Моноклональне антитіло до c-mеt

Формула / Реферат | Подібні патенти | МПК / Мітки | Додаткова інформація | Код посилання

Номер патенту: 112157

Опубліковано: 10.08.2016

Автори: Схююрман Яніне, Парен Паул, Лабрейн Аран Франк, ван ден Брінк Едвард, ван де Вінкел Ян, де Гуей Барт, Нейсен Йост Й., Хут Рене М. А.

Є ще 133 сторінки.

Дивитися все сторінки або завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

1. Моноклональне антитіло, яке зв'язує людський c-Met, де антитіло конкурує за зв'язування з розчинним cMetECDHis з іммобілізованим антитілом, де зазначене іммобілізоване антитіло містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:33, і область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:37 (024), краще, якщо антитіло конкурує більше ніж на 50 %, як наприклад, більше ніж на 75 % із зазначеним іммобілізованим антитілом, при визначенні, методом, наведеним в прикладі 17.

2. Антитіло за п. 1, яке відрізняється тим, що не конкурує за зв'язування з розчинним cMetECDHis з антитілом, вибраним із групи, яка складається з:

a) іммобілізованого антитіла, яке містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:1, й яке містить область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:5 (005),

b) іммобілізованого антитіла, яке містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:17, й яке містить область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:21 (008); та

c) іммобілізованого антитіла, яке містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:49, й яке містить область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:53 (045),

бажано, щоб антитіло конкурувало менше ніж на 25 %, наприклад, менше ніж на 20 % із зазначеним іммобілізованим антитілом, при визначенні, методом, наведеним в прикладі 17.

3. Антитіло за п. 1, яке відрізняється тим, що зв'язується з тим же епітопом, що й антитіло, вибране із групи, яка складається з:

a) антитіла, яке містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:33, й яке містить область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:37 (024),

b) антитіла, яке містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:65, й яке містить область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:69 (061),

c) антитіла, яке містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:73, й яке містить область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:77 (062),

d) антитіла, яке містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:81, й яке містить область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:85 (064),

e) антитіла, яке містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:89, й яке містить область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:93 (068),

f) антитіла, яке містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:97, й яке містить область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:101 (069),

g) антитіла, яке містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:113, й яке містить область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:117 (098),

h) антитіла, яке містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:121, й яке містить область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:125 (101); і

і) антитіла, яке містить область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:129, й яке містить область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:133 (181).

4. Антитіло за кожним з пп. 1 або 3, яке відрізняється

тим, що включає область VH CDR3, що має послідовність, представлену в:

a) SEQ ID NO: 36 (024);

b) SEQ ID NO: 193, як наприклад область VH CDR3, представлена в SEQ ID NO:68, 76, 84 або 92 (061, 062, 064, 068);

с) SEQ ID NO:196, як наприклад область VH CDR3, представлена в SEQ ID NO:100 або 132 (069, 181);

d) SEQ ID NO:116 (098);

e) SEQ ID NO:201, як наприклад область VH CDR3, представлена в SEQ ID NO:124 (101).

5. Антитіло за будь-яким з пп. 1 або 3, яке включає:

а) область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NO:33, 185 і 36, і область VL, яка включає CDR1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:37, 39 і 206, як наприклад, антитіло, яке містить область VH, яка включає CDRl, 2 та 3-послідовності SEQ ID NО:34, 35 і 36, і область VL, яка включає CDR 1, 2 та 3-послідовності SEQ ID NО:38, 39 і 40, (024);

b) область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:191, 192 і 193, і область VL, яка включає CDR1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:78, 79 і 208, як наприклад, антитіло,

яке містить:

a) область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:66, 67 і 68, і область VL, яка включає CDRl, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:70, 71 і 72, (061);

b) область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО: 74, 75 і 76, і область VL, яка включає CDR1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО: 78, 79 і 80 (062);

c) область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:82, 83 і 84; і область VL, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО: 86, 87 і 88 (064); або

d) область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:90, 91 і 92, і область VL, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:94, 95 і 96 (068);

c) область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:194, 195 і 196, і область VL, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:209, 210 і 104, як наприклад, антитіло, яке містить:

а) область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО: 98, 99 і 100, і область VL, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО: 102, 103 і 104, (069); або

b) область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО: 130, 131 і 132, і область VL, яка включає CDR l, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:134, 135 і 136, (181);

d) область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:197, 198 і 116, і область VL, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:118, 119 і 211, як наприклад, антитіло, яке містить область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3 послідовності

SEQ ID NО: 114, 115 і 116, і область VL, яка включає і CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:118, 119 і 120, (098); або

е) область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:199, 200 і 201, і область VL, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО: 126, 212 і 128, як наприклад, антитіло, яке містить область VH, яка включає CDR 1, 2 і 3 послідовності SEQ ID NО:122, 123 і 124, і область VL, яка включає CDR 1, 2 і 3, послідовності SEQ ID NО:126, 127 і 128 (101).

