5,0% як в м'ясо-пептонному бульйоні (МПБ), так і в м'ясо-пептонному агарі (МЛА) на всі досліджені види (мікроорганізмів (таблиця 1), в концентрації 0,3% і вище - на S aureus і Р mirabihs, в концентрації 1,0-2,5% і вище - на Е сом, в концентрації 2,5% і вище - на С freundn, в концентрації 1,5-2,5% і вище - на S ententidis активність сироватки крові, вміст білку були найбільшими в групах курчат, які отримували 1,52,Омг/кг живої ваги екстрактів соснової хвої і листя дубу (таблиці 2, 3, 4) Вміст гемоглобіну був в усіх дослідних групах вищим, ніж в контролі (таблиця 4), а швидкість осідання еритроцитів приблизно відповідала цьому показнику у контролі Приклад 4 Було сформовано чотири групи з двохдобових курчат по 15 голів у кожній Трьом групам протягом 18 діб задавали в об'ємі 1см 1-ій групі - по 4мг/кг живої ваги фітопрепарату (2мг екстракту соснової хвої + 2мг екстракту листя дубу), 2-ій групі - по Змг/кг ж в фітопрепарату (2мг екстракту соснової хвої + 1мг екстракту листя дубу), 3-ій групі - по Змг/кг ж в фітопрепарату (1мг екстракту соснової хвої + 2мг екстракту листя дубу) Курчата 4-ої групи були контрольними, їм замість фітопрепарату випоювали дистильовану воду в об'ємі 1см Екстракт з листя дубу стримував ріст всіх досліджених видів мікроорганізмів при додаванні в Дослідили збереження курчат у кожній групі, бактерицидну і лізоцимну активність сироватки крові, вміст гемоглобіну, КІЛЬКІСТЬ еритроцитів і лейкоцитів, швидкість осідання еритроцитів, вміст загального білку, альбумінів, а-, р-, у - глобулінів КІЛЬКОСТІ 5% як в МЛА, так і в МПБ (таблиця 2), в КІЛЬКОСТІ 0,3-1,0% і вище - стримував ріст S aureus, в КІЛЬКОСТІ 0,5-1,0% і вище - ріст Р mirabihs, в КІЛЬКОСТІ 1,5-5,0% - Е сом та S ententidis Бактеріостатична дія препарату "Вітастим" була більш вираженою, ніж бактеріостатична дія кожного з його компонентів окремо (таблиця 3) При додаванні в МЛА і МПБ препарат стримував ріст всіх досліджених видів мікроорганізмів вже в КІЛЬКОСТІ від 1,0% і вище, в КІЛЬКОСТІ від 0,05-0,2% і вище стримував ріст S aureus, P mirabihs, E coh та S ententidis, в КІЛЬКОСТІ від 0,05-0,5% і вище - ріст С freundu Приклад 3 Курчатам з двохдобового віку протягом 20 днів застосовували хвойне борошно в КІЛЬКОСТІ 0,5, 1,0 і 2,0% до корму, екстракти соснової хвої і листя дубу в КІЛЬКОСТІ 0,2-0,5, 0,8-1,0 і 1,5-2,Омг/кг живої ваги Контролем служили курчата, які не одержували зазначених препаратів Птиця, крім зазначених екстрактів і хвойного борошна, не одержувала ніяких антимікробних препаратів чи преміксів 3 п'ятидобового віку розпочався ВІДХІД ПТИЦІ При бактеріологічному дослідженні патологічного матеріалу від трупів курчат було встановлено, що причиною загибелі є сальмонельоз, спричинений Salmonella ententidis Результати щодо збереження, динаміки приросту живої маси, бактерицидної і лізоцимної активності сироватки крові, загального білку в сироватці крові, гемоглобіну і швидкості осідання