Засіб імуномодулюючої, протипухлинної, противірусної та знеболюючої дії

о) ЦА с, _ 26641 » УКРАЇНА С1 (5D* А 61 К 33/28, 33/36 ДЕРЖАВНЕ ПАТЕНТНЕ ВІДОМСТВО ОПИС ДО ПАТЕНТУ НА ВИНАХІД (54) ЗАСІБ ІМУНОМОДУЛЮЮЧОІ, ПРОТИПУХЛИННОЇ, ПРОТИВІРУСНОЇ ТА ЗНЕБОЛЮЮЧОЇ ДІЇ (21) 95104431 (22) 15.06.94 (24) 11.10.99 (31) 94004903, 94004904 (32) 18.02.94, 18.02.94 (33) RU, RU (86) PCT/RU94/00128 (15.06.94) (46) 11.10.99. Бюл. № 6 (56) Патент США № 4104373, кл. А 61 К 35/78, А 61 К 31/22, А 61 К 47/00. (72) Воробйова Тамара Васільєвна (RU) (73) Воробйова Тамара Васільєвна (RU) (57) 1. Средство иммуномодулирующего, противоопухолевого, противовирусного и обезболивающего действия, включающее действующее вещество и разбавитель, о тл и ч а ю щ е е с я тем, что в качестве действующего вещества оно содержит дихлорид ртути или арсенит калия, или арсенат натрия при следующем соотношении исходных компонентов, мас.%: Дихлорид ртути или арсенит калия, или арсенат натрия 0,001-1,5 Разбавитель До 100 2. Средство по п.1, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что в качестве разбавителя содержит натуральное виноградное белое вино с содержанием сахара 3 4 мас.% или молочную сыворотку с содержанием сахара 3-4 мас.%: 3. Средство по п.1 или 2, о т л и ч аю щ е е с я тем, что оно содержит, мас.%: Дихлорид ртути Натуральное виноградное белое вино 0,010,1 с содержанием сахара 3-4 мас.% или молочная сыворотка с содержанием сахара 3-4 мас.%. До 100 4. Средство по п.1 или 2, о т л и ч аю щ е е с я тем, что оно содержит, мас.%: Арсенат натрия или арсенит калия 0,05-0,15 Натуральное виноградное белое виноо с содержанием сахара 3-4 мас.% или молочная сыворотка с содержанием сахара 3-4 мас.% До 100 5. Средство по п.1 или 2, о т л и ч аю щ е е с я тем, что оно содержит, мас.%: Дихлорид ртути 0,3-1,5 Натуральное виноградное белое вино с содержанием сахара 3-4 мас.% или молочная сыворотка с содержанием сахара 3-4 мас.% До 100 6. Средство по п. 1, о т л и ч а ю щ ее с я тем, что оно содержит в качестве действующего вещества дихлорид ртути, а в качестве разбавителя содержит смесь свиного жира, меда натурального и этилового спирта при следующем соотношении компонентов, мас.%: Дихлорид ртути 0,03-0,13 Свиной жир 30,7-37,3 Мед натуральный 30,7-37,3 Этиловый спирт До 100 С > О 26641 Изобретение относится к медицине, а точнее к новому средству иммуномодулирующего действия и восстанавливающего нарушенное функционирование системы регуляции размножения клеток ткани. Широко известны различные лекарственные препараты, моделирующие процессы иммунитета. Так, например, способностью стимулировать иммунные реакции организма (а также лейкопоэз) обладают производные нуклеиновой кислоты; способностью специфически активировать иммунокомпетентные клетки (Т- и В-лимфоциты) обладают препараты пирогенал, продигиозан и другие. Известно терапевтическое средство, используемое против застоев в лимфатических системах, содержащее действующее вещество и разбавитель. В качестве действующего вещества средство содержит алкапоидсодержащие и/или гликозидсодержащие экстракты трав и соединения мышьяка - арсенит калия в количестве от 0,03 до 0,35 мас.%; в качестве разбавителя воду. Это средство выбрано в качестве прототипа. К недостаткам его следует отнести относительно высокую токсичность и недостаточную эффективность. В основу изобретения положена задача создания нового средства иммуномодулирующего действия и восстанавливающего нарушенное функционирование системы регуляции размножения клеток ткани, обладающее высокой эффективностью, низкой токсичностью, широким спектром действия. Задача решена тем, что заявляемое средство иммуномодулирующего действия и восстанавливающего нарушенное функционирование системы регуляции размножения клеток ткани, включающее действующее вещество и разбавитель, согласно изобретению, в качестве действующего вещества содержит дихлорид ртути или арсенит калия, или арсенат натрия, при следующем соотношении исходных компонентов, мас.%: Дихлорид ртути или арсенит калия, или арсенат натрия 0,01-1,5 Разбавитель До 100 Заявляемое средство в качестве разбавителя предпочтительно содержит натуральное виноградное белое вино с содержанием сахара 3-4 мас.% или молочную сыворотку с 3-4 мас.% содержанием сахара. Содержащиеся в натуральном виноградном белом вине в небольшом коли 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 честве обратимо коагулированные растительные белки с высвободившимися сульфгидрильными группами - SH, а также обратимо коагулированные белки в составе молочной сыворотки обратимо блокируются ионами ртути или мышьяка, вследствие чего устраняется токсичность заявляемого средства. Сахара, содержащиеся в количестве 34 мас.% в указанных вине и молочной сыворотке, способствуют поддержанию кислой среды путем брожения, улучшают вкусовые качества лекарственного средства. Заявляемое средство, согласно изобретению, предпочтительно используется в виде следующих вариантов. Заявляемое средство для внутреннего и наружного применения состоит из следующих компонентов, мас.%: Дихлорид ртути 0,01-0,1 Натуральное виноградное белое вино с содержанием 3-4 мас.% сахара или молочная сыворотка с содержанием сахара 3-4 мас.% До 100 Заявляемое средство для внутреннего и наружного применения, содержащее в качестве разбавителя смесь свиного жира, меда натурального и этилового спирта, состоит из следующих компонентов, мас.%: Дихлорид ртути 0,03-0,13 Свиной жир 30,7-37,3 Мед натуральный 30,7-37,3 Этиловый спирт До 100 Заявляемое средство для внутреннего применения, предпочтительно используемое для лечения острых и хронических лейкозов, состоит из следующих компонентов, мас.%: Арсенат натрия или арсенит калия 0,05-0,15 Натуральное виноградное белое вино с содержанием сахара 3-4 мас.% или молочная сыворотка с содержанием сахара 3-4 мас.% До 100 Применение заявляемого средства является предпочтительным для лечения острых и хронических лейкозов, так как основным депо накопления мышьяка является кровь. Заявляемое средство для наружного применения состоит из следующих компонентов, мас.%: Дихлорид ртути 0,3-1,5 ' 26641 Натуральное виноградное белое вино с содержанием сахара 3-4 мас.% или молочная сыворотка с содержанием сахара 3-4 мас.