6. Антитіло за п. 1, яке відрізняється тим, що містить:

a) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:33, і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:37 (024),

b) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:65, і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:69 (061),

c) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:73, і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:77 (062),

d) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:81, і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO: 85(064);

e) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:89, і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:93 (068);

f) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:97, і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO: 101 (069);

g) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:113, і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:117 (098);

h) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:121, і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:125 (101);

і) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:129, і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:133 (181);

j) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:159 і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:160 (078);

k) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:161 і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:162 (084);

l) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:163 і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:164 (063);

m) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:165 і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:166 (087);

n) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:137 і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:138 (066);

о) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:139 і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:140 (065);

р) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:141 і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:142 (082);

q) область VH, яка включає послідовність SEQ ID NO:143 і, бажано, область VL, яка включає послідовність SEQ ID NO:144 (089); або

r) варіант кожного із зазначених антитіл, де зазначений варіант, бажано, містить, щонайбільше, 1, 2 або 3 амінокислотних модифікації, краще, амінокислотні заміни, такі як консервативні амінокислотні заміни в зазначених послідовностях.

7. Антитіло за будь-яким з попередніх пп. 1-6, яке зв'язує домен SEMA з c-Met, бажано, щоб антитіло було здатним інгібувати зв'язування HGF з доменом SEMA з ІС50, що становить менше ніж 10 мкг/мл, як наприклад, менше ніж 2 мкг/мл, як описано в прикладі 9.

8. Антитіло за кожним з попередніх пунктів, яке відрізняється тим, що зв'язує клітини A431 з ЕС50, що становлять 10 нМ або менше, як наприклад, з ЕС50, яке дорівнює 2 нМ або менше, бажано, при визначенні, методом, наведеним в прикладі 13.

9. Антитіло за п. 8, яке відрізняється тим, що є бівалентним антитілом.

10. Антитіло за кожним з попередніх пунктів, яке відрізняється тим, що зв'язує клітини c-Met з константою афінності (KD), яка становить 20 нМ або менше, наприклад, 5 нМ або менше, бажано, при визначенні, методом, наведеним в прикладі 14.

11. Антитіло за будь-яким з попередніх пунктів, яке інгібує зв'язування HGF з позаклітинним доменом c-Met, бажано, яке інгібує зв'язування більше ніж на 40 %, як наприклад, більше ніж на 50 %, наприклад, більше ніж на 60 %, наприклад, більше ніж на 70 %, наприклад, більше ніж на 80 %, наприклад, більше ніж на 90 %, як визначено відповідно до прикладу 16.

12. Антитіло за будь-яким з попередніх пунктів, яке здатне інгібувати життєздатність клітин КР4, бажано, яке здатне інгібувати життєздатність більше ніж на 10 %, наприклад, більше ніж на 25 %, наприклад, більше ніж на 40 %, бажано, як описано в прикладі 19.

13. Антитіло за будь-яким з попередніх пунктів, яке є повнорозмірним антитілом, бажано, IgG 1-антитілом, зокрема, антитілом IgG1,к.

14. Антитіло за будь-яким з попередніх пунктів, яке є кон'югованим з іншим компонентом, таким як цитотоксичний компонент, радіоактивний ізотоп або лікарський засіб.

15. Антитіло за будь-яким з попередніх пунктів, яке є антитілом з дефіцитною єфекторною функцією, наприклад, стабілізованим людським антитілом IgG4, як наприклад, антитілом, де аргінін у положенні 409 у константній ділянці важкого ланцюга людського IgG4 замінюють на лізин, треонін, метіонін або лейцин, бажано, лізин, і/або де шарнірна область включає послідовність Cys-Pro-Pro-Cys.

16. Антитіло за будь-яким з попередніх пунктів, яке є моновалентним антитілом.

