Екстракт цілісного насіння видів moringa та його застосування у косметичній та/або дерматологічній композиції

Реферат: Винахід стосується екстракту цілісного насіння видів Moringa sp., що містить олію (включаючи тригліцериди, жирні кислоти та полярні ліпіди) та поліфеноли, та його застосування у косметичних та/або дерматологічних композиціях. UA 108850 C2 (12) UA 108850 C2 UA 108850 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Даний винахід стосується екстракту цілісних зерен видів Moringa sp., що містить олію (включаючи тригліцериди, жирні кислоти, та полярні ліпіди) та поліфеноли, та його застосування у косметичних та/або дерматологічних композиціях. Морінга є невеликим деревом, що первісне зростало в Індії, яке культивують по всьому світу, завдяки тому, що воно акліматизувалося у багатьох середовищах, воно є дуже популярним. Існує 13 видів Морінга, що належать до сімейства Moringaceae, найбільш відомим є М. oleifera (синонім: Морінга маслична, Moringa pterygosperma). Moringa oleifera - це невелике дерево, що має від 4 до 8 метрів заввишки, в якому відкрита крона розкривається як парасолька. Листя осипається, довжиною від 30 до 70 см, квіти є білими та дуже ароматними, плоди - лінійні, подовжені капсули, трикутні, шкіряні та підвішені, довжина їх досягає 30-40 см. Насіння являють собою закруглені тригони, довжиною 1,2 см та шириною 1 см, з трьома мембранними лопатями, що виходять с насіння та мають довжину 2 см. Дике або культивоване у тропічному, вологому чи дуже сухому кліматі дерево може вижити за екстремальних умов та зростати дуже швидко. Дуже глибока коренева система дозволяє дереву зростати без води протягом декількох місяців. Воно має дуже велику кількість народних назв, включаючи масличне (бен) дерево, бегенове дерево, neverdie, анамамбо, хронове дерево, касія олександрійська та також дерево, що ніколи не вмирає, чи "чудо-дерево". Дійсно, як відомо в аюрведичній медицині, воно лікує 300 хвороб та додатково має дуже значну харчову цінність. Плоди вживають у їжу вареними, листя споживають як овочі та вони мають таку харчову цінність, що за їх допомогою коригують порушення харчування у деяких країнах. Їстівну олію, збагачену олеїновою кислотою, одержують з насіння, яке також застосовують як флокулянти для дезінфекції води. Олію одержують стискуванням або екстрагуванням гексаном насіння, в якого було видалено оболонку. Для застосування властивостей флокулянту, макуху олійного насіння відновлюють після пресування. Насіння можна вживати в їжу як боби, доки вони ще зелені. Дозріле насіння, містить приблизно 40 % олії. Олія з Moringa sp. є високоякісною кулінарною олією (подібною до оливкової олії), також застосовують у парфумерії, для виробляння мила або як лампову олію (вона дуже стійка до окислення). У традиційній медицині, олію застосовують у компресах для полегшення болю протягом нападів подагри чи ревматизму (The Indian Materia Medica, pp 811-816). При пероральному застосуванні, насіння застосовують як жарознижуючий засіб (Hukkeri et al., Indian J. Pharm. Sci. (2006) 68, pp.124-126). Олію з насіння, одержану стискуванням або тим же простим неполярним екстрагуванням (зокрема, з використанням гексану), широко використовують у косметології через її живильні властивості, які спричинені тим, що вона містить тригліцериди. Застосування водного екстракту насіння у косметології описане: пептиди та білки, що їх містить, мають властивості запобігати утворенню зморшок та очищаючі властивості: з насіння спочатку знімають лушпиння та знежирюють (патенти США № 6 500 470 та US 2006/0275247). Водні та знежирені білкові фракції, екстраговані з цілісного насіння видів Moringa чи з насіння