Спосіб кріоконсервування еритроцитів

Спосіб кріоконсервування еритроцитів, що включає заморожування в рідкому азоті з кріозахисним середовищем, що містить 20% декстрану та 7% диметилсульфоксиду, відігрівання на водяній бані та відмивання від кріопротектора у фізіологічному розчині, який відрізняється тим, що фізіологічний розчин містить озон в концентрації 0,2-0,3мг/л. (19) (21) u200605129 (22) 10.05.2006 (24) 15.11.2006 (46) 15.11.2006, Бюл. № 11, 2006 р. (72) Воловельська Єлизавета Леонідівна, Мусіна Ірина Алімівна, Зінченко Василь Демидович, Рамазанов Віктор Володимирович, Бондаренко Валерій Антонович (73) ІНСТИТУТ ПРОБЛЕМ КРІОБІОЛОГІЇ І КРІОМЕДИЦИНИ НАЦІОНАЛЬНОЇ АКАДЕМІЇ НАУК УКРАЇНИ 3 18571 4 фізіологічний розчин. Цю процедуру повторювали моглобіну з клітин за допомогою приладу СФ - 4А. 3 рази. До відмитих еритроцитів у співвідношенні Вона складала 95,04±0,43%. 1:1 приливали кріоконсервант, який мав наступний Приклад 2 склад: декстран - 20%, ДМСО - 7%, глюкоза - 2%, Спосіб здійснювали аналогічно прикладу 1, за сахароза - 7%, NaCI - 0,3%, вода дистильована винятком того, що у середовище відмивання вворешта. дили озон у різних концентраціях. Одержані реКлітини з кріоконсервантом ретельно перемізультати наведені в таблиці. шували та інкубували протягом 30 хвилин при кімЗ таблиці видно, що найбільшу збереженість натній температурі. Отриману суспензію розливаеритроцитів забезпечує відмивання клітин озоноли в контейнери, які занурювали в рідкий азот. ваним фізіологічним розчином з кінцевою концентВідігрівання здійснювали на водяній бані. Після рацією озону 0,2-0,3мг/л. відігрівання до клітин додавали озонований фізіоПри застосуванні концентрацій озону, нижчих, логічний розчин при +37°С і проводили відмивання або вищих 0,2-0,3мг/л, спостерігається зменшення еритроцитів від кріопротектора шляхом центрифузбереженості еритроцитів. гування отриманої суспензії. Цю процедуру повторювали 3 рази, таким чином повністю відмиваючи Таблиця клітини від кріопротектора. Озонований фізіологічний розчин для відмиЗбереженість еритроцитів в залежності від концевання отримували, барботуючи фізіологічний рознтрації озону в середовищі відмивання чин озоно-кисневою сумішшю з концентрацією озону 20мг/л. Озон для барботування фізіологічноКонцентрація озону, Збереженість еритроциго розчину отримували з чистого кисню шляхом мг/л тів, % електросинтезу. Концентрацію озону в газовій 0 89,32±0,58 озоно-кисневій суміші та розчиненого у фізіологіч0,05 88,22±0,76 ному розчині озону визначали спектрофотометри0,10 91,38±0,92 чним методом за допомогою Specord UV VIS (Ні0,20 95,04±0,43 меччина) по поглинанню світла в смузі Хартлі 0,30 93,15±0,32 (255нм). Далі фізіологічний розчин з розчиненим в 0,40 81,98±0,61 ньому озоном додавали у фізіологічний розчин, що не містив озон, з таким розрахунком, щоб кінцева Джерела інформації: концентрація розчиненого озону складала 0,2мг/л. 1. Пат. України №12355 А, МПК A01N1/02. Збереженість еритроцитів оцінювали спектПубл. 28.02.1997. Бюл. №1. рофотометричним методом, вимірюючи вихід ге2. Пат. України №13845, МПК А01N1/02. Публ. 17.04.2006. Бюл. №4. Комп’ютерна верстка Л. Ціхановська Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601