еритроцитів наведені ВІДПОВІДНО в таблицях 1, 2, 3 і 4 Найвище збереження курчат на фоні захворювання на сальмонельоз відмічено в групі, яка отримувала по 1,5-2,Омг/кг живої ваги екстракту соснової хвої, - 90%, тобто на 40% вище, ніж у контролі (таблиця 1) Збереження 70% відмічено в групах курчат, яким згодовували 0,8-1,Омг/кг живої ваги екстракту соснової хвої та 2% хвойного борошна до корму, збереження 60% - в групах курчат, яким згодовували по 0,2-0,5мг/кгж в екстракту соснової хвої і 1,5-2,Омг/кг ж в екстракту з листя дубу та 0,5% хвойного борошна до корму Жива маса птиці, бактерицидна і лізоцимна в сироватці крові після застосування препаратів Наведені в таблицях 5-8 дані свідчать про те, що найкращі показники збереження, бактерицидної і лізоцимної активності, вмісту гемоглобіну, еритроцитів, лейкоцитів, у -глобулінів спостерігали в 1-ій групі, курчата якої отримували фітопрепарат в КІЛЬКОСТІ 4мг/кг живої ваги з співвідношенням екстрактів соснової хвої і листя дубу 1 1 Приблизно аналогічні показники відмічено в 2-ій групі, птиця якої отримувала фітопрепарат з розрахунку Змг/кг живої ваги (2мг екстракту соснової хвої + 1 мг екстракту листя дубу) Приклад 5 Було проведено визначення нешкідливості препарату (хронічної токсичності) Для цього було сформовано п'ять груп з 16-денних курчат за принципом аналогів по 5 голів у кожній Протягом 14 діб курчатам застосовували розчин "Вітастиму" в дистильованій воді в об'ємі 1 с м 3 на голову птиці 1-ої групи - одну дозу (4мг/кг живої ваги), птиці 2-ої групи - дві дози, птиці 3-ої групи п'ять доз, птиці 4-ої групи - 10 доз, птиці 5-ої групи (контроль) - випоювали дистильовану воду (по 1см 3 ) Вся птиця протягом досліду залишилася живою Одержані результати (таблиці 9, 10) свідчать про те, що застосування препарату позитивно впливало на приріст живої ваги, в рекомендованій дозі - на бактерицидну активність сироватки крові, в усіх дозах - на вміст у-глобулінів в сироватці крові В рекомендованій дозі (2мг/кг живої ваги) препарат корегував функціональну активність фабрицієвої бурси, стимулював роботу селезінки та тимусу, не справляв негативної дії на залозистий шлунок та кишечник Збільшення дози "Вітастиму" в два, п'ять і десять разів приводило до розвитку патологічних змін в залозистому шлунку та кишечнику (п'ять і десять доз), а також прискорювало розвиток процесів природної інволюції фабрицієвої бурси Супресивної дії на селезінку та тимус збільшені дози препарату не спричиняли 58722 8 Приклад 6 Було досліджено гостру токВ органах імунної системи курчат дослідних і сичність препарату "Вітастим" на курчатах і білих контрольної груп суттєвих пстоморфолопчних змін мишах Для цього було сформовано по чотири не виявлено При застосуванні 10 і 20 доз препагрупи 16-денних курчат і білих мишей масою 18рату відмічено послаблення ознак імуносупресм 20г за принципом аналогів по 10 голів тварин у селезінки, які мали місце в контрольній і 