видів Moringa, з якого було знято лушпиння, мають зволожуючий, відновлюючий вплив на шкіру та попереджують утворення зморшок (патент ЕР 1 064 008). Вказана білкова фракція насіння може бути охарактеризована як "поляризована ". Відповідно до літературних даних, насіння складається зі стеринів (камепстерин, стигмастерин, р-ситостерин, А5-авенастерин, холестерин), жирних кислот (СІ8:1-олеїнова- 6876 %, С16:0 6-7,8 %, С18:0 4-7,6 %, С20:0 2,8-4 % та С22:0 5-6,7 %), білків (26-32 %), волокон, токоферолу (α, γ, δ: відповідно 134, 93, та 48 мг/кг олії"). Насіння також містить глюкозінати, включаючи 4-(a-L-рамнопіранозілокси)бензилглюкозинат. Також було описано, що листя та насіння Moringa sp. містить деякі цитокініни, такі, як зеатин, дигідрозеатин та ізопентиладенин (патент США № 2006/0222682). Заявник продемонстрував застосування конкретного екстракту цілісного насіння видів Moringa sp, що містить олію (включаючи тригліцериди, жирні кислоти, та полярні ліпіди) та поліфеноли як активну діючу речовину у косметичних та/або дерматологічних композиціях. Таким чином, об'єктом даного винаходу є екстракт цілісного насіння видів Moringa sp., що містить олію (включаючи тригліцериди, жирні кислоти, та полярні ліпіди) та полі феноли. У контексті даного винаходу, "цілісне насіння" необхідно розуміти як насіння, оболонка якого не має бути видалена. Екстракт цілісного насіння видів Moringa sp. відрізняється тим, що містить (% за масою по відношенню до маси сухого екстракту): Олію від 5 % до 50 % включаючи (і) від 2 % до 10 % тригліцеридів та жирних кислот та (іі) від 1 UA 108850 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5 % до 15 % полярних ліпідів; - при цьому загальний вміст полі фенолів дорівнює від 0,01 % до 5 % (виражених як грами пірогалолу на 100 грам сухого екстракту). Відповідно до характеристики даного винаходу, вказаний екстракт має вміст олії, що складає від 25 % до 40 % (% за масою по відношенню до маси сухого екстракту). Відповідно до другої характеристики даного винаходу, види Moringa являють собою, переважно, Moringa oleifera або Moringa drouhardii. Вказаний екстракт видів Moringa sp. відповідно до даного винаходу, для якого були продемонстровані косметичні та дерматологічні валоризації, одержують з цілісного насіння видів Moringa sp., переважно висушеного, подрібненого, яке потім піддають щонайменше одній екстракції помірно полярним розчинником. У контексті даного винаходу, термін "помірно полярний розчинник" має бути зрозумілий як розчинник, вибраний з групи, що складається зі спирту СІ -С41, ацетону, суміші вода/спирт, та суміші вода/ацетон, які використовують окремо чи у комбінації. Переважно, це буде суміш етанол/вода. Переважно, ця суміш етанол/вода буде охарактеризована різними співвідношеннями етанол/вода від 9/1 до 7/3 (об./об.). Навіть більш переважно, помірно полярним розчинником є суміш етанол/вода 9/1 або 3/1 (об./об.). Екстрагування проводять при перемішуванні чи за статичних умов, зі зворотною відгонкою та при нормальній температурі, при співвідношенні розчинника об'єкт \об'єм, що може варіювати від 1/5 до 1/20 протягом від 30 хвилин до 48 годин. Екстрагування може бути проведено повторно 2 чи 3 рази. Віджими потім відділяють від екстракту шляхом центрифугування або фільтрування та розчин може бути більшою чи меншою мірою концентрованим, з одержанням сухого екстракту з виходом від 5 % до 10 %. Одержаний екстракт не є дуже гомогенним, носій може бути доданий протягом стадії сушіння у масових співвідношеннях відносно екстрагованого сухого залишку, що можуть варіювати від 1 % до 75 %. Носієм може бути мальтодекстрин, лактоза, кремнезем чи будь-якій інший косметологічне