Антибактеріальний засіб на основі 6-аміногексанової кислоти (варіанти)

Реферат: UA 108532 C2 (12) UA 108532 C2 Винахід належить до галузі фармакології та медицини, зокрема до засобу для пригнічення патогенних мікроорганізмів, таких як Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus fecalis, Esherihia coli. Як антибактеріальний засіб пропонується індивідуальна сполука 6-аміногексанова кислота (6-АГК) формули: H2N COOH , а також композиція - 6-аміногексанова кислота та антибіотик: пеніцилін або стрептоміцин, або канаміцин, або рифампіцин, або нітроміцин, або лінкоміцин, або амікацин, або доксициклін. UA 108532 C2 5 Винахід належить до галузі фармакології та медицини, зокрема до засобу для пригнічення патогенних мікроорганізмів, таких як Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus fecalis, Esherihia coli. Відома велика кількість антибактеріальних засобів як індивідуальних хімічних сполук, наприклад, засіб, що має антибактеріальну активність та являє собою 1,5-біс-(4-додецил-1,4діазоніабіцикло [2.2.2] октан-1-іл) пентан дихлорид дибромід за такою структурною формулою: + N + N C12H25 2Cl-, 2Br+ N 10 15 20 25 30 35 40 45 + N C12H25 (див. патент Російської Федерації № 2443705 на винахід "Средство, обладающее антибактериальной активностью"). Відомі також антибактеріальні засоби, що являють композицію з декількох компонентів, наприклад, фармацевтична композиція, що має антибактеріальну, противірусну і протигрибкову дію, яка містить хлоргексидин, бензоксонію хлорид і воду. Хлоргексидин і бензоксонію хлорид використані як основні діючі речовини, вода очищена використана як розчинник і формоутворювач при наступному співвідношенні компонентів, мас/об%: хлоргексидин 0,1-1,0 бензоксонію хлорид 0,05-0,5 решта до вода очищена 100 (див. патент Російської Федерації № 2437647 на винахід "Фармацевтическая композиция, обладающая антибактериальным, противовирусным и противогрибковым действием"). Зазначеним засобам притаманні такі недоліки: а) в обох патентах запропоновані препарати, є хлорвмісними сполуками, що обумовлює їх досить високу токсичність та не дає можливості при необхідності підвищити дозу препаратів; б) застосування препарату (див. патент Російської Федерації № 2443705 на винахід "Средство, обладающее антибактериальной активностью") обмежено ветеринарною практикою; в) застосування препарату (див. патент Російської Федерації № 2437647 на винахід "Фармацевтическая композиция, обладающая антибактериальным, противовирусным и противогрибковым действием") обмежено тільки зовнішнім застосуванням. Відомо використання амінокапронової кислоти (хімічна назва - 6-аміногексанова кислота - 6АГК) як противірусного засобу. Препарат амінокапронової кислоти використовується для профілактики і лікування грипу та гострих респіраторних вірусних інфекцій. 6-АГК створює бар'єр для вірусів, ефективно блокуючи проникнення збудників у клітини носоглотки і легень ® (див. АКК . Барьер от вирусов гриппа и ОРВИ! Рекламный проспект ООО "Юрия-Фарм", г. Киев, Украина). Невідомо використання 6-аміногексанової кислоти (6-АГК) як антибактеріального засобу. Відомий кровоспинний, протимікробний і ранозагоювальний засіб, що містить полівінілпіролідон, агар, поліетиленоксид, амінокапронову кислоту, гентаміцин і воду (див. Патент Російської Федерації на винахід № 2409369, дата публікації - 20.01.2011 p.). У даному складі амінокапронова кислота використовується як кровоспинний агент, що сприяє загоєнню ран. Як протимікробний агент в зазначеному складі використовується антибіотик - гентаміцин. Склад даного засобу вибрано як прототип до складу антибактеріального засобу, що заявляється. Прототип і засіб, що заявляється, мають наступні спільні ознаки (компоненти): - антибіотик; - амінокапронова кислота. Однак, засобу за прототипом притаманні такі недоліки: 1) обмежено застосування композиції: може застосовуватися тільки зовнішньо для лікування ран і опіків; 2) як антибіотик використовується тільки гентаміцин. 