% До 100 Заявляемое средство не токсично, благодаря свойству ионов ртути и мышьяка обратимо блокировать сульфгидрильные группы, к которым они имеют самое высокое сродство из всех реакционных групп. Общим свойством для всех организмов и всех опухолей является размножение (деление), приказ о делении передают специальные молекулы - ростовые факторы через другие белковые молекулы - рецепторы. Специфическим свойством структуры молекул всех факторов роста и иммуноглобулинов, цитокинов, рецепторов лимфоцитов и эритроцитов и некоторых гормонов (инсулин, вазопрессин и др.) является наличие дисульфидных связей, которые обладают способностью гидролизоваться (разрываться) в присутствии ионов ртути, независимо от наличия других функциональных групп. Специфическим свойством строения молекул всех цитоплазмотических рецепторов и более двух десятков ферментов (включая протеолитические) является наличие связывающих участков свободных сульфгидрильных групп. Обратимым блокированием сульфгидрильных групп рецепторов факторов роста, рецепторов стероидных гормонов и адренергических рецепторов ионами ртути или мышьяка приостанавливается рост опухоли. Дублирующая противоопухолевая защита обеспечивается за счет разрыва дисульфидных связей факторов роста, иммуноглобулинов, рецепторов лимфоцитов и эритроцитов в присутствии ионов ртути или мышьяка. Явление разрыва дисульфидных связей иммуноглобулинов, некоторых гормонов (инсулин, вазопрессин), цитокинов, рецепторов лимфоцитов и эритроцитов обеспечивает свойство препарата как иммуномодулятора. Обратимое блокирование препаратом сульфгидрильных групп ферментов и рецепторов обеспечивает организму защиту от радиационного воздействия. Исходя из того, что на поверхности опухолевых клеток рецепторов факторов роста в 20-100 раз больше, чем на поверхности других клеток, а функциональ 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 6 ная группировка рецепторов факторов роста - сульфгидрильная группа, к которой ионы ртути имеют самое высокое сродство, то воздействие на опухолевые клетки в 10-100 раз сильнее. Действующее вещество заявляемого средства - дихлорид ртути при растворении не проводит электрического тока (неионизировано), а неионизированные молекулы легко проникают через мембраны, в том числе и в мозг, а проникнув, попадают в цитоплазму с более низкой рН, в то же время все патогенные клетки, включая опухолевые, имеют аномально низкие величины рН, и вследствие повышения кислотности именно патогенные клетки поглощают ртуть, то есть обеспечивается избирательное воздействие не патогенные клетки. Заявляемое средство, благодаря описанному механизму действия обладает способностью восстанавливать нарушенное функционирование системы регуляции размножения клеток ткани. Заявляє мое средство обладает иммуномодулирующим действием. Под влиянием заявляемого средства происходит перестройка внутренних регуляторных механизмом, объединяющих иммунные клетки в единую систему и нормализация иммунологических параметров. Лучший вариант осуществления изобретения. Заявляемое средство, согласно изобретению, содержит в качестве действующего вещества дихлорид ртути или арсенит калия, или арсенат натрия в количестве 0,01-1,5 мас.% в сочетании с фармацевтически пригодным разбавителем. При этом для внутреннего и наружного применения заявляемое средство предпочтительно содержит дихлорид ртути в количестве 0,01-0,1 мас.% при использовании в качестве разбавителя натурального виноградного белого вина с содержанием сахара 3-4 мас.% или молочной сыворотки с содержанием сахара 3-4 мас.%; или содержит дихлорид ртути в количестве 0,03-0,13 мас.% при использовании в качестве разбавителя смеси свиного жира, меда натурального и этилового спирта. Указанные количества дихлорида ртути в заявляемом средстве подобраны экспериментально и обеспечивают эффективность действия заявляемого препарата. Снижение содержания дихлорида ртути ниже указанного предела или повышение выше заявленного предела нецелесообразно, так как не обеспечивает достижения желаемого результата. 26641 Целесообразно, для лечения острых и хронических лейкозов использовать заявляемое средство для внутреннего применения, содержащее в качестве действующего вещества арсенат натрия или арсенит калия в количестве 0,05-0,15 мас.% в сочетании с разбавителем - натуральным виноградным белым вином с содержанием сахара 3-4 мас.% или молочной сывороткой с содержанием 3-4 мас.%. Указанные количества действующих веществ также подобраны экспериментально и обеспечивают эффективность действия заявляемого средства. Заявляемое средство стимулирует многие функ-. ции организма, ослабляет окислительные процессы и повышает усвоение азота и фосфора, ограничивая расщепление белков, улучшает обмен в клетках и тканях, оказывая таким образом общетонизирующее действие, улучшает общее состояние, увеличивает процент гемоглобина и количество эритроцитов в крови. Заявляемое средство для наружного применения содержит действующее вещество - дихлорид ртути в количестве 0,3-1,5 мас.% в сочетании с разбавителем - натуральным виноградным белым вином с содержанием сахара 3-4 мас.% или молочной сывороткой с содержанием сахара 3-4 мас.%. В качестве натурального виноградного белого вина можно использовать, например, одно" из следующих марок вин "Муцвани", "Совиньон" и другие. В технологию изготовления таких вин входит процесс нагревания до 60°С, необходимый для прекращения сбраживания части Сахаров. При указанной температуре происходит обратимая коагуляция растительных белков, в небольшом количестве входящих в состав вина, в результате чего освобождаются сульфгидрильные группы белков SH, которые обратимо блокируются ионами ртути или мышьяка, вследствие этого устраняется токсичность раствора. В состав молочной сыворотки также входят обратимо коагулированные белки с высвободившимися сульфгидрильными группами - SH, которые обратимо блокируются ионами ртути или ионами мышьяка, вследствие чего токсичность раствора снижается до нуля. Заявляемое средство может быть рекомендовано для лечения следующих заболеваний: все виды доброкачественных опухолей; все виды злокачественных опухолей; иммунодефициты различного происхождения; ревматизм; ревматоидные артриты; полиартриты; бронхиальная астма; 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 волчанка системная красная; язвы желудка; трофические язвы; герпес; псориаз; кишечная инфекция; нейтродермиты и другие заболевания. В зависимости от формы, стадии заболевания, переносимости препаратов и других индивидуальных особенностей организма, выбор и длительность применения заявляемого средства может меняться, в то же время следует придерживаться определенных принципов лечения. Так например, следует придерживаться диетических ограничений с исключением таких продуктов питания, как мясо, рыба, яйца, поскольку при лечении