Лікувально-профілактичний засіб з нефропротекторною дією

Спосіб одержання лікувальнопрофілактичного засобу з нефропротекторною дією на основі екстракту надземної частини яглиці звичайної, який відрізняється тим, що подрібнену яглицю двічі екстрагують водою при загальному співвідношенні сировини і екстрагенту 1:10 - 1:12 при нагріванні до 90°С протягом 1 години з наступною фільтрацією та сушкою під вакуумом, до залишкової вологості 5 мас. %. UA (21) a200701563 (22) 14.02.2007 (24) 10.03.2009 (46) 10.03.2009, Бюл.№ 5, 2009 р. (72) ТОВЧИГА ОЛЬГА ВОЛОДИ МИРІВН А, U A, ШТРИГОЛЬ СЕРГІЙ ЮРІЙОВИЧ, UA, СТЕПАНОВА СВІТЛАН А ІВАНІВНА, U A (73) НАЦІОН АЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ, UA (56) UA C2 76891, 15.09.2006. UA C1 24032, 31.08.1998. UA C2 46764, 17.06.2002. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; семейства Rutaceae - Eleagnaceae. - Л.: Наука, 1988. C.69. Майзель (Михайлец) И.Б. Экспериментальное воспроизведение заболеваний органов мочеотделения // Воспроизведение заболеваний у животных для экспериментально-терапевтических исследований / Под ред. Н.В. Лазарева. - Л.: Медгиз, 1954. - С.313-325. C2 2 (19) 1 3 85892 Проте леспенефрил може викликати такі побічні ефекти, як тахікардія, запаморочення, загальна слабкість, головний біль. У зв'язку із вмістом в препараті спирту етилового він не може призначатися одночасно з багатьма лікарськими засобами (інсулін, пероральні цукрознижувальні, седативні засоби, деякі антидепресанти). Також існують відомості про невисоку фармакологічну активність леспенефрилу як у дослідах на тваринах, так і в клінічних умовах. Відомий препарат хофітол, який містить водний екстракт артишоку посівного й відзначається жовчогінними, сечогінними, гіпоазотемічними, гепатопротекторними властивостями, сприяє виведенню з організму токсинів, нормалізації процесів обміну речовин. Препарат призначають у складі комплексної терапії хворим з хронічною нирковою недостатністю, хронічним пієлонефритом та гломерулонефритом [Компендиум 2003 - лекарственные препараты / Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. - Киев: Морион, 2003. - С. Л-413]. Проте хо фітол протипоказаний при непрохідності жовчних шля хів, жовчнокам'яній хворобі, гострих захворюваннях нирок, жовчних та сечових шляхів, при тривалому застосуванні у високих дозах може спричинити діарею. Відомий лікувально-профілактичний засіб з урикозурічною дією у формі 20% настойки яґлиці звичайної на 70% спирті етиловому. Вплив даного засобу на обмін сечової кислоти зумовлений комплексом біологічно активних речовин, який екстрагується спиртом етиловим вказаної концентрації [Патент №76891 на винахід, а 2005 00030, МПК А61К 36/23 (2006.01), А61К 13/02 (2006.01), А61К 19/05 (2006.01). / Лікувально-профілактичний засіб з урикозурічною дією. О.В. Товчига, С.Ю. Штриголь, C.I. Степанова. Заявл. 04.01.2005; Надрук. 15.09.2006; Бюл. №9. - 3с.]. Проте, відомий засіб не має вираженої нефропротекторної дії. Завданням винаходу є створення нового засобу рослинного походження з достовірною нефропротекторною дією, низькою токсичністю, з доступної сировини за простою технологією. Поставлене завдання вирішується таким чином, що лікувально-профілактичний засіб з нефропротекторною дією на основі надземної частини яглиці звичайної у відповідності з винаходом містить водний витяг з сировини, одержаний шляхом бісмацерації, у формі сухого екстракту зі вмістом фенольних сполук не менше 4,5% у перерахунку на кислоту хлорогенову. Яглиця звичайна (Aegopodium podagraria L.) багаторічна трав'яниста рослина родини селерові (Аріасеае), є перспективним об'єктом для фармакологічного вивчення. Хімічний склад яглиці звичайної [Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Rutaceae - Eleagnaceae. - Л.: Наука, 1988. - С. 69.] та дані щодо її сечогінних властивостей [Степанова C.I., Штриголь С.Ю., Товчига О.В. Перспективы использования сухого экстракта сныти обыкновенной как источника биологически активных веществ. // Перспективи створення в Україні лікарських препаратів різної спрямованості 4 дії: Матер. Всеукр. науково-практ. семін. 26 листопада 2004р., м. Харків. - Харків: НФаУ, 2004. С.426-429.] надають можливість очікувати нефропротекторну дію в її препаратів. Проте, інформація щодо нефропротекторної дії препаратів яглиці звичайної у літературі відсутня. Заявлений засіб отримують методом бісмацерації [Державна Фармакопея України / Державне підприємство «Науково-експертний фармакопейний центр». - 1-е вид. - Харків: РІРЕГ, 2001. - Доповнення 1. -2004. - С. 271-273.]