прийнятний носій, що солюбілізує екстракт, такий, як, наприклад, пропіленгліколь / етоксильований олеїновий спирт у різних співвідношеннях. Одержаний екстракт Moringa sp. відрізняється вмістом олії (включаючи тригліцериди, жирні кислоти та полярні ліпіди) та поліфенолів. Інший об'єкт даного винаходу відноситься до такого екстракту видів Moringa sp., що застосовується як активна діюча речовина проти старіння. Переважно, вказаний екстракт адаптовано до боротьби з усіма ознаками старіння шкіри у людей, що мають зрілу шкіру. У контексті даного винаходу, термін "зріла шкіра" має бути зрозумілий як шкіра людини, вік якої умовно перевищує 55 років, та переважно перевищує 60 років. Ознаки старіння шкіри відрізняються, зокрема, втратою твердості та/або еластичності та/або тонусу та/або пластичності шкіри та наявністю зморшок та тонких зморшок. Об'єктом даного винаходу є, таким чином, запровадження нового активного інгредієнту, здатного до забезпечення одночасного захисту, зволоження та живлення епідермісу/зрілої шкіри, та, внаслідок цього, забезпечення гладкості шкіри, запобіганню її провисання, та реструктуризації шкіри. У різних типах тестів Заявник оцінив як глобальну дію проти старіння екстрактів Moringa sp. відповідно до даного винаходу. Було показано, що такий новий екстракт має одночасно різноманітні бажані дії, а саме: - антиоксидантну, протирадикальну дію для обмеження процесу окислення, пов'язаного з внутрішнім та зовнішнім старінням; - вплив на відновлення бар'єрної функції шкіри (білкову та ліпідну структуру епідермісу), що змінюється з віком: застосування вказаного екстракту надає можливість обмежити зневоднення шкіри та таким чином захистити шкіру; - вплив на позаклітинний матрикс для підвищення механічних властивостей зрілої шкіри (твердість, еластичність, тонус). Екстракт відповідно до даного винаходу сприяє зволоженню, гладкості, запобігає провисанню та сприяє реструктуризації шкіри. Екстракт відповідно до даного винаходу, таким чином, надає можливість зробити шкіру красивою та надати їй рівномірний тонус. Інший об'єкт даного винаходу відноситься до застосування такого екстракту, як визначено у цій заявці, для підсилення та відновлення бар'єрної функції шкіри. У контексті даного винаходу, термін "підсилює бар'єрну функцію шкіри" означає покращення бар'єрної функції шкіри. Однією з фундаментальних функцій шкіри є забезпечення бар'єру між організмом та 2 UA 108850 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 оточуючим середовищем, що протидіє, в одному напрямку, проникненню в епідерміс грибів, бактерій та алергенів оточуючого середовища (« ззовні всередину ») та, в іншому напрямі, втраті води (« зсередини назовні »). Епідерміс являє собою розділений на велику кількість шарів епітелій екстодермального походження, що постійно поновлюється. Декілька шарів різної морфологічної природи та клітинні композиції можуть бути розрізнені, зсередини назовні: базальний шар, клітинний шар, кератиноцити якого мають дуже високу проліфераційну здатність, що дозволяє ауто поновлення епідермісу, надбазальні шари (гранулярні, шиловидні шари), та, нарешті, рогові шари (Stratum Corneum, РШ). Ці стадії відповідають все більш розвиненим стадіям диференціації кератиноцитів. Кератиноцити базального шару втрачають їх проліфераційну здатність як тільки вони розпочинають процес міграції до поверхні епідермісу протягом якого кератиноцити експресують програму диференціації, що призводить до ороговіння, процесу запрограмованої смерті клітин. Бар'єрну функцію шкіри спочатку виконує роговий шар, тверда та герметична зборка, що виконана з двох відділень: - міжкорнеоцитарний цемент, збагачений ліпідами: ліпіди, організовані у пластини та ковалентно зв'язані з клітинами, обмежує проникнення молекул через роговий шар; - шари ороговілих, мертвих клітин, з яких видалено органіти (корнеоцити), що відповідають останній стадії кератиноцитарної диференціації. Цілісність позаклітинного ліпідного цементу, також як і усіх клітинних елементів рогового шару, та баланс між проліферацією та кератиноцитарною диференціацією відповідають за збереження функції функціонального епідермального бар'єра. Пошкодження бар'єрної функції, хронічне чи гостре, надає організму чутливості до зовнішнього стресу та до зневоднення. Покращення бар'єрної функції, є, зокрема, визначеним для випадків коли бар'єрна функція шкіри змінена та має бути зміцнена знов. Це відбувається у певній кількості фізіологічних станів, в залежності від часу (старіння шкіри), або у зв'язку із гормональним контекстом чи стресом. Швидкість цього відновлення, що дозволяє повернути гомеостаз, уповільнена. Також функція шкірного бар'єру є зміненою у більшості найрозповсюдженіших патологій шкіри у популяції, що часто супроводжена запальним компонентом (сухістю шкіри). Покращення бар'єрної функції може бути також рекомендованим, коли вихідна функція шкіри має бути консолідована, зокрема для забезпечення кращого опору організму зовнішньому стресу, якому він може бути підданий, зокрема, з оточуючого середовища (ультрафіолетове опромінювання, рівень вологи, зовнішня температура, забруднення, опіки). Бар'єрна функція шкіри включає усі механізми природного захисту від стресу, якому піддають шкіру. Істотний елемент, що має цю функцію, розташований на найбільш поверхневій частині епідермісу, на ділянці рогового шару, що має назву stratum corneum. У різних тестах було продемонстровано, що рекомендований екстракт, переважно впливає на відновлення ліпідної структури та білкової структури епідермісу. Застосування екстракту відповідно до даного винаходу є особливо ефективним для підсилення та відновлення бар'єрної функції шкіри. Інший об'єкт даного винаходу відноситься до косметичної та/або дерматологічної композиції, що містить, як активну діючу речовину, екстракт цілісного насіння видів Moringa sp. за даним винаходом та щонайменше один косметологічно та/або дерматологічно прийнятний ексципієнт. Вказана косметична та/або дерматологічна композиція відповідно до даного винаходу містить кількість сухого екстракту цілісного насіння Moringa sp., що складає від 0,1 грамів до 5 грамів на 100 грамів вказаної композиції. Переважно, вказана кількість екстракту видів Moringa sp. складає від 0,25 грамів до 1 граму на 100 грамів косметичної та/або дерматологічної композиції. Більш конкретно, даний винахід відноситься до косметичної композиції проти старіння. Переважно, вказана косметична композиція адаптована для боротьби з усіма ознаками старіння шкіри для людей, які мають зрілу шкіру. Косметична композиція проти старіння відповідно до даного винаходу може додатково містити одну чи декілька активних діючих речовин, таких, як активні інгредієнти, адаптовані для захисту від сонця та/або активні інгредієнти, адаптовані для депігментації шкіри. Активні інгредієнти, адаптовані для захисту від дії сонця додатково вибирають серед синтезованих хімічно молекул, відомих через їх дію проти УФ-опромінювання типу А, дію проти УФ-опромінювання типу В, таких, як октокрилен та/або діоктил бутамідотріазон та/або бісетилгексилоксифенил метоксифенілтріазин. Активними інгредієнтами, адаптованими для депігментації шкіри, для освітлення та 3 UA 108850 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 однорідності шкіри, можуть бути, додатково, ніациамід, вітамін С або його похідні. Косметологічне