заявляемым средством блокируютс і сульфгидрильные группы в системе протеолитических ферментов, то есть снижается возможность организма усваивать белковую пищу. Чаще лечение начинают с приема заявляемого средства внутрь - первые три дня по 5 мл (или 5 г) 3 раза в день, далее по 10 мл (или 10 г) х 3 раза в день в течение месяца. Параллельно приему препарата внутрь или независимо от него осуществляют местное воздействие заявляемым средством в виде примочек, тампонов, спринцеваний и клизм. В зависимости от локализации процесса выбор зоны необходимого воздействия различен на копчик, паховые лимфоузлы, подмышечную область, позвоночник, суставы, локализованные образования, покровныз или костно-суставные ткани. Так, например, при лечении заболеваний молочной железы или женской половой сферы на фоне приема заявляемого средства внутрь можно использовать местные примочки, а также влагалищные тампоны и клизмы. При лечении поражений желудка на фоне приема заявляемого средства внутрь, примочки на подмышечные области и копчик или клизмы. При поражении предстательной железы - заявляемое средство внутрь и в виде примочек на копчик, паховые и подмышечные лимфоузлы. При миелолейкозе - заявляемое средство внутрь и в виде примочек на копчик, грудную полость, паховые и подмышечные лимфоузлы, позвоночник, суставы. При поражении мягких тканей и остеогенных саркомах - заявляемое средство внутрь и в виде примочек на копчик, паховые и подмышечные области, позвоночник, область поражения. Заявляемое средство с повышенной концентрацией ртути применяется при лечении злокачественных заболеваний легких, при наличии гноя и крови в мокроте, при лечении поражений в запущенных случаях. 26641 Заявляемое средство с действующим веществом - дихлорид ртути хорошо зарекомендовало себя при лечении кожных заболеваний, таких как псориаз и нейродермит. Это связано в основном, по-видимому, с иммуномодулирующими свойствами заявляемого средства, которое при наружном применении проявляет также противовоспалительное и репаративное свойство. Применение заявляемого средства с действующим веществом - дихлорид ртути при лечении трофических язв нижних конечностей показало положительные результаты при назначении средства внутрь по общей схеме и наружно в виде примочек. Курс лечения составляет 1 месяц. При необходимости после месячного перерыва курс лечения может быть повторен. Заявляемое средство приготавливают по известной методике путем смешения исходных компонентов. Заявляемое средство было изучено в эксперименте на животных и испытано в клиниках на людях. Изучение острой токсичности заявляемого средства было проведено на 192 здоровых беспородных крысах-самцах массой 180-220 г, находившихся в стандартных условиях питания и-содержания. За 12 ч до испытаний и во время их проведения животные находились в помещении вивария с постоянной температурой и вентиляцией. За 2 ч до начала испытаний животным прекращали дачу воды и корма. Определение параметра острой токсичности (ЛД50) каждой из лекарственных форм проводили методом Литчфилда и Уилкоксона при пероральном пути введения, соответствующем назначению, и внутрибрюшинном, обеспечивающем достижение высокого токсического эффекта. Путем отбора и взвешивания были выделены 10 групп крыс для введения заявляемого препарата (в виде вариантов жидкая форма на вине и на молочной сыворотке). Число животных в каждой группе равнялось 6. При внутрибрюшинном пути введения соответствующим группам крыс вводили 5; 4; 3; 2 и 1 мл заявляемого средства, что соответствовало дозам действующего вещества - 1,65; 1,32; 0,99; 0,66 и 0,33 мг/кг. Перорально же вводили 2, 1,5; 1 и 0,5 мл, что соответствовало дозам действующего вещества - 0,66; 0,495; 0,33 и 0,165 мг/кг. В контроле животным вводили соответствующие растворители - натуральное виноградное белое вино и молочную сыворотку. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 10 Наблюдения за животными проводили в течение 14 дней после введения заявляемого средства. При этом оценивали общее состояние животных, их поведение и массу тела. После введения указанных доз заявляемого препарата у крыс наблюдали снижение двигательной активности, сонливость. Эти явления были более выражены при внутрибрюшинном введении. Однако случаев смертности животных в первые несколько дней после введения не отмечали. Кроме того, при пероральном введении заявляемого средства (в виде вариантов на вине и молочной сыворотке) случаев смертности не наблюдали и в дальнейшем в течение всего срока наблюдения. При этом различий в массе тела, общем состоянии и поведении живот ных в сравнении с контролем выявлено не было. Аналогичные результаты были получены и при внутрибрюшинном введении заявляемого средства (вариант на вине^ случаев смертности не наблюдали и различий с контролем в поведении и величинах массы тела обнаружено не было. Отсутствие случаев смертности при пероральном введении и при внутрибрюшинном введении заявляемого препарата (жидкая форма на вине), несмотря на введение максимально допустимых их объемов, не позволило рассчитать основной параметр острой TOKCW НОСТИ Л Д , ЧТО указывает на низкую токсичность э^чх форм при указанных путях введения и используемых дозах. При внутрибрюшинном введении заявляемого средства (жидкая форма на молочной сыворотке) были выявлены случаи смертности крыс на 5, 6, 7, 8 и 9-е сутки после введения. При этому животных перед гибелью отмечали вялость, паралич задних конечностей, а также обнаружили нарушения шерстного покрова. У выживших крыс эти явления были мало выражены и к 14 суткам по поведению и показателю массы тела они не отличались от контроля. Анализ частоты смертности животных, проведенный методом Литчфилда и Уилкоксона, позволил рассчитать ЛД Г і 0 . для заявляемого средства (вариант на молочной сыворотке) при их внутрибрюшинном введении. Величина ЛД 50 у крыс при внутрибрюшинном введении заявляемого сродства (жидкая форма на молочной сыворотке) составляет 5,8 (1,98-8,8) мг/кг веса животного 5О 11 26641 Выли проведены исследования противоопухолевой активности заявляемого средства на опухолевых перевиваемых культурах. Исследование проводили на перевиваемых лейкоцитарных опухолевых культурах линии L-41. Культивирование культур проводили по общепринятому методу. Плотность посева клеток составляла - 1 105 клеток в 1 мл среды. В качестве питательной среды использовали в равных соотношениях среду 199 и среду Игла с добавлением 10% бычьей сыворотки и антибиотиков: 100 ед. пенициллина и 50 ед. стрептомицина на 1 мл среды. Заявляемое