17. Антитіло за п. 16 яке відрізняється тим, що моновалентне антитіло містить:

(і) варіабельну область антитіла за кожним з пп. 1-7 або антигензв'язуючу частину зазначеної області, і

(іі) область СН імуноглобуліну або її фрагмент, який включає ділянки СН2 і СН3, де область СН або її фрагмент модифіковані таким чином, що область, яка відповідає шарнірній області, і, якщо імуноглобулін не належить до ізотипу IgG4, то й інші області СН, такі як СН3, не містять ніяких амінокислотних залишків, які були б здатні до утворення дисульфідних зв'язків з ідентичною областю СН або здатні до утворення інших ковалентних

або стабільних нековалентних зв'язків між важкими ланцюгами з ідентичною ділянкою СН у присутності поліклонального людського IgG.

18. Антитіло за кожним з попередніх пунктів, яке відрізняється тим, що воно модифіковане таким чином, що стає менш гнучким, наприклад, шляхом мутації шарнірної ділянки.

19. Антитіло за п. 18, яке відрізняється тим, що належить до підтипу IgG1, і в якому шарнірна область модифікована шляхом:

(і) видалення шарнірної області з послідовністю EPKSCDKTHTCPPCP і її заміни на шарнірну область IgG2 з послідовністю: ERKCCVECPPCP (IgG1 шарнір-IgG2);

(іі) делеції в положенні 220 так, що модифікована шарнірна область містить послідовність EPKSDKTHTCPPCP (IgG1 ΔС220);

(ііі) заміни цистеїну в положенні 220 на будь-яку іншу природну амінокислоту (X) так, що модифікована шарнірна область містить послідовність EPKSXDKTHTCPPCP (IgG1 С220Х);

(iv) видалення шарнірної області з послідовністю EPKSCDKTHTCPPCP (Unibody IgG1);

(v) видалення шарнірної області з послідовністю EPKSCDKTHTCPPCP і її заміни на шарнірну область із IgG3 з послідовністю

ELKTPLGDTTHTCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPEPKSCDTPPPCPRСР (IgG1 Шарнір-IgG3); або

(vi) заміни треоніну в положенні 223 на цистеїн і видалення лізину в положенні 222 і треоніну в положенні 225, так що модифікована шарнірна область містить послідовність EPKSCDCHCPPCP (IgG1 ТН7Δ6-9).

20. Антитіло за п. 19, в якому шарнірна область модифікована шляхом заміни цистеїну в положенні 220 на серин так, що модифікована шарнірна область містить послідовність EPKSSDKTHTCPPCP (IgGl C220S).

21. Антитіло за кожним з попередніх пунктів, яке відрізняється тим, що воно модифіковане зі зменшенням корового фукозилювання до менше 10 %, як наприклад, менше 5 %, визначеного за допомогою аніонообмінної хроматографії разом з імпульсним амперометричним детектуванням (HPAEC-PAD).

22. Антитіло за кожним з попередніх пунктів, яке відрізняється тим, що воно є біспецифічним антитілом, яке включає сайт зв'язування з c-Met, визначений за кожним з попередніх пп., та інший антигензв'язуючий сайт, який мас іншу специфічність, таку як специфічність зв'язування з людською ефекторною клітиною, людським рецептором Fc, В-клітинним рецептором або з не перекриваючим епітопом c-Met.

23. Нуклеотидна послідовність, яка кодує одну або кілька амінокислотних послідовностей, вибраних із групи, яка складається з SEQ ID NO:33, 37, 65, 69, 73, 77, 81, 85, 89, 93, 97, 101, 113, 117, 121, 125, 129, 133, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166.

24. Експресуючий вектор, який включає нуклеотидну послідовність за п. 23, який додатково кодує функціонально зв'язану константну область легкого ланцюга, константну область важкого ланцюга або обидва ланцюги антитіла, легкий й важкий.

25. Рекомбінантна еукаріотична або прокаріотична клітина-хазяїн, яка продукує антитіло, визначене за кожним з пп. 1-22.

26. Фармацевтична композиція, яка включає антитіло, визначене за кожним з пп. 1-22, і фармацевтично прийнятний носій.

27. Антитіло за кожним з пп. 1-22, яке відрізняється тим, що воно застосовується як лікарський засіб.

28. Антитіло за кожним з пп. 1-22, яке відрізняється тим, що воно застосовується при лікуванні раку, такого як HGF-залежний рак або HGF-незалежний рак.