прийнятний ексципієнт з урахуванням одержання косметичної композиції проти старіння вибрано таким чином, щоб дозволити місцеве чи пероральне введення. Переважно, місцеву форму вибирають з групи, що складається з молока, вершків, бальзаму, олії, лосьйону, гелю, гелю, що спінюється, помади, спрію та інш. Переважно, пероральну форму вибирають з групи, що складається з таблеток, капсул, пастилок, порошку, гранул, розчинів чи пероральних суспензій. Більш конкретно, даний винахід також відноситься до косметичної та/або дерматологічної композиції, адаптованої для зміцнення та відновлення бар'єрної функції шкіри. Косметологічно та/або дерматологічне прийнятний ексципієнт з урахуванням одержання косметичної та/або дерматологічної композиції, що зміцнює та відновлює бар'єрну функцію шкіри, вибирають таким чином, щоб дозволити місцеве введення. Переважно, місцеву форму вибирають з групи, що складається з молока, вершків, бальзаму, олії, лосьйону, гелю, гелю, що спінюється, помади, спрею, та інш. Інший об'єкт даного винаходу відноситься до косметичного способу боротьби з усіма ознаками старіння шкіри для людей, які мають зрілу шкіру, що відрізняється тим, що він включає застосування, при місцевому чи пероральному введенні, екстракту цілісного насіння видів Moringa sp. відповідно до даного винаходу. Препарати та композиції, що наведені нижче, представлені як не обмежуючі приклади. ПРИКЛАДИ ОДЕРЖАННЯ РОСЛИННОГО ЕКСТРАКТУ Приклад 1 2,5 кг цілісного насіння Moringa oleifera, висушеного та подрібненого, екстрагували у 17,5 літрах етанолу 90 (співвідношення етанол /вода = 9/1) шляхом двох проти точних екстрагувань при 80 °C. Після охолоджування середовища при 50 °C, екстрагований розчин відновлювали шляхом розділяння твердої речовини / рідини. Пробу висушували, що дозволяло одержати 243 грамів екстракту. Цей екстракт відрізняється вмістом олії, що становить 36 %, включаючи (і) 10 % тригліцеридів та жирних кислот та (іі) 10 % полярних ліпідів, та вмістом загальних полі фенолів, що становить 0,02 % (виражених як пірогалол на 100 грамів сухого екстракту). Приклад 2 20 г цілісного насіння Moringa oleifera, висушеного та подрібненого, екстрагували при кип'ятінні зі зворотним холодильником у 100 мл суміші етанол/вода 75:25 протягом 1 години. Екстрагований розчин відновлювали шляхом розділяння твердої речовини / рідини та висушували на роторному випарнику при 50 °C. 1,66 грамів одержаного таким чином екстракту у вигляді бурої пасти титрували при 5 % олії та 0,68 % загальних полі фенолів, виражених як пірогалол. Приклад 3 20 г цілісного насіння Moringa drouhardii, висушеного та подрібненого, екстрагували при кип'ятінні зі зворотним холодильником у 200 мл суміші етанол/вода 90:10 протягом 1 години. Екстрагований розчин відновлювали шляхом розділяння твердої речовини / рідини та висушували на роторному випарнику при 50 °C. 1,29 грамів одержаного таким чином екстракту у вигляді жовто-бурої пасти титрували при 35 % олії (тригліцериди, жирні кислоти, та полярні ліпіди) та 1,3 % загальних поліфенолів, виражених як пірогалол. 4 UA 108850 C2 ПРИКЛАДИ КОСМЕТИЧНИХ КОМПОЗИЦІЙ 5 UA 108850 C2 5 10 15 20 ОЦІНКА АНТИОКСИДАНТНОЇ АКТИВНОСТІ DPPH аналіз Антиоксиданту активність екстракт насіння Moringa oleifera відповідно до даного винаходу оцінювали за допомогою DPPH аналізу. Цей аналіз засновано на вимірюванні здатності до уловлювання антиоксидантів стабільного радикалу 2,2-дифеніл-1-пікрилгідразилу (DPPH). Цей стабільний радикал, що має поглинання при 517 нм, відновлюється до відповідного гідразину при реакції із донором водню. Результати: Одержані результати виражені у ІС50, що відповідає концентрації, яка дає 50 % зменшення поглинання