1 UA 108532 C2 5 В основу винаходу поставлено задачу - пошук нового антибактеріального засобу, який є низькотоксичним, має протимікробну активність, а також підсилює протимікробну дію антибіотиків. Поставлена задача вирішена групою винаходів, об'єднаних єдиним винахідницьким задумом, а саме, застосуванням 6-аміногексанової кислоти (6-АГК) як антибактеріального засобу, а також композиції, до складу якої входить антибіотик і 6-аміногексанова кислота. У першому винаході поставлена задача вирішена застосуванням 6-аміногексанової кислоти формули: H2N 10 15 20 25 30 35 40 45 COOH як антибактеріального засобу. У другому винаході поставлена задача вирішена антибактеріальним засобом, що містить 12500-50000 мкг/мл 6-аміногексанової кислоти і антибіотик, де як антибіотик він містить пеніцилін або стрептоміцин, або канаміцин, або рифампіцин, або нітроміцин, або лінкоміцин, або амікацин, або доксициклін. Кількість кожного антибіотика в антибактеріальному засобі залежить від його виду і складає, мкг/мл: 0,0015пеніцилін 15,0 стрептоміцин 0,06-400,0 канаміцин 0,03-0,4 0,0005рифампіцин 20,0 0,0062нітроміцин 0,04 0,038лінкоміцин 3000,0 амікацин 0,05-10,0 0,0125доксициклін 10,0. Розробка і створення нових хіміотерапевтичних препаратів для лікування інфекційних захворювань і профілактики бактеріальних ускладнень вірусних інфекцій є актуальною задачею медичної науки та охорони здоров'я. Пошук нетоксичних сполук, за допомогою яких можна було б підсилити дію антибіотиків, дозволить зменшити ефективну дозу останніх і, таким чином, знизити їх токсичний вплив на організм людини. Зараз у світі широко поширені антибіотикорезистентні штами мікроорганізмів. Це стало глобальною проблемою, яка стосується як високорозвинених держав, так і країн, що розвиваються. Не існує держави, яка б могла ігнорувати цю проблему і не проводити адекватний пошук шляхів її вирішення. 11 вересня 2001 p. BOO3 розробила Глобальну стратегію попередження формування резистентності мікроорганізмів до антибіотиків. Починаючи з 40-х років XX століття, в світі стали поширюватися збудники інфекцій, які є нечутливими до антибіотиків. Особливе місце серед відомих інфекційних захворювань займають госпітальні інфекції, які є проблемою світового рівня. В сучасних умовах для підбору раціонального лікування внутрішньолікарняних інфекцій головним показником стає визначення рівня резистентності/чутливості штаму до антибіотиків(див. Wolff M. Schweiz.// Med. Wochenschr. 1995; 125: 36: 1684-1686). Більше 70 % циркулюючих штамів збудників інфекцій є антибіотикорезистентними(див.Кпоте A., Shah P., Kromery V., Antal M., Mitsuhashi S. Transferable resistance to cefotaxime, cefoxitin, cefamandole and cefuroxime and in clinical isolates of Klebsiella pneumoniae and Serratia marcescens.// Infection 1983; 11: 315-317). Часте застосування антибіотиків призводить до збільшення числа антибіотикорезистентних штамів. Боротьба з внутрішньолікарняними інфекціями, викликаними такими штамами, є невирішеною проблемою, незважаючи на велику кількість медикаментів, розроблених і запропонованих для їх лікування (див. Рhilliрр Kaysser, Erik Seibold, Kerstin MatzRensing, Martin Pfeffer, Sandra Essbauer, Wolf D Splettstoesser. Re-emergence of tularemia in Germany: Presence of Francisella tularensis in different rodent species in endemic areas. - BMC Infectious Diseases, 2008, 8:157). Резистентність у штамів, які викликають ці захворювання, поширюється не лише на традиційні групи антибіотиків. Спостерігається виникнення стійкості і до антибіотиків нових груп. Відомі й різні механізми, за допомогою яких мікроорганізми набувають резистентності до антибіотиків. Так, деякі мікроорганізми, наприклад, Staphylococcus aureus виробляють спеціальні ферменти (пеніциліназу), які можуть або руйнувати сам антибіотик, або запобігати 2 UA 108532 C2 5 10 15 20 його дії. Додавання до антибіотиків речовин, які змогли б гальмувати вироблення або активність бактеріальних специфічних ферментів, дозволило б зменшити розмноження антибіотикорезистентних штамів. Ефективним може бути спільне використання антибіотиків з препаратами іншої природи, які дозволять підвищити чутливість збудника до антибіотиків. Автори показали, що інгібітори протеолізу проявляють активність щодо деяких інфекційних агентів - вірусів грипу, герпесу, аденовірусу та ін… (див. A. Fedchuk, V. Lozitsky, T. Gridina, L. Shitikova, L. Mudryk, V. Kuz'min, R. Lozitska, J. Drach. Anti-herpetic activity of synthetic proteolysis inhibitors and their analogues // Antiviral Research. - 2005. - vol.65. - N 3. - p.77; Fedchuk A., Lozitska R., Gridina Т., Kuzmin V., Lozitsky V. Antiviral properties of proteolysis inhibitors and compounds containing their fragments // Antiviral Research. 