3-ій грукожній Препарат ввели одноразово в об'ємі 1см пах Не було відмічено в цілому проявів 1-ій групі тварин - по 10 доз, 2-ій групі тварин - по імуносупресм або імуностимуляцм тимусу у 20 доз, 3-ій групі тварин - по 40 доз, 4-ій групі (конпорівнянні з контролем при застосуванні препаратролю) ввели по 1 см дистильованої води Через ту в будь-якій КІЛЬКОСТІ З, 7 і 14 днів після введення препарату знекровТаким чином, однократне застосування "Вітаслювали по три тварини з кожної з груп і проводили тиму" в КІЛЬКОСТІ 10 доз не спричиняло негативного визначення показників природної резистентності впливу на функціональну активність досліджених курчат, а також маси тіла та органів, індексу орвнутрішніх органів, в той час як введення 20 і 40 ганів та гістологічне дослідження органів курчат та доз препарату призводило до морфофункцюнальмишей Препарат в усіх дозах (таблиця 6 1) позиних порушень в печінці і залозистому шлунку, але тивно впливав на приріст живої ваги, в КІЛЬКОСТІ 10 протягом 7-14 діб відбулися репаративні процеси, і 20 доз - на бактерицидну і лізоцимну (на 3-ій і 7внаслідок яких морфофункцюнальні зміни в печіний дні) активність сироватки крові, КІЛЬКІСТЬ уці і залозистому шлунку були цілком еліміновані глобулінів значно підвищувалась при застосуванні Однократне введення білим мишам 10-ти доз препарату у КІЛЬКОСТІ 10 доз через сім днів, а при "Вітастиму" не спричиняло вираженої негативної застосуванні у КІЛЬКОСТІ 20 і 40 доз - на 14 день На дії на організм і в деякій мірі стимулювало мор3-ій і 7-ий дні після застосування препарату в фофункцюнальну активність селезінки Через три КІЛЬКОСТІ 10, 20 і 40 доз спостерігали зниження дні після введення 20 і 40 доз препарату спостерігемоглобіну в крові гали патологічні зміни в печінці, але протягом наступних 7-14 діб відмічено деяку нормалізацію Через три доби після застосування "Вітастиму" морфофункцюнального стану органу Морфоне було відмічено морфофункцюнальних змін в функцюнальних змін у шлунку і кишечнику білих печінці в контрольній і в 1-ій групі курчат (10 доз), в мишей виявлено не було 2-ій (20 доз) і 3-ій (40 доз) групах курчат відмічені ВІДПОВІДНО незначні і виражені морфофункцюнаНа підставі одержаних результатів можна льні зміни стану печінки зробити висновок, що фітопрепарат "Вітастим" є практично нетоксичним (4 клас небезпеки за ГОСТ Аналогічні результати були одержані і при гі12 1 007-76) і при застосуванні в рекомендованій стологічному дослідженні залозистого шлунку дозі - 2мг/кг живої ваги - справляє позитивний після застосування препарату в КІЛЬКОСТІ 10 доз, як вплив на збереження і приріст живої ваги, природі в контролі, не відмічено порушення трубчастої ну резистентність організму (бактерицидну і лізоструктури залоз, десквамації епітелію слизової або цимну активність сироватки крові, вміст білку і уйого відторгнення, в 2-ій групі мало місце часткове глобулінів в сироватці крові, гемоглобіну в