Фармацевтична композиція, призначена для лікування очної хвороби

Реферат: Винахід належить до фармацевтичної композиції, призначеної для лікування очної хвороби, асоційованої з патологічними аномаліями в тканинах зорової системи, яка містить антитіло, що специфічно зв’язується з β-амілоїдним білком, способу діагностики очної хвороби та способу моніторингу мінімальних залишкових ознак очної хвороби. UA 101167 C2 (12) UA 101167 C2 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Перехресне посилання на споріднені заявки на патент За даною заявкою заявляється пріоритет попередньої заявки на патент США, сер. №. 60/960616, зареєстрованої 5 жовтня 2007 р., що включена в даний опис як посилання. Передумови створення винаходу Даний винахід стосується способів і композицій, призначених для діагностики й лікування амілоїдозу, тобто групи порушень і патологій, асоційованих з амілоїдним білком, таких як хвороба Альцгеймера. Амілоїдоз являє собою не окреме захворювання, а скоріше групу різноманітних прогресуючих хворобливих процесів, які характеризуються позаклітинними відкладеннями в тканині воскоподібного крохмалеподібного білка, який називається амілоїдом, що накопичується в одному або декількох органах або системах організму. Після утворення амілоїдних відкладень вони починають перешкоджати нормальному функціонуванню органа або системи організму. Відомо принаймні 15 різних типів амілоїдозу. Основними формами є первинний амілоїдоз, який не має відомих провісників (станів-попередників) захворювання, вторинний амілоїдоз, який супроводжує певний інший стан, і спадковий амілоїдоз. Вторинний амілоїдоз виникає в людей, які страждають від хронічних інфекційних або запальних захворювань, таких як туберкульоз, бактеріальна інфекція, яку називають сімейною середземноморською лихоманкою, кісткові інфекційні захворювання (остеомієліт), ревматоїдний артрит, запалення тонкого кишечнику (гранулематозний ілеїт), хвороба Ходжкіна й проказа. Амілоїдні відкладення включають такий компонент, як амілоїд P (пентагональний) (AP), глікопротеїн, споріднений до амілоїду P сироватки здорового індивідуума (SAP), і сульфатовані глікозаміноглікани (GAG), комплекс вуглеводів сполучної тканини. Фібрили амілоїдного білка, на частку яких припадає приблизно 90 % амілоїдного матеріалу, містять один з декількох різних типів білків. Ці білки мають здатність складатися у фібрили, що мають так звану "бетаскладчасту" конформацію, унікальну конфігурацію білка, при якій сайти зв'язування стають доступними для барвника конго червоного, що приводить до унікальних особливостей фарбування амілоїдного білка. Багато зв'язаних з віком захворювань обумовлені або асоційовані з амілоїдоподібними білками й характеризуються, зокрема, утворенням позаклітинних відкладень амілоїду або амілоїдоподібного матеріалу, які беруть участь у патогенезі, а також у розвитку захворювання. Такі захворювання включають (але, не обмежуючись тільки ними) неврологічні порушення, такі як хвороба Альцгеймера (AD), деменція, зв'язана з тільцями Леві, синдром Дауна, спадкова церебральна геморагія з амілоїдозом (голландського типу); комплекс деменції ГуамаПаркінсона. Інші захворювання, які обумовлені або асоційовані з амілоїдоподібними білками, являють собою прогресуючий надядерний параліч, розсіяний склероз; хвороба КрейцфельдтаЯкоба, хвороба Паркінсона, зв'язана з ВІЛ деменція, ALS (аміотрофічний бічний склероз), діабет дорослих; старечий серцевий амілоїдоз; ендокринні пухлини й інші захворювання, включаючи очні хвороби, асоційовані з патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, насамперед асоційовані з зв'язаними з амілоїдом-бета патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, такими як деградація нейронів. Такі патологічні аномалії можуть мати місце, наприклад, у різних тканинах ока, таких як зорова зона кори, приводячи до кортикального порушення зору, передня камера й зоровий нерв, приводячи до глаукоми, кришталик, приводячи до катаракти через відкладення бета-амілоїду, склоподібне тіло, приводячи до амілоїдозу ока, сітківка, приводячи до первинної дегенерації сітківки й дегенерації жовтої плями, наприклад, до зв'язаної з віком дегенерації жовтої плями, зоровий нерв, приводячи до друзів зорового нерва, оптичної нейропатії й ретробульбарного невриту, і рогівка, приводячи до дистрофії за типом "ґрат" (ґратчаста дистрофія). Хоча патогенез цих захворювань може бути різним, характерні для них відкладення часто містять багато подібних молекулярних компонентів. У значній мірі це може стосуватися місцевої активації прозапальних шляхів, приводячи тим самим до конкурентного відкладення компонентів активованого комплементу, реактантів гострої фази, імуномодуляторів і інших запальних медіаторів (McGeer і ін., 1994). Хвороба Альцгеймера (AD) являє собою неврологічне порушення, яке, як передбачається, викликається, насамперед, амілоїдними бляшками, нагромадженням патологічних відкладень білків у головному мозку. Тип амілоїду, який найбільш часто зустрічається, виявлений у головному мозку уражених захворюванням індивідуумів, в основному складається з Aβ-фібрил. Науково доведено, що збільшення виробництва й нагромадження бета-амілоїдного білка в бляшках приводить до загибелі нервових клітин, що сприяє виникненню й розвитку хвороби Альцгеймера. У свою чергу, втрата нервових клітин у стратегічно важливих ділянках головного 1 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 мозку приводить до зменшення рівня нейромедіаторів і погіршення пам'яті. До білків, які в першу чергу відповідальні за утворення бляшки, належать амілоїдний білок-попередник (APP) і два пресеніліни (пресенілін I і пресенілін II). Послідовне розщеплення амілоїдного білкапопередника (APP), що конститутивно експресується й катаболізується в більшості клітин ферментами β- і -секретазами, приводить до вивільнення Aβ-пептиду, що складається з 39-43 амінокислот. Розщеплення APP, очевидно, приводить до підвищення їх здатності до агрегації з утворенням бляшок. Aβ(1-42)-фрагмент має насамперед найбільш високу здатність утворювати агрегати завдяки наявності двох високогідрофобних амінокислотних залишків на його C-кінці. Тому передбачається, що Aβ(1-42)-фрагмент бере участь і відповідає, насамперед, за ініціацію утворення нейритної бляшки при AD і, отже, має високий патологічний потенціал. Таким чином, існує необхідність у створенні агентів, призначених для попередження утворення амілоїдних бляшок і руйнування існуючих при AD бляшок. Симптоми хвороби Альцгеймера проявляються повільно, і першим симптомом може бути лише слабка забудькуватість. На цій стадії індивідууми можуть забувати останні події, дії, імена знайомих людей або назви речей і можуть бути не в змозі вирішити прості математичні завдання. При прогресуванні хвороби симптоми стають більш помітними й настільки серйозними, що змушують людей, уражених AD, або членів їх родини вдаватися до медичної допомоги. Симптоми, характерні для середньої стадії AD, включають забування того, як виконувати прості функції, такі як приводити себе до порядку, при цьому виникають проблеми з мовою, розумінням, читанням або писанням. Пацієнти на пізній стадії AD можуть ставати боязливими або агресивними, можуть іти далеко від будинку й, зрештою, мати потребу в повному догляді. Зараз єдиним надійним шляхом діагностики AD є ідентифікація бляшок і сплетень у тканині головного мозку при розтині після смерті індивідуума. Таким чином, поки індивідуум ще живий, лікарі можуть ставити тільки діагноз "можлива" або "імовірна" AD. За допомогою сучасних методів лікарі можуть правильно діагностувати аж до 90 відсотків випадків AD за допомогою ряду засобів, що дозволяють діагностувати "можливу" AD. Лікарі задають питання про загальний стан здоров'я індивідуума, медичні проблеми, що мали місце в минулому, і історії яких-небудь утруднень в індивідуума при виконанні повсякденних дій. Поведінкові тести на пам'ять, вирішення задач, увага, лічба і мова дозволяють одержувати інформацію про когнітивну дегенерацію, а медичні аналізи, такі як аналізи крові, сечі або спинномозкової рідини, і сканування головного мозку можуть дати деяку додаткову інформацію. Боротьба з AD полягає в здійсненні лікування, заснованого на застосуванні лікарських засобів, і лікування без використання лікарських засобів (немедикаментозного лікування). Лікування з метою зміни основного перебігу хвороби (уповільнення або реверсування розвитку) дотепер були в основному безуспішними. Було продемонстровано, що лікарські засоби, які відновлюють дефіцит (дефект) або недостатню функцію хімічних медіаторів нервових клітин (нейромедіаторів), зокрема, інгібітори холінестерази (ChEI), такі як такрин і ривастигмін, дозволяють поліпшувати симптоми. ChEI затримують ферментативне розщеплення нейромедіаторів, підвищуючи тим самим кількість хімічних медіаторів, придатних для передачі нервових сигналів у головному мозку. Для деяких людей на ранній і середній стадіях захворювання такі лікарські засоби, як такрин (COGNEX®, Морріс-Плейнс, шт. Нью-Джерсі), донепезил (ARICEPT®, Токіо, Японія), ривастигмін (EXELON®, Іст-Хановер, шт. Нью-Джерсі) або галантамін (REMINYL®, НьюБрансуік, шт. Нью-Джерсі), можуть попереджати погіршення деяких симптомів протягом обмеженого періоду часу. Інший лікарський засіб, мемантин (NAMENDA®, Нью-Йорк, шт. НьюЙорк), дозволено для лікування AD від середнього до важкого ступеня. Лікарські засоби можуть впливати також на психіатричні прояви AD. Деякі лікарські засоби можуть також допомагати контролювати поведінкові симптоми AD, такі як безсоння, збудження, блукання, тривогу й депресію. Лікування цих симптомів часто робить життя пацієнтів більш комфортним й полегшує обслуговуючому персоналу догляд за ними. На жаль, незважаючи на значні успіхи лікування, які демонструють, що цей клас агентів істотно перевершує за ефективністю плацебо, хвороба продовжує прогресувати, а вплив на розумові функції в середньому є дуже обмеженим. Багато лікарських засобів, які застосовують для лікування AD, такі, наприклад, як ChEI, мають також побічні дії, які включають шлунково-кишкові порушення, токсичність для печінки й втрату ваги. З AD часто асоційовані кортикальні порушення зору, незважаючи на те, що при оцінці впливу на візуальну активність або очні хвороби були отримані негативні результати. Дані, отримані при розтині після смерті пацієнтів, які страждають від AD, дозволили виявити патологічні зміни в прекортикальних зорових структурах і зниження волокон зорового нерва. 2 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Дисфункція процесингу візуальних даних при AD також асоційована з нейрологічними змінами й патологією у вентральному шляху, що простирається від сітківки із клітинами Pганглія через дрібноклітинні шари латеральних шляхів вузла колінця (LGN), досягаючи інферотемпоральної кори (IT), і в дорсальному шляху, що простирається від сітківки із клітинами M-ганглія через макроклітинні шари LGN, досягаючи середньої темпоральної кори. Старечі бляшки в пацієнтів, які страждають від AD, створюють аномалії й дисфункції в цих кортикальних ділянках. Старечі бляшки можуть приводити також до втрати візуальної здатності до сприйняття, наприклад, здатності розпізнавати обличчя знайомих людей, цей стан відомий як прозопагнозія. До інших захворювань, які обумовлені або асоційовані з нагромадженням і відкладенням амілоїдоподібного білка, належать помірне когнітивне порушення, деменція, зв'язана з тільцями Леві (LBD), синдром Дауна (трисомія за 21 хромосомою), аміотрофічний бічний склероз (ALS), міозит, який викликається тільцями включення (IBM), і очні хвороби, асоційовані з патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, насамперед асоційовані із зв'язаними з амілоїдом-бета патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, такими як деградація нейронів. Такі патологічні аномалії можуть мати місце в різних тканинах ока, таких як зорова зона кори, приводячи до кортикального порушення зору; передня камера й зоровий нерв, приводячи до глаукоми; кришталик, приводячи до катаракти через відкладення бетаамілоїду; склоподібне тіло, приводячи до амілоїдозу ока; сітківка, приводячи до первинної дегенерації сітківки й дегенерації жовтої плями, наприклад, зв'язаної з віком дегенерації жовтої плями; зоровий нерв, приводячи до друзів зорового нерва, оптичної нейропатії й ретробульбарного невриту; і рогівка, приводячи до ґратчастої дистрофії. Помірне когнітивне порушення (MCI) є загальним поняттям, яке включає невеликі, але помітні порушення пам'яті, які найбільш часто зустрічаються. Індивідуум, що страждає від MCI, відчуває більше утруднень, зв'язаних з пам'яттю, ніж це можна очікувати у зв'язку з віком, однак не має інших симптомів деменції, таких як порушення розсудливості й логічного ходу думки. MCI являє собою стан, який часто є свідченням преклінічної стадії AD. Очевидно, відкладення β-амілоїду в енторинальній ділянці кори головного мозку (EC) відіграє основну роль у розвитку помірного когнітивного порушення (MCI) у старому віці. Це узгоджується з даними про те, що рівні Aβ(1-42) у СМР (спинномозкова рідина)-A істотно знижуються, коли клінічні ознаки AD стають явними. На відміну від СМР-А, рівні Aβ(1-42) у СМРтау істотно підвищуються на стадії MCI, і ці рівні продовжують залишатися підвищеними надалі, це свідчить про те, що підвищені рівні в СМР-тау можна використовувати для виявлення індивідуумів з MCI, які схильні до розвитку AD. Деменція, зв'язана з тільцями Леві (LBD), являє собою нейродегенеративне порушення, яке може виникати в індивідуумів старше 65 років, як правило, яке викликає симптоми когнітивного (розумового) порушення й патологічні зміни поведінки. Симптоми можуть включати когнітивне порушення, неврологічні ознаки, порушення сну й нездатність до самостійних дій. Когнітивне порушення в більшості випадків є характерною рисою LBD. У пацієнтів відбуваються повторювані випадки замішання, які прогресивно збільшуються. Флуктуації когнітивної здатності часто асоційовані зі зсувом рівня уваги й пильності. Когнітивне порушення й флуктуації розумової здібності можуть варіюватися протягом хвилин, годин або днів. Тільця Леві утворюються з фосфорилованих і нефосфорилованих нейрофіламентних білків; вони містять синаптичний білок альфа-синуклеїн, а також убікітин, який бере участь в елімінації ушкоджених або аномальних білків. Крім тілець Леві можуть бути присутні також нейрити Леві, що представляють собою тільця включення, які беруть участь у клітинних процесах у нервових клітинах. Амілоїдні бляшки можуть утворюватися в головному мозку пацієнтів, уражених LBD, однак, як правило, у меншій кількості, ніж у пацієнтів, що страждають від хвороби Альцгеймера. Наявність нейрофібрилярних сплетень, що представляють собою ще одну мікропатологічну ознаку AD, не є головною відмінною рисою LBD, але вони часто присутні додатково до амілоїдних бляшок. Синдром Дауна (DS) або трисомія за 21 хромосомою являє собою генетичне порушення, яке викликається присутністю повної додаткової хромосоми 21 або її частини, і він часто асоціюється з певним порушенням когнітивної здатності й фізичного росту. DS характеризується передчасним старінням: ураження більшості індивідуумів, у яких хвороба Альцгеймера проявляється на п'ятому десятку років життя, включаючи відкладення формуючої бляшки білка амілоїду-бета, є більш серйозним у порівнянні з ураженням більшості інших пацієнтів, які страждають від хвороби Альцгеймера. Крім того, у багатьох людей з DS розвивається катаракта, яка починається в дитячому віці, і багато хто страждають від вродженої глаукоми. У людей ген амілоїдного білка-попередника, з якого після розщеплення утворюється 3 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 амілоїд-бета, локалізований на хромосомі 21. В індивідуумів, уражених DS, накопичується як розчинний, так і внутрішньоклітинний бета-амілоїд, до відкладення позаклітинного бетаамілоїду, який відповідає за утворення старечих