29. Спосіб одержання антитіла за кожним з пп. 1-22, який включає стадії:

а) культивування клітини-хазяїна за п. 25, і

b) очищення антитіла з культурального середовища.

30. Спосіб виявлення наявності c-Met у зразку, який передбачає:

- контакт зразка з антитілом за кожним з пп. 1-22 за умов, які дають можливість утворення комплексу між антитілом і c-Met; і

- аналіз того, чи утворювався комплекс.

31. Набір для виявлення наявності c-Met у зразку, який включає:

- антитіло за кожним з пп. 1-22; і

- інструкції із застосування набору реактивів.

32. Антиідіотипове антитіло, проти антитіла за кожним з пп. 1-22.

Текст

Реферат: Винахід стосується моноклонального антитіла, яке зв'язує людський c-Met, також розкрита фармацевтична композиція, яка включає антитіло, а також терапевтичний й діагностичний способи застосування антитіла. UA 112157 C2 (12) UA 112157 C2 UA 112157 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Галузь техніки, до якої відноситься винахід Даний винахід відноситься до моноклональних антитіл проти людського c-Met, рецептора фактора росту гепатоцитів, і до застосування таких антитіл, конкретно до їх застосування для лікування злоякісних новоутворень. Попередній рівень техніки Білок c-Met є мембраноасоційованим рецептором-тирозинкіназою. Переважно одноланцюговий попередник посттрансляційно розщеплюється з одержанням зрілої форми гетеродимера c-Met, який складається з позаклітинного α-ланцюга (50 кДа) і більш довгого трансмембранного β-ланцюга (145 кДа), які зв'язані дисульфідним зв'язком (Birchmeier et al. 2003. Nat Rev Mol Cell Biol 4:915). Позаклітинна частина c-Met складається із трьох типів доменів. N-кінцевий домен SEMA утворюється із цілої α-субодиниці й частини β-субодиниці й має гомологію з білками семафоринів. Наступним за доменом SEMA йде цистеїн-збагачений домен, а далі 4 імуноглобуліно-(Ig)-подібних домени. Цитоплазматична частина містить навколомембранний кіназний домен і С-кінцевий хвіст, який є важливим для передачі сигналу в клітину. Єдиний відомий високо-афінний ліганд для c-Met, фактор росту гепатоцитів (HGF), експресується, головним чином, фібробластами за нормальних умов (Li and Tseng 1995. J Cell Physiol 163:61) і пухлинними клітинами (Ferracini et al. 1995. Oncogene 10:739). HGF (який також називають розсіюючим фактором: SF) синтезується у вигляді попередника, який протеолітично перетворюється на активний α/β гетеродимер. Виходячи із кристалічної структури фрагмента, який зв'язує рецептор, вважають, що HGF зв'язується з c-Met у вигляді димера (Chirgadze et al. 1999. Nat Struct Biol 6:72). α-Ланцюг HGF зв'язується в c-Met з високою афінністю з Ig-подібним доменом, тоді як β-ланцюг HGF зв'язується в c-Met з низькою афінністю з доменом SEMA (Basilico et al. 2008. J Biol Chem 283:21267). Остання взаємодія є відповідальною за димеризацію c-Met і активацію рецепторної тирозинкінази при зв'язуванні з активним гетеродимером HGF. Автофосфорилювання рецептора призводить у результаті до одержання унікального стикувального сайту для залучення ефекторів, з яких зв'язування Gab1 (1-й зв'язуючий агент, асоційований з 2-м білком, зв'язаним з рецептором фактора росту [Grb2]) є суттєвим для наступних етапів основних сигнальних шляхів c-Met (Comoglio et al. 2008. Nat Rev Drug Discov 7:504): • Шлях Ras-ERK1/2: проліферація. • Шлях Ras-Rac: інвазія, рухливість, епітеліально-мезенхімальний перехід. • Шлях PI3K-Akt: життєздатність. c-Met експресується на поверхні епітеліальних і ендотеліальних клітин багатьох органів у процесі ембріогенезу та у дорослому стані, включаючи печінку, підшлункову залозу, передміхурову залозу, нирки, м'язи й кістковий мозок. Активація c-Met відіграє істотну роль у так званій програмі "інвазивного росту", яка складається з ряду процесів, які включають проліферацію, рухливість, ангіогенез і захист від апоптозу (Boccaccio and Comoglio 2006. Nat Rev Cancer 