крові), відторгнення клітин головних залоз, часткова десякий перебільшує аналогічний вплив його складоквамація епітелію, ознаки пперсекрецм, в 3-ій групі вих, а також чинить певну імуностимулюючу дію і відмічено витончення стінок залоз слизової обоможе бути рекомендований для застосування у лонки шлунку, відторгнення клітин, місцями - руйветеринарній практиці як засіб для підвищення нування слизової оболонки, утворення кистозних природної резистентності і імунокорекцм організму порожнин, гіперемія слизової з дрібними крововиливами Таблиця 1 Антибактеріальні властивості екстракту з соснової хвої Вміст екстракту у середовиЩі, % Тест-культура, КУО, М±т (п=3) S aureus 209 МПБ МПА Р mirabihs МПБ МПА 40±8 48±3 24±18 52±12 67±26 156±18 Е coll МПБ С freundn МЛА МПБ МЛА 78±26 НЗР 13±8 1,5 1,0 91 ±30 НЗР 58±16 0,5 59±31 НЗР 94±23 115±26 0,4 129±42 НЗР 101±36 117±28 0,3 153±34 НЗР 138±17 164±21 0,2 12±4 170±53 156±39 НЗР 213±бЗ 16±7 0,1 34±13 20±8 282±47 202±54 НЗР 246±98 Контроль 168±53 278±62 402±85 Примітка КУО - колонії утворюючі одиниці, НЗР - напівзливний ріст, - - ріст відсутній 5,0 2,5 S ententidis МПБ МПА 103±31 139±12 167±43 96±32 205±66 104±20 268±72 132±16 303+95 156±38 368±137 203±49 391±67 274±98 419±172 58722 10 Таблиця 2 Антибаїсгеріальні властивості екстраісгу з листя дубу Тест-культура, КУО, М±т (п=3) S aureus 209 Р mirabihs Е coll С freundn S ententidis МПБ МПА МПБ МПА МПБ МПА МПБ МПА МПБ МПА 5,0 2,5 НЗР 102±28 105±63 19±6 23±12 НЗР 112+14 156±52 1,5 1,0 44±18 37±12 ЗР 125±23 190±23 53±20 0,5 24±6 23±12 62±27 54±28 ЗР 137±32 206±63 74±32 0,4 63±12 38±8 64±8 72±33 ЗР 252±4 2бЗ±38 116±56 116±18 0,3 71 ±10 42±9 98±16 ЗР 290±68 270±22 204±35 167±41 126±17 0,2 92±27 208+34 ЗР 302+71 276+58 231±54 18±3 49±10 102±20 201±60 0,1 120±44 24±6 66±21 109±19 215±73 214±45 ЗР 388±64 288±38 242±79 Контроль 168±53 278±62 402±85 419±172 156±18 Примітка КУО - колонії утворюючі одиниці, ЗР - зливний ріст, НЗР - напівзливний ріст, - - ріст відсутній Вміст екстрактуу середовищі, % Таблиця З Антибактеріальні властивості фітопрепарату вітастим Вміст екТест-культура, КУО, М ± т (п=3) стра ктуу S aureus 209 Р mirabihs Е coll С freundn середоМПБ МПА МПБ МПА МПБ МПА МПБ МПА вищі, % 5,0 2,5 1,5 1,0 0,5 5±2 0,4 11+4 0,3 15±6 0,2 22±3 112±16 0,1 285±39 88±25 27±7 0,05 356±48 49±17 113+16 93+44 37±10 0,01 468±32 325±28 63±20 192±35 64±12 18±6 122±31 19±5 Контроль 492±56 105±28 263±36 87±8 Примітка КУО - колонії утворюючі одиниці, - - ріст відсутній S ententidis МПБ МПА 126±32 213±26 281±20 117±46 303±18 212±38 453±61 Таблиця 4 Збереження птиці після застосування фітопрепаратів Група птиці Доза препарату Пало голів Хвойне борошно (в% до корму) 1 0,5 4 2 1,0 5 3 2,0 3 Екстракт соснової хвої (вмг на 1 кг живої маси) 4 0,2-0,5 4 5 0,8-1,0 3 6 1,5-2,0 1 Екстракт з листя дубу (вмг на 1 кг живої маси) 7 0,2-0,5 6 8 0,8-1,0 6 9 1,5-2,0 4 Контроль 5 Примітка - препарати не застосовували Збереження,% 