2006-vol. 70, PA. 49). Відомо використання 6-АГК - Е-амінокапронової кислоти - як противірусного засобу (див. Рекламный проспект ООО "Юрия-Фарм", вказаний вище). Однак, не існує закономірності, яка б виявлялася у тому, що, якщо будь-яка речовина має противірусну активність, то вона обов'язково буде проявляти також антибактеріальну дію. Наприклад, відомо, що протигрипозний препарат Ремантадин не тільки не проявляє антибактеріальної дії, але й не є ефективним відносно вірусів грипу В. Відомо також, що антибіотики, маючи антибактеріальну дію, не є противірусними препаратами. З науково-технічної літератури заявникам невідомо використання 6-аміногексанової кислоти як антибактеріального засобу. 6-аміногексанова кислота (Е-амінокапронова кислота) - це порошок білого кольору без запаху, добре розчинний у воді, погано - в етанолі, практично не розчинний у діетиловому ефірі і хлороформі; температура плавлення 204-209 °C, молекулярна маса 131; структурна формула: H2N 25 30 35 40 45 50 55 COOH Приклади здійснення винаходу. ПРИКЛАД № 1. Визначали мінімальні дози 6-аміногексанової кислоти, які зменшували ріст мікроорганізмів, проявляючи бактерицидну дію. Для цього до розведень препарату на поживному бульйоні Мюллера-Хінтона в кінцевому обсязі 2 мл додавали 0,1 мл розведення добової культури мікроорганізмів Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus 2781, Staphylococcus aureus Кунда, Enterococcus fecalis ATCC 29212, Esherihia coli ATCC 25922 і 9 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 в концентрації 10 мікробних клітин/мл. Контрольний зразок містив збудник і живильне середовище. Через 20 годин термостатування при 37 °C в контрольних і дослідних зразках реєстрували ріст кількості мікроорганізмів за методом визначення зміни оптичної щільності рідини, яку тестували за допомогою приладу Densi-LaMeter. Дослідження проводили в 3-5 повторах. Результати статистично оброблялися за допомогою програм Microsoft Excel 2007. Отримані результати наведені в таблицях 1 і 2. Як видно з даних, наведених у таблиці 1, додавання 6-аміногексанової кислоти в концентраціях 50 мг/мл, 25 мг/мл і 12,5 мг/мл до живильного бульйону призводило до зменшення росту всіх досліджених штамів стафілокока. Присутність 6-АГК у середовищі в кінцевій концентрації 50 мг/мл, 25 мг/мл і 12,5 мг/мл призводило до зниження росту штаму Staphylococcus aureus ATCC 25923 на 40 %, 27 % і 13,5 % відповідно. Аналогічну дію препарату спостерігали і щодо штаму Staphylococcus aureus Кунда: додавання 6-АГК в кінцевій концентрації 50 мг/мл, 25 мг/мл і 12,5 мг/мл призводило до зменшення росту мікроорганізмів на 44,5 %, 37 % і 29,5 % відповідно. У відношенні штаму Staphylococcus aureus 2781 гальмування росту мікроорганізмів у присутності 6-АГК спостерігалося у меншій мірі. Додавання 6-АГК в кінцевій концентрації 50 мг/мл, 25 мг/мл і 12,5 мг/мл призводило до зменшення росту мікроорганізмів на 18 %, 14,5 % і 14,5 % відповідно. Крім того, присутність в живильному бульйоні 6-АГК призводило до гальмування росту й інших мікроорганізмів (див. таблицю 2). Так, додавання 6-АГК до живильного середовища в кінцевій концентрації 75 мг/мл, 50 мг/мл і 25 мг/мл призводило до зменшення росту Enterococcus fecalis ATCC 29212 на 38,5 %, 23 % і 8 % відповідно. При додаванні препарату до середовища в кінцевій концентрації 40 мг/мл, 30 мг/мл і 20 мг/мл спостерігалося гальмування росту Esherihia coli ATCC 25922 на 50 %, 16 % і 26,3 % відповідно(див.таблицю 2). Спостерігався вплив присутності 6-аміногексанової кислоти і на ріст Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. Додавання 6-АГК до живильного середовища в кінцевих концентраціях від 75 мг/мл до 12,5 мг/мл призводило до зменшення росту мікроорганізмів (див.таблицю 2). 