бляшок. Підвищення рівнів бета-амілоїду при синдромі Дауна може відображати підвищені рівні експресії й білка ферменту 2, який розщеплює амілоїдний білок-попередник, на хромосомі 21. Аміотрофічний бічний склероз (ALS) характеризується дегенерацією верхніх і нижніх рухових нейронів. У деяких пацієнтів з ALS може мати місце деменція або афазія (ALS-D). Деменція найбільш часто являє собою лобово-скроневу деменцію (FTD), і в багатьох таких випадках є убікітин-позитивні, тау-негативні включення в нейронах зубчастої звивини медіальної й нижньої поверхні півкулі головного мозку й у поверхневих шарах лобової й скроневої долі головного мозку. Міозит, зв'язаний з тільцями включення (IBM), являє собою інвалідизуюче захворювання, яке, як правило, виявляється в людей старше 50 років, при якому виникає запалення м'язових волокон, і вони починають атрофуватися, але при цьому головний мозок не порушується, і пацієнти повністю зберігають свій інтелект. Виявлено, що рівень двох ферментів, що беруть участь у виробництві білка амілоїду-β, підвищений у м'язових клітинах пацієнтів, які страждають від цього м'язового прогресуючого захворювання, що часто зустрічається в людей похилого віку, при цьому підвищується також рівень амілоїду-β. Ще одним захворюванням, обумовленим або асоційованим з нагромадженням і відкладенням амілоїдоподібного білка, є дегенерація жовтої плями. Дегенерація жовтої плями являє собою звичайне захворювання ока, яке викликає деградацію жовтої плями, тобто центральної ділянки сітківки (тонкий шар тканини на задній частині ока, звідки світлочутливі клітини посилають зорові сигнали в головний мозок). Жовта пляма опосередковує гострий, чіткий, "неспотворений" зір. Ушкодження жовтої плями приводить до розвитку сліпих плям і затуманеного або порушеного зору. Зв'язана з віком дегенерація жовтої плями (AMD) є основною причиною погіршення зору в Сполучених Штатах, і в людей старше 65 років вона являє собою основну причину медично підтвердженої сліпоти серед осіб кавказької раси. Приблизно 1,8 мільйонів американців у віці 40 років і більше мають розвинену AMD, а ще в 7,3 мільйонів людей з помірної AMD є значний ризик втрати зору. За оцінках уряду до 2020 р. 2,9 мільйони людей будуть мати розвинену AMD. Жертви AMD часто бувають здивовані й розстроєні, коли довідаються, як мало відомо про причини й методи лікування цього стану сліпоти. Існує дві форми дегенерації жовтої плями: суха дегенерація жовтої плями й волога дегенерація жовтої плями. Суха форма, при якій клітини жовтої плями повільно починають руйнуватися, діагностована в 85 відсотків випадків дегенерації жовтої плями. Як правило, суха AMD уражає обидва ока, хоча при цьому одне око може втратити зір, а друге око може залишатися неураженим. Звичайно ранніми ознаками сухий AMD є друзи, які являють собою відкладення жовтого тіла під сітківкою. Ризик виникнення розвинутої сухої AMD або вологої AMD підвищується зі збільшенням кількості або розміру друз. Суха AMD може прогресувати й викликати втрату зору, не перетворюючись у вологу форму захворювання; однак на ранній стадії суха AMD може раптово переходити у вологу форму. Хоча на частку вологої форми припадає тільки 15 відсотків випадків, вона в 90 відсотках приводить до сліпоти, і її розглядають як розвинену AMD (не існує ранньої або проміжної стадії вологої AMD). Вологій AMD завжди передує суха форма захворювання. При прогресуванні сухої форми в деяких людей починається патологічний ріст кровоносних судин за жовтою плямою. Ці судини є дуже тендітними, і з них просочується рідина й кров (звідси назва "волога" дегенерація жовтої плями), приводячи до швидкого ушкодження жовтої плями. Суха форма AMD спочатку часто викликає злегка затуманений зір. Потім, насамперед, центральна частина зорового поля може ставати затуманеною, і ця ділянка збільшується в розмірах при прогресуванні захворювання. Якщо уражене тільки одне око, то симптоми можуть залишатися непоміченими. У випадку вологої AMD прямі лінії можуть представлятися хвилястими й при цьому може швидко наступати втрата центрального зору. Для встановлення діагнозу дегенерації жовтої плями, як правило, проводять дослідження розширеного ока (зіниці), тест на гостроту зору й обстеження задньої стінки ока з використанням процедури, яку називають фундоскопією, що допомагає встановленню діагнозу AMD, і, якщо є припущення про наявність вологої AMD, то може бути проведена ангіографія з використанням флуоресцеїну. Зараз відсутні засоби лікування, що дозволяють попереджати втрату зору, якщо суха AMD досягла розвинутої стадії. Однак застосування певної композиції, що містить високу дозу антиоксидантів і цинку, може сповільнювати або попереджати прогресування проміжної стадії AMD, що приводить до переходу в розвинену стадію. Macugen® 4 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 (ін'єкція пегаптанібу натрію), лазерне фотокоагулювання й фотодинамічна терапія дозволяють контролювати патологічний ріст кровоносних судин і крововилив у жовтій плямі, що є корисним для певної групи людей з вологою AMD; однак зір, якщо він уже втрачений, не може бути відновлений за допомогою таких методів. Якщо зір втрачений, то існують засоби для слабкого зору, які можуть допомагати поліпшувати якість життя. Однією із найбільш ранніх ознак зв'язаної з віком дегенерації жовтої плями (AMD) є нагромадження позаклітинних відкладень, відомих як друзи, в ділянці, що знаходиться між базальним шаром пігментованого епітелію сітківки (RPE) і базальною оболонкою Бруха (BM). Результати сучасних досліджень, проведених Anderson зі співавторами, підтвердили, що друзи містять амілоїд-бета (Experimental Eye Research 78, 2004, стор. 243-256). Зараз проводяться дослідження, у яких вивчають фактори навколишнього середовища, генетичні й зв'язані з харчуванням фактори, які можуть впливати на AMD. Досліджують також нові стратегії лікування, включаючи застосування трансплантатів клітин сітківки, лікарських засобів, які повинні попереджати або сповільнювати прогресування захворювання, променевої терапії, генної терапії, комп'ютерного чипа, імплантованого в сітківку, що може допомагати стимулювати зір, і агентів, які повинні попереджати ріст нових кровоносних судин під жовтою плямою. Важливим фактором, який необхідно враховувати при розробці нових лікарських засобів, є простота їх застосування пацієнтами, для яких вони призначені. На частку лікарських засобів, які вводять пероральним шляхом, зокрема, таблеток, капсул і м'яких гелів, припадає 70 % всіх застосовуваних лікарських форм через зручність їх застосування пацієнтами. Розробники лікарських засобів визнають, що пацієнти надають перевагу пероральному застосуванню в порівнянні з ін'єкціями, або іншими більш інвазивними формами, які застосовують в медицині. Також кращими є препаративні форми, які дозволяють знижувати кількість доз (тобто форми, які застосовують один раз на день, або форми із пролонгованим вивільненням). Простота застосування антибіотиків у вигляді пероральних лікарських форм приводить до того, що дотримання пацієнтом режиму й схеми лікування в процесі лікування поліпшується. Таким чином, необхідна розробка ефективних способів і композицій, призначених для попередження або спрямованих на боротьбу з ускладненнями, асоційованими з амілоїдозом, що представляє собою групу захворювань і порушень, асоційованих з утворенням амілоїдних бляшок, включаючи вторинний амілоїдоз і зв'язаний з віком амілоїдоз, включаючи (але, не обмежуючись тільки ними) неврологічні захворювання, такі як хвороба Альцгеймера (AD), деменція, зв'язана з тільцями Леві, синдром Дауна, спадкова церебральна геморагія з амілоїдозом (голландського типу); комплекс деменції Гуама-Паркінсона, а також інші захворювання, які обумовлені або асоційовані з амілоїдоподібними білками, такі як прогресуючий надядерний параліч, розсіяний склероз; хвороба Крейцфельдта-Якоба, хвороба Паркінсона, зв'язана з ВІЛ деменція, ALS (аміотрофічний бічний склероз), діабет дорослих; старечий серцевий амілоїдоз; ендокринні пухлини й інші захворювання, включаючи очні хвороби, асоційовані з патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, насамперед асоційовані з зв'язаними з амілоїдом-бета патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, такими як деградація нейронів. Такі патологічні аномалії можуть мати місце, наприклад, у різних тканинах ока, таких як зорова зона кори, приводячи до кортикального порушення зору; передня камера й зоровий нерв, приводячи до глаукоми; кришталик, приводячи до катаракти через відкладення бета-амілоїду; склоподібне тіло, приводячи до амілоїдозу ока; сітківка, приводячи до первинної дегенерації сітківки й дегенерації жовтої плями, наприклад, зв'язаної з віком дегенерації жовтої плями; зоровий нерв, приводячи до друзів зорового нерва, оптичної нейропатії й ретробульбарного невриту; і рогівка, приводячи до ґратчастої дистрофії. Зокрема, існує необхідність у засобах, які нейтралізують фізіологічні прояви захворювання, такі як формування бляшок, асоційованих з агрегацією волокон амілоїду або амілоїдоподібного пептиду. Було встановлено, що антитіла до амілоїдів, які виробляються при інокуляції Aβ 1-42 у суміші з повним або неповним ад'ювантом Фрейнда, мають здатність знижувати амілоїдне навантаження в трансгенних мишей, на яких змодельована людська хвороба Альцгеймера (Schenk і ін., 1999). Внутрішньоочеревинна інокуляція тетрапальмітоїлованого Aβ 1-16, реконструйованого в ліпосомах, трансгенним мишам лінії NORBA приводила до одержання високих титрів антитіл до амілоїдів, які, як встановлено, мали здатність солюбілізувати амілоїдні волокна й бляшки in vitro і in vivo (Nicolau і ін., 2002). Вперше гіпотеза про можливий механізм, за допомогою якого відбувається розчинення амілоїдних бляшок і волокон, була запропонована Bard зі співавторами, 2000, які зробили висновок про те, що антитіла опсонізують бляшки, які потім руйнуються макрофагами мікроглії. 5 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 De Mattos зі співавторами, 2001 встановили, що МАт до центрального домену β-амілоїду має здатність зв'язуватися й повністю руйнувати амілоїд у плазмі. Вони довели, що присутність вказаних МАт у кровотоці зрушує рівновагу Aβ між головним мозком і плазмою у бік периферичного кліренсу й катаболізму замість нагромадження в головному мозку. Тривале лікування людини антитілами гризунів можна викликати антиглобулінову відповідь, що виявляється приблизно на 8-12 день після введення й досягає піка приблизно через 20-30 днів. Якщо така антиглобулінова відповідь виявлена, то лікування необхідно переривати не більш ніж через приблизно 10 днів, і повторну обробку в більш пізній момент часу, як правило, не проводять, оскільки вона може приводити до швидкого виникнення вторинної антиглобулінової відповіді. Хоча для антитіл гризунів характерний помітний рівень консервативності послідовностей з людськими антитілами, існує багато відмінностей у послідовностях гризунів і людини, що є достатнім для імуногенності антитіл гризунів для людини. Цю проблему можна вирішити шляхом створення антитіл безпосередньо в організмі людини або шляхом створення "гуманізованих" (відомих також як "реконструйовані" антитіла). Гуманізовані антитіла містять амінокислотну послідовність варіабельної ділянки, що несе отримані з антитіл гризунів CDR, розподілені в людських послідовностях або послідовностях, що нагадують людські, каркасних ділянок. Оскільки специфічність гуманізованого антитіла забезпечується отриманими з антитіл гризунів CDR, ці залишки слід застосовувати практично в незміненому вигляді, при цьому припустимі лише мінорні модифікації, які істотно не впливають на афінність і специфічність антитіла відносно його антигену-мішені. Каркасні залишки можна одержувати з варіабельної ділянки антитіла будь-якого примата або насамперед з будь-якої людської варіабельної ділянки або їх комбінації й створену в результаті варіабельну ділянку слід розглядати як реконструйовану. Для максимізації ймовірності того, що афінність буде зберігатися в реконструйованому антитілі, важливо здійснювати відповідний відбір каркасної ділянки. Відомо, що послідовності каркасних ділянок служать для підтримки CDR у їх правильній просторовій орієнтації для взаємодії з антигеном, і що каркасні залишки можуть іноді навіть брати участь у зв'язуванні антигену. Для підтримки афінності антитіла до його антигену доцільно вибирати послідовності людських каркасних ділянок, що мають найбільшу подібність з послідовностями каркасних ділянок гризунів. Потім може виявитися необхідним заміняти одну або декілька амінокислот у послідовності людської каркасної ділянки на відповідний залишок у каркасній ділянці гризунів для того, щоб уникнути втрати афінності. Цю заміну можна здійснювати за допомогою комп'ютерного моделювання. Даний винахід стосується нових способів і композицій, які містять антитіла, які мають високу специфічність й високу ефективність, насамперед химерні антитіла, включаючи їх фрагменти, більш конкретно частково або повністю гуманізовані антитіла, включаючи їх фрагменти, які мають здатність розпізнавати й зв'язуватися зі специфічними епітопами ряду β-амілоїдних антигенів, які можуть презентуватися антитілу в мономерній, димерній, тримерній і т.д., полімерній формі, у формі агрегату, волокон, філаментів або в конденсованій формі бляшки. Антитіла, запропоновані в даному винаході, найбільш переважно застосовувати для лікування амілоїдозу, групи захворювань і порушень, асоційованих з утворенням амілоїдних бляшок, включаючи вторинний амілоїдоз і зв'язаний з віком амілоїдоз, включаючи (але, не обмежуючись тільки ними) неврологічні захворювання, такі як хвороба Альцгеймера (AD), деменція, зв'язана з тільцями Леві, синдром Дауна, спадкова церебральна геморагія з амілоїдозом (голландського типу); комплекс деменції Гуама-Паркінсона, а також інші захворювання, які обумовлені або асоційовані з амілоїдоподібними білками, такі як прогресуючий надядерний параліч, розсіяний склероз; хвороба Крейцфельдта-Якоба, спадкова церебральна геморагія з амілоїдозом (голландського типу), хвороба Паркінсона, зв'язана з ВІЛ деменція, ALS (аміотрофічний бічний склероз), діабет дорослих; старечий серцевий амілоїдоз; ендокринні пухлини й інші захворювання, включаючи очні хвороби, асоційовані з патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, насамперед асоційовані з зв'язаними з амілоїдом-бета патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, такими як деградація нейронів. Такі патологічні аномалії можуть мати місце, наприклад, у різних тканинах ока, таких як зорова зона кори, приводячи до кортикального порушення зору; передня камера й зоровий нерв, приводячи до глаукоми; кришталик, приводячи до катаракти через відкладення бета-амілоїду; склоподібне тіло, приводячи до амілоїдозу ока; сітківка, приводячи до первинної дегенерації сітківки й дегенерації жовтої плями, наприклад, зв'язаної з віком дегенерації жовтої плями; зоровий нерв, приводячи до друзів зорового нерва, оптичної нейропатії й ретробульбарного невриту; і рогівка, приводячи до ґратчастої дистрофії. 6 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Короткий виклад суті винаходу Одним з варіантів здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який розпізнає й зв'язується принаймні з одним індивідуальним сайтом зв'язування, насамперед принаймні із двома індивідуальними сайтами зв'язування й більш переважно принаймні із трьома індивідуальними сайтами зв'язування на βамілоїдному білку, при цьому кожний із вказаного одного, вказаних принаймні двох, вказаних принаймні трьох сайтів зв'язування містить принаймні один або два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які переважно беруть участь у зв'язування антитіла. Зокрема, химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у винаході, зв'язується принаймні із двома, насамперед принаймні із трьома індивідуальними сайтами зв'язування на β-амілоїдному білку, при цьому принаймні два із трьох індивідуальних сайтів зв'язування містять принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які переважно беруть участь у зв'язування антитіла, і принаймні один із трьох індивідуальних сайтів зв'язування містить принаймні один амінокислотний залишок. Принаймні два індивідуальні сайти зв'язування, які містять принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки, що переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, локалізовані в безпосередній близькості відносно один одного на антигені, розділені та/або фланковані принаймні одним амінокислотним залишком, який не бере участь у зв'язуванні антитіла, або бере участь в істотно меншому ступені в порівнянні із двома вказаними послідовно розташованими амінокислотними залишками, формуючи тим самим конформаційний переривчастий епітоп. Принаймні три індивідуальні сайти зв'язування, які містять принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки й принаймні один амінокислотний залишок відповідно, що переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, локалізовані в безпосередній близькості відносно один одного на епітопі, розділені та/або фланковані принаймні одним амінокислотним залишком, який не бере участь у зв'язуванні антитіла або бере участь в істотно меншому ступені в порівнянні з амінокислотними залишками, які переважно беруть участь у зв'язування антитіла, формуючи тим самим конформаційний переривчастий епітоп. Зокрема, запропоновані химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який розпізнає й зв'язується принаймні з одним індивідуальним сайтом зв'язування, насамперед принаймні із двома індивідуальними сайтами зв'язування, більш переважно принаймні із трьома індивідуальними сайтами зв'язування на β-амілоїдному білку, при цьому кожний із вказаного принаймні одного або вказаних принаймні двох сайтів зв'язування містить принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які переважно беруть участь у зв'язування антитіла, де принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які утворюють перший сайт зв'язування, являють собою –Phe - Phe-, вбудовані в наступну корову послідовність (SEQ ID NO: 9): Xaa3-Phe – Phe – Xaa4 – Xaa5 – Xaa6, де Xaa3 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, норлейцин, Met, Phe і Ile; Xaa4 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, Ser і Ile; Xaa5 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp; Xaa6 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, і де вказані амінокислотні Xaa3, Xaa4, Xaa5 і Xaa6 не беруть участь у зв'язуванні антитіла, або беруть участь в істотно меншому ступені в порівнянні із сайтом зв'язування –Phe - Phe-. Іншим варіантом винаходу є химерне антитіло або його фрагмент або гуманізоване антитіло або його фрагмент, у якому Xaa3 означає Val або Leu, але переважно Val; Xaa4 означає Ala або Val, але переважно Ala; Xaa5 означає Glu or Asp, але переважно Glu; Xaa6 означає Glu or Asp, але переважно Asp. Зокрема, запропоновані химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який розпізнає й зв'язується принаймні з одним індивідуальним сайтом зв'язування, насамперед принаймні із двома індивідуальними сайтами зв'язування, більш переважно принаймні із трьома індивідуальними сайтами зв'язування на β-амілоїдному білку, при цьому вказані індивідуальні сайти зв'язування містять принаймні один і принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки відповідно, які переважно беруть участь у зв'язування антитіла, де принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які 7 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 утворюють перший сайт зв'язування, являють собою –Phe - Phe-, і принаймні один амінокислотний залишок являє собою -His-, вбудовані в наступну корову послідовність: – Xaa1 – His – Xaa3 - Xaa4 – Xaa5 – Xaa6 - Phe – Phe – Xaa7 - Xaa8 – Xaa9-, у якій Xaa1 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає His, Asn, Gln, Lys і Arg, Xaa3 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Asn і Gln, Xaa4 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає His, Asn, Gln, Lys і Arg, Xaa5 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, Ser і Ile; Xaa6 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, норлейцин, Met, Phe і Ile, Xaa7 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu і Ile, Xaa8 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, Xaa9 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, і де амінокислотні залишки Xaa1, Xaa3, Xaa6, Xaa7, Xaa8 і Xaa9 не беруть участь у зв'язуванні антитіла або беруть участь в істотно меншому ступені в порівнянні із сайтом зв'язування –His- і Phe - Phe- відповідно. Іншим варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, у якому Xaa3 означає Gln або Asn, але переважно Gln; Xaa4 означає Lys; Xaa5 означає Leu; Xaa6 означає Val або Leu, але переважно Val; Xaa7 означає Ala або Val, але переважно Ala; Xaa8 означає Glu або Asp, але переважно Glu; і Xaa9 означає Asp або Glu, але переважно Asp. Наступним варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який розпізнає й зв'язується принаймні з одним індивідуальним сайтом зв'язування, насамперед принаймні із двома індивідуальними сайтами зв'язування, більш переважно принаймні із трьома індивідуальними сайтами зв'язування на βамілоїдному білку, при цьому кожний із вказаного принаймні одного або принаймні із вказаних двох індивідуальних сайтів зв'язування містить принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, де принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які утворюють другий сайт зв'язування, являють собою -Lys-Leu-, вбудовані в наступну корову послідовність (SEQ ID NO: 10): Xaa1 – Xaa2 - Lys-Leu – Xaa3, у якій Xaa1 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає His, Asn, Gln Lys і Arg; Xaa2 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Asn і Gln; Xaa3 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, норлейцин, Met, Phe і Ile; і де амінокислотні залишки Xaa2, Xaa3 не беруть участь у зв'язуванні антитіла, або беруть участь в істотно меншому ступені в порівнянні із сайтом зв'язування –Lys Leu-. Наступним варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який розпізнає й зв'язується принаймні з одним індивідуальним сайтом зв'язування, насамперед принаймні із двома індивідуальними сайтами зв'язування, більш переважно принаймні із трьома індивідуальними сайтами зв'язування на βамілоїдному білку, при цьому вказані індивідуальні сайти зв'язування містять принаймні один і принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки відповідно, які переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, де принаймні один і принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які розділені принаймні одним амінокислотним залишком, який не бере участь у зв'язуванні антитіла або, який бере участь в істотно меншому ступені в порівнянні з амінокислотними залишками, які переважно беруть участь у зв'язування антитіла, являють собою -His- і -Lys-Leu- відповідно, вбудовані в наступну корову послідовність: His – Xaa2 – Lys - Leu – Xaa3– Xaa4– Xaa5 - Xaa6 – Xaa7 - Xaa8 –, у якій Xaa2 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Asn і Gln; Xaa3 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, норлейцин, Met, Phe і Ile; 8 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Xaa4 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, норлейцин, Met, Phe і Ile; Xaa5 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, норлейцин, Met, Phe і Ile; Xaa6 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, Ser і Ile; Xaa7 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp; Xaa8 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, і де амінокислотні залишки Xaa2, Xaa3, Xaa6, Xaa7, Xaa8 не беруть участь у зв'язуванні антитіла, або беруть участь в істотно меншому ступені в порівнянні із сайтом зв'язування –His- і –Lys - Leu- відповідно. Іншим варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, у якому Xaa2 означає Gln або Asn, але переважно Gln; Xaa3 означає Val або Leu, але переважно Val; Xaa4 означає Phe; Xaa5 означає Phe; Xaa6 означає Ala або Val, але переважно Ala; Xaa7 означає Glu або Asp, але переважно Glu; і Xaa8 означає Asp або Glu, але переважно Asp. Наступним варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який розпізнає й зв'язується принаймні із двома індивідуальними сайтами зв'язування на β-амілоїдному білку, при цьому кожний із принаймні двох вказаних сайтів зв'язування містить принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, де принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які розділені принаймні одним амінокислотним залишком, який не бере участь у зв'язуванні антитіла, або, який бере участь в істотно меншому ступені в порівнянні з послідовно розташованими, амінокислотними залишками, такими як –Phe - Phe- і -Lys - Leu- відповідно, утворюють перший і другий сайт зв'язування, вбудовані в наступну корову послідовність: Xaa1 – Xaa2 – Lys - Leu – Xaa3 - Phe – Phe - Xaa4 – Xaa5 – Xaa6, у якій Xaa1 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає His, Asn, Gln Lys і Arg; Xaa2 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Asn і Gln; Xaa3 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, норлейцин, Met, Phe і Ile; Xaa4 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, Ser і Ile; Xaa5 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp; Xaa6 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, і де амінокислотні залишки Xaa2, Xaa3, Xaa4, Xaa5 і Xaa6 не беруть участь у зв'язуванні антитіла, або беруть участь в істотно меншому ступені в порівнянні із сайтом зв'язування –Lys - Leu- і –Phe Phe- відповідно. Наступним варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який розпізнає й зв'язується принаймні з одним індивідуальним сайтом зв'язування, насамперед принаймні із двома індивідуальними сайтами зв'язування, більш переважно принаймні із трьома індивідуальними сайтами зв'язування на βамілоїдному білку, при цьому вказані індивідуальні сайти зв'язування містять принаймні один і принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки відповідно, які переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, де принаймні один і принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки розділені принаймні одним амінокислотним залишком, який не бере участь у зв'язуванні антитіла або, який бере участь в істотно меншому ступені в порівнянні з амінокислотними залишками, які переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, і де вказані амінокислотні залишки являють собою -His- і -Phe-Phe- і -Lys-Leu- відповідно, вбудовані в наступну корову послідовність: His – Xaa2 – Lys - Leu – Xaa3 - Phe – Phe - Xaa4 – Xaa5 – Xaa6, у якій Xaa2 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Asn і Gln; Xaa3 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, норлейцин, Met, Phe і Ile; Xaa4 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, Ser і Ile; Xaa5 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp; 9 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Xaa6 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, і де амінокислотні залишки Xaa2, Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6 не беруть участь у зв'язуванні антитіла, або беруть участь в істотно меншому ступені в порівнянні із сайтом зв'язування –His-, –Lys - Leu- і – Phe - Phe- відповідно. Іншим варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, у якому Xaa2 означає Gln або Asn, але переважно Gln; Xaa3 означає Val або Leu, але переважно Val; Xaa4 означає Ala або Val, але переважно Ala; Xaa5 означає Glu або Asp, але переважно Glu, і Xaa6 означає Asp або Glu, але переважно Asp. Наступним варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який розпізнає й зв'язується принаймні із двома індивідуальними сайтами зв'язування на β-амілоїдному білку, при цьому кожний із принаймні двох індивідуальних сайтів зв'язування містить принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, де принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки розділені принаймні одним амінокислотним залишком, який не бере участь у зв'язуванні антитіла або, який бере участь в істотно меншому ступені в порівнянні із вказаними послідовно розташованими амінокислотними залишками, що представляють собою -Phe-Phe- і -Lys-Leu- відповідно, які утворюють перший і другий сайт зв'язування, вбудовані в наступну корову послідовність: Xaa1 – Xaa2 – Lys - Leu – Xaa3 - Phe – Phe - Xaa4 – Xaa5 – Xaa6, у якій Xaa1 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає His, Asn, Gln, Lys і Arg; Xaa2 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Asn і Gln; Xaa3 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Val, Ala, Leu, Met, Phe, норлейцин і Ile; Xaa4 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu і Ile; Xaa5 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp; Xaa6 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, і де амінокислотні залишки Xaa2, Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6 не беруть участь у зв'язуванні антитіла, або беруть участь в істотно меншому ступені в порівнянні із сайтами зв'язування –Lys - Leu- і –Phe Phe- відповідно. Іншим варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, у якому Xaa1 означає His або Arg, але переважно His; Xaa2 означає Gln або Asn, але переважно Gln; Xaa3 означає Val або Leu, але переважно Val; Xaa4 означає Ala або Val, але переважно Ala; Xaa5 означає Glu або Asp, але переважно Glu, і Xaa6 означає Asp або Glu, але переважно Asp. Наступним варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який розпізнає й зв'язується принаймні із двома індивідуальними сайтами зв'язування на β-амілоїдному білку, при цьому кожний із принаймні двох індивідуальних сайтів зв'язування містить принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, що представляють собою – Phe – Phe – Ala - Glu -, насамперед – Phe – Phe - Ala -, але найбільш переважно – Phe Phe - і – Lys - Leu - відповідно, і вказані принаймні два індивідуальні сайти зв'язування мають амінокислотну послідовність – Val – Phe – Phe – Ala – Glu - Asp -, представлену в SEQ ID NO:7, і амінокислотну послідовність His-Gln-Lys-Leu-Val -, представлену в SEQ ID NO:8, відповідно. Одним з варіантів здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який розпізнає й зв'язується принаймні з одним індивідуальним сайтом зв'язування, насамперед принаймні із двома індивідуальними сайтами зв'язування, більш переважно принаймні із трьома індивідуальними сайтами зв'язування на βамілоїдному білку, при цьому вказаний принаймні один або вказані принаймні два індивідуальні сайти зв'язування містить(ять) принаймні один і принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки відповідно, що переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, які являють собою – Phe - Phe -і - Lys-Leu -, і -His- відповідно, де вказані індивідуальні сайти зв'язування вбудовані в амінокислотну послідовність –Val - Phe - Phe - Ala - Glu- і амінокислотну послідовність –His – Gln – Lys – Leu - Val - відповідно. 10 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Наступним варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який розпізнає й зв'язується принаймні із двома індивідуальними сайтами зв'язування на β-амілоїдному білку, кожний з яких містить принаймні два послідовно розташованих амінокислотних залишки в амінокислотних послідовностях, представлених в SEQ ID NO:7 і 8 відповідно, де вказані послідовно розташовані амінокислотні залишки, насамперед –Phe - Phe- і –Lys - Leu-, переважно беруть участь у зв'язуванні βамілоїдного білка. Наступним конкретним варіантом здійснення винаходу є антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у винаході, яке/який зв'язується з 4 індивідуальними сайтами зв'язування на β-амілоїдному білку, при цьому 4 індивідуальних сайти зв'язування включають 2 сайти зв'язування, кожний з яких містить один амінокислотний залишок, і 2 сайти зв'язування, кожний з яких містить два послідовно розташованих амінокислотних залишки, які переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, де вказані 4 індивідуальні сайти зв'язування локалізовані в безпосередній близькості відносно один одного на β-амілоїдному білку й де вказані 4 сайти зв'язування розділені принаймні одним амінокислотним залишком, який не бере участь у зв'язуванні антитіла або бере участь в істотно меншому ступені в порівнянні із вказаним одним амінокислотним залишком, і вказаними двома послідовно розташованими амінокислотними залишками 4 індивідуальних сайтів зв'язування, утворюючи тим самим конформаційний переривчастий епітоп. Зокрема, перші із двох послідовно розташованих амінокислотних залишків, які переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, являють собою –Lys - Leu-, а другі із принаймні двох послідовно розташованих амінокислотних залишків являють собою –Phe - Phe-, перший з одиночних амінокислотних залишків являє собою -His-, а другий з одиночних амінокислотних залишків являє собою -Asp-, які вбудовані в наступну корову послідовність: - Xaa1– His – Xaa2 – Lys – Leu –Xaa3 – Phe – Phe – Xaa4 – Xaa5 – Asp. – Xaa6, у якій Xaa1 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає His, Asn, Gln, Lys і Arg, але переважно His; Xaa2 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Asn і Gln, але переважно Gln; Xaa3 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, норлейцин, Met, Phe і Ile, але переважно Val; Xaa4 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, Ser і Ile, переважно Ala; Xaa5 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, переважно Glu; Xaa6 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, норлейцин, Met, Phe і Ile, переважно Val; де амінокислотні залишки Xaa 1, Xaa2, Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6 не беруть участь у зв'язуванні антитіла, або беруть участь в істотно меншому ступені в порівнянні із сайтом зв'язування –His-, –Asp-, -Lys - Leu і –Phe - Phe-. Одним з варіантів здійснення винаходу є антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у винаході, яке/який зв'язується з 4 індивідуальними сайтами зв'язування на β-амілоїдному білку, при цьому 4 індивідуальних сайти зв'язування включають 2 сайти зв'язування, кожний з яких містить один амінокислотний залишок, і два сайти зв'язування, кожний з яких містить два послідовно розташованих амінокислотних залишки, при цьому перші із двох послідовно розташованих амінокислотних залишків, які переважно беруть участь у зв'язуванні антитіла, являють собою –Lys - Leu-, а другі із принаймні двох послідовно розташованих амінокислотних залишків являють собою –Phe - Phe-, перший з одиночних амінокислотних залишків являє собою -His-, а другий з одиночних амінокислотних залишків являють собою -Asp-, де залишки вбудовані в наступну корову послідовність: - Xaa1– His – Xaa2 – Lys – Leu –Xaa3 – Phe – Phe – Xaa4 – Xaa5 – Asp – Xaa6, у якій Xaa1 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає His, Asn, Gln, Lys і Arg, але переважно His; Xaa2 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Asn і Gln, але переважно Gln; Xaa3 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, норлейцин, Met, Phe і Ile, переважно Val; Xaa4 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, Ser і Ile, переважно Ala; Xaa5 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, переважно Glu; 11 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 Xaa6 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala, Val, Leu, норлейцин, Met, Phe і Ile, переважно Val; і де амінокислотні залишки Xaa 1, Xaa2, Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6 не беруть участь у зв'язуванні антитіла або беруть участь в істотно меншому ступені в порівнянні із сайтом зв'язування –His-, –Asp-, -Lys - Leu і –Phe - Phe-. В одному з варіантів здійснення винаходу вказані вище сайти розпізнавання й зв'язування утворюють конформаційний переривчастий епітоп, локалізований в ділянці β-амілоїдного білка між амінокислотними залишками 12-24, насамперед між залишками 14-23, більш конкретно між амінокислотними залишками 14 і 20, при цьому принаймні кожний із двох індивідуальних сайтів розпізнавання й зв'язування, що містять принаймні 2 амінокислотних залишки, локалізований у положенні 16 і 17 і в положенні 19 і 20 відповідно, і при цьому принаймні один індивідуальний сайт розпізнавання й зв'язування, що містить принаймні 1 амінокислотний залишок, локалізований у положенні 14, при цьому вказані залишки переважно беруть участь у зв'язуванні β-амілоїдного білка й при цьому індивідуальні сайти розпізнавання й зв'язування принаймні на одній стороні фланковані амінокислотними залишками, насамперед залишками 21 і 22, і розділені одним амінокислотним залишком, локалізованим у положенні 15 і 18, ці амінокислотні залишки не беруть участь безпосередньо у зв'язуванні антигену або беруть участь принаймні в істотно меншому ступені. Ще в одному варіанті здійснення винаходу вказані принаймні три індивідуальних сайти розпізнавання й зв'язування фланковані на обох кінцях амінокислотними залишками, насамперед залишками 12 і 13 і залишками 21 і 22, і розділені одним амінокислотним залишком, локалізованим у положенні 15 і 18, ці амінокислотні залишки не беруть участь безпосередньо у зв'язуванні антигену або принаймні беруть участь в істотно меншому ступені. У конкретному варіанті здійснення винаходу вказані послідовно розташовані амінокислотні залишки, насамперед –Lys - Leu- у положенні 16 і 17 і -Phe - Phe- у положенні 19 і 20, які переважно беруть участь у зв'язуванні β-амілоїдного білка, вбудовані в наступну корову ділянку: Val– 12 30 40 45 50 55 His– 14 Gln– 15 Lys– 16 Leu– 17 Val– 18 Phe– 19 Phe– 20 Ala– 21 Glu– 22 Asp23 В іншому конкретному варіанті здійснення винаходу вказані амінокислотні залишки, насамперед –Lys - Leu- у положенні 16 і 17 і –Phe - Phe- у положенні 19 і 20, і -His- у положенні 14, які переважно беруть участь у зв'язуванні β-амілоїдного білка, вбудовані в наступну корову ділянку: Val– 12 35 His– 13 His– 13 His– 14 Gln– 15 Lys– 16 Leu– 17 Val– 18 Phe– Phe– 19 20 Ala– 21 Glu– 22 Asp– 23 Val– 24 Gly– 25 Іншим варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який містить варіабельну ділянку легкого й важкого ланцюга відповідно, принаймні одну CDR з нелюдського антитіла, насамперед дві CDR з нелюдського антитіла, більш переважно три CDR з нелюдського антитіла, вбудовані в одну або декілька отриманих з організму людини або приматів каркасних ділянок, і необов'язково константну ділянку, отриману з антитіла людини або приматів, де гуманізоване антитіло або його фрагмент має здатність специфічно розпізнавати й зв'язувати β-амілоїдний білок, насамперед β-амілоїдний мономерний пептид, більш переважно β-амілоїдний полімерний пептид, ще більш переважно β-амілоїдні волокна, фібрили або філаменти у виділеному стані або у вигляді частини β-амілоїдної бляшки, в епітопі, що містить наступну амінокислотну послідовність (SEQ ID NO: 11): Xaa1 - Xaa2 - Lys - Leu - Xaa3-Phe - Phe - Xaa4 - Xaa5 - Xaa6, у якій Xaa1 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає His, Asn, Gln, але переважно His; Xaa2 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Asn і Gln, але переважно Gln; і Xaa3 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Val, Leu і Ile, але переважно Val; Xaa4 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala і Val, але переважно Ala; Xaa5 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, але переважно Glu; Xaa6 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, але переважно Asp. 12 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Ще одним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який містить варіабельні ділянки легкого й важкого ланцюга відповідно, принаймні одну CDR з нелюдського антитіла, насамперед дві CDR з нелюдського антитіла, більш переважно три CDR з нелюдського антитіла, вбудовані в одну або декілька отриманих з антитіла людини або приматів каркасних ділянок, і необов'язково константну ділянку, отриману з антитіла людини або приматів, де гуманізоване антитіло або його фрагмент має здатність специфічно розпізнавати й зв'язувати β-амілоїдний білок, насамперед β-амілоїдний мономерний пептид, більш переважно β-амілоїдний полімерний пептид, ще більш переважно β-амілоїдні волокна, фібрили або філаменти у виділеному стані або у вигляді частини β-амілоїдної бляшки, в епітопі, що містить наступну амінокислотну послідовність: His - Xaa2 - Lys - Leu - Xaa3 - Phe - Phe - Xaa4 - Xaa5 - Xaa6, у якій Xaa2 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Asn і Gln, але переважно Gln; і Xaa3 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Val, Leu і Ile, але переважно Val; Xaa4 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Ala і Val, але переважно Ala; Xaa5 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, але переважно Glu; Xaa6 означає амінокислотний залишок, вибраний із групи, яка включає Glu і Asp, але переважно Glu; і де вказані амінокислотні залишки Xaa2, Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6, не беруть участь у зв'язуванні антитіла або беруть участь в істотно меншому ступені в порівнянні із сайтом зв'язування –His- і –Lys - Leu-, і -Phe - Phe-. У конкретному варіанті здійснення винаходу CDR з нелюдського антитіла одержують із донорського антитіла, але переважно з мишиного донорського антитіла до фрагмента антигену, що не містить вказаний індивідуальний сайт зв'язування. Цей зсув в епітопній ділянці можна принаймні частково викликати шляхом застосування надмолекулярної антигенної конструкції, що містить антигенний пептид, який відповідає амінокислотній послідовності β-амілоїдного пептиду, насамперед β-амілоїдного пептиду Aβ1-16, модифікованого гідрофільним фрагментом, таким, наприклад, як поліетиленгліколь (ПЕГ), де гідрофільний фрагмент ковалентно зв'язаний з кожним кінцем антигенного пептиду принаймні через одну, насамперед через одну або дві амінокислоти, такі, наприклад, як лізин, глутамінова кислота й цистеїн, або будь-яку іншу прийнятну амінокислоту або аналог амінокислоти, які можуть служити сполучним елементом для сполучення гідрофільного фрагмента з описаним нижче пептидним фрагментом, у процесі імунізації. Коли ПЕГ застосовують як гідрофільний фрагмент, то вільні кінці ПЕГ ковалентно зв'язують із фосфатидилетаноламіном або будь-якою іншою сполукою, яка може функціонувати як "заякорювальний" елемент, наприклад, для вбудовування антигенної конструкції в бішар ліпосоми, як представлено в даному описі. Зокрема, CDR з нелюдського антитіла одержують із мишиного донорського антитіла, що має характерні властивості антитіла ACI-01-Ab7C2 (яке в даному описі позначено також як "mС2"), депонованого відповідно до вимог Будапештського договору 01 грудня 2005 р. у Німецькій колекції мікроорганізмів і клітинних культур (DSMZ), Брауншвейг, Mascheroder Weg 1 B, 38124 Braunschweig, під реєстраційним номером DSM ACC2750. В одному з варіантів здійснення винаходу CDR з нелюдського антитіла одержують із мишиного донорського антитіла ACI-01-Ab7C2 (яке в даному описі позначено також як "mС2"), депонованого відповідно до вимог Будапештського договору 01 грудня 2005 р. у Німецькій колекції мікроорганізмів і клітинних культур (DSMZ), Брауншвейг, Mascheroder Weg 1 B, 38124 Braunschweig, під реєстраційним номером DSM ACC2750). Як компонент протоколу імунізації для зсуву епітопної ділянки можна застосовувати також ліпід А. Конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло або його фрагмент, що містить інтегрований в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки принаймні один пептид, амінокислотна послідовність якого вибрана із групи послідовностей, яка включає SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), і SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR). Іншим варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло або його фрагмент, де вказане гуманізоване антитіло містить інтегрований в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки принаймні один пептид, амінокислотна послідовність якого вибрана із групи 13 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 послідовностей, яка включає SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR). Ще одним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло або його фрагмент, де вказане гуманізоване антитіло містить інтегрований в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки принаймні один пептид, що має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR). Зокрема, винахід стосується варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), що містить інтегрований в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки принаймні один пептид, що має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR). Іншим конкретним варіантом здійснення винаходу є варіабельна ділянка важкого ланцюга (HCVR), що містить інтегрований в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки принаймні один пептид, амінокислотна послідовність якого вибрана із групи послідовностей, яка включає SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR). Винахід стосується також гуманізованого антитіла або його фрагменту, що містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки принаймні два пептиди, ці пептиди є різними й містять амінокислотну послідовність, вибрану із групи послідовностей, яка включає SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), і SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), де та сама CDR не може бути присутня двічі в антитілі. Зокрема, якщо обидві із принаймні двох присутніх CDR являють собою CDR варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), то принаймні одна із вказаних CDR повинна являти собою CDR1, якій відповідає SEQ ID NO: 4. Винахід стосується також гуманізованого антитіла або його фрагменту, що містить інтегровані в отримані з організму людини або приматів каркасні ділянки важкого ланцюга принаймні два пептиди, амінокислотна послідовність яких вибрана із групи послідовностей, яка включає SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), але насамперед гуманізованого антитіла або його фрагменту, у якому та сама CDR не може бути присутня двічі в антитілі. Зокрема, винахід стосується варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), що містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки важкого ланцюга принаймні два пептиди, амінокислотна послідовність яких вибрана із групи послідовностей, яка включає SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR). Наступним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло або його фрагмент, що містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки легкого ланцюга принаймні два пептиди, амінокислотна послідовність яких вибрана із групи послідовностей, яка включає SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR). Зокрема, винахід стосується варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), що містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки легкого ланцюга принаймні два пептиди, амінокислотна послідовність яких вибрана із групи послідовностей, яка включає SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), де та сама CDR не може бути присутня двічі в антитілі, і, зокрема, принаймні одна із вказаних CDR повинна являти собою CDR1, якій відповідає SEQ ID NO: 4. Винахід стосується також гуманізованого антитіла або його фрагменту, яке/який містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки важкого ланцюга пептиди, що мають амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), переважно в вказаному вище порядку. Зокрема, винахід стосується варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), що містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки важкого ланцюга пептиди, що мають амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), переважно в вказаному вище порядку. 14 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Винахід стосується також гуманізованого антитіла або його фрагменту, яке/який містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки легкого ланцюга пептиди, що мають амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (LCVR), переважно в вказаному вище порядку. Зокрема, винахід стосується варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), що містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки легкого ланцюга пептиди, що мають амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), переважно в вказаному вище порядку. Винахід стосується також гуманізованого антитіла або його фрагменту, що містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки принаймні три пептиди, які мають амінокислотну послідовність, вибрану із групи, яка включає SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), і SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), але переважно гуманізованого антитіла або його фрагменту, де та сама CDR не може бути присутня двічі в антитілі. Іншим варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло або його фрагмент, де антитіло містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки принаймні чотири пептиди, які мають амінокислотну послідовність, вибрану із групи, яка включає SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), і SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), але переважно гуманізованого антитіла або його фрагменту, де та сама CDR не може бути присутня двічі в антитілі. Ще одним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло або його фрагмент, що містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки принаймні п'ять пептидів, які мають амінокислотну послідовність, вибрану із групи, яка включає SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), і SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), але переважно гуманізованого антитіла або його фрагменту, де та сама CDR не може бути присутня двічі в антитілі. Ще одним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло або його фрагмент, яке/який містять інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки пептиди, що мають амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), і SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1, SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR). Конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка важкого ланцюга (HCVR) або фрагмент, де гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка важкого ланцюга (HCVR) або фрагмент містить інтегрований в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки важкого ланцюга принаймні пептид, що має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR). Іншим конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка важкого ланцюга (HCVR) або фрагмент, де гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка важкого ланцюга (HCVR) або фрагмент містить інтегрований в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки важкого ланцюга принаймні пептид, що має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR). Іншим конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка важкого ланцюга (HCVR) або фрагмент, де гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка важкого ланцюга (HCVR) або фрагмент містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки важкого ланцюга принаймні два пептиди, що мають амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1, і SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR). Наступним конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка важкого ланцюга (HCVR) або фрагмент, де гуманізоване антитіло, його 15 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 варіабельна ділянка важкого ланцюга (HCVR) або фрагмент містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки важкого ланцюга принаймні два пептиди, що мають амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR). Іншим конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка важкого ланцюга (HCVR) або фрагмент, де гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка важкого ланцюга (HCVR) або фрагмент містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки важкого ланцюга принаймні два пептиди, що мають амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2, і SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR). Іншим конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка легкого ланцюга (LCVR) або фрагмент, де гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка легкого ланцюга (LCVR) або фрагмент містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки легкого ланцюга принаймні два пептиди, що мають амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1, і SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR). Наступним конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка легкого ланцюга (LCVR) або фрагмент, де гуманізоване антитіло, його варіабельна ділянка легкого ланцюга (LCVR) або фрагмент містить інтегровані в отримані з антитіла людини або приматів каркасні ділянки легкого ланцюга принаймні два пептиди, що мають амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1, і SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR). Крім того, під обсяг винаходу підпадають гуманізоване антитіло або його фрагмент, причому й з варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), і з варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR) мишиного антитіла C2 вбудовують принаймні одну з їх CDR-ділянок у принаймні дві CDR-ділянки гуманізованого антитіла. Таким чином, отримане в результаті гуманізоване антитіло або його фрагмент містить - принаймні одну амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1 (HCVR), у сполученні з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1 (LCVR); - принаймні одну амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2 (HCVR), у сполученні з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1 (LCVR); - принаймні одну амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 (HCVR), у сполученні з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO: 4, що відповідає CDR1 (LCVR); - принаймні одну амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1 (HCVR), у сполученні з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2 (LCVR); - принаймні одну амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2 (HCVR), у сполученні з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2 (LCVR); - принаймні одну амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 2, що відповідає CDR2 (HCVR), у сполученні з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 (LCVR); - принаймні одну амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 1, що відповідає CDR1 (HCVR), у сполученні з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 (LCVR); - принаймні одну амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 (HCVR), у сполученні з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO: 5, що відповідає CDR2 (LCVR); - принаймні одну амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 3, що відповідає CDR3 (HCVR), у сполученні з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO: 6, що відповідає CDR3 (LCVR). Ще одним варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, описане/описаний вище, де антитіло містить константну ділянку легкого ланцюга та/або важкого ланцюга, отриману з антитіла людини або приматів. Ще одним варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, у якому принаймні одна, насамперед принаймні одна, але не більше 5, більш переважно принаймні одна, але не більше 4, ще більш переважно принаймні одна, але не більше 3, але найбільш переважно принаймні одна, але не більше 2, амінокислот, які присутні CDR-ділянках легкого ланцюга та/або важкого ланцюга, які представлені в SEQ ID NO: 1-6, замінені шляхом консервативної заміни таким чином, що антитіло повністю зберігає свою функціональну активність. Зокрема, винахід стосується химерного антитіла або його фрагменту, або гуманізованого антитіла або його фрагменту, у якому в CDR2 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 5, Lys у положенні 50 відповідно до 16 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 номенклатури Кебота замінений амінокислотним залишком, вибраним із групи, яка включає Arg, Gln і Glu, переважно Arg. Зокрема, винахід стосується варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), у якій в CDR2, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 5, Lys у положенні 50 відповідно до номенклатури Кебота замінений амінокислотним залишком, вибраним із групи, яка включає Arg, Gln і Glu, переважно Arg. Іншим варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, у якому в CDR2 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 5, Ser у положенні 53 відповідно до номенклатури Кебота замінений амінокислотним залишком, вибраним із групи, яка включає Asn і Thr, але переважно Asn. Зокрема, винахід стосується варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), у якій в CDR2, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 5, Ser у положенні 53 відповідно до номенклатури Кебота замінений амінокислотним залишком, вибраним із групи, яка включає Asn і Thr, але переважно Asn. Одним з варіантів здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, у якому амінокислотна послідовність варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR) ідентична на 90 %, переважно на 95 %, більш переважно на 98 % до послідовності, представленої в SEQ ID NO: 15 і 16 відповідно. Іншим варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, у якому амінокислотна послідовність варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR) ідентична на 90 %, переважно на 95 %, більш переважно на 98 % до послідовності, представленої в SEQ ID NO: 12 і 13 відповідно. Ще одним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло або його фрагмент, у якому амінокислотна послідовність принаймні двох, але особливо переважно трьох CDRділянок варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR), ідентична на 90 %, переважно на 95 %, більш переважно на 98 % до послідовності відповідної CDR-ділянки, представленої в SEQ ID NO: 1-3. Ще одним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло або його фрагмент, у якому амінокислотна послідовність принаймні двох, але особливо переважно трьох CDRділянок варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR), ідентична на 90 %, переважно на 95 %, більш переважно на 98 % до послідовності відповідної CDR-ділянки, представленої в SEQ ID NO: 4-6. Іншим варіантом здійснення винаходу є описане/описаний вище химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у даному винаході, у якому амінокислотна послідовність варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR) ідентична на 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 або 99 % до послідовності, представленої в SEQ ID NO: 15 і 16 відповідно. Ще одним варіантом здійснення винаходу є описане вище химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у даному винаході, у якому амінокислотна послідовність варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR) ідентична на 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 або 99 % до послідовності, представленої в SEQ ID NO: 12 і 13 відповідно. Іншим варіантом здійснення винаходу є описане вище химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у даному винаході, у якому амінокислотна послідовність принаймні однієї, переважно принаймні двох, але особливо переважно трьох CDR-ділянок варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR) ідентична на 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 або 99 % до послідовності, що відповідає CDRділянки, представленої в SEQ ID NO: 1-3. Іншим варіантом здійснення винаходу є описане вище химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у даному винаході, у якому амінокислотна послідовність принаймні однієї, переважно принаймні двох, але особливо переважно трьох CDR-ділянок варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR) ідентична на 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 або 99 % до послідовності, що відповідає CDRділянки, представленої в SEQ ID NO: 4-6. Ще одним варіантом здійснення винаходу є описане вище гуманізоване антитіло, запропоноване в даному винаході, у якому принаймні одна з амінокислот, що входять у послідовності акцепторних каркасних ділянок, отриманих з послідовностей VH і VK людської зародкової лінії відповідно, замінена на амінокислоту з відповідної ділянки мишиного антитіла ACI-01-Ab7C2 або її консервативну заміну. 17 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Зокрема, винахід стосується варіабельної ділянки важкого ланцюга й гуманізованого антитіла, що містить цю варіабельну ділянку важкого ланцюга, відповідно, у яких Trp у положенні 47 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Leu, норлейцин, Ile, Val, Met, Ala і Phe, переважно Leu і Ile, але найбільш переважно Leu, як показано в SEQ ID NO: 15. Винахід стосується також варіабельної ділянки важкого ланцюга й гуманізованого антитіла, що містить цю варіабельну ділянку важкого ланцюга, відповідно, у яких Arg у положенні 94 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи V WO 2009/048537 III варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Ser і Thr, але особливо переважно Ser, як показано в SEQ ID NO: 15. Ще одним варіантом здійснення винаходу є варіабельна ділянка важкого ланцюга й гуманізоване антитіло, що містить цю варіабельну ділянку важкого ланцюга, відповідно, у яких Trp у положенні 47 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Leu, норлейцин, Ile, Val, Met, Ala і Phe, переважно Leu і Ile, але особливо переважно Leu, і Arg у положенні 94 відповідно до номенклатури Кебота замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Ser і Thr, але особливо переважно Ser, як показано в SEQ ID NO: 15. Винахід стосується також варіабельної ділянки легкого ланцюга й гуманізованого антитіла, що містить цю варіабельну ділянку легкого ланцюга, відповідно, у яких Gln у положенні 45 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VK людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VKII варіабельної ділянки легкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Lys, Arg, Gln і Asn, переважно Lys і Arg, але особливо переважно Lys. Винахід стосується також варіабельної ділянки легкого ланцюга й гуманізованого антитіла, що містить цю варіабельну ділянку легкого ланцюга, відповідно, у яких Tyr у положенні 87 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VK людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VKII варіабельної ділянки легкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Phe, Leu, Val, Ile і Ala, переважно Leu і Phe, але особливо переважно Phe. Винахід стосується також варіабельної ділянки легкого ланцюга й гуманізованого антитіла, що містить цю варіабельну ділянку легкого ланцюга, відповідно, у яких Lys у положенні 50 відповідно до номенклатури Кебота в CDR2-ділянці, отриманій з мишиного моноклонального антитіла, переважно мишиного антитіла ACI-01-Ab7C2, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 12, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Arg, Gln, His і Asn, але особливо переважно Arg. Ще одним варіантом здійснення винаходу є варіабельна ділянка легкого ланцюга й гуманізоване антитіло, що містить цю варіабельну ділянку легкого ланцюга, відповідно, у яких Asn у положенні 53 відповідно до номенклатури Кебота в CDR2-ділянці, отриманій з мишиного моноклонального антитіла, переважно мишиного антитіла ACI-01-Ab7C2, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 12, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Ala, Val, Leu, Ser і Ile; але переважно Ser. Ще одним кращим варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, у якому Trp у положенні 47 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Leu, норлейцин, Ile, Val, Met, Ala і Phe, переважно Leu і Ile, але найбільш переважно Leu, і Arg у положенні 94 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Ser і Thr, але найбільш переважно Ser, як показано в SEQ ID NO: 15, і Tyr у положенні 87 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VK людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VKII варіабельної ділянки легкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений 18 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Phe, Leu, Val, Ile і Ala, переважно Leu і Phe, але найбільш переважно Phe. Ще одним варіантом здійснення винаходу є варіабельна ділянка важкого ланцюга й гуманізоване антитіло, що містить цю варіабельну ділянку важкого ланцюга, відповідно, у яких Trp у положенні 47 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, показаної в SEQ ID NO: 15, замінений на Leu. Ще одним варіантом здійснення винаходу є варіабельна ділянка важкого ланцюга й гуманізоване антитіло, що містить цю варіабельну ділянку важкого ланцюга, відповідно, у яких Arg у положенні 94 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений на Ser, як показано в SEQ ID NO: 15. Ще одним варіантом здійснення винаходу є варіабельна ділянка важкого ланцюга й гуманізоване антитіло, що містить цю варіабельну ділянку важкого ланцюга, відповідно, у яких Trp у положенні 47 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений на Leu і Ile, але найбільш переважно на Leu, і Arg у положенні 94 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений на Ser, як показано в SEQ ID NO: 15. Ще одним варіантом здійснення винаходу є варіабельна ділянка легкого ланцюга й гуманізоване антитіло, що містить цю варіабельну ділянку легкого ланцюга, відповідно, у яких Tyr у положенні 87 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VK людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VKII варіабельної ділянки легкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений на Phe. Ще одним варіантом здійснення винаходу є варіабельна ділянка важкого ланцюга й гуманізоване антитіло, що містить цю варіабельну ділянку важкого ланцюга, відповідно, у яких Trp у положенні 47 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений на Leu і Ile, але найбільш переважно на Leu, і Arg у положенні 94 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей V H людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений на Ser, як показано в SEQ ID NO: 15, і Tyr у положенні 87 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VK людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VKII варіабельної ділянки легкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений на Phe. Одним з варіантів здійснення винаходу є варіабельна ділянка важкого ланцюга й гуманізоване антитіло, що містить цю варіабельну ділянку важкого ланцюга, відповідно, у яких Trp у положенні 47 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Leu, норлейцин, Ile, Val, Met, Ala і Phe, переважно Leu і Ile, але найбільш переважно Leu, і Arg у положенні 94 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Ser і Thr, але найбільш переважно Ser, як показано в SEQ ID NO: 15, і в які Lys у положенні 50 згідно із номенклатурою Кебота в CDR2-ділянці, отриманій з мишиного моноклонального антитіла, переважно мишиного антитіла ACI-01-Ab7C2, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Arg, Gln, His і Asn, але найбільш переважно Arg. Одним з варіантів здійснення винаходу є варіабельна ділянка важкого ланцюга й гуманізоване антитіло, що містить цю варіабельну ділянку важкого ланцюга, відповідно, у яких Trp у положенні 47 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Leu, норлейцин, Ile, Val, Met, Ala і Phe, 19 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 переважно Leu і Ile, але найбільш переважно Leu, і Arg у положенні 94 відповідно до номенклатури Кебота в послідовності акцепторної каркасної ділянки, отриманої з послідовностей VH людської зародкової лінії, що стосується підгрупи VHIII варіабельної ділянки важкого ланцюга відповідно до номенклатури Кебота, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Ser і Thr, але найбільш переважно Ser, як показано в SEQ ID NO: 15, і в які Asn у положенні 53 згідно із номенклатурою Кебота в CDR2-ділянці, отриманій з мишиного моноклонального антитіла, переважно мишиного антитіла ACI-01-Ab7C2, замінений амінокислотою, вибраною із групи, яка включає Ala, Val, Leu, Ser і Ile; але найбільш переважно Ser. Конкретним варіантом здійснення винаходу є варіабельна ділянка легкого ланцюга, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 12. Іншим конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, що містить варіабельну ділянку легкого ланцюга, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 12. Конкретним варіантом здійснення винаходу є варіабельна ділянка легкого ланцюга, включаючи сигнальні послідовності, як показано в SEQ ID NO: 13. Іншим конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, що містить повну варіабельну ділянку легкого ланцюга, включаючи сигнальні послідовності, як показано в SEQ ID NO: 13. Іншим конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, що містить варіабельну ділянку легкого ланцюга, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 12, і константну ділянку легкого ланцюга, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 14. Наступним конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, що містить повну варіабельну ділянку легкого ланцюга, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 13, і константну ділянку легкого ланцюга, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 14. Конкретним варіантом здійснення винаходу є варіабельна ділянка важкого ланцюга, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 15. Іншим конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, що містить варіабельну ділянку важкого ланцюга, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 15. Конкретним варіантом здійснення винаходу є варіабельна ділянка важкого ланцюга, включаючи сигнальні послідовності, як показано в SEQ ID NO: 16. Іншим конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, що містить повну варіабельну ділянку важкого ланцюга, включаючи сигнальні послідовності, як показано в SEQ ID NO: 16. Наступним конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, що містить варіабельну ділянку важкого ланцюга, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 15, і константну ділянку важкого ланцюга, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 17. Іншим конкретним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, що містить варіабельну ділянку важкого ланцюга, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 16, і константну ділянку важкого ланцюга, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 17. В одному з варіантів здійснення гуманізоване антитіло, запропоноване у винаході, і описане вище, при спільній інкубації з мономерним Aβ-пептидом, що має принаймні 30, переважно принаймні 35, більш переважно принаймні 38, ще більш переважно принаймні 40 амінокислотних залишків, та/або з полімерним розчинним амілоїдним Aβ-пептидом, що містить множину вказаних мономерних Aβ-ланок, але найбільш переважно з мономерним Aβ 1-42 та/або полімерним розчинним амілоїдним Aβ-пептидом, що містить множину вказаних мономерних Aβ 142-ланок, насамперед при співвідношенні молярних концентрацій антитіла й Aβ 1-42 аж до 1:1000, переважно аж до 1:500, більш переважно аж до 1:300, ще більш переважно аж до 1:200, але найбільш переважно при співвідношенні молярних концентрацій від 1:10 до 1:100, інгібує агрегацію Aβ-мономерів, що приводить до утворення високомолекулярних полімерних фібрил. Зокрема, спільну інкубацію антитіла, запропонованого у винаході, з амілоїдними мономерними та/або полімерними розчинними амілоїдними пептидами здійснюють протягом проміжку часу, що становить від 24 до 60 год., переважно від 30 до 50 год., більш переважно протягом 48 год., але найбільш переважно протягом 24 год., при температурі від 28 до 40 °C, переважно від 32 до 38 °C, найбільш переважно при 37 °C. В конкретному варіанті здійснення винаходу спільну інкубацію з амілоїдними мономерними та/або полімерними розчинними амілоїдними пептидами здійснюють протягом 24 год. при температурі 37 °C. Зокрема, антитіло, насамперед гуманізоване антитіло, запропоноване у винаході, включаючи будь-які функціональні еквіваленти антитіла або його функціональні фрагменти, зв'язується з мономерним Aβ1-42-пептидом та/або полімерним розчинним амілоїдним Aβ 20 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 пептидом, що містить множину вказаних мономерних Aβ1-42-ланок, і при спільній інкубації з мономерним Aβ1-42-пептидом та/або полімерним розчинним амілоїдним Aβ-пептидом, що містить множину вказаних мономерних Aβ1-42-ланок, інгібує агрегацію Aβ-мономерів, що приводить до утворення високомолекулярних полімерних фібрил. В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло, насамперед гуманізоване антитіло, запропоноване у винаході, включаючи будь-які функціональні еквіваленти антитіла або його функціональні фрагменти, інгібує агрегацію мономерів Aβ та/або розчинних полімерів Aβ, що містять множину вказаних мономерних Aβ-ланок, що приводить до утворення високомолекулярних полімерних фібрил, принаймні на 50 %, переважно принаймні на 60 %, переважно принаймні на 65 %, більш переважно принаймні на 75 %, ще більш переважно принаймні на 80 %, але найбільш переважно принаймні на 85 %-90 % або більше, у порівнянні з відповідними мономерами амілоїдного пептиду, інкубованими в буфері (контроль), при співвідношенні молярних концентрацій антитіла й Aβ1-42 аж до 1:1000, переважно при співвідношенні молярних концентрацій від 1:10 до 1:100, але найбільш переважно при співвідношенні молярних концентрацій 1:10. У конкретному варіанті здійснення винаходу антитіло, насамперед гуманізоване антитіло, запропоноване у винаході, включаючи будь-які функціональні еквіваленти антитіла або його функціональні фрагменти, інгібує агрегацію мономерів Aβ та/або розчинних полімерів Aβ, що містять множину вказаних мономерних Aβ-ланок, що приводить до утворення високомолекулярних полімерних фібрил, принаймні на 30 % при співвідношенні молярних концентрацій антитіла й Aβ1-42 1:100. В іншому конкретному варіанті здійснення винаходу антитіло, насамперед гуманізоване антитіло, запропоноване у винаході, включаючи будь-які функціональні еквіваленти антитіла або його функціональні фрагменти, інгібує агрегацію мономерів Aβ та/або розчинних полімерів Aβ, що містять множину вказаних мономерних Aβ-ланок, що приводить до утворення високомолекулярних полімерних фібрил, принаймні на 80 % при співвідношенні молярних концентрацій антитіла й Aβ1-42 1:10. Зв'язування антитіл, запропонованих у винаході й описаних вище, з амілоїдогенними мономерними пептидами та/або полімерними пептидами, але насамперед з амілоїдною формою (1-42), приводить до інгібування агрегації мономерних та/або полімерних амілоїдогенних пептидів, що приводить до утворення високомолекулярних фібрил або філаментів. Внаслідок інгібування агрегації амілоїдогенних мономерних та/або полімерних пептидів антитіла, запропоновані в даному винаході, мають здатність попереджати або сповільнювати утворення амілоїдних бляшок, насамперед амілоїдної форми (1-42), яка, як відомо, стає нерозчинною в результаті зміни вторинної конформації і являє собою основну частину амілоїдних бляшок у головному мозку хворих індивідуумів (тварин) або людей. Здатність антитіл, запропонованих у винаході, інгібувати агрегацію можна визначати будьяким прийнятним методом, відомим у даній галузі, насамперед ультрацентрифугуванням у градієнті густини з наступним аналізом продукту седиментації з використанням ДСН-ПААГ на попередньо створеному градієнті та/або за допомогою флуоресцентного аналізу з використанням тіофлавіну T (Th-T). Одним з варіантів здійснення винаходу є антитіло, насамперед гуманізоване антитіло, описане у винаході, включаючи будь-які функціональні еквіваленти антитіла або його функціональні фрагменти, де антитіло при спільній інкубації, насамперед при співвідношенні молярних концентрацій від 1:5 до 1:1000, переважно від 1:10 до 1:500, більш переважно при співвідношенні від 1:10 до 1:300, ще більш переважно при співвідношенні від 1:10 до 1:100, з раніше сформованими високомолекулярними полімерними амілоїдними фібрилами або філаментами, які утворилися в результаті агрегації мономерних Aβ-пептидів, які мають принаймні 30, переважно принаймні 35, більш переважно принаймні 38, ще більш переважно принаймні 40 амінокислотних залишків, але найбільш переважно мономерних Aβ 1-42-пептидів, має здатність порушувати агрегацію раніше сформованих високомолекулярних полімерних фібрил або філаментів принаймні на 20 %, насамперед принаймні на 30 %, більш переважно принаймні на 35 %, ще більш переважно принаймні 40 %, але найбільш переважно принаймні на 50 % або більше. У конкретному варіанті здійснення винаходу інгібування антитілом агрегації й здатність антитіла порушувати агрегацію відповідно визначають ультрацентрифугуванням у градієнті густини з наступним аналізом продукту седиментації з використанням ДСН-ПААГ на попередньо створеному градієнті. 21 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 В іншому конкретному варіанті здійснення винаходу інгібування антитілом агрегації й здатність антитіла порушувати агрегацію відповідно визначають за допомогою флуоресцентного аналізу з використанням тіофлавіну T (Th-T). В іншому конкретному варіанті здійснення винаходу антитіло, запропоноване у винаході, спільно інкубують з амілоїдом у вигляді раніше сформованих високомолекулярних полімерних фібрил або філаментів протягом 12-36 год., переважно 18-30 год., більш переважно 24 год. при температурі від 28 до 40 °C, переважно від 32 до 38 °C, більш переважно при 37 °C. Зокрема, спільну інкубацію з раніше сформованими високомолекулярними полімерними фібрилами або філаментами здійснюють протягом 24 год. при температурі 37 °C. У конкретному варіанті здійснення винаходу антитіло, насамперед гуманізоване антитіло, запропоноване у винаході, включаючи будь-які функціональні еквіваленти антитіла або його функціональні фрагменти, має здатність порушувати агрегацію раніше сформованих полімерних фібрил або філаментів принаймні на 24 % при співвідношенні молярних концентрацій антитіла й Aβ1-42 1:100. В іншому конкретному варіанті здійснення винаходу антитіло, насамперед гуманізоване антитіло, запропоноване у винаході, включаючи будь-які функціональні еквіваленти антитіла або його функціональні фрагменти, має здатність порушувати агрегацію раніше сформованих полімерних фібрил або філаментів принаймні на 32 % при співвідношенні молярних концентрацій антитіла й Aβ1-42 1:10. Шляхом порушення агрегації амілоїдогенних полімерних фібрил або філаментів антитіла, запропоновані в даному винаході, мають здатність попереджати або сповільнюватиутворення амілоїдних бляшок, що приводить до полегшення симптомів, асоційованих із захворюванням, і сповільненню або припиненню його розвитку. Таким чином, наступним варіантом здійснення винаходу є антитіло, насамперед гуманізоване антитіло, включаючи будь-які функціональні еквіваленти антитіла або його функціональні фрагменти, описані вище, де антитіло має здатність знижувати загальну кількість Aβ у головному мозку індивідуума, насамперед ссавця, але переважно людини, що страждає від захворювання або стану, що приводить до підвищеної концентрації Aβ у головному мозку. Наступним варіантом здійснення винаходу є гуманізоване антитіло, запропоноване у винаході й описане вище, де антитіло має біфункціональність, яка проявляється як у здатності інгібувати агрегацію, так і в здатності порушувати агрегацію, насамперед у сполученні з високому рівнем конформаційної чутливості. Зокрема, винахід стосується химерного антитіла або його фрагменту, або гуманізованого антитіла або його фрагменту, запропонованого у винаході й описаного вище, де антитіло при спільній інкубації з амілоїдними мономерними та/або полімерними розчинними амілоїдними пептидами, насамперед з β-амілоїдними мономерними пептидами, такими, наприклад, як мономерні Aβ-пептиди 1-39, 1-40, 1-41 або 1-42, та/або полімерним розчинним β-амілоїдним пептидом, що містить множину вказаних мономерних Aβ-ланок, але насамперед з Aβ1-42мономерним та/або полімерним розчинним Aβ-амілоїдним пептидом, що містить множину вказаних мономерних Aβ1-42-ланок, інгібує агрегацію Aβ-мономерів у високомолекулярні полімерні фібрили або філаменти й, крім того, при спільній інкубації з раніше сформованими високомолекулярними полімерними амілоїдними фібрилами або філаментами, які утворилися в результаті агрегації амілоїдних мономерних пептидів, насамперед мономерних β-амілоїдних пептидів, таких, наприклад, як мономерні Aβ-пептиди 1-39, 1-40, 1-41 або 1-42, але насамперед мономерні Aβ1-42-пептиди, має здатність порушувати агрегацію раніше сформованих полімерних фібрил або філаментів. Другим об'єктом винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у даному винаході й описане/описаний вище, де антитіло має здатність індукувати перехід β-складчастої конформації в конформацію у вигляді α-спіралі та/або довільної спіралі, але насамперед у конформацію у вигляді довільної спіралі, ще більш переважно в конформацію у вигляді довільної спіралі в конкретній ділянці молекули, насамперед в районі Tyr 10 і Val12 Aβ-білка, що приводить до підвищення частки конформації у вигляді довільної спіралі за рахунок β-складчастої конформації й підвищує солюбілізацію раніше сформованих високомолекулярних полімерних амілоїдних фібрил або філаментів. Зокрема, відбувається зниження частки β-складчастої конформації принаймні на 30 %, насамперед принаймні на 35 % і більш переважно принаймні на 40 % і більше в порівнянні з відповідними раніше сформованими амілоїдними полімерними фібрилами або філаментами, які інкубували в буфері (контроль). Здатність антитіла індукувати конформаційний перехід вторинної структури можна визначати будь-яким прийнятним методом, відомим у даній галузі, насамперед за допомогою 22 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 13С-ЯМР-спектроскопії твердого тіла, але переважно шляхом визначення інтегральних інтенсивностей, обумовлених конформаціями Tyr 10 і Va112 Cβ в Aβ 1-42-пептиді. Наступним варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у даному винаході й описане/описаний вище, яке/який містить принаймні один легкий ланцюг або його фрагмент або принаймні один важкий ланцюг або його фрагмент, де зв'язування антитіла або його фрагмента з Aβ-мономером характеризуються високою афінністю зв'язування, при цьому значення K D -7 -12 становить від принаймні приблизно 1 × 10 M до принаймні приблизно 1× 10 M, переважно від -8 -11 принаймні приблизно 1 × 10 M до принаймні приблизно 1× 10 M, більш переважно від -9 -10 принаймні приблизно 1 × 10 M до принаймні приблизно 1 × 10 M, ще більш переважно від -8 -8 принаймні приблизно 1 × 10 M до принаймні приблизно 2 ×10 M, але краще антитіло або його фрагмент не дає якої-небудь істотної перехресної реакції з амілоїдним білком-попередником (APP). Ще одним варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у даному винаході й описане/описаний вище, яке/який містить принаймні один легкий ланцюг або його фрагмент або принаймні один важкий ланцюг або його фрагмент, де зв'язування антитіла або його фрагмента з Aβ-волокном, -фібрилою або -філаментом характеризуються високою афінністю зв'язування, -7 при цьому значення KD становить від принаймні приблизно 1 × 10 M до принаймні приблизно -12 -8 -11 1× 10 M, переважно від принаймні приблизно 1 × 10 M до принаймні приблизно 1× 10 M, -9 -10 більш переважно від принаймні приблизно 1 × 10 M до принаймні приблизно 1 × 10 M, ще -9 -9 більш переважно від принаймні приблизно 2 × 10 M до принаймні приблизно 5 ×10 M, але краще антитіло або його фрагмент не дає якої-небудь істотної перехресної реакції з амілоїдним білком-попередником (APP). В іншому варіанті здійснення винаходу для антитіла, запропонованого у винаході й описаного вище, або його фрагмента характерна афінність до зв'язування з Aβ-волокном, фібрилою або -філаментом, принаймні в 2 рази, насамперед принаймні в 4 рази, переважно принаймні в 10 разів, переважно принаймні в 15 разів, більш переважно принаймні в 20 разів, але найбільш переважно принаймні в 25 разів більше висока, ніж афінність до зв'язування з Aβмономером. Ще одним варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, описане/описаний вище, де антитіло характеризується значним зв'язуванням з агрегованим Aβ, включаючи Aβ-бляшки, в організмі ссавців, насамперед у головному мозку людини, але переважно не дає якої-небудь істотної перехресної реакції з амілоїдним білком-попередником (APP). Іншим варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, описане/описаний вище, де антитіло характеризується значним зв'язуванням з розчинним полімерним амілоїдом, насамперед амілоїдом β (Aβ), включаючи Aβ-мономери, в організмі ссавців, насамперед у головному мозку людини, але переважно не дає якої-небудь істотної перехресної реакції з амілоїдним білкомпопередником (APP). Іншим варіантом здійснення винаходу є химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у винаході й описане/описаний вище, де антитіло істотно знижує завантаження Aβ-бляшками в організмі ссавця, насамперед головному мозку людини. Це може відбуватися або в результаті зв'язування антитіла із бляшкою, або в результаті зсув рівноваги між амілоїдом, насамперед амілоїдом β (Aβ) у його нерозчинному й агрегованому стані, убік його розчинної форми в результаті порушення агрегації волокон з утворенням розчинних полі- і мономерних форм шляхом індукції зміни конформації й зв'язування й стабілізації амілоїдних форм із порушеною агрегацією й солюбілізованих амілоїдних форм, насамперед форм амілоїду β (Aβ), у тканині та/або загальній воді організму, насамперед у головному мозку. Завдяки активності антитіла, запропонованого у винаході, відбувається головним чином периферичний кліренс і катаболізм замість нагромадження в тканині та/або загальній воді організму, насамперед у головному мозку. Таким чином, сприятливу дію антитіла, запропонованого у винаході, можна одержувати без зв'язування антитіла із бляшкою. Завдяки його стабілізуючій активності, антитіло, запропоноване у винаході, має здатність нейтралізувати токсичні дії полімерного й менш агрегованого розчинного амілоїдного білка, насамперед білка амілоїду β (Aβ), у тканині та/або загальній воді організму. Таким чином, у конкретному варіанті здійснення винаходу антитіло, запропоноване у винаході, може виявляти сприятливу дію без необхідності у зв'язуванні агрегованого амілоїду бета в головному мозку. 23 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Ще одним об'єктом винаходу є гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у даному винаході й описане/описаний вище, яке/який містить принаймні один легкий ланцюг або його фрагмент або принаймні один важкий ланцюг або його фрагмент, у які вбудовані принаймні одна, переважно дві й більш переважно три CDR-ділянки, отриманих з мишиного донорського антитіла, насамперед мишиного антитіла ACI-01-Ab7C2 (у контексті даного опису позначене також як "mС2" і "hС2" у випадку гуманізованого антитіла C2), яке депоновано 01 грудня 2005 р. у Німецькій колекції мікроорганізмів і клітинних культур (DSMZ), Брауншвейг, Mascheroder Weg 1 B, 38124 Branuschweig, під реєстраційним номером DSM ACC2750, де антитіло або його фрагмент має афінність до антигену Aβ, принаймні в 5 разів, переважно принаймні в 8 разів, більш переважно принаймні в 10 разів, але найбільш переважно принаймні в 15 разів більш високу в порівнянні з мишиним донорським антитілом. В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло, запропоноване в даному винаході, може являти собою повне антитіло (наприклад, із двома повнорозмірними легкими ланцюгами й двома повнорозмірними важкими ланцюгами) будь-якого ізотипу й підтипу (наприклад, IgM, IgD, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgE, IgA1 і IgA2); але найбільш переважно антитіло IgG4-ізотипу; в альтернативному варіанті в іншому варіанті здійснення винаходу воно може являти собою антигензв'язувальний фрагмент (наприклад, Fab, F(ab") 2 і Fv) повні антитіла. Таким чином, винахід стосується також антигензв'язувальних фрагментів антитіл, представлених у даному описі. В одному з варіантів здійснення винаходу фрагмент вибирають із групи, яка включає Fab-фрагмент, Fab'-фрагмент, F(ab)2-фрагмент і Fv-фрагмент, включаючи продукти експресуючої Fab бібліотеки імуноглобулінів і епітопзв'язувальні фрагменти будь-якого із вказаних вище антитіл і фрагментів. В іншому варіанті здійснення винаходу антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, запропоноване/запропонований у винаході, кон'югують з поліетиленгліколем. А в іншому варіанті здійснення винаходу константну ділянку антитіла, запропонованого у винаході, модифікують для зниження принаймні однієї опосередковуваної константною ділянкою біологічної ефекторної функції в порівнянні з немодифікованим антитілом. У ще одному варіанті здійснення винаходу антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, запропоновані у винаході, містять Fc-ділянку зі зміненою ефекторною функцією. Винахід стосується також нуклеотидної молекули, що містить нуклеотидну послідовність, яка кодує химерне антитіло або його фрагмент або гуманізоване антитіло або фрагмент, запропоноване(ий) у винаході й описані вище. Зокрема, винахід стосується нуклеотидної молекули, яка містить нуклеотидну послідовність, яка кодує ділянку, що складається із суміжних молекул амінокислот, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 2 і 3 відповідно, або комплементарну послідовність, які являють собою гіперваріабельні ділянки (CDR) 2 і 3 варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR). Більш конкретно, винахід стосується нуклеотидної молекули, яка містить нуклеотидну послідовність, яка кодує ділянку, що складається із суміжних молекул амінокислот, послідовність якої представлена в SEQ ID NO: 4, або комплементарну послідовність, що являє собою гіперваріабельну ділянку (CDR) 1 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR). Іншим варіантом здійснення винаходу є нуклеотидна молекула, яка містить нуклеотидну послідовність, представлену в SEQ ID NO: 18 і SEQ ID NO: 19, або комплементарну послідовність, яка кодує амінокислотну послідовність CDR2 і CDR3 відповідно варіабельної ділянки важкого ланцюга (HCVR). Наступним варіантом здійснення винаходу є нуклеотидна молекула, яка містить нуклеотидну послідовність, представлену в SEQ ID NO: 20, або комплементарну послідовність, яка кодує CDR1 варіабельної ділянки легкого ланцюга (LCVR). Ще одним варіантом здійснення винаходу є нуклеотидна молекула, яка містить нуклеотидну послідовність, представлену в SEQ ID NO: 21, або комплементарну послідовність, яка кодує варіабельну ділянку легкого ланцюга. Іншим варіантом здійснення винаходу є нуклеотидна молекула, яка містить нуклеотидну послідовність, представлену в SEQ ID NO: 22, або комплементарну послідовність, яка кодує варіабельну ділянку легкого ланцюга, включаючи сигнальні послідовності. Іншим варіантом здійснення винаходу є нуклеотидна молекула, яка містить нуклеотидну послідовність, яка кодує варіабельну ділянку легкого ланцюга, що представлена в SEQ ID NO: 22, і константну ділянку легкого ланцюга, що представлена в SEQ ID NO: 23. Винахід стосується також комплементарного ланцюга вказаної нуклеотидної молекули. Ще одним варіантом здійснення винаходу є нуклеотидна молекула, яка містить нуклеотидну послідовність, представлену в SEQ ID NO: 24, що кодує варіабельну ділянку важкого ланцюга. Винахід стосується також комплементарного ланцюга вказаної нуклеотидної молекули. 24 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Іншим варіантом здійснення винаходу є нуклеотидна молекула, яка містить нуклеотидну послідовність, представлену в SEQ ID NO: 25, що кодує варіабельну ділянку важкого ланцюга, включаючи сигнальні послідовності. Винахід стосується також комплементарного ланцюга вказаної нуклеотидної молекули. Іншим варіантом здійснення винаходу є нуклеотидна молекула, яка містить нуклеотидну послідовність, яка кодує варіабельну ділянку важкого ланцюга, що представлена в SEQ ID NO: 25, іконстантну ділянку важкого ланцюга, що представлена в SEQ ID NO: 26. Винахід стосується також комплементарного ланцюга вказаної нуклеотидної молекули. Даний винахід стосується також нуклеотидної послідовності, яка гібридизується з однією з описаних вище нуклеотидних послідовностей, які кодують антитіло, запропонованих у винаході, насамперед з її комплементарним ланцюгом, або у виділеному стані, або у вигляді фрагмента більшої нуклеотидної молекули. Зокрема, винахід стосується будь-якої нуклеотидної послідовності, яка гібридизується в загальноприйнятих умовах гібридизації, насамперед у строгих умовах гібридизації, з будь-якою нуклеотидною послідовністю, представленою в SEQ ID NO: 18-26 і 29-32, насамперед з її комплементарним ланцюгом. Ще одним варіантом здійснення винаходу є експресійний вектор, який містить молекулу нуклеїнової кислоти, запропоновану у винаході й описану вище. Наступним варіантом здійснення винаходу є клітина, що містить експресійний вектор, який включає нуклеїнову кислоту, запропоновану у винаході й описану вище. Ще одним варіантом здійснення винаходу є композиція, яка містить антитіло, запропоноване у винаході, але переважно химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у винаході й описане/описаний вище, включаючи будь-яке функціонально еквівалентне антитіло або будь-який похідне, або функціональний фрагменти, у терапевтично ефективній кількості, зокрема композиція, яка представляє собою фармацевтичну композицію, що необов'язково містить також фармацевтично прийнятний носій. В іншому варіанті здійснення винаходу композиція містить антитіло в терапевтично ефективній кількості. Крім того, під обсяг винаходу підпадає композиція або суміш, що містить антитіло, насамперед моноклональне антитіло, запропоноване у винаході, але насамперед химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у винаході й описане/описаний вище, включаючи будь-яке функціонально еквівалентне антитіло або будь-який похідне, або функціональний фрагменти, у терапевтично ефективній кількості й необов'язково додаткову біологічно активну субстанцію та/або фармацевтично прийнятний носій та/або розріджувач, та/або ексципієнт. Зокрема, винахід стосується композиції або суміші, у якій додаткова біологічно активна субстанція являє собою сполуку, яку застосовують для медикаментозного лікування амілоїдозу, групи захворювань і порушень, асоційованих з амілоїдом або амілоїдоподібним білком, таким як Aβ-білок, включаючи хворобу Альцгеймера. В іншому варіанті здійснення винаходу додаткова біологічно активна субстанція або сполука може являти собою також терапевтичний засіб, який можна використовувати для лікування амілоїдозу, який викликається амілоїдом β, або можна використовувати для медикаментозного лікування інших неврологічних порушень. Додаткова біологічно активна субстанція або сполука може мати біологічну дію, опосередковувану таким же або подібним механізмом, що й антитіло, запропоноване у винаході, або мати неспоріднений механізм дії або сполучення споріднених та/або неспоріднених механізмів дії. Як правило, додаткова біологічно активна сполука може являти собою енхансери нейронної трансмісії, психотерапевтичні лікарські засоби, інгібітори ацетилхолінестерази, блокатори кальцієвих каналів, біогенні аміни, транквілізатори на основі бензодіазепінів, підсилювачі синтезу, нагромадження або вивільнення ацетилхоліну, агоністи постсинаптичного рецептора ацетилхоліну, інгібітори моноаміноксидази-A або -B, антагоністи рецептора N-метил-Dаспартатглутамату (NMDA), нестероїдні протизапальні лікарські засоби, антиоксиданти й антагоністи серотонергічного рецептора. Більш конкретно, композиція або суміш, запропонована у винаході, може містити принаймні одну сполуку, вибрану із групи, яка включає сполуку проти окисного стресу, антиапоптозні сполуки, хелатори металів, інгібітори репарації ДНК, такі як пірензепін і метаболіти, 3-аміно-1пропансульфонову кислоту (3APS), 1,3-пропандисульфонат (1,3PDS), активатори α-секретаз, інгібітори β- і -секретаз, тау-білки, нейромедіатор, руйнівники β-складчастої конформації, 25 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 атрактанти для клітинних компонентів, що беруть участь у кліренсі/виснаженні амілоїду бета, інгібітори вкороченого на N-кінці амілоїду бета, включаючи піроглутаматований амілоїд бета 342, протизапальні молекули або інгібітори холінестерази (ChEI), такі як такрин, ривастигмін, донепезил та/або галантамін, агоністи М1 і інші лікарські засоби, включаючи будь-який модифікуючий амілоїд або тау-білок лікарський засіб, і харчові добавки, у сполученні з антитілом, запропонованим у даному винаході, і необов'язково фармацевтично прийнятним носієм та/або розріджувачем, та/або ексципієнтом. Винахід стосується також композиції або суміші, у якій сполука являє собою інгібітор холінестерази (ChEI), насамперед, суміші, у якій сполука являє собою сполуку, вибрану із групи, яка включає такрин, ривастигмін, донепезил, галантамін, ніацин і мемантин. У наступному варіанті здійснення винаходу композиції, запропоновані у винаході, містять ніацин або мемантин у сполученні з антитілом, запропонованим у даному винаході, і необов'язково фармацевтично прийнятний носій та/або розріджувач, та/або ексципієнт. Ще одним варіантом здійснення винаходу є композиції, які містять "атипові антипсихотичні засоби", такі, наприклад, як клозапін, зипрасидон, рисперидон, арипіпразол або оланзапін, призначені для лікування позитивних або негативних психотичних симптомів, включаючи галюцинації, марення, порушення мислення (що проявляються у вираженій непослідовності дій, психічному розладі, розладі асоціативного мислення) і ексцентрична або неорганізована поведінка, а також ангедонію, знижену емоційну реакцію, апатію й відмову від суспільства, у сполученні з антитілом, насамперед моноклональним антитілом, запропонованим у винаході, але переважно з химерним антитілом або його фрагментом або гуманізованим антитілом або його фрагментом, запропонованими у винаході й описаними вище, і необов'язково фармацевтично прийнятним носієм та/або розріджувачем, та/або ексципієнтом. У конкретному варіанті здійснення винаходу композиції й суміші, запропоновані у винаході й описані вище, містять антитіло й біологічно активну субстанцію відповідно в терапевтично ефективній кількості. Інші сполуки, які можна застосовувати в сумішах у сполученні з антитілом, запропонованим у даному винаході, описані, наприклад, в WO 2004/058258 (див. насамперед стор. 16 і 17), включаючи мішені терапевтичних лікарських засобів (стор. 36-39), алкансульфонові кислоти й алкансірчані кислоти (стор. 39-51), інгібітори холінестерази (стор. 51-56), антагоністи NMDAрецептора (стор. 56-58), естрогени (стор. 58-59), нестероїдні протизапальні лікарські засоби (стор. 60-61), антиоксиданти (стор. 61-62), агоністи рецепторів, які активуються пероксисомальними проліфераторами (PPAR) (стор. 63-67), агенти, що знижують рівень холестерину (стор. 68-75); інгібітори амілоїду (стор. 75-77), інгібітори утворення амілоїду (стор. 77-78), хелатори металів (стор. 78-79), антипсихотичні засоби й антидепресанти (стор. 80-82), харчові добавки (стор. 83-89) і сполуки, які підвищують доступність біологічно активних субстанцій у головному мозку (див. стор. 89-93) і проліки (стор. 93 і 94); вказаний документ включений у даний опис як посилання. Іншим варіантом здійснення винаходу є композиція, яка містить антитіло, насамперед моноклональне антитіло, запропоноване у винаході, але переважно химерне антитіло або його фрагмент, або гуманізоване антитіло або його фрагмент, запропоноване/запропонований у винаході й описане/описаний вище, та/або біологічно активну субстанцію в терапевтично ефективній кількості. Винахід стосується також застосування антитіла, насамперед моноклонального антитіла, запропонованого у винаході, але переважно химерного антитіла або його фрагмента, або гуманізованого антитіла або його фрагмента, запропонованого у винаході й описаного вище, та/або його функціонального фрагменти та/або фармацевтичної композиції або суміші, що містить вказане антитіло, для приготування лікарського засобу, призначеного для лікування або полегшення впливів амілоїдозу, групи захворювань і порушень, асоційованих з утворенням амілоїдних бляшок, включаючи вторинний амілоїдоз і зв'язаний з віком амілоїдоз, включаючи (але не обмежуючись тільки ними) неврологічні захворювання, такі як хвороба Альцгеймера (AD), деменція, зв'язана з тільцями Леві, синдром Дауна, спадкова церебральна геморагія з амілоїдозом (голландського типу); комплекс деменції Гуама-Паркінсона, а також інших захворювань, які обумовлені або асоційовані з амілоїдоподібними білками, таких як прогресуючий надядерний параліч, розсіяний склероз; хвороба Крейцфельдта-Якоба, хвороба Паркінсона, зв'язана з ВІЛ деменція, ALS (аміотрофічний бічний склероз), діабет дорослих; старечий серцевий амілоїдоз; ендокринні пухлини й інші захворювання, включаючи очні хвороби, асоційовані з патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, насамперед асоційовані з зв'язаними з амілоїдом-бета патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, такими як деградація нейронів. Такі патологічні аномалії можуть мати 26 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 місце, наприклад, у різних тканинах ока, таких як зорова зона кори, приводячи до кортикального порушення зору, передня камера й зоровий нерв, приводячи до глаукоми, кришталик, приводячи до катаракти через відкладення бета-амілоїду, склоподібне тіло, приводячи до амілоїдозу ока, сітківка, приводячи до первинної дегенерації сітківки й дегенерації жовтої плями, наприклад, зв'язаної з віком дегенерації жовтої плями, зоровий нерв, приводячи до друзів зорового нерва, оптичної нейропатії й ретробульбарного невриту, і рогівка, приводячи до ґратчастої дистрофії. Даний винахід стосується також способу одержання антитіла, насамперед моноклонального антитіла, запропонованого у винаході, більш переважно химерного антитіла або його фрагмента, або гуманізованого антитіла або його фрагмента, запропонованого у винаході й описаного вище, та/або його функціонального фрагмента, та/або фармацевтичної композиції, або суміші, що містить вказане антитіло та/або його функціональний фрагмент, переважно в терапевтично ефективній кількості, для використання в способі попередження, лікування або полегшення впливів амілоїдозу, групи захворювань і порушень, асоційованих з утворенням амілоїдних бляшок, включаючи вторинний амілоїдоз і зв'язаний з віком амілоїдоз, включаючи (але не обмежуючись тільки ними) неврологічні захворювання, такі як хвороба Альцгеймера (AD), деменція, зв'язана з тільцями Леві, синдром Дауна, спадкова церебральна геморагія з амілоїдозом (голландського типу); комплекс деменції Гуама-Паркінсона, а також інших захворювань, які обумовлені або асоційовані з амілоїдоподібними білками, таких як прогресуючий надядерний параліч, розсіяний склероз; хвороба Крейцфельдта-Якоба, хвороба Паркінсона, зв'язана з ВІЛ деменція, ALS (аміотрофічний бічний склероз), діабет дорослих; старечий серцевий амілоїдоз; ендокринні пухлини й інші захворювання, включаючи очні хвороби, асоційовані з патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, насамперед асоційовані з зв'язаними з амілоїдом-бета патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, такими як деградація нейронів, який полягає в тому, що готують препарат антитіла, запропонованого у винаході, насамперед моноклонального антитіла, запропонованого у винаході, більш переважно химерного антитіла або його фрагмента або гуманізованого антитіла або його фрагмента, запропонованих у винаході, у вигляді фармацевтично прийнятної форми. Такі патологічні аномалії можуть мати місце, наприклад, у різних тканинах ока, таких як зорова зона кори, приводячи до кортикального порушення зору; передня камера й зоровий нерв, приводячи до глаукоми; кришталик, приводячи до катаракти через відкладення бета-амілоїду; склоподібне тіло, приводячи до амілоїдозу ока; сітківка, приводячи до первинної дегенерації сітківки й дегенерації жовтої плями, наприклад, зв'язаної з віком дегенерації жовтої плями; зоровий нерв, приводячи до друзів зорового нерва, оптичної нейропатії й ретробульбарного невриту; і рогівка, приводячи до ґратчастої дистрофії. Крім того, даний винахід стосується способу попередження, лікування або полегшення впливів амілоїдозу, групи захворювань і порушень, асоційованих з утворенням амілоїдних бляшок, включаючи вторинний амілоїдоз і зв'язаний з віком амілоїдоз, в індивідуума, що має потребу в цьому, який полягає в тому, що вводять антитіло та/або його функціональний фрагмент, більш переважно гуманізоване антитіло та/або його функціональний фрагмент, або композицію, або суміш, що містить вказане антитіло та/або його функціональний фрагмент, індивідуумові, зокрема ссавцеві, більш переважно людині, ураженому вказаним порушенням. Ці захворювання включають (але не обмежуючись тільки ними) неврологічні захворювання, такі як хвороба Альцгеймера (AD), деменція, зв'язана з тільцями Леві, синдром Дауна, спадкова церебральна геморагія з амілоїдозом (голландського типу); комплекс деменції ГуамаПаркінсона, а також інші захворювання, які обумовлені або асоційовані з амілоїдоподібними білками, такі як прогресуючий надядерний параліч, розсіяний склероз; хвороба КрейцфельдтаЯкоба, хвороба Паркінсона, зв'язана з ВІЛ деменція, ALS (аміотрофічний бічний склероз), діабет дорослих; старечий серцевий амілоїдоз; ендокринні пухлини й інші захворювання, включаючи очні хвороби, асоційовані з патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, насамперед асоційовані з зв'язаними з амілоїдом-бета патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, такими як деградація нейронів, де патологічні аномалії можуть мати місце, наприклад, у різних тканинах ока, таких як зорова зона кори, приводячи до кортикального порушення зору; передня камера й зоровий нерв, приводячи до глаукоми; кришталик, приводячи до катаракти через відкладення бета-амілоїду; склоподібне тіло, приводячи до амілоїдозу ока; сітківка, приводячи до первинної дегенерації сітківки й дегенерації жовтої плями, наприклад, зв'язаної з віком дегенерації жовтої плями; зоровий нерв, приводячи до друзів зорового нерва, оптичної нейропатії й ретробульбарного невриту; і рогівка, приводячи до ґратчастої дистрофії. 27 UA 101167 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Крім того, об'єктом винаходу є спосіб лікування амілоїдозу, групи захворювань і порушень, асоційованих з утворенням амілоїдних бляшок, включаючи вторинний амілоїдоз і зв'язаний з віком амілоїдоз, включаючи (але не обмежуючись тільки ними) неврологічні захворювання, такі як хвороба Альцгеймера (AD), і інші захворювання, включаючи очні хвороби, асоційовані з патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, насамперед асоційовані з зв'язаними з амілоїдом-бета патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, такими як деградація нейронів. Такі патологічні аномалії можуть мати місце, наприклад, у різних тканинах ока, таких як зорова зона кори, приводячи до кортикального порушення зору; передня камера й зоровий нерв, приводячи до глаукоми; кришталик, приводячи до катаракти через відкладення бета-амілоїду; склоподібне тіло, приводячи до амілоїдозу ока; сітківка, приводячи до первинної дегенерації сітківки й дегенерації жовтої плями, наприклад, зв'язаної з віком дегенерації жовтої плями; зоровий нерв, приводячи до друзів зорового нерва, оптичної нейропатії й ретробульбарного невриту; і рогівка, приводячи до ґратчастої дистрофії. Конкретним варіантом здійснення винаходу є спосіб збереження або підвищення когнітивної здатності до запам'ятовування, але насамперед для відновлення когнітивної здатності до запам'ятовування в індивідуума, насамперед ссавця або людини, що страждає від порушення пам'яті, який полягає в тому, що вводять індивідуумові, насамперед ссавцеві або людині, антитіло, переважно фармацевтичну композицію, запропоновану у винаході й описану вище. Ще одним об'єктом винаходу є терапевтична композиція й спосіб одержання вказаної композиції, а також спосіб лікування амілоїдозу, групи захворювань і порушень, асоційованих з утворенням амілоїдних бляшок, включаючи вторинний амілоїдоз і зв'язаний з віком амілоїдоз, в індивідуума, насамперед ссавця, більш переважно людини. Вказані захворювання й порушення включають (але не обмежуючись тільки ними) неврологічні захворювання, такі як хвороба Альцгеймера (AD), і інші захворювання, включаючи очні хвороби, асоційовані з патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, насамперед асоційовані з зв'язаними з амілоїдом-бета патологічними аномаліями/змінами в тканинах зорової системи, такими як деградація нейронів. Такі патологічні аномалії можуть мати місце, наприклад, у різних тканинах ока, таких як зорова зона кори, приводячи до кортикального порушення зору; передня камера й зоровий нерв, приводячи до глаукоми; кришталик, приводячи до катаракти через відкладення бета-амілоїду; склоподібне тіло, приводячи до амілоїдозу ока; сітківка, приводячи до первинної дегенерації сітківки й дегенерації жовтої плями, наприклад, зв'язаної з віком дегенерації жовтої плями; зоровий нерв, приводячи до друзів зорового нерва, оптичної нейропатії й ретробульбарного невриту; і рогівка, приводячи до ґратчастої дистрофії. Винахід стосується також способу діагностування асоційованого з амілоїдом захворювання або стану в індивідуума, що має потребу в цьому, який полягає в тому, що виявляють імуноспецифічне зв'язування антитіла або його активного фрагмента з епітопом амілоїдного білка в зразку або in situ, що включає стадії, на яких (a) приводять у контакт зразок або специфічну частину організму або ділянку організму, яка, як очікується, може містити амілоїдний білок, з антитілом, насамперед з моноклональним антитілом, запропонованим у винаході, більш переважно з химерним антитілом або його фрагментом, або з гуманізованим антитілом або його фрагментом, запропонованим у винаході й описаним вище, та/або його функціональним фрагментом, де антитіло зв'язується з епітопом амілоїдного білка; (б) дають можливість антитілу та/або його функціональному фрагменту зв'язатися з амілоїдним білком з утворенням імунологічного комплексу; (в) виявляють утворення імунологічного комплексу; і (г) встановлюють кореляцію між присутністю або відсутністю імунологічного комплексу й присутністю або відсутністю амілоїдного білка в зразку або специфічній частині або ділянці організму індивідуума. Крім того, у винаході запропонований спосіб визначення ступеня завантаження амілоїдогенними бляшками тканини та/або загальної води організму в індивідуума, який полягає в тому, що а) одержують зразок, репрезентативний для досліджуваної тканини та/або загальної води організму; б) оцінюють присутність у зразку амілоїдного білка за допомогою антитіла, насамперед моноклонального антитіла, запропонованого у винаході, але переважно химерного антитіла або його фрагмента, або гуманізованого антитіла або його фрагмента, запропонованого у винаході й описаного вище, та/або його функціонального фрагмента; в) визначають кількість антитіла, зв'язаного з білком; і г) розраховують завантаження бляшками тканини та/або загальної води організму. 28