60,0 50,0 70,0 60,0 70,0 90,0 40,0 40,0 60,0 50,0 58722 11 12 Таблиця 5 Динаміка приросту живої ваги курчат протягом і після застосування фітопрепаратів Жива вага птиці, г (M±m, n=5) Вік курчат, днів 5 10 15 Хвойне борошно (в% до корму) 1 0,5 44,4+2,5 46,9±1,9 68,7±5,4 2 1 42,1+2,5 46,2±2,2 69,7±3,9 3 2 43,2+2,3 45,2±3,2 64,5±4,7 Екстракт хвої (мг/кг живої ваги) 4 0,5 45,2±0,8 49,4±5,2 67,2±10,4 5 1 42,4±0,9 44,5±2,0 56,1±6,4 6 2 48,2±0,5 51,7±4,7 69,2±12,6 Екстракт листя дубу (мг/кг живої ваги) 7 0,5 39,7±1,2 43,8±5,0 59,4±11,2 8 1 38,0±0,5 41,1±4,3 59,0±5,8 9 2 48,4±1,6 50,2±1,8 69,0±3,8 Контроль 39,8+2,0 41,7±3,2 52,2±5,9 Примітка, - - препарати не застосовували Група птиці Доза препарату 20 73,9±4,9 87,4±7,4 86,2±20,8 82,6±12,3 86,8+9,4 96,5±11,5 68,8±1,9 85,4±5,7 108,7±8,6 45,6+2,8 Таблиця 6 Бактерицидна і лізоцимна активність сироватки крові курчат після застосування препаратів Група птиці Вихідний фон 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Контроль Примітка - недостатній, Бактерицидна активність Лізоцимна активність сироватки крові,% сироватки крові,% (М±т, п=5) (М±т, п=5) 23,0±10,4 26,54±8,9 Хвойне борошно (в% до корму) 0,5 24,17±2,7 39,08±4,5 1,0 24,95±1,0 31,35±8,6 2,0 23,71 ±2,2 38,53±4,7 Екстракт соснової хвої (вмг на 1 кг живої ваги) 0,2-0,5 28,90±2,5 39,08±4,5 0,8-1,0 37,97+0,4 31,35+8,6 1,5-2,0 45,81 ±Ю,9 38,53±4,7 Екстракт з листя дубу (вмг на 1 кг живої ваги) 0,2-0,5 26,34±2,8 36,53±8,3 0,8-1,0 25,91±1,7 39,74±7,7 1,5-2,0 30,22±3,7 47,32±16,1 17,30±2,4 29,92±2,1 - - препарати не застосовували, рівень імовірності вірогідності різни контрольною групами - низький - від задовільного до високого Доза препарату 13 14 58722 Таблиця 7 Вміст загального білку і гемоглобіну, швидкість осідання еритроцитів в крові курчат після застосування препаратів Групи птиці Доза препарату Загальний білок, г/дм3 ( М ± т , п=5) Гемоглобін, г/дм3 ( М ± т , п=5) 34,3±3,0 ШВИДКІСТЬ осідання 140,8±2,0 Вихідний фон еритроцитів, мм/годину ( М ± т , п=5) 2,8±0,2 Хвойне борошно (в% до корму) 35,0±1,6 228,2±11,0 34,9±1,8 250,6±20,0 34,8±1,1 212,3±10,0 Екстракт соснової хвої (мг/кг живої маси) 4 0,2-0,5 35,6±0,6 283,8±6,0 5 0,8-1,0 36,2±1,6 236,5±20,0 6 1,5-2,0 37,1±0,8 249,0±1,0 Екстракт листя дубу (мг/кг живої маси) 7 0,2-0,5 35,2±1,3 251,6±25,0 8 0,8-1,0 35,3±1,1 188,9±4,0 9 1,5-2,0 36,8±1,7 236,3±12,0 Контроль 23,0±3,0 142,6±27,0 Примітка - - препарати не застосовували 1 2 3 0,5 1 2 2,0±0,4 1,9±0,6 2,2±0,1 2,5+0,2 3,5±0,2 2,8±0,9 2,5±0,2 2,9±0,1 2,4±0,3 2,3±0,4 Таблиця 8 Динаміка збереження птиці протягом досліду Збереження курчат,% Група 1 2 3 4 (контроль) Примітка 1 2 3 4 Вік ПТИЦІ, ДНІВ 5 100 93,4 93,4 15 93,4 92,9 92,4 20 92,9 92,3 83,4 100 група група група група 10 100 93,4 92,9 86,7 84,6 81,8 доза 4мг/кг живої маси (2мг екстракту хвої + 2мг екстракту листя дубу), доза Змг/кг живої маси (2мг екстракту хвої + 1 мг екстракту листя дубу), доза Змг/кг живої