Лікувально-профілактичний засіб з антибактеріальною і сперміцидною дією

1. Лікувально-профілактичний засіб з антибактеріальною і сперміцидною дією у дозованій формі C2 1 3 хлоргексидину (патент РФ №2178312 на «Тампон жіночий із пролонгованою лікувальнопрофілактичною дією»). Даний тампон забезпечує пролонговану лікувальну та/або профілактичну дію для лікування гінекологічних захворювань і профілактики ЗПСШ. Однак застосування тампона призводить до зменшення постачання кисню до слизової оболонки піхви, що призводить до порушення природного балансу піхвової мікрофлори і, як наслідок, розвитку вагінозів, а також при вмісті у препараті хлоргексидину ~ 55% збільшує ризик виникнення побічних ефектів. Відома хімічна композиція для нанесення на тампон, що має сперміцидну, бактерицидну та віруцидну активність і містить хлоргексидин та/або оксид поліетилену і ноноксинол-9 (заявка РСТ №0003682 на «Хімічну композицію, що має сперміцидну, бактерицидну та віруцидну активність, і препарат для введення у вагінальний канал»). Дана композиція має сперміцидну, бактерицидну і віруцидну активність для внутрішньовагінального застосування як контрацептивного засобу, а також для запобігання передачі ЗПСШ. Однак застосування в композиції двох діючих речовин антибактеріальної дії призводить до ушкодження клітин слизової оболонки піхви. Відома фармакологічна композиція пролонгованої дії для лікування різних запальних захворювань, зокрема в дерматовенерології, виконана у вигляді гелю або плівки, що містить хлоргексидин, димексид і стабілізуючий агент (патент РФ №2201219 «Фармакологічна композиція пролонгованої дії»). Дана фармацевтична композиція забезпечує пролонгований вплив лікарської речовини - хлоргексидину для лікування запальних захворювань різної етіології. Однак недоліком композиції, виконаної у вигляді гелю, або плівки, є незручність застосування для лікування запальних захворювань у дерматовенерології, а також той факт, що використання димексиду призводить до опіків слизової оболонки піхви. Відомий вагінальний засіб, виконаний у вигляді супозиторію, який містить принаймні ефективну кількість одного антимікробного агента місцевого застосування, вибраного з групи, що містить, зокрема, хлоргексидину глюконат і життєздатну колонію мікрокапсульованных молочнокислих бактерій (патент РФ №2147431 на «Віруцидний, бактерицидний і сперматоцидний супозиторій»). Даний вагінальний супозиторій є високоефективним для запобігання зараженню практично всіма захворюваннями, що передаються статевим шляхом, і одночасно є протизаплідним засобом, а також таким, що робить його користувачів несприйнятливими до дріжджових інфекцій. Однак відомо, що одночасне застосування антибактеріальних агентів і бактерій є небажаним, також відомо, що вміст хлоргексидину в кількості від 10 до 2000 мг на супозиторій збільшує ризик виникнення побічних ефектів. Найбільш близьким до засобу, що заявляється, за сукупністю суттєвих ознак, є лікувальнопрофілактичний засіб «Гексикон», що має антиба 89682 4 ктеріальну та антисептичну дію (патент РФ №2166314 на «Лікувально-профілактичний засіб «Гексикон», що має антибактеріальну та антисептичну дію). Відомий засіб, виконаний у вигляді супозиторію для інтравагінального введення, що містить хлоргексидину біглюконат і гідрофільну основу, який широко застосовують для лікування таких захворювань, як сифіліс, гонорея і трихомоназ. Однак недоліком даного супозиторію є те, що при його застосуванні ефект досягається не у повному обсязі через зниження біодоступності хлоргексидину, з обумовленого тим, що вагінальні інфекції пов'язані з рясними піхвовими виділеннями, які призводять до зниження вивільнення хлоргексидину з даної основи. В той же час застосування