средство и отдельно разбавитель - вино "Эрети" и действующее вещество - дихлорид ртути разводили на безбелковой питательной среде и вносили их в различных концентрациях в 3-4 культуры для контакта с клеточным монослоем. Так как действующим веществом в заявляемом средстве является дихлорид ртути, то мы в предварительном опыте для сравнения установили, что ЕД^ дихлорида ртути, тормозящая рост опухолевых культур L-41 составляет менее 10 мкг/мл. На вторые сутки после постановки опыта производили микроскопическую оценку действия препарата по 4-х балльной системе и количественное определение содержания белка культур по методу Лоури в мсдификации Опма и Игла. Критерий цитостатической активности препарата - процент торможения роста культур по угнетению синтеза белка. Данные опыта представлены в табл. 1. Согласно существующим стандартным методам отбора противоопухолевых препаратов - препарат является активным если его ЕД^ меньше или равны 100 мкг/мл. Исследования показали, что ЕД^, заявляемого средства составляет -10 мкг/мл, что в 10 раз превышает стандарт и свидетельствует о его выраженном цитостатическом действии на опухолевых культурах. Из приведенных данных видно, что заявляемое средство оказывает выраженное тормозящее действие на опухолевые культуры в концентрации 9,9 мкг/мл, что и составляет его ЕД^, дихлорида ртути составляет примерно 8 мкг/мл. Вино в ИР = 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Вес лимфоузла при 12 исследованных концентрациях оказывает на культуры незначительное стимулирующее воздействие в пределах 4,2-8,8%. Было проведено изучение иммунофармакологических свойств заявляемого средства. Проведено исследование влияния заявляемого средства на массу основных органов иммунной системы. Опыты проводили на мышах линий СВА, С57В1 и гибридах первого поколения этих линий. Заявляемое средство (в виде двух вариантов: разбавитель - вино и разбавитель - молочная сыворотка) вводили мышам линий С57В1 и г ибридам первого поколения линий СВА х С57В1 в течение 10 дн. Через сутки после последнего введения заявляемого средства животных взвешивали, забивали, извлекали селезенки и определяли их массу. Результаты взвешивания и подсчета массовых коэффициентов представлены в табл. 2. Данные этих опытов показывают, что заявляемое средство не влияет на массу селезенки и массовый коэффициент этого органа при введении препаратов в течение 10 дн. В следующих экспериментах заявляемое средство вводили в течение 30 дн и затем проводили взвешивание тимусов (в опытах использовали мышей линии СВА). Из результатов, представленных в табл. 3, следует, что на вес тимуса препарат в данных экспериментальных условиях не влиял. Было исследовано влияние заявляемого средства на реакцию "трансплантат против хозяина". Эти исследования проводили по следующей методике. Мышам - гибридам первого поколения линий СВА и С57В1 в подушечку одной задней лапки подкожно вводили клетки лимфатических узлов мышей линии С57В1, в контрлатеральную лапу вводили то же количество сингенных клеток лимфоузлов гибридов. На восьмые сутки после перевивки клеток лимфатических узлов доноров определяли массу подколенных лимфатическиз узлов обеих лап реципиентов. Реакцию оценивали по индексу реакции (V1P), рассчитанному по формуле: введении клеток С57В1 Вес лимфоузла при введении клеток гибридов Заявляемое средство (в двух варианние 10 и 20 дн донорам и реципиентам. тах: разбавитель - молочная сыворотка Результаты этих исследований предои разбавитель - вино) вводилось в течетавлены в табл. 4 и 5. 13 26641 Как следует из данных, представленных в табл. 4 и 5, заявляемое средство оказывает мощное влияние на клеточный иммунитет в реакции "трансплантат про-* тив хозяина". Своеобразие действия заявляемого средства заключается в том, что эффект достигается как при введении препарата реципиентам, так и донорам. Во всех случаях происходит увеличение массы лимфатических узлов при пересадке клеток той же линии мышей. Эти "контрольные" лимфоузлы достигают размеров "опытных", т. е. тех, реакцию в которых осуществляют лимфоидные клетки родительской линии против клеток генотипа гидридов. Масса этих "опытных" лимфоузлов практически одинакова во всех группах животных, включая мышей, не получавших заявляемое средство. Следовательно, заявляемое средство при введении в течение 10 дн как донорам, так и реципиентам не влияет на массу тех лимфатических узлов, в которых и протекает реакция лимфоцитов доноров против клеток чужеродного генотипа, но усиливает реакцию лимфоцитов против клеток собственного генотипа. При таком характере действия пре-парата индекс реакции лишь незначительно превышает 1 в опытных группах. При увеличении курса введения заявляемого средства донорам до 20 дн возрастает масса обоих лимфоузлов ("опытных и "контрольных") и становится выше, •чем в группе животных, не получавшей заявляемого средства (табл.4). Однако, между собой эти лимфоузлы отличаются незначительно, и индекс реакции равен 1,24. Исследовано влияние заявляемого средства на количество розеткообразую-» щих клеток в селезенках мышей. Популяция розеткообразующих клеток является смешанной, но практика показывает, что их определение является одним из наиболее чувствительных тестов при исследовании иммунотропного действия самых разнообразных химических соединений. Влияние заявляемого средства на число розеткообразующих клеток в селезенках определяли у мышей оппозитных линий, иммунизированных эритроцитами барана. Курсы введения заявляемого средства различной длительности начинали проводить до иммунизации животных тестантигеном и продолжали еще пять дней после иммунизации. На седьмые сутки после антигенного стимула мышей забивали и в селезенках определяли количество клеток, связывающих эритроциты барана. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 14 Полученные данные свидетельствуют, что заявляемое средство в терапевтической дозе после 10 и 20 дн перорального введения мышам уменьшает количество антигенсвязывающих клеток в селезенках мышей как высоко, так и низкоо*&ечающей линий. При этом в случае низкоотвечающей линии животных снижение интенсивности иммунного ответа более заметно. Влияние заявляемого средства на число антителообразующих клеток в селезенках мышей проводили, исследуя действие средства на число гемолизинпродуцирующих клеток в этом органе животных, иммунизированных эритроцитами барана. Курсы введения заявляемого средства различной длительности начинали проводить до иммунизации животных тестантигеном и продолжали еще три дня после иммунизации. Препарат вводили животным перорально в дозе, эквивалентной терапевтической, ежедневно. На 5 сутки после иммунизации мышей эритроцитами барана животных забивали и в селезенках определяли количество клеток, продуцирующих антитела. Полученные данные показали, что заявляемое средство уменьшает количество антителообразующих клеток в селезенках мышей как низко, так И'высокоотвечающих линий при иммунизации животных эритроцитами барана в качестве тестантигена. При этом степе; «ь снижения числа гемолизинпродуцирующих клеток зависит от длительности курса введения препарата. При введении заявляемого средства в течение 20 дн это снижение становится статистически значимых у животных обеих линий. Влияние заявляемого средства на количество циркулирующих в крови антител проводили через 10 и 20 дн после введения препарата и через 7 дн после иммунизации мышей эритроцитами барана. Курсы введения заявляемого средства различной длительности начинали проводить до иммунизации животных тест-антигеном и продолжали еще пять дней после иммунизации. Полученные результаты показали, что ни у высоко- ни у низкоотвечающих животных заявляемое средство не влияло на эту реакцию гуморального иммунитета при исследовании показателей интенсивности иммунного ответа после 10 и 20 дн перорального введения препарата в терапевтической дозе. Таким образом, количество антител, наиболее интегральный показатель ин 26641 тенсивности иммуяного ответа, при введении заявляемого средства сохраняется в пределах нормального (контрольного) уровня. Исследовалось также влияние заявляемого средства на длительность гексеналового сна как показателя функционального состояния монооксигеназной системы организма. Опыты проводили на беспородных мышах-самцах, массой 20-22. Животным вводили средство ежедневно перорально в течение одной и трех недель; контрольным группам вводили тот же объем физиологического раствора. Тест-метаболит (гексенал) вводили внутрибрюшинно в дозе 70 мг/кг и оценивали длительность наркотического состояния мышей. Полученные результаты показали, что введение заявляемого средства в терапевтической дозе в течение одной или трех недель не влияет на длительность метаболизма гексенала, что свидетельствует об отсутствии существенных реакций со стороны микросомальной системы ферментов организма при действии этого препарата. Таким образом, на основании проведенного исследования некоторых иммунофармакологических свойств заявляемого средства выявлено значительное иммунотропное действие его в отношении реакции клеточного иммунитета - реакции "трансплантат против хозяина". Под влиянием заявляемого средства происходила стимуляция лимфоцитов как в отношений реакций против чужеродных клеток (при введении препарата в течение 3 недель), так и в отношении клеток того же генотипа, но находящихся в другой особи (при введении препарата 10 и 20 дн). Эти результаты были получены как при введении заявляемого средства реципиентам, так и при введении их донорам. В условиях экспериментов препарат ингибировал иммунное розеткооб^иование и снижал количество антителообразующих клеток в селезенках мышей. Однако интегральные показали гуморального иммунитета - титры циркулирующих в крови антител, - оставались в опытных группах на уровне этих характеристик у контрольных животных. В терапевтических дозах заявляемое средство не оказывало влияние на функциональную активность монооксигеназной ферментной системы, вместе с иммунной являющейся частью единой системы организма, обеспечивающей его ответ на внешние воздействия. Это также свиде 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 16 тельствует о мягком иммунотропном действии заявляемого средства. Изучение способности заявляемого средства индуцировать генные мутации на стандартных тест-штаммах S.typhimurium ТА 100, ТА 98, ТА 1537 методом Эймса, показало, что заявляемое средство не обладает мутагенной активностью. Было проведено клиническое изучение иммунотропных свойств заявляемого средства. Изучение проводилось на добровольцах (78 пациентов): с различными опухолевыми заболеваниями - 56 человек; ревматоидным артритом (11-111 рентгенологические стадии и 11-111 степень активности) 22 человекг. Были исследованы следующие показатели: общее количество лимфоцитов, число В-лимфоцитов и Т-лимфоцитов, соотношение Т-хелперов и Т-супрессоров, содержание иммуноглобулинов С, М, А и Е и циркулирующих иммунных комплексов, функциональная активность Т-лимфоцитов (Т-хелперов и Т-супрессоров) и В-лимфоцитов в реакциях бласттрансформации с различными митогенами, фагоцитарная активность и цитохимическая характеристика ферментативной активности иммунокомпетентных клеток. Лечение заявляемым средством проводилось в соответствии с применяемой схемой. Иммунологические обследования осуществляли перед началом лечения, в процессе лечения: после первых двух недель применения препарата и после одного курса (четыре недели с начала лечения), - и спустя 2-3 мес после окончания приема препарата. В некоторых случаях определение иммунологических показателей проводили-при повторных курсах введения средства и спустя 6 месяцев после начала приема заявляемого средства. Динамика течения основного заболевания при лечении заявляемым средством в данных исследованиях становилась положительной после приема препарата более двух недель. Субъективно онкологические больные после курсового приема заявляемого средства отмечали значительное улучшение общего самочувствия. Объективно были отмечены случаи уменьшения размеров опухоли и лимфоузлов, восстановление проходимости кишечника. После проведения двух-трех курсов лечения заявляемым препаратов больные положительно оценивали самочувствие, сохраняли трудоспособность; некоторую слабость связывали с необходимостью соблюдения диеты. 