маси (1 мг екстракту хвої + 2мг екстракту листя дубу), контроль замість препарату випоювали дистильовану воду Таблиця 9 Імунобіологічні показники реактивності організму курчат Показники Вихідний фон* М ± т (т=5) Норма Після застосування "Вітастиму", М ± т (п=5) Групи 1 2 3 4 Бактерицидна ак42,1±8,8 58-71 72,6±2,7 66,4±1,9 60,1±2,6 58,2±2,7 тивність сироватки крові,% Лізоцимна активність сироватки 49,9±5,6 45-69 51,3±3,7 43,3±1,1 70,4+3,4 65,1+4,8 крові,% Примітка рівень імовірності вірогідності різниці між дослідною і контрольною групами - недостатній, \^\ - низький, [ ^ - від задовільного до високого * - до застосування препарату, 1 група - доза 4мг/кг живої ваги (2мг екстракту хвої + 2мг екстракту листя дубу), 2 група - доза Змг/кг живої ваги (2мг екстракту хвої + 1 мг екстракту листя дубу), 3 група - доза Змг/кг живої ваги (1 мг екстракту хвої + 2мг екстракту листя дубу), 4 група - контроль замість препарату випоювали дистильовану воду 15 16 58722 Таблиця 10 Гематологічні показники реактивності організму курчат Показники Вихідний фон*, М±т (п=5) Після застосування "Вітастиму", М±т (п=5) Норма Групи ПТИЦІ 1 2 3 Гемоглобін, 72,0±0,9 112,0 221,6±2,5 226,0±3,4 210,0±2,8 г/дм3 ШОЕ, 2,3±0,1 2-3 3,2±0,31 3,6±0,2 3,8±0,37 мм/час Еритроцити, 3,92±0,2 3,0-4,0 5,2±0,12 5,0±0,14 4,8±0,18 млн/мм3 Лейкоцити, 40,5±2,6 20,0-40,0 42,5±1,1 44,1±0,7 44,5±2,1 тис/мм3 Примітка рівень імовірності вірогідності різниці між дослідною і контрольною групами - недостатній, Q - низький, Q ] - від задовільного до високого * - до застосування препарату, 1 група - доза 4мг/кг живої ваги (2мг екстракту хвої + 2мг екстракту листя дубу), 2 група - доза Змг/кг живої ваги (2мг екстракту хвої + 1 мг екстракту листя дубу), 3 група - доза Змг/кг живої ваги (1 мг екстракту хвої + 2мг екстракту листя дубу), 4 група - контроль замість препарату випоювали дистильовану воду БІОХІМІЧНІ показники реактивності організму курчат Показники Вихідний фон*, М±т (п=5) 4 103,0±1,5 4,1±0,19 3,1±0,33 49,4±1,3 Таблиця 11 Після застосування "Вітастиму", М±т (п=5) Норма Групи ПТИЦІ 1 2 3 4 Загальний білок, 22,6±2,0 35,0-46,0 31,7±1,0 46,8+3,0 42,4+2,0 35,8+1,9 г/дм3 Альбуміни,% 58,42±3,7 37,0-45,6 14,52±0,5 14,32+1,5 6,37+0,5 23,75+1,1 а - глобуліни,% 18,14±1,4 14,6-18,4 9,19±1,2 22,08±0,9 34,38±2,9 4,48+0,3 р - глобуліни,% 16,81+1,1 13,0-16,0 7,91 ±0,8 7,55±1,0 15,62+1,2 11,67±0,7 у - глобуліни,% 6,63±4,8 26,2-33,0 68,58±2,2 81,6±1,7 38,55±2,4 39,43±2,7 Білковий коефіцієнт 1,4±0,15 0,9-1,4 0,16±0,04 0,1 ±0,02 0,31 ±0,04 0,17±2,0 Примітка рівень імовірності вірогідності різниці між дослідною і контрольною групами - недостатній, \^\ - низький, [ ^ j - від задовільного до високого * - до застосування препарату, 1 група - доза 4мг/кг живої ваги (2мг екстракту хвої + 2мг екстракту листя дубу), 2 група - доза Змг/кг живої ваги (2мг екстракту хвої + 1 мг екстракту листя дубу), 3 група - доза Змг/кг живої ваги (1 мг екстракту