Протимікробний засіб

Изобретение относится к химии биологически активных веществ, а именно к 2,6-динитро-4-бензоилфенил пи передину, обладающему противомикробной активностью, изученной на таких тест-культурах, как Staphylococcus aureus P-209, Streptococcus faecalis, Bacillus subtilis, которое может найти применение в медицинской практике и фармакологии. Замещенный пиперидин является основой многих лекарственных препаратов: ана-лептиков (белягрид); ганглиоблокаторов (пирилен); производные пиперидина входят в состав диуретиков (клопамид); средств, действующих на центральную нервную систему (лобелин, анабазин, мидокалм); фрагментарно содержат пиперидин нейролептики(перициазин,тиоридазин, га-лоперидол, пилюзид, пенфлюридол); (анги-стаминные препараты (кетотифен); антиангинальные средства (дипиридамол); наркотические (лидол, промедол, фентанил) и ненаркотические анальгетики (либексин). Однако, противомикробная активность 2,6-динитро-4-бензоилфенилпиперидина формулы 1 не описана. В качестве аналога по структуре и биодействию выбран 2-бенэоил-4,6-динитрофе-нил-морфолин формулы II [1]. Однако данное соединение имеет довольно высокие значения минимальной подавляющей концентрации и величины острой токсичности (LD5O=200,6 мг/кг). Задачей изобретения является поиск новых малотоксичных соединений, которые могли бы быть использованы как бактерицидные средства с большей эффективностью. Поставленная задача решается применением в качестве бактерицидного средства 2,6-динитро-4бензоилфенилпиперидина, который получают синтезом 4-бензоил-2,6-динитрохлорбензола и пиперидина [1]. В качестве базового объекта для сравнения противомикробных свойств был выбран фурацилин, используемый в медицине в качестве бактерицидного препарата [2]. Известным недостатком фурацилина является его высокая токсичность (так, рекомендованная суточная доза составляет для взрослых 0,5 г.) и как ее следствие - отрицательные побочные явления как при наружном, так и при внутреннем применении. К тому же, при сравнении противомикробной активности у некоторых культур (Staphylococcus aureus Р-209) МПК выше, чем для соединения 1. Противомикробную активность соединения І в сравнении с прототипом II и базовым соединением III изучали по отношению к культурам, полученшм из Всесоюзной коллекции микроорганизмов института биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР; Staphylococcus aureus P-209, Streptococcus faecails. Bacillus Subtilis. Определение противомикробной активности проводили методом серийных разведений, позволяющим установить минимальную подавляющую концентрацию (МПК) вещества, ингибирующую рост опытных тесткультур. Исследуемые соединения растворяли в спирте или готовили водно-спиртовые растворы с содержанием этилового спирта не менее 60% для обеспечения стерильности растворов, необходимой для микробиологических испытаний. Суточные культуры "используемых микроорганизмов выращивали в стандартной питательной среде переваре по Хоттингеру при постоянном встряхивании в колбах Эр-ленмейера при t°-37°C. Из суточных культур микробов готовили взвеси, содержание 2 · 109 микробных клеток в 1 мл/р-ра. Двухкратные серийные разведения исследуемых веществ I, II, III проводили в пробирках, объемом 10 мл (10 штук), содержащих по 2 мл стерильной питательной среды. Исходный раствор веществ I, II готовили концентрацией 20 мг/мл, растворитель - этанол. Затем перекаткой получали необходимое для постановки опыта разведение исследуемого вещества. Учет результатов проводили после 18-20 час. инкубации. С этой целью просматривали содержимое всех пробирок на наличие или отсутствие роста микробов. Чувствительность микроорганизмов к воздействию вещества выражается средней арифметической величиной из показателей вещества в двух смежных пробирках: последней - с прозрачной средой (отсутствие роста тест-культуры) и первой помутневшей (наличие роста тест-культуры). Полученная величина под названием минимальной подавляющей концентрации (МПК) характеризует антимикробную активность предлагаемого соединения 1, прототипа по структуре и базового соединения III. Полученные данные представлены в таблице. Из данных таблицы видно, что все вещества обладают антимикробным действием, причем активность соединения (1) одного порядка с фурацилином, а в отношении Staphylococcus aureus P-209 превосходит активность фурацилина в 1,3 раза, Относительно прототипа противомикроб-ная активность заявляемого соединения выше в отношении Staphylococcus aureus Р-209 в 21 раз, в отношении Streptococcus faecalis в 8 раз и в отношении Bacillus Subfllis в 6 раз. Острую токсичность предлагаемого соединения 1 и прототипа II определяли по методике Бернса на неинбредных белых мышах, массой 14-20 г. Значение LD50 при внутрибрюшинном введении составило 441,3 мг/кг и 200,6 мг/кг, соответственно. Токсичность фурацилина не допускает применения повышенных доз препарата, в то время как низкое значение LD50 для 1 -441,3 мг/кг позволяет повысить концентрации соединения 1 без негативных последствий для организмов и вместе с тем повлиять на эффективность действия. Таким образом, предлагаемое соединение имеет следующие преимущества: 1. Антимикробная активность одного порядка с известным антимикробным препаратом фурацилином, а для Staphylococcus aureus Р-209 в 1,3 раза выше таковой. 2. Значительно меньшая токсичность по сравнению с известным антимикробным препаратом фурацилином и прототипом по структуре и биодействию (II).