3 UA 108532 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ПРИКЛАД № 2. Проводили дослідження з визначення спільної дії 6-аміногексанової кислоти і пеніциліну на ріст мікроорганізмів - штами Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus 2781, Staphylococcus aureus Кунда. Для цього готували дворазові розведення препаратів з концентрацією вище, ніж мінімальна діюча доза, на бульйоні Мюллера-Хінтона. До 1 мл розведення пеніциліну додавали 1 мл розведення 6-АГК. До 2 мл суміші додавали 0,1 мл розведення добової культури 9 мікроорганізмів в концентрації 10 мікробних клітин/мл. Контрольними рядами були такі, де до 1 мл живильного середовища додавали тільки пеніцилін або 6-АГК. Контроль росту мікроорганізмів містив 2 мл бульйону Мюллера-Хінтона. Через 20 годин термостатування при 37 °C в контрольних і дослідних зразках реєстрували ріст мікроорганізмів за зміною оптичної щільності рідини, яку визначали за допомогою приладу Densi-La-Meter. Дослідження проводили в 3-5 повторах. Результати статистично оброблялися за допомогою програм Microsoft Excel 2007. Результати наведені в таблиці 3. ПРИКЛАДИ №№ 3-9 здійснювали аналогічно прикладу 2, але з різними антибіотиками, а саме: ПРИКЛАД 3 - стрептоміцин, таблиця 4, ПРИКЛАД 4 - канаміцин, таблиця 5, ПРИКЛАД 5 - рифампіцин, таблиця 6, ПРИКЛАД 6 - нітроміцин, таблиця 7, ПРИКЛАД 7 - лінкоміцин, таблиця 8, ПРИКЛАД 8 - амікацин, таблиця 9, ПРИКЛАД 9 - доксициклін, таблиця 10. Аналіз даних, наведених у прикладах №№ 2-9. ПРИКЛАД № 2. Штам Staphylococcus aureus ATCC 25923 проявив високу чутливість до пеніциліну: вже в концентрації 0,003 мкг/мл препарат зменшував ріст штаму на 36 %, а в концентраціях 0,0125 мкг/мл і вище пригнічував його ріст більш, ніж на 80 %. Спільне застосування пеніциліну в концентраціях 0,0015, а також 0,003 і 0,0062 мкг/ мл і 6АГК в концентрації 50 мг/мл було значно ефективнішим, ніж використання кожного препарату окремо (ріст мікроорганізму пригнічувався на 11-20 % більше, чим тільки пеніциліном). Штам Staphylococcus aureus 2781 також проявив чутливість до пеніциліну, хоча дія препарату вивчалася в дуже малих дозах (0,0025-0,01 мкг/мл). Препарат в дозах 0,0025-0,005 мкг/мл гальмував ріст мікроорганізму на 24 %. Введення до складу композиції 6-АГК (50мг/мл) посилювало гальмування росту Staphylococcus aureus 2781 на 10,5-14 %. Штам Staphylococcus aureus Кунда проявив чутливість до високих доз пеніциліну: в концентрації 5 мкг/мл препарат зменшував ріст штаму на 22 %, а в концентрації 15 мкг/мл пригнічував його ріст на 85 %. Спільне застосування пеніциліну в дозі 5 мкг/мл з 6-АГК в концентраціях 12,5 мг/мл, 25 мг/мл і 50 мг/мл було більш ефективним, ніж використання тільки антибіотика, на 19-37 %. ПРИКЛАД № 3. Штам Staphylococcus aureus ATCC 25923 не виявив високу чутливість до стрептоміцину: в концентрації 0,125 мкг/мл він зменшував ріст штаму в рідкому середовищі на 22,5 %. Спільне його застосування в дозах 0,125 і 0,06 мкг/мл з 6-АГК в концентрації 12,5 і 25 мг/мл було більш ефективним, ніж використання антибіотика окремо. Пригнічення росту штаму збільшувалася на 15-35 %. Штам Staphylococcus aureus 2781 проявив чутливість до стрептоміцину, починаючи з концентрації 0,25 мкг/мл (зменшував ріст штаму в рідкому середовищі на 21 %). Спільне його застосування в дозі 0,25 мкг/мл і 6-АГК в концентрації 12,5 мг/мл було більш ефективним, ніж використання кожного препарату окремо. Гальмування росту мікроорганізму склало 50 %. Штам Staphylococcus aureus Кунда проявив чутливість до стрептоміцину у високих дозах: в концентрації 400 мкг/мл препарат зменшував його ріст в рідкому середовищі на 33 %. Спільне його застосування в дозі 100 мкг/мл і 6-АГК в концентрації 50 мг/мл було більш ефективним, ніж використання кожного препарату окремо. ПРИКЛАД № 4. Штам Staphylococcus aureus ATCC 25923 проявив чутливість до канаміцину: в концентрації 0,06 мкг/мл препарат зменшував ріст штаму на 27 %). Спільне його застосування в дозі 0,12 мкг/мл і 6-АГК в концентрації 50 мг/мл було незначно більш ефективним (зменшення росту на 54 %), ніж використання антибіотика окремо (зменшення росту на 48 %). 