17 26641 У большинства больных ревматоидным артритом врачи отметили положительную динамику суставного синдрома в виде уменьшения скованности после одного курса терапии препаратом. В этих условиях 5 было обнаружено исчезновение фибромы наружных половых органов у одной из больных. При обследовании больных до лечения заявляемым средством отмечается мо- 10 заичный характер изменений иммунологического статуса как у больных различными заболеваниями, так и у больных одной группы. При этом величины исследованных параметров иммунитета не вы- 15 ходили за рамки средне-физиологических показателей у практически здоровых людей. Однако, у значительного числа онкологических больных было нарушено соотношение субпопуляций Т-хелперов: Т-суп- •20 рессоров. Единственным показателем, однонаправленно измененным у всех пациентов, является количество циркулирующих иммунных комплексов, которые увеличены и 25 у онкологических больных, и у пациентов, страдающих ревматоидным артритом. Через две недели, после начала приема заявляемого средства при исследовании показателей иммунитета у пациентов 30 была обнаружена значительная реакция иммунной системы. У большинства больных обеих групп наблюдалось снижение общего числа лимфоцитов, снижение Т- и В-лимфоцитов, 35 снижение Т-хелперов и заметное снижение Т-супрессоров, изменение иммуноглобулинов различных классов носило разнонаправленный характер у разных пациентов, у онкологических больных отме- 40 чено увеличение фагоцитарной активности моноцитов и лейкоцитов. Количество же циркулирующих иммунных комплексов уменьшалось и v онкологических больных и у больных ревматоидным артритом. 45 Важно отметить, что у онкологических больных при нарушении соотношения Тхелперов:Т-супрессоров при снижении числа Т-лимфоцитов, уменьшение численности их субпопуляций происходило в разной степе- 50 ни. За счет этого достигалось восстановление соотношения Т-хелперов:Т-супрессоров, хотя и на низком функциональном уровне. Изменение содержания В-лимфоцитов и особенно уровня иммуноглобулинов раз- 55 личных классов носили нерегулярный характер. Данлые изучения пролиферативной активности лимфоцитов в реакциях бласттрансформации подтверждают вывод о зна 18 чительной реакции иммунной системы при введении заявляемого средства и о существенных индивидуальных особенностях этой реакции после двух первых недель приема препарата. По окончании первого курса лечения среди изменений показателей иммунитета обращает на себя внимание заметное уменьшение циркулирующих иммунных комплексов. При всем разнонаправленном характере колебаний остальных иммунологических параметров необходимо отметить тот факт, что они не выходят за границы физиологической нормы. Аналогичная картина сохраняется при исследовании иммунологических показателей у паииентов через 2-3 месяца после окончания первого курса терапии перед второй серией приема препарата. В течение повторного курса индивидуальные изменения иммунологических параметров у больных носят тот же характер, что и при первом курсе терапии, но не имеют единого вектора направленности у всех больных. В процессе исследований пытались объединить больных в группы по типам изменения, связать эти изменения с группами крови, однако, четких закономерностей выявить не удалось. Через 6 месяцев после приема 2-3 курсов лечения заявляемым средством отмечена положительная динамика изучаемых показателей. При анализе всех представленных к рассмотрению* результатов клинических иммунотропных свойств заявляемого средства, обращает на себя внимание в высшей степени индивидуальный характер реакции иммунной системы каждого больного. В целом реакция протекает в две фазы. Первая - характеризуется ненаправленными изменениями иммунологических показателей. Очевидно, под влиянием заявляемого средства происходит перестройка внутренних регуляторных механизмов, объединяющих иммунные клетки в единую систему. Вторая фаза - фаза нормализации иммунологических параметров. Общими здесь являются два эффекта: уменьшение содержания циркулирующих иммунных комплексов; нормализация соотношения субпопуляций Т-хелперов:Тсупрессоров. Оба наблюдаемых явления имеют положительное прогностическое значение, так как свидетельствуют о нормализации состояния иммунной системы. Уменьшение циркулирующих иммунных комплексов наблюдается у всех больных (онкологических и страдающих ревматоидным артритом), нормализация соотноше 19 26641 ния субпопуляций лимфоцитов характерна для большинства пациентов данных групп. Заявляемое средство было испытано в клиниках более чем на 250 больных. Препарат прошел испытания при лече- 5 нии следующих заболеваний: злокачественные и доброкачественные опухоли, ревматизм, ревматоидный артрит, бронхиальная астма, нейродермиты и другие заболевания. 10 Преимущественными онкологическими заболеваниями являлись: заболевания женских органов (рак молочной железы, рак тела и шейки матки, рак яичников), заболевания кроветворной системы (лимфогра- 15 нулематоз, лимфолейкоз, острый лимфобластный лейкоз, миеломная болезнь), заболевания внутренних органов и тканей (рак прямой кишки, желудка, печени, носоглотки, кожи и др.); из опухолей доброкачест- 20 венной природы, такие как аденома предстательной железы, фибромиома матки, папиллома, киста, мастопатия молочных желез, лолип прямой кишки и другие. Возрастной контингент больных 20- 25 60 лет; сроки лечения заявляемым средством составили от 0,5 до 2-х лет и более. Заявляемое средство применялось по вышеописанной методике: внутрь - первые три дня по 5 мл 3 раза в день, далее 30 10 мл х 3 раза в день в течение месяца. Параллельно приему препарата внутрь проводилось местное наружное воздействие заявляемым средством в зависимости от локализации процесса заболевания. Пре- 35 парат наружно применялся в виде примочек, тампонов, спринцеваний, клизм. Пре-. парат наносился в зоны необходимого воздействия - на копчик, паховые лимфоузлы, подмышечную область, позвоночник, 40 суставы, локализованные образования, покровные или костно-суставные ткани. Анализ результатов лечения заявляемым средством, в том числе онкологических больных IV, III, II стадий заболевания 45 (со сроками лечения: более 0,5 года, более 1 года, более 2-х лет), а также длительная поддерживающая терапия заявляемым средством выявили положительный эффект лечения, как для не леченных ра- 50 нее, так и леченных ранее больных. Наблюдалась полная регрессия опухоли (злокачественной) в зависимости от вида заболевания, стадии, сроков лечения у больных до 34,3%; у больных с 55 опухолями доброкачественной природы до 80,8%. У ряда больных наблюдалась стабилизация процесса, уменьшение размера опухоли. У всех больных отмечалось улучшение общего состояния, 20 Для лучшего понимания настоящего изобретения приводятся следующие конкретные примеры приготовления заявляемого средства и его клинических испытаний. П р и м е р 1. Заявляемое средство следующего состава: Дихлорид ртути, г 0,01 Натуральное виноградное белое вино с содержанием сахара 4 мас.