Спосіб прогнозування ефективності лікування раку яєчників

Винахід відноситься до медицини, а саме до морфометрії, І може бути використаний при патологоанатомічному вивченні біопсійного матеріалу для прогнозування ефективності лікування раку яєчників. Відомим є спосіб прогнозування ефективності лікування раку яєчників, що включає в себе визначення мітотичного Індексу. Якщо мітотичний індекс має значення 7.0 і вище прогнозується несприятливий кінець лікування (Иржанов СИ. Морфологические основы эффективности химиотерапии у больных серозной цистокарциномой яичников, Авто-ред. дис. докт. мед. наук. М., 1984, с. 41). Найбільш близьким до заявляемого по технічній суті і результатам, які отримуються, є засіб прогнозування ефективності лікування раку яєчників (див, Якимова Т.П., Яковцова И.И. Способ прогнозирования эффективности лечения рака яичников. Авт. свид. СССР № 4769984 от 13.12.1989 г.), Цей спосіб прогнозування ефективності лікування раку яєчників полягає у визначенні в пухлині мітотичного Індексу, для чого визначають кількість лімфоцитів, уражених пухлинних клітин, відносний об'єм паренхими пухлини і при значенні кількості лімфоцитів у межах 400-1000 екз., мітотичного Індексу 10-35, уражених пухлинних клітин 2-50, відносного об'єму паренхими пухлини 70-80 прогнозується неефективне лікування хвороби. Основним недоліком цього засобу є те, що він не ураховує якісну характеристику лімфоідних клітин, а акцентує увагу ли ше на кількісних показниках. Тоді як відомо, що не тільки кількість, а і якість імунних клітин визначають особливості розвитку пухлини (Фукс Б.Б. Ключевые вопросы противоопухолевого иммунитета и гликоконьюганты. -Ар хив патологии, 1991, № 11, с. 17-22). Серед Імунокомпетептних клітин у стромі пухлини зустрічаються як кілерні, так І суп-рессорні клітини: Т- і В-лІмфоцити, макрофаги. Основними клонами Імунних клітин, які виконують кілерну і супрессорну функцію с Т-кілери, Т-супрессори, макрофаги-кілери та макрофаги-супрессори (Сохин А.А., Чернушенко Е.Ф. Прикладная иммунология. К., Здоровье, 1984, с. 315). Ще одним з недоліків цього засобу є велика трудоємкість під час його виконання. Задачою цього винаходу є підвищення точності і вірогідності прогнозування ефективності лікування раку яєчників на основі вивчення супрессорної і кілерної активності у пухлині. Поставлену задачу реалізують шляхом підрахування у полі зору мікроскопа (х 400) кількості Т-супрессорів, Т-кілерів, макро-фагів-супрессорів та макрофагів-кілерів, а також підрахуванням відносного показника : загальна сума супрессоріо загальна сума кілерів. Для визначення імунних клітин використовують парафінові, або криостатні зрізи раку яєчників, оброблені по непрямому методу Кунса (Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная. М., Иностр. лит-ра, 1962, с. 731) за допомогою моноклональних антитіл ІКО-31, ІКО-90, ІКО-86, ІКО-ҐМ1, Т-супрессори визначають з ІКО-31, Т-кілери визначають як різницю між загальною кількостю Т-лімфоцитІв (що підраховують на препаратах, оброблених ІКО-90) і сумою Т-супрессорів І Т-хелперів (останні визначаються з ІКО-86). Макрофаги-супрессори і макрофаги-кілери визначаються по власному засобу (заявка на винахід направлена до Держкомвинаходу України). Спосіб здійснюється таким чином. Виготовляють серійні кріостатні зрізи (або парафінові) товщиною 6-7 мкм. Достатньо 5 зрізів. 1-й зріз обробляють по непрямому методу Кунса МКА ІКО31 (для виявлення Т-супрессорів); другий зріз обробляють МКА ІКО-90 (для виявлення усіх зрілих Т-лімфоцитів); третій зріз обробляють МКА ІКО-86 (для виявлення Т-хелперів/індукторІв). Підраховують щільність відповідно Т-супрес-сорів, усіх Т-лімфоцитІв, Т-хелперів/Індук-торів у полі зору мікроскопа (х 400), Потім Із показника загальної кількості Т-лІмфоцитів віднімають суму Тсупрессорів і Т-хелперів/ /Індукторів, тим самим отримують кількісний показник Т-кiлерів. Четвертий та п'ятий зрізи обробляють МКА ҐМІ (та Індометацином) для виявлення маїсрофагівсупрессорів та макрофагів-кілерів. Препарати досліджують на люмінісцентному мікроскопі при збільшенні (х 400). Потім підраховують суму супрес-сорів та кілерів: SС = Тс + Мс: SK = ТК + МК, а потім визначають відношення загальної кількості супресорів до загальної кількості кілерів : SC/SK і в залежності від величини цього показника прогнозують ефективність лікування раку яєчників. Якщо відношення загальної кількості супрессорів до загальної кількості кілерів рівняється 0,300,37 і менше - прогноз лікування вважається сприятливим. Якщо цей показник досягає 0,40 1 більше - прогноз лікування несприятливий. Приклад. Протокол патолоана-томічного дослідження біопсії сірозної кисти яєчників. Виготовлено 5 кріостатних зрізів, товщиною 5-7 мкм. 1-й зріз обробили ІКО-31, другий зріз ІКО-90; третій - ІКО-86; четвертий і п'ятий зрізи - ІКО-ГМІ і Індометацином. Підрахували щільність Т-супрессорів, яка рівняла 1,93 ±0,04 екз. у полі зору (х 400). Потім підрахували загальну кількість Т-лімфоцитів, вона склала 12,9 ± 2,5 екз. у полі зору (х 400). Щільність Т-хелперів/індук-торів рівнялась 3,87 ±0,5 екз. у полі зору (х 400). Підрахували кількість Т-кілерів у полі зору (х 400), яка склала 7,1 ±1,1 екз. Потім підрахували щільність макрофагів-супрессорів - 2,0 ± 0,44 єкз. І макрофагів-кілерів -6,0 ± 0,47 екз. у полі зору (х 400). Загальна сума супрессорів склала 3,39 екз. Загальна сума кілерів - 13,1 екз. Відношення загальної суми супрессорів до загальної суми кілерів склала 0,3. Таким же чином визначили цей показник при перехідній аденомі яєчників (пред-рак) і при різних гістологічних формах раку яєчників. При перехідній аденомі яєчників (пред-рак) відношення загальної кільності супрессорів до загальної кількості кілерів склало 0,37, що дозволяє нам трактувати цей показник з амплітудою 0,30-0,37 як показник відносно сприятливого прогнозу протікання пухлини у плані малігнізації та злоякісності. При папілярному раці яєчників цей показник склав 0,44, при папілярно-солідному раці - 0,50, а при солідній формі -0,52. Після передопераційноТ хіміотерапії, яка складалася Із застосування ТІО-ТЕФу у сумарній дозі 120-240 мг, відношення загальної кількості супрессорів до загальної кількості кілерів у стромі папілярного, папілярно-солідною І солідного раку яєчників змінилося таким чином (таблиця). Таким чином, внаслідок проведених лікувальних засобів при раці яєчників усіх трьох гістологічних форм виявляється позитивна динаміка, а саме показник відношення загальної кількості супрессорів до загальної кількості кілерів зменшився і при папілярному та папілярносолідному раці наблизився до контрольного, що свідчить про сприятливий прогноз лікування. При солідному раці цей показник досягає 0,40, що вважається як несприятливий прогноз лікування. Ці хворі потребують продовження лікування.