хвої + 2мг екстракту листя дубу), 4 група - контроль замість препарату випоювали дистильовану воду Таблиця 12 Показники природної резистентності курчат при визначенні нешкідливості (хронічної токсичності) вітастиму після 14 добового застосування , М±т (п=5) Групи птиці (КІЛЬКІСТЬ ДОЗ 1(1)* II (2)* III (5)* Жива маса, г 226,6±7,78 265,32±8,95 296,96±6,88 Бактерицидна активність% 80,11+7,71 21,26±3,00 19,16+4,05 Лізоцимна активність,% 28,47±3,45 47,28±3,02 48,34±1,11 Загальний білок, г/дм'5 35,7±1,4 37,5±0,9 35,7±0,4 Альбуміни** 11,17±3,41 16,33±4,00 22,68±9,21 а - глобуліни** 37,31±6,15 25,92±7,12 23,25±9,15 р - глобуліни** 9,27±2,73 8,80±0,88 15,76±5,91 у - глобуліни** 42,25±6,5 48,95±6,55 38,31+5,29 Гемоглобін, г/дм'5 113,0±1,4 160,0±3,3 118,0±1,8 Еритроцити, млн/мм'5 6,25±0,29 6,9±0,77 6,51 ±0,63 0* - КІЛЬКІСТЬ введених доз препарату, Примітка ** - у відносних відсотках, V група - контроль замість "Вітастиму" птиці вводили дистильовану Показники препарату) IV (10)* 258,16±6,35 21,21 ±6,21 34,29±8,54 37,0±0,7 32,57±8,58 21,98±5,53 12,74±3,80 32,71 ±7,05 167,0±2,1 7,19±0,56 воду V 222,5±20,52 35,53+10,8 50,75±6,47 33,0±0,9 34,36±7,19 25,48±7,47 15,88±2,39 24,28±1,48 223,0±8,9 7,46±0,48 58722 17 18 Таблиця 13 Маса тіла та органів курчат у 32-денному ВІЦІ при визначенні нешкідливості препарату (хронічної токсичності) та індекс органів, М±т (п=5) Показники Маса тіла, г Маса печінки, г Індекс печінки Маса селезінки, г Індекс селезінки Масатимусу, г Індекс тимусу Маса бурси, г Індекс бурси Групи птиці, КІЛЬКІСТЬ доз препарату II (5 доз) III (10 доз) IV (2 дози) 296,96±6,88 258,16±16,35 256,32±8,95 10,02±0,45 9,39±0,38 8,90±4,60 33,72±1,10 37,15±3,52 34,74±1,29 1,04±0,07 0,97±0,11 0,89±0,07 3,45±0,16 3,93±0,69 3,47±0,21 2,37±0,2 1,73±0,04 1,55±0,10 8,00±2,61 6,80±0,46 6,03±0,28 0,67±0,04 0,65±0,05 0,53±0,01 2,28±0,16 2,43±0,31 2,10±0,11 1(1 доза)* 226,6±7,78 8,52±0,36 37,70±1,68 0,91 ±0,16 3,97±0,66 1,35±0,13 6,03±0,78 0,68±0,08 2,98±0,31 V (вода) 222,5±20,52 7,61 ±0,34 37,37±2,34 0,77±0,13 3,41 ±0,34 1,29±0,19 5,74±0,58 0,64±0,14 2,79±0,46 Таблиця 14 Показники природної резистентності курчат при вивченні гострої токсичності "Вітастиму", М±гл (п=3) Групи птиці Показники Жива маса, г 3 153,60± 8,36 55,10± 2,29 50,35± 8,43 5,00± 0,73 1 (10)" 7 187,60± 6,08 31,00± 13,37 65,62± 1,37 6,53± 0,45 14 308,42± 29,57 18,86+ 2,89 34,25± 13,14 5,36± 0,27 3 157,90± 6,72 84,99± 6,20 41,87± 8,52 5,91± 3,12 2 (20)" 7 199,42± 11,40 35,87± 12,78 65,97± 1,42 6,64± 2,14 Бактерицидна актив ність,% Лізоцимна актив ність,% Еритроцити, млн/мм Гемоглобін, 69,2±1,2 70,7±13,7 90,0±2,1 65,1±4,8 70,3±9,6 г/дм Загальний білок 28,0±1,5 30,6±1,9 32,1±1,2 30,6±0,0 35,7±2,3 г/дм 53,01± 5,84± Альбуміни" 9,94±3,76 46,39±8,97 7,54±3,07 4,41 2,76 а - гло13,85± 30,04± 23,71± 27,97± 6,33±1,55 4,41 21,25 9,78 14,46 буліни" 14 291,37± 8,26 38,60± 16,88 46,20± 7,00 6,34± 0,54 3 (40)" 3 7 150,92± 194,70± 