%, мл 100 Заявляемое средство готовят следующим образом. Дихлорид ртути растворяют в виноградном вине в указанных количествах в обычных условиях (при комнатной температуре). Получают прозрачный раствор, светло-желтого цвета (рН=3,1). Полученный препарат хранят в посуде из темногс стекла при температуре не выше 15°С в темном месте. При хранении возможно выпадение осадка соединений винной кислоты, поэтому перед употреблением растеор необходима взбалтывать. Препарат пригоден для внутреннего и наружного применения. П р и м е р 2. Заявляемое средство следующего состава: Дихлорид ртути, г 0,06 Натуральное виноградное белое вино с содер- * • жанием сахара 3 мас.%., мл 100 Приготавливают средство аналогично примеру 1. Получают прозрачный раствор, желтоватого цвета, рН = 3,3. Препарат пригоден для внутреннего и наружного применения. П р и м е р 3. Заявляемое средство следующего состава: Дихлорид ртути, г 0,1 Молочная сыворотка с 4 мас.%-ным содержанием сахара, мл 100 Приготавливают средство аналогично примеру 1. Получают прозрачный раствор, светло-кремового цвета. Препарат пригоден для внутреннего и наружного применения. П р и м е р 4. Заявляемое средство следующего состава: Дихлорид ртути, г 0,3 Натуральное виноградное белое вино с содержанием сахара 3 мас.%, мл 100 Приготавливают средство аналогично примеру 1. Получают прозрачный раствор, светло-желтого цвета, рН=3,2. 21 26641 Препарат пригоден для наружного применения. П р и м е р 5. Заявляемое средство следующего состава: Дихлорид ртути 1,5 5 Молочная сыворотка с 3 мас.%-ным содержанием сахара, мл 100 Приготавливают средство аналогично примеру 1. Получают прозрачный раствор 10 светло-кремового цвета. Препарат пригоден для наружного применения. П р и м е р 6. Заявляемое средство следующего состава, г 15 Дихлорид ртути 0,25 Свиной жир 230 Мед натуральный 240 Спирт 96° До 750 Приготавливают средство следующим -20 образом. Дихлорид ртути растворяют в этиловом спирте. Предварительно размягченный свиной жир смешивают с медом натуральным в указанных количествах. За- 25 тем раствор дихлорида ртути суммы в этиловом спирте небольшими порциями, тщательно растирая, вносят в смесь жира с медом. Получают заявляемое средство в виде кремообразного продукта, светло- 30 желтого цвета. Препарат пригоден для внутреннего и наружного применения. П р и м е р 7. Заявляемое средство следующего состава: 35 Арсенит калия, г 0,05 Натуральное виноградное белое вино с содержанием сахара 4 мас.%, мл. До 100 40 Заявляемое средство готовят путем растворения арсенита калия в натуральном виноградном белом вине в указанных количествах. Получают прозрачный раствор, светло-желтого цвета, рН = 3,2. 45 Препарат пригоден для внутреннего применения. П р и м е р 8. Заявляемое средство следующего состава: Арсенат натрия, г 0,15 50 Молочная сыворотка с содержанием сахара 3 мас.%, мл ' До 100 Заявляемое средство готовят путем растворения арсената натрия в молочной 55 сыворотке с содержанием сахара 3 мас.% в указанных количествах. Получают прозрачный раствор, светло-желтого цвета. Препарат пригоден для внутреннего применения. 22 П р и м е р 9. Были проведены клинические испытания заявляемого средства на 99 онкологических больных, из них: 67 больных имели злокачественные опухоли, 32 больных имели опухоли доброкачественной природы. Из группы 67 больных 32 прошли курс предварительного лечения (операция, полихимиотерапия, гамма-терапия), 35 - не подвергались ранее лечению. Большинство онкологических больных: 21 человек имели IV-ю стадию заболевания, 18 больных - Ш-ю; Н-я стадия заболевания отмечена у 6 больных. Для 22 больных стадия заболевания не определена. Контингент онкобольных по возрасту: от 40 до 60 лет - 39 человек. От 20 до 40 лет - 7 человек, старше 60 лет - 14 человек. По полу: 11 мужчин, 56 - женщин. Сроки лечения больных заявляемым средством составляли: более 0,5 года 28 больных (41,8%); более 1 года 3 больных (4,5%); более 2-х лет 19 больных (28,3%). Длительная поддерживающая терапия заявляемым средством проводилась у 17 больных (25,4%). Преимущественными заболеваниями являлись: злокачественные опухоли (рак молочной железы, рак тела, шейки матки, рак яичников, прямой кишки, желудка, печени, носоглотки, кожи; заболевания кроветворной системы - лимфогранулематоз, лимфолейкоз, острый лимфобластный лейкоз, миеломная болезнь), из опухолей доброкачественной природы (аденома предстательной железы), фибромиома матки, папиллома, киста, мастопатия молочных желез, полипы прямой кишки). Для онкологических больных (ранее не подвергавшихся лечению) ~ 35 человек (100%) получены следующие результаты. Полная регрессия опухоли (сняты с учета у онколога), практически здоровы 12 человек (34,3%). Заболевания: рак молочной железы III—IV ст., фиброзно-кистозная мастопатия (злокачественная форма), рак матки, рак яичников, остеогенная саркома, меланома, лимфолейкоз). Стабилизация процесса наблюдалась у 12 больных (34,3%). (Заболевания: рак молочной железы IH-IV ст., аденокарцинома молочных желез, аденокарцинома простаты, IV ст. (метастазы в легкие), рак прямой кишки, IV ст., рак носоглотки (метастазы в мозг, позвоночник), бластома нижней части пищевода (злокачественная опухоль, III ст.,). 23 26641 24 Уменьшение размера опухоли, улучУменьшение размера опухоли у 9 большение общего состояния у 2-х больных ных (25,8%) (Заболевание: рак молочной (7,6%). железы). Состояние удовлетворительное у 1 -го Улучшение общего состояния у 1-го больного (3,8). Результаты лечения больбольного (2,8%). 5 ных (ранее леченных) - 6 человек (100%). Дальнейшее прогрессирование процесПрактически здоров - 1 больной са имело место у 1-го больного (2,8%). (16,7%). (Заболевание: мастопатия). Для онкологических больных, леченСостояние хорошее у 3 больных (49,9%). ных ранее 32 человека (100%) результаты Без рецидивов у 1 больного (16,7%). лечения следующие. 10 Ремиссия у 1 больного (16,7%). Положительный эффект лечения больПолная регрессия опухоли. Сняты с ных с заболеваниями не онкологического учета у онколога. Практически здоровы характера (опухоли доброкачественной 6 больных (18,8%). (Заболевания: рак молочной железы HHV ст., рак яичников, IV 15 природы) составляет - 81%. * П р и м е р 10. Были проведены ст., объемное образование правой доли клинические испытания заявляемого печени (злокачественная форма), базалиосредства на 157 больных, из которых 138 ма ушной раковины). (87,9%) - онкологические больные (опуСтабилизация процесса наблюдалась у 12 больных (37,6%). (Заболевания: рак 20 холи злокачественной природы); 19 (12,1%) г имели опухоли доброкачественной примолочной железы бластома молочной жероды. Из 138 онкологических больных лезы, IV ст. (злокачественная форма), рак 94 (68,1%) прошли курс предварительношейки матки, рак глотки, 11 ст., рак пра1 го лечения (операция, полихимиотерапия, вой доли печени, рак прямой кишки, ротоглотки, желудка, поджелудочной желе- 25 гамма-терапия), 44 больных (31S8%) не подвергались такому лечению. Онкологизы, хронический лимфолейкоз III ст., остческие заболевания (опухоли злокачестрый лимфобластный лейкоз). венной природы) включают: Уменьшение размера опухоли у 2-х I - заболевания женских органов (рак больных (6,2%). (Заболевание: рак момолочной железы, рак тела и рак шейки лочной железы). 