метанольного розчину DPPH при 0,06 мМ. Екстракт відповідно до даного винаходу має антиоксидантну активність, що головним чином забезпечена молекулою, присутньою в оболонці. Хемілюмінесценція Це спосіб, в якому генерують вільні радикали (радикал супероксиду Oz") за допомогою фотохімічного сигналу. Інтенсивність окислення у 1000 разів перевищує інтенсивність окислення, яку одержують за стандартних умов. Детекцію проводять шляхом хемілюмінесценції, що дозволяє оцінювання антиоксидантних ліпо- чи водорозчинних екстрактів чи молекул. The результати виражені відповідно в еквівалентній кількості вітаміну С або тролоксу (6-гідрокси-2,5,7,8-тетраметилхроман-2-карбонової кислоти). Чутливість становить порядку наномолів. 6 UA 108850 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 Результати: 65 мкг екстракту відповідно до Прикладу 1 є необхідними для одержання активності, еквівалентної активності, детектованої для 1 мкг тролоксу: активність еквівалентна лікопену, молекули, відомої завдяки її антиоксидантній активності. Цей аналіз також підтвердив, що спостережена антиоксидатнта активність була, головним чином, генерована молекулами оболонки: тільки 4,7 мкг екстракту ЕЮН 90 % оболонки є необхідними для 1 мкг тролоксу (активність еквівалентна геністеїну). Це підтверджує важливість застосування, відповідно до даного винаходу, цілісного насіння видів Moringa. Вільні радикали, виробляння яких підвищено через зовнішній стрес (холод, забруднення, тютюн, УФ) відповідають за зміни ДНК клітин шкіри, але також клітинних мембран та мітохондрій. Протирадикальна активність екстракту, одержаного відповідно до Прикладу 1, надає можливість боротьби з власним старінням шкіри та старінням шкіри під дією зовнішніх факторів. ОЦІНКА АКТИВНОСТІ ВІДНОВЛЕННЯ БАР'ЄРНОЇ ФУНКЦІЇ Епідерміс відіграє головну захисну роль шляхом забезпечення хімічного та механічного бар'єру для організму. Він забезпечує збереження герметичності, а саме, функції шкірного бар'єру. Корнеоцити, кератиноцити рогового шару, пов'язані з ліпідним матриксом, забезпечують велику частину цієї функції. Проте, більш глибокі шари разом задіяні у встановленні на місце учасників цієї функції. Здатність до диференціації кератиноцитів епідермісу гарантує встановлення на місце бар'єру типу функціональної селективної проникності (Еlias PM. J Invest Dermatol 125 183-200 (2005)). З точки зору білків, епідремальна диференціація головним чином зосереджена на еволюції структуральних білків, що є кератинами та які роблять внесок в архітектурну цілісність епідермісу, їх експресія варіюється як функція ступеню зрілості кератиноцитів. Основний кератин 1 та кислотний кератин 10 є ранніми маркерами кератиноцитарної диференціації, що наявна з базального шару епідермісу. Експресія інших маркерів даного біологічного процесу, пізніх маркерів, може відбуватися пізніше, наприклад, експресія білків рогової оболонки, такої, як інволюкрин, а також деяких основних ферментів на початку перехресного схрещування структуральних білків один з іншим та з кератиноцитарними ліпідами, трансглутаміназами, такими, як трансглутаміназа 1 (TG1) (Houben E, et al. Skin PharmacolPhysiol.; 20(3):122-32 (2007)). Одночасно, синтез та транспорт кератиноцитарних ліпідів відбуваються при виникненні міжкорнеоцитарного ліпідного цементу, необхідного для утворення шкірного бар'єру, формування якого являє собою останню фазу кінцевої епідермальної диференціації. Такий позаклітинний ліпідний матрикс забезпечує основний бар'єр черезшкірним переносам води та електролітів (Mizutani Y., et al. FEES Lett. 563: 93 (2004)) Таким чином, певна кількість ферментів та ліпідних транспортерів мають їх кератиноцитарну