6:637). Ці регульовані c-Met процеси йдуть за нормальних фізіологічних умов у процесі ембріонального розвитку, при репарації уражень печінки й серця, і в патологічних випадках у ході онкогенезу (Eder et al. 2009. Clin Cancer Res 15:2207). Недоречна передача сигналів від c-Met відбувається фактично у всіх типах твердих пухлин, таких як рак сечового міхура, рак грудей, рак шийки матки, колоректальний рак, рак шлунка, рак голови й шиї, рак печінки, рак легені, рак яєчників, рак підшлункової залози, рак нирок і рак щитовидної залози, а також у різних саркомах, гемопоетичних злоякісних новоутвореннях і в меланомах (Birchmeier et al. 2003. Nat Rev Mol Cell Biol 4:915; Comoglio et al. 2008. Nat Rev Drug Discov 7:504; Peruzzi and Bottaro 2006. Clin Cancer Res 12:3657). Основні механізми онкогенності c-Met, як правило, здійснюються трьома різними шляхами: • аутокринні петлі HGF/c-Met, • гіперекспресія c-Met або HGF, • мутації в послідовності, яка кодує рецептор c-Met, які активують кінази. Найбільш суттєвим є те, що мутації, які активують c-Met, були ідентифіковані в пацієнтів зі спадковим папілярним раком нирок (Schmidt et al. 1997. Nat Genet 16:68). Конститутивна активація c-Met спричиняє одному або кільком з поміж проліферативного, інвазивного, життєтвірного або ангіогенного фенотипів злоякісних новоутворень. Було показано, що сайленсинг гена c-Met, здатного до ендогенної експресії, у пухлинних клітинах у результаті призводить до припинення проліферації й росту пухлини і до регресії початку метастазування, а також до зменшення утворення нових метастаз (Corso et al. 2008. Oncogene 27:684). Оскільки c-Met сприяє багатьом станам розвитку злоякісних новоутворень, від початкового до прогресу до метастазування, c-Met і його ліганд HGF стали лідируючими кандидатами для спрямованої протипухлинної терапії (Comoglio et al. 2008. Nat Rev Drug Discov 7:504; Knudsen 1 UA 112157 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 and Vande Woude 2008. Curr Opin Genet Dev 18:87). Для досягнення даної мети вивчаються кілька стратегій: • Хибні рецептори: субобласті HGF або c-Met або молекулярні аналоги можуть діяти антагоністично як стехіометричні конкуренти шляхом блокування зв'язування ліганду або димеризації рецептора. Одним прикладом такої антагоністичної субобласті HGF є NK4 (Kringle Pharma). • Низькомолекулярні інгібітори тирозинкіназ (TKI): Трьома c-Met-специфічними TKI у різних стадіях клінічної оцінки є ARQ197 (Arqule), JNJ 38877605 (Johnson & Johnson) і PF-04217903 (Pfizer). • Моноклональні антитіла, які зв'язують HGF, такі як AMG102, рилотумумаб (англ. rilotumumab) (Amgen), HuL2G7 (Takeda), і AV-299 (Schering). • Моноклональні антитіла, які зв'язують c-Met, описані в WO2005016382, WO2006015371, WO2007090807, WO2007126799 WO2009007427, WO2009142738 і в роботі van der Horst et al. (van der Horst et al. 2009. Neoplasoa 11:355). MetМab (Genentech) є гуманізованими моновалентними (одно-плечовими) OA-5D5 антитілами, які зв'язують позаклітинний домен cMet, запобігаючи в такий спосіб зв'язуванню HGF і наступній активації рецептора (Jin et al. 2008. Cancer Res 68:4360). У мишачих моделях ксенотрансплантатів було виявлено, що обробка MetМab інгібує пухлинний ріст HGF-керованої ортотопічної гліобластоми й підшкірних панкреатичних пухлин (Jin et al. 2008. Cancer Res 68:4360; Martens et al. 2006. Clin Cancer Res 12:6144). Антитіло h224G11 (Pierre Fabre) (Corvaia and Boute 2009. Abstract 835 AACR 100th Annual Meeting) є гуманізованим двовалентним IgG 1-антитілом проти c-Met. Протипухлинний ефект даного антитіла спостерігали в мишей (Goetsch et al. 2009. Abstract 2792 AACR 100th Annual Meeting). Антитіло CE-355621 (Pfizer) є людським IgG2, який блокує зв'язування ліганду шляхом зв'язування з позаклітинним доменом c-Met та інгібує HGF-залежний ріст у моделях пухлинних ксенотрансплантатів (Tseng et al. 2008. J Nucl Med 49:129). У