30 матки, рак яичников) - 72 больных; Данных по рецидиву не обнаружено у Я - рак кроветворной системы (лимфог4 больных (12,5%). ранулематоз, лимфобластная лимфома, лейУлучшение общего состояния у 4-х козы: хронический лимфобластный лейкоз, больных (12,5%). острый миелоидный лейкоз) - 14 больных; Ремиссия у ?-х больных (6,2%). 35 III - онкологические заболевания внутСостояние удовлетворительное у 1 ренних органов и тканей (рак желудка, больного (3,1%). рак легкого, рак прямой кишки, рак печеДальнейшее прогрессирование процесни, рак мочевого пузыря, рак предстаса имело место у 1-го больного (3,1%). тельной железы и другие) - 52 больных. Положительный эффект лечения он- 40 В результате лечения больных заявкологических больных (ранее леченых и ляемым средством были получены сленелеченых) заявляемым средством сосдующие результаты. тавляет 79%). Для группы онкологических больных Отсутствие эффекта у одного больно(опухоли злокачественной природы), И, III, IV го (2,9%). 45 стадий - 138 человек (100%) установлено: Результаты лечения опухолей доброполная регрессия опухоли у 5 болькачественной природы (ранее не леченных (3,6%); ных больных) - 26 человек (100%): уменьшение размера опухоли у 32 Полная регрессия опухоли, сняты с больных (23,5); учета у онколога, практически здоровы - 50 стабилизация роста злокачественной 21 больной (80,8%). (Заболевания: фибопухоли у 61 больных (44,2); роаденома молочных желез, мастопатия, улучшение общего состояния у 28 фиброма, фибромиома матки, полип прябольных (20,3%); мой кишки, полип шейки матки, поликисдальнейшее прогрессирование процестоз, гнойная опухоль яичников, лимфоа- 55 са у 12 больных (8,7%). денит и другие). Для группы больных с опухолями добСтабилизация процесса наблюдалась рокачественной природы - 19 человек у 2-х больных (7,7%). (Заболевания: киста (100%) установлено: молочной железы, внутрипротоковая парегрессия опухоли у 8 больных пиллома молочной железы). (42,1%); 25 26641 26 стабилизация процесса у 5 больных фицитов различного происхождения, для (26,2%); лечения всех видов злокачественных и добуменьшение размеров опухоли у 4 рокачественных опухолей, ревматизма, больных (21,1%); ревматоидного артрита, полиартрита, бронулучшение общего состояния у 2 боль- 5 хиальной астмы, волчанки системной красных (10,5%). ной, язвы желудка, герпеса, трофических Заявляемое средство находит примеязв, псориаза, кишечных инфекций, нейнение в медицине для лечения иммуноде- * родермитов и других заболеваний. Т а б л и ц а 1 Сравнительное изучение биологической активности заявляемого средства, разбавителя (натуральное виноградное белое вино с содержанием сахара 4 % мае.) и действующего вещества - дихлорида ртути на перевиваемой опухолевой культуре линии L-41 Препарат Концент- Процентрация ное дихлори- содержада ртути, ние мкг/мл спирта Содержание белка в мкг/мл Процент торможения или стимуляции Достоверность (Р) роста культур, % Контроль 294,0±10,4 Заявляемое средство 1,1 0.03 318,0±0 7,5 стимуляции 3.3 0,1 238.3±9,1 18,9 торможения >0,05 Заявляемое средство 4,8 0,15 224,0±0 23,8 торможения >0,05 Заявляемое средство 6,6 0,2 214,0±0 27.2 торможения >0,05 Заявляемое средство 9,9 0,3 144,0±0 51,0 торможения >0.05 Вино белое натуральное виноградное — 0,03 316.0±25.1 6,9 стимуляции Вино белое натуральное виноградное — 0.1 318,0±0 7,5 стимуляции Заявляемое средство Вино белое натуральное виноградное * • 0.15 318,0±0 7,5 стимуляции I 27 28 26641 Продолжение табл. 1 Препарат Концент- Процентное рация дихлори- содержание да ртути, спирта мкг/мл Содержание белка в мкг/мл Процент торможения или Достоверстимуляции ность (Р) роста культур, % Вино белое натуральное виноградное 0,2 322,5±5.6 8,8 стимуляции Вино белое натуральное виноградное 0,3 307,0±13,8 4,2 стимуляции Дихлорид ртути 1,0 390,3±2,6 1,? торможения 0,05 Дихлорид ртути 3.3 279,0±27.3 5,1 торможения >0,05 Дихлорид ртути 5,0 256.0±5.2 12,9 торможения >0,05 Дихлорид ртути 8Д г 154,0±5.0 47,6 торможения >0,05 л Т а б л и ц а Массы селезенок при действии заявляемого средства * а № п/п 1 2 3 Препарат Линии С57В1 Контроль Заявляемое средство (разбавитель - молочная сыворотка) Заявляемое средство (разбавитель вино) Количество животных в группе ДостоверМасса Массовый селезен- ность (Р) коэффициотличий от CH.IT ки мг «7Г11 контроля 2 Достоверность (р) отличий от контроля 23 86 9 90 >0,05 0.56 >0.05 10 87 >0,05 0,51 >0,05 0,55 29 ЗО 26641 Продолжение табл. 2 № п/п 1 2 3 Количество животных в группе Препарат Гибрид первого поколения линии СВАхС57В1 Контроль Заявляемое средство (разбавительмолочная сыворотка) Заявляемое средство (разбавитель-вино) Масса селезенки, мг ДостоверМассовый ность (Р) коэффициотличий от ент контроля 25 114 1.1 112 >0.05 12 114 >0,05 Достоверность (Р) отличий от контроля 0.46 — 0,48 >0,05 0,46 >0,05 Т а б л и ц а 3 Масса тимуса и селезенки при действии заявляемого средства (разбавитель - вино) Масса тимуса Количество животных в группе мг 8 174 7 Препарат 170 Контроль Заявляемое средство Р отличий от контроля >0,05 Т а б л и ц а 4 Влияние заявляемого средства (разбавитель - молочная сыворотка) на массу подколенных лимфоузлов в реакции "трансплантат против хозяина" Схема взедения заявляемого средства, дни Массы лимфоузлов, мг реципиентам донорам Число животных в группе Контроль 14 14 10 20 8 9 10 2.8 7.2 11.5 9.2 7.7 13.3 3,35 1.10 1.24 10 10 11 9 10 10 3.3 ' 5.2 6.0 5,2 7.1 6.6 7.0 6,6 2.4 1.3 1.3 1.4 Контроль 14 14 контрольной лапки опытной лапки Индекс реакции 31 32 26641 Т а б л и ц а 5 Влияние заявляемого средства (разбавитель яино) на массу подколенных лимфоузлов в реакции трансплантат против хозяина Схема введения заявляемого средства, дни реципиентам донорам Число животных в группе 10 10 11 9 10 9 Контроль 14 14 Массы лимфоузлов, мг контрольной лапки 3,3 6.7 4,6 5,1 Упорядник Техред М. Келемеш Замовлення 520 ОПЫТНОЙ Индекс реакции лапки 7,1 8,2 6,2 6,3 2,4 1,3 1.4 1.2 Тираж Коректор М.Самборська Підписне Державне патентне відомство України, 254655, ГСП, Київ-53, Львівська пл., 8 Відкрите акціонерне товариство "Патент", м. Ужгород, вуя. Гагаріна, 101