експресію, що зростає із диференціацією. Зокрема, деякі члени сімейства транспортерів ABC (касетний транспортер, що зв'язує аденозин трифосфат) відіграють головну роль на стадіях встановлення на місті ліпідного бар'єра. Таким чином, ABC G1, що специфічно переносить гліцерин, та ABC A12, необхідний для переносу 7 UA 108850 C2 5 10 15 ліпідних прекурсорів у ламелярні тільця, є сенситивними маркерами. Епідермальні кераміди відіграють головну специфічну роль та являють незамінний маркер рівня функціональності шкірного бар'єру. Таким чином, у ферментів, що задіяні разом у синтезі керамідів шкіри, експресія та активність специфічно збільшуються протягом руйнування функції епідермального бар'єру та при зростанні рівня епідермальної диференціації. Тобто, зокрема, випадок сфінголіпідної С4-гідрокислази/дельта-4 десатурази чи HDES2, дигідрокерамідна гідроксилазна активність яких задіяна у синтезі фітокерамідів шкіри у Man (Feingold, K.R. J Lipid Res 48: 25312546 (2007)). По-перше, ефекти екстрактів відповідно до даного винаходу були спочатку вивчені в моделі диференційованих нормальних кератиноцитів людини (НКЛ). Цей ефект був потім вивчений у моделі кератиноцитарного старіння. Модель диференційованих нормальних кератиноцитів людини Був проаналізований вплив екстрактів видів Moringa на генну експресію різних білків, задіяних у синтезі чи транспорті епідермальних ліпідів, ABC G1 та HDES2. Результати: Результати виражені у відсотках стимуляції генної експресії (ІРНК) різних маркерів епідермальної диференціації, вираженої за допомогою НКЛ (по відношенню до необроблених клітин). Значний позитивний ефект розглядали від 100 % стимуляції. Одержані результати наведено у таблиці нижче. 20 25 30 35 40 45 50 55 Таблиця 1: вплив вітаміну D3, розіглітазону, та екстракту відповідно до даного винаходу з моделі диференційованих нормальних кератиноцитів людини (НКЛ). Екстракт, одержаний відповідно до Прикладу 1 при 20 мкг/мл, призвів до генної експресії HDES2 та ABC G1. Екстракт, одержаний відповідно до Прикладу 1, дозволяє відновлення ліпідної дермальної диференціації на початку встановлення на місці гідрофобного бар'єру, що дозволяє обмеження зневоднення шкіри, що особливо часто зустрічається у зрілої шкіри. Модель кератиноцитарного старіння Здатності до регенерації шкірного бар'єру зменшена у зрілих суб'єктів (Tagami, Arch. Derm. Res. 2007), нами було застосовано модель, що є міметиком процесу кератиноцитарного старіння клітинної лінії кератиноцитів людини НаСаТ, оброблених Н2О2- Нами було проаналізовано вплив екстрактів видів Moringa на відновлення експресії (ІРНК) маркерів білкової диференціації, експресія яких була інгібована старінням клітин, наприклад, К1 та інволюкрину. Результати: Екстракт відповідно до Прикладу 1, при 1 та 10 мкг/мл дозволяє відновлення експресії К1 (11 та 35 % відповідно) та інволюкрину (15 % для 10 мкг/мл). Висновок Результати, одержані від двох моделей, добре демонструють компліментарність дії (відновлення як ліпідної структури, так і білкової структури епідермісу) екстракту за даним винаходом. ОЦІНКА АКТИВНСТІ ПОЗАКОІТИННОГО МАТРИКСУ Позаклітинний матрикс (ПКМ) є динамічною структурою, що відіграє структуральну та регулюючу роль для тканин. Вона надає шкірі тургор та механічні властивості: твердість, еластичність, та тонус. В області епідермісу, вона займає міжклітинний простір та відіграє роль у збереженні епідермальної структури. Вона також забезпечує зміни між клітинами епідермісу та задіяна у клітинній активності. ПКМ епідермісу складається, зокрема, з колагену (волокнистого білку) типу IV. Якщо клітина старіє, то компоненти ПКМ головним чином розпадаються під дією ферментів