даного засобу призводить і до пригнічення росту нормальної мікрофлори піхви, що підвищує ризик розвитку вагінального дисбактеріозу. Із практики також відомо, що при застосуванні даного засобу іноді спостерігають негативний вплив основи на слизову оболонку піхви, що проявляється у вигляді опіку. Крім того, витікання основи супозиторію створює у споживачів почуття дискомфорту. Завданням винаходу є створення лікувальнопрофілактичного засобу у твердій дозованій формі - у вигляді таблетки для інтравагінального застосування, що містить хлоргексидин або його сіль, який має високий терапевтичний ефект за рахунок підвищення біологічної доступності, гарні споживчі властивості та здатність стимулювати ріст нормальної мікрофлори і який, крім того, розширює арсенал засобів з хлоргексидином для інтравагінального введення, які мають антибактеріальну та сперміцидну дію. Поставлене завдання досягається пропонованим засобом, що має антибактеріальну та сперміцидну дію, містить хлоргексидин або його сіль і основу і виконаний у дозованій формі для інтравагінального введення, відповідно до винаходу засіб виконаний у вигляді таблетки, основа якої як головну складову містить лактозу, а також інші фармацевтично прийнятні допоміжні речовини при наступному співвідношенні компонентів, мас.%: Хлоргексидин або сіль 1,0-4,0 Основа: Лактоза 60,0-95,0 Інші фармацевтично прийнятні допоміжні речовини до 100. У кращому варіанті як сіль хлоргексидину використовують біглюконат або ацетат, або дигідрохлорид. У кращому варіанті засіб додатково може містити регенеруючу речовину, вибрану з декспантенолу, метилурацилу, обліпихової олії, у кількості 0,5-10мас.%. Технічний результат пропонованої композиції полягає у створенні лікувально-профілактичного засобу у вигляді таблетки, що дає можливість: - підвищити ефективність за рахунок підвищення біодоступності хлоргексидину; - стимулювати після застосування засобу ріст нормальної мікрофлори; - поліпшити споживчі властивості. 5 89682 Те, що пропонований засіб з хлоргексидином має високу терапевтичну ефективність і гарні споживчі властивості, обумовлене тим, що засіб виконаний у вигляді дозованої форми для інтравагінального введення - у вигляді таблетки, яка містить лактозу як головну складову основи, що сприяє повному вивільненню хлоргексидину з основи, що дозволяє підвищити його біодоступність, і, як наслідок, підвищити його антибактеріальну та сперміцидну дію. Повне вивільнення хлоргексидину з основи обумовлене введенням лактози як головного складового компонента основи (при її вмісті 60,0-95,0мас.%) і дозволяє рівномірно розподілити хлоргексидин по таблетковій масі (див. табл.1), що приводить до рівномірного розподілу хлоргексидину в слизовій оболонці піхви. 6 Крім того, лактоза стимулює ріст нормальної мікрофлори піхви, що приводить до зменшення ризику розвитку дисбактеріозу піхви на фоні використання пропонованого засобу. Те, що пропонований засіб виконано у вигляді таблетки, приводить до усунення витікання основи, і як наслідок, до усунення почуття дискомфорту. Додаткове введення до композиції регенеруючих речовин, здатних стимулювати відновлення тканин, ушкоджених в результаті розвитку інфекції, приводить до швидкого відновлення клітин слизової оболонки піхви і знижує ризик вторинного інфікування, що нівелює негативну дію хлоргексидину на слизову оболонку піхви. Таблиця 1 Рівномірність розподілу хлоргексидину по таблетковій масі № серії 490606 500606 510606 520606 Вміст хлоргексидину min max 95,0 (1,9) 99,6 (2,7) 93,6 (2,6) 98,9 (2,7) 99,7 (2,4) 104,2 (2,0) 95,3 (1,6) 99,7 (2,9) Таким чином, пропонований засіб є ефективним як при лікуванні бактеріального запалення, так і при його використанні як сперміцидного препарату, при мінімальному ризику розвитку вагінального дисбактеріозу. Крім того, пропонований засіб має поліпшені споживчі властивості. Вміст компонентів у пропонованому засобі встановлено експериментально. Вміст хлоргексидину або його солей менше 1мас.