4 UA 108532 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Штам Staphylococcus aureus 2781 також проявив чутливість до канаміцину, але в більш високих дозах. Починаючи з концентрації 0,2 мкг/мл препарат зменшував ріст штаму на 29 %. Спільне його застосування в зазначеній дозі і 6-АГК в концентрації 12,5 мг/мл було більш ефективним (зменшення росту на 50 %). У більш високій дозі (0,4 мкг/мл) канаміцин гальмував ріст мікроорганізму на 58 %, при цьому введення до складу композиції 6-АГК в концентраціях 12,5 та 25 мг/мл посилювало гальмування росту мікроорганізму до 66,5 і 75 % відповідно. ПРИКЛАД №5. Штам Staphylococcus aureus ATCC 25923 проявив деяку чутливість до рифампіцину у вивчених низьких дозах (зменшення росту на 10,5-17 %). Спільне застосування препарату в дозах 0,0005-0,002 мкг/мл з 6-АГК в концентраціях 25 і 50 мг/мл було більш ефективним (зменшення росту на 27,5-31 % і 35,5-38 % відповідно). Штам Staphylococcus aureus 2781 проявив високу чутливість до рифампіцину: в концентрації 0,0005 мкг/мл препарат зменшував ріст штаму на16,5 %, в концентрації 0,001 мкг/мл - на 25 % і в концентрації 0,0015 мкг/мл - на 46 %. Істотно посилювався антибактеріальний ефект щодо штаму Staphylococcus aureus 2781 при спільному застосуванні рифампіцину та 6-АГК. Поєднання рифампіцину в дозі 0,005 мкг/мл, 0,001 мкг/мл і 0,0015 мкг/мл з 6-АГК в дозах 12,5-50 мг/мл було значно ефективнішим (зменшення росту на 54-96 %), ніж використання антибіотика окремо. Штам Staphylococcus aureus Кунда проявив чутливість до рифампіцину у високих дозах (520 мкг/мл): препарат зменшував ріст штаму в рідкому середовищі на 16,5-55,5 %. Спільне застосування препарату в дозах 5 мкг/мл і 10 мкг/мл з 6-АГК в концентрації 50 мг/мл було більш ефективним (зменшення росту на 28 і 44,5 % відповідно), ніж використання тільки рифампіцину у зазначених дозах (зменшення росту на 16,5 і 33 %). ПРИКЛАД № 6. Штам Staphylococcus aureus ATCC 25923 проявив чутливість до нітроміцину, в концентраціях 0,0062 мкг/мл, 0,0125 мкг/мл і 0,025 мкг/мл препарат зменшував ріст штаму на 24, 52 і 80 % відповідно. Спільне застосування препарату в дозах 0,0062 і 0,0125 мкг/мл з 6-АГК в концентраціях 25 і 50 мг/мл було більш ефективним (зменшення росту на 40-80 %), ніж використання нітроміціна окремо. Штам Staphylococcus aureus 2781 проявив високу чутливість до нітроміцину: в дозі 0,02 мкг/мл препарат зменшував ріст штаму на 64,5 %, а в концентрації 0,04 мкг/мл - на 86 %. Нітроміцин в концентрації 0,01 мкг/мл, майже не проявляв в цій дозі антибактеріальної дії. При додаванні 6-АГК в концентраціях 50 мг/мл, 25 мг/мл і 12,5 мг/мл зменшення росту було значно більш ефективним (на 46,5 %, 39 % і 36 % відповідно). Також дія композиції нітроміцина в дозі 0,02 мкг/мл з 6-АГК в концентрації 50 мг/мл була значно більш вираженою, ніж при використанні антибіотика в зазначеній дозі окремо (зменшення росту на 86 %). ПРИКЛАД № 7. Штам Staphylococcus aureus ATCC 25923 проявив високу чутливість до лінкоміцину. У концентрації 0,0625 мкг/мл препарат зменшував ріст штаму на 41 %, в концентрації 0,125 мкг/мл - на 50 %, а в концентрації 0,25 мкг/мл - на 62 %. Спільне застосування лінкоміцину в дозі 0,0625 мкг/мл з 6-АГК в концентраціях 50 мг/мл, 25 мг/мл і 12,5 мг/мл було значно більш ефективним (зменшення росту на 71 %, 59 % і 53 % відповідно). Штам Staphylococcus aureus 2781 проявив високу чутливість до лінкоміцину. У концентрації 0,038 мкг/мл препарат зменшував ріст штаму на 37 %, в концентрації 0,075 мкг/мл - на 78 % і в концентрації 0,15 мкг/мл - на 85 %. Спільне застосування лінкоміцину в дозі 0,038 мкг/мл з 6-АГК в концентраціях 50 мг/мл, 25 мг/мл і 12,5 мг/мл було значно більш ефективним, ніж використання антибіотика окремо (зменшення росту на 63 %, 55, 5 % і 48 % відповідно). Штам Staphylococcus aureus Кунда проявив чутливість до лінкоміцину у високих дозах: в концентрації 1500 мкг/мл препарат зменшував його ріст в рідкому середовищі на 33 %, а в концентрації 3000 мкг/мл - на 55,5 %. Спільне застосування препарату в концентрації 3000 мкг/мл з 6-АГК в концентраціях 12,5, 25 і 50 мг/мл було більш ефективним, ніж використання антибіотика окремо (зменшення росту на 66,5 %, 72 % і 72 % відповідно). ПРИКЛАД № 8. Штам Staphylococcus aureus ATCC 25923 проявив високу чутливість до амікацину. У концентрації 0,125 мкг/мл він зменшував ріст збудника на 62,5 %. В концентраціях 0,25 мкг/мл і 0,5 мкг/мл антибіотик майже повністю пригнічував ріст мікроорганізмів. Спільне застосування амікацину в концентрації 0,125 мкг/мл з 6-АГК в концентрації 50 мг/мл було більш ефективним, ніж використання тільки антибіотика (зменшення росту на 71 %). Штам Staphylococcus aureus 2781 проявив чутливість до амікацину. В концентрації 0,05 мкг/мл антибіотик зменшував ріст мікроорганізму на 33 %, в концентрації 0,1 мкг/мл - на 52 %, а 5 UA 108532 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 в дозі 0,2 мкг/мл - 78 %. Спільне застосування амікацину в дозі 0,2 мкг/мл з 6-АГК в концентрації 50 мг/мл було більш ефективним, ніж використання кожного препарату окремо (зменшення росту на 92,5 %). Спільне застосування амікацину в дозі 10 мкг/мл з 6-АГК в концентрації 50 мг/мл було більш ефективним, ніж використання кожного препарату окремо (зменшення росту на 55,5 %). ПРИКЛАД № 9. Штам Staphylococcus aureus ATCC 25923 проявив чутливість до доксицикліну в концентрації 0,05 мкг/мл і 0,025 мкг/мл, пригнічуючи ріст мікроорганізмів на 32 % і 26,5 %. Доксициклін в концентрації 0,0125 мкг/мл не пригнічував ріст збудника. Застосування доксицикліну у всіх вивчених концентраціях спільно з 6-АГК у всіх вивчених дозах було більш ефективним, ніж використання кожного препарату окремо (зменшення росту на 32,5-72 %). Штам Staphylococcus aureus 2781 проявив високу чутливість до доксицикліну. У концентрації 0,05 мкг/мл препарат зменшував ріст штаму на 50 %, в концентрації 0,075 мкг/мл - на 80 % і в концентрації 0,1 мкг/мл - на 90 %. Спільне застосування доксицикліну в дозах 0,075 мкг/мл і 0,05 мкг/мл з 6-АГК в концентрації 12,5 мг/мл було значно більш ефективним, ніж використання антибіотика окремо. Зазначалося зменшення росту на 90 % і 85 % відповідно. Аналогічні результати отримані при спільному застосуванні доксицикліну в тих же концентраціях 0,075 мкг/мл і 0,05 мкг/мл з 6-АГК в концентрації 25 мг/мл. Зменшення росту було на 90 % в обох випадках. Штам Staphylococcus aureus Кунда проявив схожу з пеніциліном чутливість до доксицикліну. В концентрації 5 мкг/мл препарат зменшував ріст штаму на 33 %, в концентрації 10 мкг/мл на 59 %, а в концентрації 15 мкг/мл -на 81,5 %. Спільне застосування доксицикліну в концентрації 5 мкг/мл з 6-АГК в концентраціях 12,5 мг/мл, 25 мг/мл і 50 мг/мл було більш ефективним, ніж використання кожного препарату окремо (зменшення росту на 44 %, 59 % і 63 % відповідно). Менш значним був вплив 6-АГК при концентрації доксцікліна 10 мкг/мл - зменшення росту на 6375 %, тоді як антибіотик окремо знижував ріст на 59 %. На підставі даних, наведених у прикладах №№ 1-9, можна зробити наступні висновки. 6-аміногексанова кислота здатна високоефективно гальмувати ріст Staphylococcus aureus ATCC 25923 при використанні її як монопрепарату та в композиції з антибіотиками. Композиція з пеніциліном, до якого штам високочутливий, має більшу антибактеріальну активність, ніж кожен з препаратів окремо. Композиція із стрептоміцином, до якого штам чутливий, має більшу антибактеріальну активність, ніж кожен з препаратів окремо. Композиція із канаміцином, до якого штам високочутливий, має більшу антибактеріальну активність, ніж кожен з препаратів окремо. Композиція із рифампіцином, до якого штам проявляє деяку чутливість, має більшу антибактеріальну активність, ніж кожен з препаратів окремо. Композиція із нітроміцином, до якого штам високочутливий, має більшу антибактеріальну активність, ніж кожен з препаратів окремо. 6-аміногексанова кислота здатна ефективно гальмувати ріст Staphylococcus aureus 2781 при використанні її як монопрепарату та в композиції з антибіотиками. Більшу антибактеріальну активність, ніж кожен з препаратів окремо, мають композиції 6аміногексанової кислоти із стрептоміцином, канаміцином рифампіцином, нітроміцином, лінкоміцином, амікацином, доксицикліном. При цьому штам Staphylococcus aureus 2781 є менш чутливим до антибіотиків, ніж Staphylococcus aureus ATCC 25923, тобто ефективні відносно нього дози антибіотиків є більш високими. 6-аміногексанова кислота здатна гальмувати ріст Staphylococcus aureus Кунда при використанні її як монопрепарату та в композиції з антибіотиками. Більшу антибактеріальну активність, ніж кожен з препаратів окремо, мають композиції 6-АГК з пеніциліном, стрептоміцином, рифампіцином, лінкоміцином, амікацином, доксицикліном, гентаміцином. При цьому штам Staphylococcus aureus Кунда чутливий лише до високих доз антибіотиків. Заявлений антибактеріальний засіб призначений для використання при лікуванні інфекційних захворювань і профілактики та лікування бактеріальних ускладнень вірусних інфекцій. 