. Експериментальним шляхом в якості екстрагенту вибрана вода. Авторами доведено, що нефропротекторна дія притаманна саме комплексу біологічно активних речовин, що екстрагуються з наздземної частини яглиці звичайної цим розчинником. Крім того, одержаний екстракт у сухому вигляді вигідно відрізняється за технологічними параметрами: характеризується задовільними сипкими властивостями та меншою гігроскопічністю, що забезпечує стійкість при зберіганні. При одержанні заявленого засобу виключається необхідність застосування етанолу та хлороформу, а також стадія очищення витягу від ліпофільних речовин, що значно зменшує собівартість кінцевого продукту та спрощує технологічний процес. Заявлений засіб одержують простим, доступним способом. Повітряно-суху сировину подрібнюють, заливають необхідною кількістю води дистильованої. Екстракцію проводять при підвищеній температурі (90°С), витяг відфільтровують та висушують до залишкової вологості 5%. Вихід готового продукту становить 24,5±2,7%. Одержаний засіб - коричневий порошок з характерним приємним запахом. Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1 Повітряно-суху сировину - надземну частину яглиці звичайної - подрібнювали до розмірів часток, які проходять крізь сито з діаметром отворів 2мм. На 100,0г сировини брали 1000мл води дистильованої, кількість екстрагенту збільшували з урахуванням коефіцієнту поглинання сировини, який дорівнює 2, таким чином, об'єм води дистильованої становив 1200мл. Відповідно до обраного методу загальну кількість екстрагенту ділили на дві частини. Подрібнену сировину заливали двома третинами води дистильованої. Екстракцію проводили при нагріванні до 90°С протягом 1 год при періодичному перемішуванні. Витяг відфільтровували під вакуумом і повторювали процес настоювання та фільтрації з рештою екстрагенту. Одержані витяги об'єднували, воду відганяли. Екстракт висушували на вакуумно-ротаційному апараті до залишкової вологості 5%. Вихід екстракту становив 25,1%. Сухий екстракт яглиці звичайної - коричневий порошок з характерним запахом. Приклад 2 Вивчення нефропротекторної дії заявленого засобу проводили на моделі токсичної нефропатії у мишей, що викликана підшкірним уведенням етиленгліколю (10мл/кг) [Майзель (Михайлец) И.Б. Экспериментальное воспроизведение заболева 5 85892 ний органов мочеотделения. // Воспроизведение заболеваний у животных для экспериментальнотерапевтических исследований / Под ред. Н.В. Лазарева. - Л.: Медгиз, 1954. - С.313-325]. Введення етиленгліколю контрольним тваринам призводило до виникнення тяжкої інтоксикації. Через 3040 хвилин після ін'єкції розвивалась макрогематурія, що свідчить про високу чутливість нирок до дії токсину, первинність та тяжкість їхнього ураження. Для визначення нефропротекторної активності використано режим профілактичного введення заявленого засобу в різних дозах. Заявлений засіб у формі водного розчину сухого екстракту в дозі 1 та 5г/кг, а також препарат порівняння - хофітол вводили внутрішньошлунково протягом 3 днів до введення нефротоксичного агенту. Лабораторних тварин (рандомбредні миші масою 25-30г) розподілили на групи відповідно до препарату, що вони одержували, та його дози: 1. Контроль (етиленгліколь), n=12. 6 2. Заявлений засіб (1г/кг) + етиленгліколь, n=18. 3. Заявлений засіб (5г/кг) + етиленгліколь, n=12. 4. Хо фітол (5мл/кг) + етиленгліколь, n=16. 5. Хо фітол (25мл/кг) + етиленгліколь, n=15. За вмістом екстракту лікарської сировини - артишоку посівного - дози хо фітолу (5 і 25мл/кг) відповідають досліджуваним дозам заявленого засобу (1 і 5г/кг). В якості критерію нефропротекторної дії обрано виживаність тварин. Це інтегральний критерій, що дозволяє надійно верифікувати наявність захисної дії. У тварин, які одержували заявлений засіб, симптоми інтоксикації, в т. ч. гематурія, були вираженими значно менше, ніж у контрольних тварин. Це свідчить про сприятливий вплив заявленого засобу на стан нирок. Результати дослідження наведені в таблиці 1. Таблиця 1 Вплив заявленого засобу та препарату порівняння на виживаність мишей з етиленгліколевою нефропатією № Група 1 Контроль (етиленгліколь) Заявлений засіб (1г/кг) + етиленгліколь Заявлений засіб (5г/кг) + етиленгліколь Хо фітол (5мл/кг) + етиленгліколь 2 3 4 5 Хо фітол (25мл/кг) + етиленгліколь Кількість мишей в гр упі 12 Виживаність, Статистична достовір% ність різниці 8,33 Вижило Загинуло 1 11 18 14 4 77,8 12 6 6 50,0 16 6 10 37,5 15 11 4 73,3 Р2-1 < 0,001 Р3-1