% не забезпечує необхідної антибактеріальної та сперміцидної дії. Вміст хлоргексидину або його солі більше 4мас.% збільшує ризик виникнення побічних ефектів. Вміст лактози менше 60,0мас.% не забезпечує рівномірного розподілу хлоргексидину, а відтак і досягнення максимального рівня біодоступності хлоргексидину, а також не забезпечує достатньої стимуляції росту нормальної мікрофлори піхви. Вміст лактози більше 95,0мас.% не дозволяє одержати таблетку, що відповідає всім вимогам до таблеток. Як інші фармацевтично прийнятні допоміжні речовини використовують: антифрикційну речовину або суміш антифрикційних речовин, наповнювачі, зв'язуючі, дезінтегратори, буферні агенти, що дозволяють одержати таблетку. Як антифрикційну речовину пропонований засіб може містити, зокрема, стеаринову кислоту або її солі, тальк, аеросил. Як солі стеаринової кислоти пропонований засіб може містити, зокрема, магнієву та/або кальцієву солі. Як наповнювач пропонований засіб може містити, зокрема, крохмаль, мікрокристалічну целюлозу (МКЦ), магнію карбонат. Середнє відхилення від номіналу min max 2,1 2,6 Як зв'язуюче пропонований засіб може містити, зокрема, полівінілпіролідон, оксипропілметилцелюлозу, желатин, натрію альгінат. Як дезінтегратор засіб може містити, зокрема, твін-80, кросповідон. Як буферний агент засіб може містити, зокрема, кислоту адипінову або молочну. Спосіб одержання пропонованого засобу. Розрахункову кількість розчину хлоргексидину або його солі, лактози та інших фармацевтично прийнятних допоміжних речовин змішують. Отриману масу висушують, калібрують, після чого опудрюють антифрикційною речовиною або сумішшю антифрикційних речовин, або сумішшю антифрикційної речовини і наповнювача, і потім таблетують. Нижче наведені приклади виготовлення пропонованого засобу у вигляді вагінальних таблеток. Приклад 1 У розчин, що містить 10,0г хлоргексидину (у перерахуванні на суху речовину), вводять 30,0г метилцелюлози. В отриману суміш додають 950,0г лактози, масу перемішують, висушують, калібрують, опудрюють 10,0г аеросила і таблетують. Одержують таблеткову масу, що має наступний склад, мас.%: Хлоргексидин - 1,0 Лактоза - 95,0 Аеросил - 1,0 Метилцелюлоза - 3,0. Приклад 2 У розчин, що містить 40,0г хлоргексидину (у перерахуванні на суху речовину), вводять 9,0г молочної кислоти. В отриману суміш додають 950,0г лактози, масу перемішують, висушують, калібрують, опудрюють 1,0г стеаринової кислоти і таблетують. 7 Одержують таблеткову масу, що має наступний склад, мас.%: Хлоргексидин - 4,0 Молочна кислота - 0,9 Лактоза - 95,0 Стеаринова кислота - 0,1 Приклад 3 У розчин, що містить 10,0г хлоргексидину (у перерахуванні на суху речовину), вводять 50,0г полівінілпіролідону, 30,0г твіну-80, 20,0г кислоти молочної. В отриману суміш додають 600,0г лактози і 289,1г крохмалю, масу перемішують, висушують, калібрують, опудрюють 0,9г кальцію стеарату і таблетують. Одержують таблеткову масу, що має наступний склад, мас.%: Хлоргексидин - 1,0 Лактоза - 60,0 Кальцію стеарат - 0,09 Полівінілпіролідон - 5,0 Твін-80 - 3,0 Кислота молочна - 2,0 Крохмаль - до 100. Приклад 4 У розчин, що містить 40,0г хлоргексидину (у перерахуванні на суху речовину), вводять 20,0г желатину. В отриману суміш додають 20,0г кросповідону, 309,1г МКЦ і 600,0г лактози, масу перемішують, висушують, калібрують, опудрюють 0,9г тальку та 10,0г кислоти адипінової, таблетують. Одержують таблеткову масу, що має наступний склад, мас.