6 UA 108532 C2 Таблиця 1 Ступінь пригнічення росту (у %) штамів стафілокока 6-аміногексановою кислотою (6-АГК) різної концентрації Штами мікроорганізмів 6-АГК 50 мг/мл 1 Staphylococcus aureus ATCC 25923 Staphylococcus aureus 2781 Staphylococcus aureus Кунда 2 40 18 44,5 6-АГК 25 мг/мл 3 27 14,5 37 6-АГК 12,5мг/мл 4 13,5 14,5 29,5 Таблиця 2 Ступінь пригнічення росту (у %) штамів певних мікроорганізмів 6-аміногексановою кислотою (6АГК) різної концентрації Штами мікроорганізмів 1 Enterococcus fecalis ATCC 29212 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Esherihia coli ATCC 25922 *н/д - не досліджували 6-АГК 75 мг/мл 2 38,5 28 н/д* 6-АГК 50 мг/мл 3 23 32,5 н/д* 6-АГК 40 мг/мл 4 н/и* 11 50 Продовження таблиці 2 5 Штами мікроорганізмів 6-АГК 30 мг/мл 6-АГК 25 мг/мл 6-АГК 20 мг/мл 1 Enterococcus fecalis ATCC 29212 н/д* Pseudomonas aeruginosa A TCC 27853 Esherihia coli ATCC 25922 5 6 8 8,5 9 н/д* 16 7 н/д* 6-АГК 12,5 мг/мл 8 н/д* 22 26,32 % 19 н/д* *н/д - не досліджували Таблиця 3 Ріст мікроорганізмів в присутності різних концентрацій 6-АГК і пеніциліну при окремому та спільному їх застосуванні (у % по відношенню до контролю) Концентрація 6-АГК 6-АГК 50 мг/мл 6-АГК 25 мг/мл 6-АГК 12,5 мг/мл Концентр. пеніциліну 1 2 3 4 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus AТСС 25923 0,05 мкг/мл 11 14 14 0,025 мкг/мл 14 14 14 0,0125 мкг/мл 14 14 14 0,0062 мкг/мл 25 33,5 36 Контроль 6-АГК 55,5 61 75 Концентрація 6-АГК 6-АГК 50 мг/мл 6-АГК 25 мг/мл 6-АГК 12,5 мг/мл Концентр. пеніциліну 0,006 мкг/мл 20 20 20 0,003 мкг/мл 44 60 64 0,0015 мкг/мл 60 76 84 Контроль 6-АГК 68 84 88 7 Контроль пеніциліну 5 14 16,5 19,5 36 100 Контроль пеніциліну 24 64 80 100 UA 108532 C2 Штам мікроорганізму - Staphylococcus аureus 2781 0,01 мкг/мл 76 72,5 0,005 мкг/мл 62 69 0,0025 мкг/мл 65,5 72,5 Контроль 6-АГК 72,5 76 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus Кунда 15 мкг/мл 11 11 10 мкг/мл 33,5 37 5 мкг/мл 41 55,5 Контроль 6-АГК 55,5 63 76 69 72,5 79 69 76 76 100 15 29,5 59 70,5 15 33,5 78 100 Таблиця 4 Ріст мікроорганізмів в присутності різних концентрацій 6-АГК і стрептоміцину при окремому і спільному їх застосуванні (у % по відношенню до контролю) Концентрація 6-АГК 50 6-АГК 12,5 6-АГК 6-АГК 25 мг/мл мг/мл мг/мл Концентр. стрептоміцину 1 2 3 4 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus ATCC 25923 0,25 мкг/мл 70 72,5 67,5 0,125 мкг/мл 60 65 62,5 0,06 мкг/мл 60 65 60 Контроль 6-АГК 57,5 70 75 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus 2781 0,5 мкг/мл 8,5 42 46 0,25 мкг/мл 8,5 33,5 50 0,125 мкг/мл 8,5 29 62,5 Контроль 6-АГК 8,5 37,5 67 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus Кунда 400 мкг/мл 67 78 83,5 200 мкг/мл 94,5 117 122 100 мкг/мл 83,5 122 133,5 Контроль 6-АГК 100 94 89 Контроль стрептоміцину 5 70 77,5 95 100 50 79 92 100 67 100 111 100 Таблиця 5 Ріст мікроорганізмів в присутності різних концентрацій 6-АГК та канаміцину при окремому та спільному їх застосуванні (у % по відношенню до контролю) Концентрація 6-АГК 6-АГК 50 мг/мл 6-АГК 25 мг/мл Концентр. канаміцину 1 2 3 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus ATCC 25923 0,12 мкг/мл 46 50 0,06 мкг/мл 77 77 0,03 мкг/мл 71 73 Контроль 6-АГК 64,5 62,5 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus 2781 0,4 мкг/мл 8,5 25 0,2 мкг/мл 8,5 37,5 0,1 мкг/мл 8,5 41,5 Контроль 6-АГК 8,5 37,5 8 6-АГК 12,5 мг/мл Контроль канаміцину 4 5 58,5 79 83,5 83,5 52 73 93,5 100 33,5 50 62,5 67 42 71 100 100 UA 108532 C2 Таблиця 6 Ріст мікроорганізмів в присутності різних концентрацій 6-АГК та рифампіцину при окремому і спільному їх застосуванні (у % по відношенню до контролю) Концентрація 6-АГК 6-АГК 50 мг/мл 6-АГК 25 мг/мл Концентр. рифампіцину 1 2 3 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus AТСС 25923 0,002 мкг/мл 62 69 0,001 мкг/мл 65,5 72,5 0,0005 мкг/мл 65,5 69 Контроль 6-АГК 76 76 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus 2781 0,0015 мкг/мл 4 8,5 0,001 мкг/мл 4 21 0,0005 мкг/мл 8,5 25 Контроль 6-АГК 8,5 37,5 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus Кунда 20 мкг/мл 39 50 10 мкг/мл 55,5 72 5 мкг/мл 72,2 83,5 Контроль 6-АГК 100 94,5 6-АГК 12,5 мг/мл Контроль рифампіцину 4 5 79 83 83 83 83 89,5 89,5 100 25 29 46 66,5 54 75 83,5 100 33,5 83,5 94,5 89 44,5 67 83,5 100 Таблиця 7 Ріст мікроорганізмів в присутності різних концентрацій 6-АГК