висновку слід зазначити, що деякі продукти проти c-Met уже вивчалися, але дотепер не існує жодного продукту проти c-Met, схваленого для терапевтичного застосування. Існує необхідність одержання ефективних і безпечних продуктів для лікування важких, асоційованих з c-Met захворювань, таких як злоякісні новоутворення. Сутність винаходу Метою даного винаходу було запропонувати нові високоспецифічні та ефективні моноклональні антитіла проти c-Met для медичного застосування. Антитіла запропоновані винаходом демонструють характеристики зв'язування з c-Met, які відрізняються від характеристик антитіл, описаних у даній галузі. У кращих втіленнях, антитіла запропоновані винаходом мають високу афінність у відношенні до людського c-Met, є антагоністичними й мають кращий профіль фармакокінетики при застосуванні для пацієнтів-людей. Короткий опис креслень Фігура 1. Порівняння послідовностей варіабельних ділянок важких ланцюгів антитіл HuМab. Виходячи із цих послідовностей можуть бути визначені консенсусні послідовності CDR. Ці консенсусні послідовності представлені в Таблиці 4. Фігура 2. Порівняння послідовностей варіабельних ділянок легких ланцюгів антитіл HuМab. Виходячи із цих послідовностей можуть бути визначені консенсусні послідовності CDR. Ці консенсусні послідовності представлені в Таблиці 4. Фігура 3. Криві зв'язування одновалентних і двовалентних форм антитіл проти c-Met із клітинами A431, які експресують c-Met. Представлені дані це MFI одного репрезентативного експерименту. Оскільки IgG1-024 і Uni-068 не демонструють насиченого зв'язування із клітинами A431, то не можливо і розрахувати точне значення EC50. Фігура 4. Зв'язування антитіл з c-Met, який експресується на епітеліальних клітинах макакирезус. Представлені дані - це MFI одного експерименту. Фігура 5. Інгібування зв'язування HGF з позаклітинним доменом рецептора c-Met, індуковане антитілом проти c-Met. Представлені дані - це один репрезентативний експеримент. Фігура 6. Криві інгібування різними антитілами проти с-Met зв'язування HGF з cМetSEMA_567His8, отримані за допомогою TR-FRET. Представлені дані - це середнє MFI ± стандартна похибка трьох незалежних експериментів. Фігура 7. Процентне інгібування життєздатних клітин KP4 після обробки антитілом проти cMet у порівнянні з необробленими клітинами (0 %). Представлені дані - це процентне інгібування життєздатних клітин двох незалежних експериментів ± стандартне відхилення. IgG11016-022 є єдиним позитивним результатом в одному експерименті. Фігура 8. Ефективність антитіл проти c-Met при інгібуванні росту пухлин в моделі ксенотрансплантату KP4 у мишах SCID. Мишей обробляли за допомогою 400 цд антитіла на 9 2 UA 112157 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 день після тижневої підтримуючої дози 200 цд. Представлені середні розміри пухлини на групу обробки. Фігура 9. Ефективність антитіл, які зв'язують c-Met, для інгібування росту пухлин в моделі ксенотрансплантата KP4 у мишах SCID. Мишей обробляли 400 мкг антитіла на 9 день, з наступною підтримуючою дозою 200 мкг раз на тиждень. Вплив обробки на частоту пухлин, від 3 часу. Представлений відсоток мишей без пухлини (розміри пухлин

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Monoclonal antibodies against c-met

Автори англійською

Neijssen, Joost, J., de Goeij, Bart, van den Brink, Edward, Labrijn, Aran, Frank, Hoet, Rene, M., A., Schuurman, Janine, Parren, Paul, van de Winkel, Jan

Автори російською

Нейсен Йост Й., де Гуей Барт, ван ден Бринк Эдвард, Лабрейн Аран Франк, Хут Рене М., А., Схююрман Янине, Парэн Паул, ван де Винкел Ян

МПК / Мітки

МПК: C07K 16/28, A61K 39/395, A61P 35/00

Мітки: моноклональне, антитіло, c-met

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/141-112157-monoklonalne-antitilo-do-c-met.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Моноклональне антитіло до c-mеt</a>

Подібні патенти