цинкендопептидазного типу, що мають назву матриксних металопротеїназ чи ММР. Останні приймають активну участь у процесі рубцювання, але вони також приймають участь у провисанні шкіри та у появі зморшок, що є першими ознаками старіння шкіри. Серед них, ММР9 є желатиназою, що має активність проти денатурованих молекул колагену (желатину), але також може розщеплювати нативні молекули колагену типу IV, V, та VII. Вплив екстрактів видів Moringa на експресію ІРНК ММР-9 був проаналізований для клітинної лінії кератиноцитів людини НаСаТ, обробленої Н2С>2, що є міметиком процесу клітинного 8 UA 108850 C2 5 старіння. Результати: Екстракт, одержаний відповідно до Прикладу 1, інгібує генну експресію ММР-9 при 1,10, та 30 мкг/мл істотно при трьох концентраціях. Екстракт, одержаний відповідно до Прикладу 1, надає можливість відновлення механічних властивостей ПКМ: твердості, еластичності та тонусу ПКМ шкіри, та надає можливість відновлення білкової структури епідермісу. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 10 15 20 25 30 35 40 45 1. Спосіб одержання екстракту цілісного насіння видів Moringa sp., що включає: - подрібнення цілісного насіння; - щонайменше одне екстрагування сумішшю етанол/вода зі співвідношенням етанол/вода, що становить 9/1; - центрифугування або фільтрування; та - сушіння. 2. Екстракт цілісного насіння видів Moringa sp., одержаний способом за п. 1, який відрізняється тим, що містить (% за масою відносно маси сухого екстракту): олію у кількості приблизно 35 %, включаючи (і) приблизно 10 % тригліцеридів та жирних кислот, та (іі) приблизно 10 % полярних ліпідів; поліфеноли, у кількості від 0,01 % до 5 % (які виражені як грами пірогалолу на 100 грамів сухого екстракту). 3. Екстракт цілісного насіння видів Moringa sp. за п. 2, який відрізняється тим, що він являє собою екстракт Moringa oleifcra або Moringa drouhardii. 4. Застосування екстракту цілісного насіння видів Moringa sp. за будь-яким з пп. 2-3 як активної діючої речовини проти старіння. 5. Застосування за п. 4, яке відрізняється тим, що вказану активну діючу речовину адаптовано для боротьби з усіма ознаками старіння шкіри у людей, що мають зрілу шкіру, зокрема з втратою твердості та/або еластичності, та/або тонусу, та/або пластичності шкіри та наявністю зморщок та тонких зморщок, для забезпечення гладкості шкіри, запобігання її провисанню та реструктуризації шкіри. 6. Застосування екстракту цілісного насіння видів Moringa sp. за будь-яким з пп. 2-3 для зміцнення та відновлення бар'єрної функції шкіри. 7. Косметична та/або дерматологічна композиція, яка відрізняється тим, що містить як активну діючу речовину екстракт цілісного насіння видів Moringa sp. за будь-яким з пп. 2-3 та щонайменше один косметологічно та/або дерматологічно прийнятний ексципієнт. 8. Композиція за п. 7, яка відрізняється тим, що містить кількість сухого екстракту цілісного насіння видів Moringa sp. від 0,1 грама до 5 грамів на 100 грамів вказаної композиції. 9. Композиція за п. 7, яка відрізняється тим, що додатково містить одну чи декілька активних діючих речовин, адаптованих для захисту від сонця та/або для депігментації шкіри. 10. Косметичний спосіб боротьби з усіма ознаками старіння шкіри у людей, що мають зрілу шкіру, зокрема з втратою твердості та/або еластичності, та/або тонусу, та/або пластичності шкіри та наявністю зморщок та тонких зморщок, для забезпечення гладкості шкіри, запобігання її провисанню та реструктуризації шкіри, який включає застосування, шляхом місцевого чи перорального введення, екстракту цілісного насіння видів Moringa sp. за будь-яким з пп. 2-3. Комп’ютерна верстка О. Рябко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 9