%: Хлоргексидин - 4,0 Лактоза - 60,0 Тальк - 0,09 Желатин - 2,0 Кросповідон - 2,0 Кислота адипінова -1,0 МКЦ - до 100. Приклад 5-8 Проводять аналогічно прикладам 1-4, але як діючу речовину використовують хлоргексидину біглюконат. Приклади 9-12 Проводять аналогічно прикладам 1-4, але як діючу речовину використовують хлоргексидину ацетат. Приклади 13-16 Проводять аналогічно прикладам 1-4, але як діючу речовину використовують хлоргексидину дигідрохлорид. Приклад 17 У розчин, що містить 10,0г хлоргексидину (у перерахуванні на суху речовину), вводять 5,0г декспантенолу, 10,0г натрію альгінату, 10,0г твіну-80. В отриману суміш додають 14,1г крохмалю і 950,0г лактози, масу перемішують, висушують, калібрують, опудрюють 0,9г магнію стеарату і таблетують. Одержують таблеткову масу, що має наступний склад, мас.%: Хлоргексидин -1,0 Декспантенол - 0,5 Лактоза - 95,0 Магнію стеарат - 0,09 Натрію альгінат -1,0 89682 8 Твін-80 - 1,0 Крохмаль - до 100. Приклад 18 У розчин, що містить 40,0г хлоргексидину (у перерахуванні на суху речовину) і вводять 5,0г декспантенолу. В отриману суміш додають 4,1г МКЦ і 950,0г лактози, масу перемішують, висушують, калібрують, опудрюють 0,9г стеаринової кислоти і таблетують. Одержують таблеткову масу, що має наступний склад, мас.%: Хлоргексидин - 4,0 Декспантенол - 0,5 Лактоза - 95,0 Стеаринова кислота - 0,09 МКЦ - до 100. Приклад 19 У розчин, що містить 10,0г хлоргексидину (у перерахуванні на суху речовину), вводять 10,0г желатину і 5,0г декспантенолу. В отриману суміш додають 5,0г кросповідону, 349,0г МКЦ і 600,0г лактози, масу перемішують, висушують, калібрують, опудрюють 20,0г кислоти адипінової і 1,0г суміші стеарату магнію і стеарату кальцію (у співвідношенні 1:1) і таблетують. Одержують таблеткову масу, що має наступний склад, мас.%: Хлоргексидин -1,0 Декспантенол - 0,5 Лактоза - 60,0 Стеарат магнію/стеарат кальцію - 0,1 Желатин - 1,0 Кросповідон - 0,5 Кислота адипінова - 2,0 МКЦ - до 100. Приклад 20 У розчин, що містить 40,0г хлоргексидину (у перерахуванні на суху речовину), вводять 50,0г полівінілпіролідону, 15,0г твіну-80, 5,0г декспантенолу. В отриману суміш додають 600,0г лактози і 265,0г магнію карбонату, масу перемішують, висушують, калібрують, опудрюють 10,0г аеросила і 15,0г кислоти адипінової, таблетують. Одержують таблеткову масу, що має наступний склад, мас.%: Хлоргексидин - 4,0 Декспантенол - 0,5 Лактоза - 60,0 Аеросил - 1,0 Полівінілпіролідон - 5,0 Твін-80 - 1,5 Кислота адипінова - 1,5 Магнію карбонат - до 100. Приклад 21 У розчин, що містить 10,0г хлоргексидину (у перерахуванні на суху речовину), вводять 100,0г декспантенолу. В отриману суміш додають 880,0г лактози, масу перемішують, висушують, калібрують, опудрюють 10,0г тальку і таблетують. Одержують таблеткову масу, що має наступний склад, мас.%: Хлоргексидин - 1,0 Декспантенол - 10,0 Лактоза - 88,0 Тальк - 1,0 9 Приклад 22 У розчин, що містить 40,0г хлоргексидину (у перерахуванні на суху речовину), вводять 100,0г декспантенолу. В отриману суміш додають 850,0г лактози, масу перемішують, висушують, калібрують, опудрюють 10,0г стеарату кальцію і таблетують. Одержують таблеткову масу, що має наступний склад, мас.%: Хлоргексидин - 4,0 Декспантенол -10,0 Лактоза - 85,0 Кальцію стеарат - 1,0 Приклад 23 У розчин, що містить 10,0г хлоргексидину (у перерахуванні на суху речовину), вводять 100,0г декспантенолу, 10,0г полівінілпіролідону, 5,0г твіну-80, 10,0г кислоти молочної. В отриману суміш додають 600,0г лактози і 264,0г крохмалю, масу перемішують, висушують, калібрують, опудрюють 1,0г стеарату магнію і таблетують. Одержують таблеткову масу, що має наступний склад, мас.%: Хлоргексидин - 1,0 Декспантенол - 10,0 Лактоза - 60,0 Стеарат магнію - 0,1 Полівінілпіролідон - 1,0 Твін-80 - 0,5 Кислота молочна - 1,0 Крохмаль - до 100. Приклад 24 У розчин, що містить 40,0г хлоргексидину (у перерахуванні на суху речовину), вводять 100,0г декспантенолу, 40,0г оксипропілметилцелюлози і 30,0г твіну-80. В отриману суміш додають 600,0г лактози і 184,0г МКЦ, масу перемішують, висушують, калібрують, опудрюють 5,0г кислоти адипінової та 1,0г суміші стеарату кальцію і стеарату магнію (у співвідношенні 1:1), таблетують. Одержують таблеткову масу, що має наступний склад, мас.%: Хлоргексидин - 4,0 Декспантенол - 10,0 Лактоза - 60,0 Стеарат кальцію/стеарат магнію - 0,1 Оксипропілметилцелюлоза - 4,0 Твін-80 - 3,0 Кислота адипінова - 0,5 МКЦ - до 100. Приклади 25-28 Проводять аналогічно прикладам 17-20, але як регенеруючу речовину використовують метилурацил. Приклади 29-32 Проводять аналогічно прикладам 17-20, але як регенеруючу речовину використовують обліпихову олію. Приклади 33-36 Проводять аналогічно прикладам 21-24, але як регенеруючу речовину використовують метилурацил. Приклади 37-40 89682 10 Проводять аналогічно прикладам 21-24, але як регенеруючу речовину використовують обліпихову олію. Кількісне визначення хлоргексидину або його солі в таблетках здійснюють методом високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) на рідинному хроматографі фірми "Waters" (або аналогічному) зі спектрофотометричним детектором. Випробування на мікробіологічну чистоту таблеток проводять відповідно до вимог ГФ XI, вип.2, с.193 і Зміни №3 (категорія 2). Отримані результати відповідають нормативним вимогам. Отримані таблетки за зовнішнім виглядом відповідають вимогам ГФ XI, вип.2, с.154. Нижче наведені результати доклінічних досліджень пропонованого засобу, що складаються з двох частин. З метою визначення загальнотоксичної дії і доказу ефективності пропонованого засобу та його сперміцидної активності були проведеш його доклінічні випробування на базі Центральної науково-дослідної лабораторії Нижегородської державної медичної академії. Результати експериментів були оброблені на ЮМ PC/AT за допомогою пакетів прикладних програм Statistica 5.5. Для всіх кількісних даних обчислювали групове середнє арифметичне (М) і середньоквадратичне відхилення (SD), парні внутрішньогрупові та міжгрупові порівняння середніх визначали за критеріями Уілкоксона. Відмінності вважали достовірними при рівні значущості р20% площі голівки заповнено незабарвленими вакуолями), голівки з маленькою акросомною областю (2,0мл Концентрація сперма- >20-107мл тозоїдів Рухливість >50% рухливих або >25% з поступальним рухом протягом 60хв після еякуляції Морфологія 50% живих, тобто незабарвлених 19 89682 Морфологія: - нормальні - дефект голівки - дефект шийки або середньої частини - дефект хвоста Зразок бланка аналізу еякулята Дата одержання еяВихідний кулята 1 2 Тривалість стримування Інтервал між еякуляцією і початком аналізу (хв) Об'єм (мл) Рухливість: а) швидкий поступальний рух; b) коливальний (повільний і в'ялопоступальний рух) і непоступальний рух; с) нерухливі сперматозоїди Через 30хв 3 20 Через 60хв 4 Після визначення параметрів еякулята донорів у ті ж пробірки з еякулятом при температурі 37°С додавали необхідну кількість пропонованого засобу, що дорівнювала разовій дозі при інтравагшальному застосуванні. Для послідовного спостереження залишали в термостаті на 30 і 60хв при 37°С. Експериментальні групи (у кожній групі n=10): 1. Плацебо (основа таблеток) 2. Пропонований засіб, варіант №1 3. Пропонований засіб, варіант №2 Вплив пропонованих засобів на життєздатність сперматозоїдів в еякуляті здорових чоловіків in vitro. При макроскопічному аналізі еякулята здорових чоловіків молодого віку були отримані наступні результати (табл.8). Життєздатність (% живих) Концентрація (106/мл) Таблиця 8 Дані макроскопічної оцінки еякулята здорових молодих чоловіків-донорів, n=30, (M±SD) Об'єм (мл) Концентрація (106/мл) 3,82±0,53 352±149 а 71,5±8,6 При порівнянні зі стандартами (табл.7) можна зробити висновок, що досліджувані еякуляти відповідають значенням нормальних показників при макроскопічному описі. Рухливість (%) b 11,2±4,04 с 16,3±8,1 Життєздатність (% живих) 85±7,1 Після додавання пропонованого засобу і рухливість, і життєздатність сперматозоїдів значно знизилася на відміну від груп-плацебо (табл.9) уже через 30хв. Таблиця 9 Вплив пропонованого засобу на рухливість і життєздатність сперматозоїдів у еякуляті здорових молодих чоловіків-донорів (M±SD) Група Плацебо таблетки Пропонований засіб, варіант №1 Пропонований засіб, варіант №2 а 45,8±8,2 Рухливість (30хв) (%) b с 15,0±6,7 39,0±22,4 Життєздатність ( % живих) 30хв 60хв 74,25±7,88 72,5±5,31 100 2,0±1,90 0 100 1,25±0,350 0 Таким чином, макроскопічний аналіз еякулята після застосування пропонованого засобу у вигляді вагінальних таблеток виявив 1-2% життєздатних сперматозоїдів через 30хв, хоча через 60хв результати були порівнянні з дією інших препаратів знерухомлення та загибель сперматозоїдів. Результати морфологічного аналізу мазків, що дає можливість виявити структурні зміни сперма тозоїдів після застосування пропонованого засобу протягом 30 і 60хв, представлені в таблиці 10. Додавання пропонованого засобу, варіанта №1 і варіанта №2, до порції еякулята in vitro шкідливо впливає на структуру сперматозоїдів. Основною точкою прикладання був хвіст сперматозоїда, морфологія якого була найбільш ушкодженою через 30 і 60хв після впливу. 21 89682 22 Таблиця 10 Вплив пропонованого засобу на морфологію сперматозоїдів у еякуляті здорових молодих чоловіків-донорів через 30 і 60хв після впливу, (M±SD) Група Вихідні дані (n=30) Плацебо таблетки (n=10) 30хв 60хв Пропонований засіб, варіант №1 (n=10) 30хв 60хв Пропонований засіб, варіант №2 (n=10) 30хв 60хв Норма Патологія шийки 0,9±0,8 94,3±2,9 голівки 2,2±1,9 66,25±20,2 62,25±23,0 2,5±1,29 2,5±1,29 9,5±4,35 10,0±9,52 27,75±17,9 26,25±20,53 63,5±12,8 54,3±8,0 2,5±1,7 2,0±1,0 13,0±7,7 10,3±4,04 23,0±9,8 34,3±10,5 68±12,8 52,3±5,03 2,3±0,57 2,6±0,57 6,6±4,04 8,6±3,7 24,7±8,71 38,3±2,08 При порівнянні результатів мікроскопічного аналізу з результатами макроскопічного аналізу можна припустити, що при впливі препаратів із хлоргексидином знерухомлення та загибель сперматозоїдів обумовлені порушенням проникності мембрани та метаболізму клітини, але не порушенням її структурної цілісності шляхом розриву мембрани. Висновок У дослідженні вивчали ефективність сперміцидної дії пропонованого засобу у вигляді таблеток для інтравагінального введення, розроблених ВАТ Нижфарм, Росія, in vitro з використанням сперми чоловіків-донорів. Пропонований засіб застосовували в дозі 1 таблетка однократно на порцію сперми людини хвоста 2,7±1,5 (3,5мл). Як контрольну речовину застосовували основу таблеток. In vitro при застосуванні різних варіантів №1 і №2 пропонованого засобу було виявлено 1-2% життєздатних сперматозоїдів через 30хв, хоча через 60хв спостерігали повне знерухомлення та загибель сперматозоїдів (100%). При оцінці морфології сперматозоїдів у тесті in vitro основним механізмом порушення їхньої рухливості та загибелі при дії пропонованого засобу на основі хлоргексидину було порушення проникності мембрани та метаболізму сперматозоїдів, але не структурної цілісності. Як показали проведеш дослідження, пропонований засіб у вигляді вагінальних таблеток є ефективним антибактеріальним і сперміцидним засобом, зручним у застосуванні. 23 Комп’ютерна верстка А. Рябко 89682 Підписне 24 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601