4,40 5,20 31,03± 22,20± 5,52 8,43 26,84± 60,72± 3,31 1,01 5,17± 6,31± 1,02 2,03 14 270,90± 7,10 18,07± 3,85 51,36± 9,20 6,05± 0,82 4 (вода дистильована) 3 7 14 153,40± 196,90± 265,01± 5,60 5,76 17,20 30,87± 38,8± 15,79± 5,57 17,38 2,75 23,38± 58,83± 49,52± 4,01 1,24 7,34 5,66± 7,78± 6,44± 2,03 2,51 0,43 83,0±0,3 77,1 ±2,2 80,3±8,9 87,0±0,9 80,7±7,2 97,3±22,4 90,0+1,0 33,5±1,6 33,5±2,5 36,1 ±0,0 32,4±1,2 31,0±0,0 36,1 ±0,0 33,5±0,5 34,81± 3,91 28,28± 4,89 15,36± 11,11 7,16±3,28 8,94±1,50 34,95± 18,67 24,61± 5,78 32,10± 6,89 12,21± 3,91 10,79± 6,01 7,70±3,13 9,02±2,44 Р - глобуліни" 7,15± 3,00 10,95± 4,32 33,02± 0,17 6,13±0,80 18,17± 14,39 7,08±2,20 15,98± 1,69 32,8± 16,79 30,93± 16,03 у - гло 25,99± 4,07 72,78± 2,58 31,1± 9,54 23,77± 4,07 46,32± 15,46 49,03±16,8 27,31± 11,45 44,20± 16,48 52,35± 12,72 буліни" Примітка 10,93± 2,10 25,98± 2,69 9,77±4,24 56,24±4,47 26,06± 16,79 6,39± 2,23 48,81± 14,16 30,21+6,54 0 - КІЛЬКІСТЬ введених доз препарату, 3, 7, 14 - дні дослідження показників після застосування "Вітастиму" " - білкові фракції в таблиці представлені у відносних відсотках ТаВлиця 15 Маса тіла та органів індекс органів при визначенні гострої токсичності фітопрепарату Вітастим М±гп (п=3) І (10 доз) 3 (21) Маса г 153 6±8 4 II (20 доз) І Показники 7 (25) 14 (32) 3 (21) 7 (25) 187 62±6 08 30В42±29 5 7 157 9±6 7 199 42±11 Групи птиці(доза препа рату) III (40 доз) І ВідОїр матеріалу дн * 14 3 7 (32) (21) (25) 291 37±8 2 150 9±4 4 Печінка г 4 Э7±0 54 6 35±0 07 13 50±3 24 5 32±0 27 6 71 ±0 45 9 77±0 24 5 02±0 02 Індекс печінки 32 17±1 71 33 90±1 23 45 49±13 9 33 76±1 56 33 60±0 62 33 53±0 13 33 30±0 63 Селезінка г 0 В2±0 14 0 45±0 04 0 90±0 07 0 67±0 07 0 60±0 04 0 92±0 07 0 47±0 04 Індекс селезінки 5 30±0 7Э 2 40±0 24 2 94±0 29 4 23±0 29 3 83±0 85 3 15±0 19 313±0 18 Бурса г 1 05±0 17 0 49±0 01 0 49±0 03 0 96±0 21 0 50±0 01 0 73±0 13 0 96±0 1 Індекс Оурси 5 ЭЗ±0 26 2 63±0 54 1 60±0 08 5 38±0 67 2 54 ±0 12 2 52±0 50 6 35±0 57 Тимус г 0 91 ±0 03 1 12±0 16 1 95±0 23 1 04±0 09 1 11 ±0 11 1 68±0 26 0 92±0 16 Індекс тимусу 6 30±0 31 5 94±0 75 6 36±0 57 6 55±0 42 5 56±0 26 5 74±0 73 6 11±1 08 термін відбору матеріалу для Г СТОЛОГІЧНОГО дослідження після застосування Вітастиму (дні; Примітка (21) (25) (32) вік курчат на день відОору матеріалу 194 7±5 2 7 34±0 47 37 62±1 70 0 77±0 08 3 92±0 ЗО 0 88±0 09 4 53±0 46 1 10±0 08 5 22±0 07 IV (вода) І 14 (32) 3 (21) 7 (25) 14 (32) 270 9±7 1 153 4±5 6 196 9±5 76 265 0 Ш 7 2 6 77±0 37 34 34±1 27 0 81 ±0 06 4 14±0 37 0 78±0 09 3 99±0 57 1 31 ±0 36 6 54±1 67 9 96±0 5 37 66±0 59 0 82±0 08 3 07±0 16 0 48±0 05 1 80±0 10 2 17±0 4 8 20±1 37 8 83±0 5 4 59±0 41 32 75±2 89 29 86±1 93 0 89±0 07 0 50±0 04 3 29±0 32 3 26±0 23 0 49±0 03 0 99±0 03 1 83±0 15 6 44±0 07 1 87±0 24 0 95±0 13 6 89±0 75 6 22±0 76 19 Комп'ютерна верстка Л Ціхановська 58722 20 Підписано до друку 05 09 2003 Тираж 39 при м Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна