Фіксовано висушені людські тромбоцити, фармацевтична композиція, спосіб приготування фіксовано висушених людських тромбоцитів, спосіб, що прискорює зсілість крові в організмі пацієнта, спосіб, що прискорює заго

1. .Фиксированно высушенные человеческие тромбоциты, которые при переработке: прилипают к тромбогенным поверхностям; не прилипают к нетромбогенным поверхностям; претерпевают изменение формы (расширение) при прилипании, к тромбогенной поверхности; прилипают друг к другу, образуя гемоо татическую пробку при прилипании к тромбогенной поверхности; и высвобождают свое гранулярное содержимое. 2. Фиксированно высушенные тромбоциты по п.1, отличающиеся тем, что они лиофилизированы. 3. ФикСИрОВаННО ВЫСушеННЫе трОМбоЦИТЫ ПО П.1," отличающиеся тем, что они получены в результате фиксации соединением, выбранным из группы, включающей формальдегид, параформальдегид и глутаровый альдегид. 4. Фиксированно высушенные тромбоциты по п.1, отличающиеся тем, что они получены в результате фиксации перманганатом. 5. Фиксированно высушенные тромбоциты по п.1, отличающиеся тем, что они стабилизированы альбу мином. 6. Фиксированно высушенные тромбоциты по п.1, отличающиеся тем, что они стабилизированы трегалозой, 7. Фармацевтическая композиция, содержащая активное начало, отличающаяся тем, что в ка честве активного начала она содержит фиксированно высушенные тромбоциты по любому из пп.1-6 в эффективном количестве. 8. Фармацевтическая композиция по п.7, отли чающаяся тем, что также содержит альбумин. 9. Фармацевтическая композиция по п. 8, отли чающаяся тем, что также содержит человеческий альбумин. 10. Фармацевтическая композиция по п 7, отли чающаяся тем, что тромбоциты лиофилизирова ны. 11. Фармацевтическая композиция по п.7, отли чающаяся тем, что она дополнительно содержит водный физиологически пригодный носитель. 12. Фармацевтическая композиция по п.7, отли чающаяся тем, что тромбоциты фиксированы соединением, выбранным из группы, включающей формальдегид, параформальдегид и глутаровый альдегид. 13. Фармацевтическая композиция по п 7, отли чающаяся тем, что тромбоциты фиксированы перманганатом. 14. Способ приготовления фиксированно высу шенных человеческих тромбоцитов, предусматри вающий фиксацию человеческих тромбоцитов и их высушивание, отличающийся тем, что фикса цию проводят посредством инкубации человечес ких тромбоцитов до 60 минут в растворе, содержа щем до 1,8% вещества, выбранного из группы, включающей параформальдегид, формальдегид и глутаровый альдегид, или посредством инкубации их до 20 минут в растворе, содержащем до 1 г/дл раствора перманганата, стабилизацию тромбоци тов после фиксации посредством их суспендирования в растворе, содержащем от 0,1 до 20 мас.% соединений, выбранных иэ группы, вклю чающей альбумин ичрегалозу. 15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что фик сацию осуществляют путем перемешивания ука занных тромбоцитов с раствором, содержащим фиксатор. 16. Способ, ускоряющий свертываемость крови в организме пациента, нуждающегося в таком лече нии, включающий введение тромбоцитарного пре парата в организм пациента, отличающийся тем, что в качестве тромбоцитарного препарата О см 150 или 250 показывает значительное истечение цитоплазмы). Пример 3. Приготовление лиофилизированных человеческих тромбоцитов со стабилизацией перманганатом Всю массу крови получали от здоровых доноров, добровольно сдающих свою кровь, в виде коммерческих упаковок крови (Fenwal 4R6402, Baxter Health Саге) с лсодержанием в них стандартного комплекта антикоагулянта (CPDA-1). Конечный объем каждой собранной кровяной упаковки с содержанием лимонной кислоты составлял 500 см3. Каждый наполненный кровью пакет центрифугировали для получения обогащенной тромбоцитами плазмы (PRP), которая вытягивалась из пакета и промывалась посредством трех этапов центрифугирования/повторного суспензирования в фосфатно-буферном солевомрастворе, как описано выше в примере 1. Промытые тромбоциты повторно суспендировались в 1/10 объема буферного солевого раствора и добавлялись по каплям в раствор перманганата, состоящий из фосфатно -буферного солевого раствора, содержащего КМпОд или NaMnO4 с конечной концентрацией 0,01 г/дл. Суспензию тромбоцитов выдерживали в термостате в растворе перманганата в течение 10 минут при комнатной температуре, и затем двукратно промывали, как описано выше, 0,1-5,0 г/дл альбумина в буферном растворе с целью удаления перманганата. Потеря тромбоцитов в ходе перманганатной обработки и последующей промывки составляла лишь 10-20%. Для сохранения выхода 70-100% после лиофилизации/регидратации в конечный раствор повторного суспензирования до лиофилизации необходимо вводить стабилизатор, такой как трегалоза или альбумин, предпочтительно в указанных выше пределах. Состав раствора регидрата ции не является критически важным, но он должен быть изотоническим и должен быть буферным с величиной рН 7,3-7,4 (как и для фиксированных параформальдегидом тромбоцитов) . Типичные данные анализа регидратированных фиксированных перманганатом тромбоцитов представлены ниже в таблице 2. Количество микрочастиц после регидратации тромбоцитных препаратов, фиксированных перманганатным процессом, как описано в данном примере, составляло 2,6-4,0x106/мл. Реакция (при испытании на гипотонический шок) тромбоцитов, приготовленных указанным способом, составляла 0 - 0,030 OD/мин (0,100-0,150 для свежеприготовленных тромбоцитов). Количество выделенной LDH составляло 50 - 200 IU/л. 20 Пример 4 (сравнительный пример А), использование активационных маркеров для определения характеристик стабилизированных параформальдегидом тромбоцитов. Цель данного примера состоит в том, чтобы продемонстрировать, что тромбоциты, фиксированные параформальдегидом по данному изобретению, выделяют их гранулярное содержимое после контактирования с тромбогенной поверхностью, в то время как тромбоциты, известные ранее, их не выделяют. Исследуемые тромбоцитные препараты стабилизировались 1,0% формальдегидом в течение 60 минут (параформальдегид 1) и 1,8% параформальдегидом в течение 60 минут (параформальдегид 2); эти препараты сравнивались с тромбоцитами, приго-, товленными как описано в патенте Brinkhous и др., то есть они фиксировались 2% параформальдегидом в течение 120 минут (Brinkhous). Маркеры, используемые в данных испытаниях, приведенные в таблице 3, CD62 и GP53, представляли собой коммерчески доступные , антитела, покупаемые у фирмы Becton-Dickinson, Inc., и они служили для того, чтобы обнаружить на поверхности тромбоцита антигенов, выделяемых из тромбоцитных гранул. Присутствие выделенных гранулами антигенов на поверхности тромбоцита является доказательством активизации тромбоцита. Антитела к этим антигенам рассматриваются как активационные маркеры. Антитела к вызванному тромбоцитом ростовому фактору (PDGF) использовались для выявления связывания PDGF с оболочкой тромбоцитов. Антитело PDGF было приобретено у фирмы Genzyme (Кембридж, МА). Сосуды, используемые в тестах на адгезивность Baumgartner, были взяты у обычных собак. Эксперименты осуществлялись для того, чтобы продемонстрировать активационную способность отдельных лиофилизированных тромбоцитных препаратов путем ввода их в свежеприготовленную цельную кровяную массу, свободную от естественных тромбоцитов, путем дифференциального центрифугирования для сравнения со свежеприготовленной цельной кровью, предназначенной для использования в кольцевидных перфузионных камерах. Кровь собирали в цитратный антикоагулянт (CPDA-1) от обычных доноров. Две полосы (1 см) артериального сосуда собаки помещались на конический стержень и вставлялись в рециркуляционную петлю, приво 27495 димую в движение перистальтическим насосом со скоростью 130 мл/мин. Осуществляли перфузию этой петли сначала буферным раствором, затем кровью (либо со свежеприготовленными, либо с лиофилизированными тромбоцитами) в течение пяти минут при комнатной температуре, а затем осуществляли в течение 2 минут перфузию 2% параформальдегидом для устойчивой фиксации клейких тромбоцитов с сосудом. Тромбоциты на поверхности сосуда обнаруживались путем ввода флюоресцентного моноклонального антитела в GPIIbllla. Слипаемость была количественно определена посредством эпи-флюорес-центной микроскопии по измерению процента поверхности сосуда, покрытой флюоресцирующими клетками. Кроме того, брали образцы остальной части крови (с нелрилипшими тромбоцитами) для приготовления обогащенной тромбоцитами плазмы (PRP). PRP далее фиксировалась посредством 2%-го параформальдегида в течение 1-2 часов при комнатной температуре до выдержки в термостате с флюоресцентно мечеными моноклональными антителами к CD62 и PG53 или PDGF. Присутствие этих маркеров на поверхности тромбоцитов в образце обнаружива- ' лось методом стандартной цитометрии в потоке в цитометре FACSCAN™ . Результаты были выражены количественно как процент тромбоцитов с флюоресценцией, превышающей фон, зарегистрированный неспецифическимконтрольным антителом (неиммунная мышь lgG2a). Полученные данные сравнивались с образцами крови, взятыми до или сразу же после инициирования " перфузии полос сосуда. Результаты данного сопоставления приведены в таблице 3. Из таблицы 3 ясно, что указанные концентрация и время стабилизации приводят в результате к получению тромбоцитов с различными в значительной степени свойствами. Тромбоциты параформ.1 и параформ.2 показывают увеличенное число активационных маркеров, присутствующих на тромбоцитах в крови, циркулирующей через субэндотелиальную поверхность стенки сосуда. Параформ.2 показывает удвоение активационных маркеров после экспонирования активационной поверхности. В отличие от этого, препарат BrinKhous практически не обнаруживает активации после циркуляции с маркером CD62 и показывает минимальное изменение PDGF. Пример 5 (сравнительный пример б). Использование активационных маркеров для определения характеристик тромбоцитов, приготовленных с перманганатом калия Цель этого примера состоит в том, чтобы продемонстрировать, что тромбоциты, фиксированные посредством перманганата по данному изобретению, выделяют их гранулярное содержимое после контактирования с тромбогенной поверхностью, в то время как известные ранее тромбоциты, их не выделяют. Данный пример осуществляли таким же образом, как и пример 4, описанный выше, с той разницей, что тромбоциты фиксировались посредством перманганата, как описано выше в примере 3. Использовались три различных фиксированных посредством перманганата тромбоцитных препарата: тромбоци ты, стабилизированные 0,02 Мол. перманганата и лиофилизированные в присутствии Трегалозы (Перм.1); тромбоциты, стабилизированные 0,02 Мол. перманганата и лиофилизированные в присутствии человеческого сывороточного альбумина (Перм.2); и тромбоциты, стабилизированные 0,01 Мол. перманганата и лиофилизированные в присутствии человеческого сывороточного альбумина (Перм.З). Для сравнительных целей тромбоциты фиксировались также 2% формальдегида в течение 120 минут и высушивались в присутствии бычьего сывороточного альбумина. Данные представлены в таблице 4. Из таблицы 4 ясно, что в противоположность фиксированным перманганатом тромбоцитам по настоящему изобретению, тромбоцитный препарат BrinKhous практически не обнаруживал активации после экспонирования тромбогенного сосуда. Пример 6 (сравнительный пример в). Адгезионное прилипание регидратированных тромбоцитов к субэндотелию сосуда Способность свежеприготовленных и регидратированных тромбоцитов приклеиваться к стенкам экспонированных субэндотелиальных сосудов была проверена в кольцевой камере перфузии. Сравнивались тромбоцитные препараты BrinKhous и тромбоциты, приготовленные, как описано выше в примерах 4 и 5. Тромбоциты удалялись из антикоагулированной АСО цельной крови и заменялись различными препаратами высушенных и регидратированных тромбоцитов. Затем цельную кровь и кровь, содержащую повторно гидратированные тромбоциты, нагнетали через камеры, содержащие несколько помещенных в них сосудов. Скорости потока и смещения были неизменными для всех препаратов. Результаты приведены ниже в таблице 5. Хотя различие результатов между циклами испытания было значительным, очевидно, что тромбоциты BrinKhous были "более клейкими", чем другие препараты. Все препараты приклеивались к субэндотелию сосудов, но тромбоцитами, приготовленными согласно настоящему изобретению, покрывалась меньшая площадь поверхности экспонированной стенки сосуда. Безусловно, адгезионное прилипание известных ранее тромбоцитов, которые являются метаболически "мертвыми" является пассивным прилипанием, за которым не следует необходимая метаболическая реакция. Пример 7 (сравнительный пример с). Тест на восстановление гипотонического шока Тест на восстановление гипотонического шока осуществляли для определения способности тромбоцитов удалять воду и освобождаться от разбухания, вызванного повышенным поглощением воды тромбоцитами. Для измерения степени восстановления от разбухания тромбоцитные суспензии концентрацией 3x108 /мл в содержащей лимонную кислоту плазме обрабатывались 1/2-ным объемом денонсированной воды в аггрегометре Chronolog при температуре 37°С. Сигнал светопропускания (%Т) увеличивался сразу же с поглощением воды тромбоцитами в результате гипотонического шока (%Тм«с), с последующим возвратом %Т к значению, близкому к 27495 основному (%Тосн, откорректированному на разбавление), поскольку вода активно вытесняется не подвергнутыми воздействию тромбоцитами. Степень восстановления по прошествии 10 минут определяли количественно по следующей формуле: (О/ гр 4 '° * макс _ о/ ПП /о А фактич7 \ Степень возврата от гипотонического шока была измерена отдельно, и это измерение осуществлялось так же, как описано выше, с той разницей, что оно осуществлялось при температуре 22°С в аггрегометре Payton без перемешивания. Степень восстановления рассчитывалась как степень изменения %Т от 1 минуты до 3 минут после добавления деионизированной воды. Результаты, приведенные в таблице 6, выражены как процент степени изменения %Т, получен- , ного в случае контрольных свежеприготовленных тромбоцитов. Скорость и степень восстановления тромбоцитов в тесте на гипотонический шок зависели в значительной мере от целостности оболочки тромбоцита и от остаточной метаболической активности. Тромбоцитные препараты BrinKhous не показали реакции, в то время как тромбоцитные препараты по данному изобретению обнаруживали восстановление на 40-100%. Пример 8 (сравнительный пример д). Образование тромбина в тромбогенных препаратах Цель данного примера заключается в том, чтобы проиллюстрировать, что небольшие изменения концентрации фиксаторов и времени фиксации приводят в результате к различным реакциям тромбоцитов на стимуляцию. Тесту подвергались четыре тромбоцитных препарата на образование тромбина (который зависит от концентрации тромбоцита) и основу протромбиназного комплекса на поверхности тромбоцитов. Результаты показаны на фиг. 1. Количество тромбоцитов х 1000 дается на горизонтальной оси. Образование тромбина в единицах дается на вертикальной оси. Использовались следующие препараты: (і) тромбоциты параформ. 1 (треугольники на рис.1); (її) тромбоциты параформ.2 (квадраты); (ш) тромбоциты BrinKhous (ромбы); и (iv) свежеприготовленные промытые тромбоциты как контрольные препараты (кружочки). Тромбоциты параформ.2 показывали максимальную скорость образования тромбина, за ними следовали тромбоциты параформ. 1 и затем тромбоциты BrinKhous. Контрольные тромбоциты показывали наименьшую скорость образования тромбина. Пример 9. Экспрессия образованного тромбоцитом ростового фактора (PDGF) на поверхности фиксированно высушенных тромбоцитов Цель данного примера заключалась в исследовании тромбоцитов, фиксированных и высушенных различными средствами для экспрессии PDGF на их поверхности Антитела и тромбоцитные препараты описываются в изложенных выше примерах 5 и 6. Данные приводятся в нижеследующей таблице?. Эти данные показывают, что как тромбоциты BrinKhous, так и тромбоциты по настоящему изобретению выражают PDGF на их поверхности, и что тромбоциты Перм 2 и Параформ 2 выражают в большей степени PDGF на поверхности, чем тромбоциты BrinKhous до или после стимуляции. Пример 10. Локальный ввод фиксированно высушенных тромбоцитов, которые выражают PDGF для ускорения заживления ран у свиней В данном примере описывается использование тромбоцитов, которые выражают PDGF на их поверхности для ускорения заживления ран у свиней Свиные тромбоциты, используемые в данном эксперименте, приготавливались в основном таким же образом, как описано в примере 1, и они модифицировались, как описано ниже. Для удаления параформальдегида добавляли равный объем имидазольного буферного солевого раствора (IBS), pH=7,35 Эти тромбоциты осаждались путем центрифугирования в течение 8 минут при комнатной температуре при ускорении центрифуги 1500хд. Всплывшая фаза удалялась, и осадок повторно суспендировался в 5-10 мл IBS, pH=6,8 Промывка повторялась двукратно. Затем процедура осуществлялась таким же образом, как и в примере 1, с той разницей, что концентрация свиных тромбоцитов составляла 8x104 /мкл. В качестве стабилизатора для сушки вводили свиной альбумин в том же количестве, что и в примере 2. Тромбоцитный перевязочный материал приготавливали, используя хирургическую перевязку BIOBRANEII™ на секциях 1 кв.см (Don B.Holland, Inc., Sugarland, Техас) в чашках Петри диаметром 10 см. Перевязочный материал площадью 1 см2 насыщали 3,2x109 свиными тромбоцитами с помощью пипетки на 1 мл с раствором, содержащим указанное количество тромбоцитов, наносимым на перевязочный материал, после чего осторожно переносили перевязочный материал с тромбоцитами в камеру лиофилизации, и этот материал высушивали при температуре -40°С до обнаружения крекированного белого порошка. Исследования проводили на двух взрослых свиньях. Их анестезировали и получали на них ' ранения проколом регулированных размеров с использованием дерматологического 3-миллиметрового (мм) устройства для пункции. На 0 день образовывались раны глубиной 3 мм и шириной 3 мм на обритой стерилизованной поверхности вдоль спины анестезированных свиней. Рана проникала в эпидермический слой, дермический слой и жировую ткань. Образовывалось по три ряда из шести ран. Ряд 1 обрабатывали сухими тромбоцитами. Ряд 2 обрабатывали сеткой, пропитанной сухими тромбоцитами. Ряд 3 оставляли необработанным На первый день рану 1 каждого ряда удаляли. На второй день рану 2 каждого ряда удаляли. На каждый из последующих четырех дней последующие раны каждого ряда удаляли для проведения исследования. Удаленная ткань фиксировалась посредством параформальдегида и обрабатывалась стандартными гистологическими приемами, окрашивалась и исследовалась с помощью микроскопа на заживление ран. Каждую секцию исследовали 27495 на присутствие тромбоцитов, фибробластовой пролиферации по краям и в основании раны, на возобновление эпитатиального роста и на воспалительную реакцию. Количество тромбоцитов, скапливающихся в каждой точке, точно не было определено. Раны в ряду 1 наполнялись высушенными тромбоцитами Каждую рану от прокола наполняли до возможной полноты высушенными тромбоцитами. Раны в ряду 2 обрабатывали наполнением сеткой (1 см ), содержащей высушенные тромбоциты, каждой раны. Качественная оценка показала, что все обработанные секции успешно заживлялись по сравнению с необработанными ранами. Пример 11. Внутривенный ввод фиксированно высушенных тромбоцитов в организм здоровых собак и собак с заболеванием Wtlebrand Для измерения гемостатической эффективности регидратированных -тромбоцитов в условиях ин виво, в организм здоровых собак и одной собаки с дефицитом фактора VWIebrand (заболевание Wllebrand, vV\D) вливали регидратированные фиксированно высушенные собачьи тромбоциты. Эти собачьи тромбоциты фиксировались, высушивались и подвергались структурной переработке таким же образом, как и человеческие тромбоциты в описанных выше примерах 1 и 2 с той разницей, что эти тромбоциты фиксировались в 0,67% параформальдегидном растворе в течение одного часа. В нижеследующей таблице 8 приведены физические данные вливания и характеристик собак. После вливания тромбоцитов в организм собак собирали образцы крови в ходе данного экспе римента в течение примерно четырех часов нижеследующим образом В организм анестезированных собак вливали регидратированные тромбоциты. Оголяли сонную артерию. В бедренную артерию вставляли канулю для измерения кровяного давления и вторую канулю вставляли в бедренную вену для отбора образцов и ввода жидкостей. Одну сонную артерию травмировали проколом с вводом стеноза согласно общепринятым приемам (смотри Nichols и др.. Circulation Research 59, 15-26, 1988) У собак измеряли изменение кровяного давления, частоты сердечного биения, дыхания и т.д. для выявления нежелательной реакции на вливание фиксировано высушенных тромбоцитов. Регидратированные тромбоциты метились флюоресцентным красителем, вливались, и отбирали образцы крови для исследования их на присутствие меченых регидратированных тромбоцитов в периферической циркуляции в образующемся тромбе на участках разорванных стенок сосудов (субэндотелий) и на приклеивание к нормальным стенкам сосудов. Делались вырезы на маргинальных участках ушей собак и эти секции препарировались для микроскопического исследования на приклеивание регидратированных тромбоцитов. В таблице 9 показаны результаты этих исследований. Изложенные выше примеры являются иллюстрацией настоящего изобретения и не являются его ограничением Настоящее изобретение определяется нижеследующей формулой изобретения с включенными эквивалентами этой формулы изобретения. Таблица 1 Характеристики регидратированных тромбоцитов в условиях ин витро Исследование агрегации тромбоцитов Процент тромбоцитов, оставшихся неагрегированными 1,5 мг/мл ристоцетина 12-15% (сильная реакция) ЮмкМАОР 42-85% (слабая реакция) 8 мг/мл коллагена 25-60% (умеренная реакция) Исследование методом цитометрии в потоке Процент тромбоцитов с нормальной флюоресценцией GPIb (AN-51, SZ-2, SZ-1, MoAbs 90-97% (эквивалентно свежим тромбоцитам) GPIIpllla (IOE5 MoAb) 98-99% (эквивалентно свежим тромбоцитам) Таблица 2 Характеристики регидратированных тромбоцитов в условиях ин витро Исследование агрегации тромбоцитов Процент тромбоцитов, оставшихся неагрегированными 1,5 мг/мл ристоцетина 15-32% (сильная реакция) ЮмкМол ADP 27-42% (умеренная реакция) 8 мг/мл коллагена 27-50% (умеренная реакция) Исследование методом цитометрии в потоке Процент тромбоцитов с нормальной флюоресценцией GPIb (AN-51, SZ-2, SZ-1, MoAbs) 91-99% (эквивалентно свежим тромбоцитам) GPNbllla (ЮЕ5 MoAb) 95-99% (эквивалентно свежим тромбоцитам) 27495 Таблица 3 Сравнение стабилизированных параформальдегидом тромбоцитов с активационными маркерами 10 Процент положительных тромбоцитов Маркер До циркуляции После циркуляции 1.0% Параформальдегид/60 минут (Параформ.1) CD62 12 16 GP53 18 22 PDGF 20 24 1,8% Параформальдегид/60 минут (Параформ.2) CD62 6.3 12.7 GP53 14,9 21,30 PDGF 12,18 18,40 2,0% Параформальдегид/120 минут (Brinkhous) CD62 11 6 GP53 1 1 PDGF 27 30 Таблица 4 Тромбоциты Сравнение стабилизированных перманганатом тромбоцитов с активационными маркерами Маркер CD62 (% положительных тромбоцитов) До циркуляции После циркуляции Перм.1 39 86 Перм.2 31 60 Перм.З Не определ. 37 BrinKhous 11 6 Таблица 5 Адгезионное прилипание регидратированных тромбоцитов к субэндотелию сосуда Тип тромбоцита Процент покрытия Свежеприготовленный 53-76 Перм 2 26-53 Параформ.2 23-43 BrinKhous 44-80 Таблица 6 Восстановление гипотонического шока различным образом стабилизированных тромбоцитных препаратов Тромбоцитный препарат Восстановление Перм.1 Скорость 0-10 Степень 40 Перм.2 0-8 Параформ.2 26-43 100 0 0 27495 Таблица 7 Экспрессия PDGF на поверхности тромбоцита Препарат Процент положительных тромбоцитов для PDGF До циркуляции После циркуляции Свежеприготовленная 45 67 кровь Перм.2 Не определ. 64 Параформ.1 37 34 Параформ.2 28 40 BrinKhous 27 30 Таблица 8 Вливание регидратированных тромбоцитов (RP) в здоровых (N) собак и собак с заболеванием VMebrand (vWD) Физические данные Фенотип N 6 VWD 20 Вес (кг) N 15,9 9,1 Число тромбоцитов (хЮ ) 255 225 285 Число общих циркулирующих тромбоцитов (хЮ9) 448 315 228 Вливаемые RP (мл) 10 9,2 8.5 Суммарное количество 82,5 138 117 9 RPCxIO ) Общее количество RP(% исходных тромбоцитов) 18,4 43 51 %vWF (начальный) 100 100 0 %v\AF (пост крио.) _ 50 ВТ (мин: сек) Начальн. 2:28 1:55 >15 ВТ (мин: сек) пост крио. 7:52 ВТ (мин: сек) пост крио. 2:52 1:55 6:40 nocTRP Таблица 9 Эффект от вливания регидратированных тромбоцитов (RP) в организм здоровых собак (N) и собак с заболеванием WiHebrand (vWD) Тест Фенотип N N vWO Реакция на переливание крови нет нет нет RP в периферической циркуляции да да да Присутствие RP в образующемся тромбе да да да Приклеивание RP к субэндотелию да да -да Приклеивание RP к нормальным стенкам сосуда нет нет нет Приклеивание RP к вырезанной поверхности да да да 11 27495 10 20 ЗО 40 50 60 Число тромбоцитов (х 1000) Тираж 50 екз. Відкрите акціонерне товариство «Патент» Україна, 88000, м. Ужгород, вул. Гагаріна, 101 (03122) 3-72-89 (03122) 2-57-03 12 70 80