та нітроміцину при окремому та спільному їх застосуванні (у % по відношенню до контролю) Концентрація 6-АГК 6-АГК 50 мг/мл 6-АГК 25 мг/мл Концентр. нітроміцину 1 2 3 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus ATCC 25923 0,025 мкг/мл 20 20 0,0125 мкг/мл 20 24 0,0062 мкг/мл 56 60 Контроль 6-АГК 68 84 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus 2781 0,04 мкг/мл 14 14 0,02 мкг/мл 14 28,5 0,01 мкг/мл 53,5 61 Контроль 6-АГК 82 86 6-АГК 12,5 мг/мл Контроль нітроміцину 4 5 20 44 88 88 20 48 76 100 14 39 64 86 14 35,5 96 100 Таблиця 8 Ріст мікроорганізмів в присутності різних концентрацій 6-АГК і лінкоміцину при окремому та спільному їх застосуванні (у % по відношенню до контролю) Концентрація 6-АГК 6-АГК 50 мг/мл 6-АГК 25 мг/мл Концентр. лінкоміцину 1 2 3 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus ATCC 25923 0,025 мкг/мл 12 26,5 0,125 мкг/мл 20,5 35 0,0625мкг/мл 29 41 9 6-АГК 12,5 мг/мл Контроль лінкоміцину 4 5 38 50 47 38 50 59 UA 108532 C2 Контроль 6-АГК 50 67,5 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus 2781 0,15мкг/мл 18,5 18,5 0,075мкг/мл 15 18,5 0,038 мкг/мл 37 44,5 Контроль 6-АГК 78 85 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus Кунда 3000мкг/мл 28 28 1500мкг/мл 55,5 72 Контроль 6-АГК 100 94,5 88 100 15 15 52 89 15 22 63 100 33,5 78 89 44,5 67 100 Таблиця 9 Ріст мікроорганізмів в присутності різних концентрацій 6-АГК та амікацину при окремому та спільному їх застосуванні (у % по відношенню до контролю) Концентрація Контроль 6-АГК 6-АГК 50 мг/мл 6-АГК 25 мг/мл 6-АГК 12,5 мг/мл амікацину Концентр. амікацину 1 2 3 4 5 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus ATCC 25923 0,5 мкг/мл 0 0 0 8,5 0,25 мкг/мл 0 17 21 4 0,125 мкг/мл 29 54 62,5 37,5 Контроль 6-АГК 79 87,5 83,5 100 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus 2781 0,2 мкг/мл 7,5 22 29,5 22 0,1 мкг/мл 52 59 63 48 0,05 мкг/мл 63 63 67 67 Контроль 6-АГК 70 74 78 100 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus Кунда 10 мкг/мл 44,5 67 67 70 7,5 мкг/мл 52 75 81,5 89 5 мкг/мл 70 85 89 96 Контроль 6-АГК 55,5 63 70 100 Таблиця 10 Ріст мікроорганізмів в присутності різних концентрацій 6-АГК і доксицикліну при окремому та спільному їх застосуванні (у % по відношенню до контролю) Концентрація 6-АГК 6-АГК 50 мг/мл 6-АГК 25 мг/мл 6-АГК 12,5 мг/мл Контроль доксицикліну Концентр. доксицикліну 1 2 3 4 5 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus ATCC 25923 0,05 мкг/мл 44 50 53 68 0,025 мкг/мл 38 56 56 73,5 0,0125 мкг/мл 44 59 67,5 100 Контроль 6-АГК 50 67,5 88 100 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus 2781 0,1 мкг/мл 10 10 10 10 0,075 мкг/мл 10 10 10 20 0,05 мкг/мл 10 10 15 50 Контроль 6-АГК 10 20 55 100 Штам мікроорганізму - Staphylococcus aureus Кунда 15 мкг/мл 18,5 18,5 18,5 18,5 10 UA 108532 C2 10 мкг/мл 5 мкг/мл Контроль 6-АГК 29 37 55,5 25 41 63 37 55,5 70 41 67 100 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 1. Антибактеріальний засіб, що являє собою 6-аміногексанову кислоту формули: 5 10 15 20 H2N COOH . 2. Антибактеріальний засіб, що містить 12500-50000 мкг/мл 6-аміногексанової кислоти і антибіотик, вибраний з пеніциліну, стрептоміцину, канаміцину, рифампіцину, нітроміцину, лінкоміцину, амікацину або доксицикліну. 3. Антибактеріальний засіб за п. 2, який відрізняється тим, що пеніцилін він містить в кількості 0,0015-15,0 мкг/мл. 4. Антибактеріальний засіб за п. 2, який відрізняється тим, що стрептоміцин він містить в кількості 0,06-400,0 мкг/мл. 5. Антибактеріальний засіб за п. 2, який відрізняється тим, що канаміцин він містить в кількості 0,03-0,4 мкг/мл. 6. Антибактеріальний засіб за п. 2, який відрізняється тим, що рифампіцин він містить в кількості 0,0005-20,0 мкг/мл. 7. Антибактеріальний засіб за п. 2, який відрізняється тим, що нітроміцин він містить в кількості 0,0062-0,04 мкг/мл. 8. Антибактеріальний засіб за п. 2, який відрізняється тим, що лінкоміцин він містить в кількості 0,038-3000,0 мкг/мл. 9. Антибактеріальний засіб за п. 2, який відрізняється тим, що амікацин він містить в кількості 0,05-10,0 мкг/мл. 10. Антибактеріальний засіб за п. 2, який відрізняється тим, що доксициклін він містить в кількості 0,0125-10,0 мкг/мл. 25 Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 11