Спосіб визначення глікованого фібриногену плазми крові у хворих на цукровий діабет

Спосіб визначення глікованого фібриногену плазми крові у хворих на цукровий діабет колориметричним шляхом у клініко-лабораторних умовах, який відрізняється тим, що глікований фібриноген плазми крові визначають після інкубації протягом трьох з половиною годин при T=100 °C загального фібриногену крові з насиченою щавлевою кислотою та подальшої інкубації отриманого супернатанта впродовж 50 хвилин при T=40 °C з насиченим розчином тіобарбітурової кислоти. (19) (21) u200607620 (22) 07.07.2006 (24) 15.01.2007 (46) 15.01.2007, Бюл. № 1, 2007 р. (72) Каліман Віктор Павлович, Каліман Павло Авксентійович, Жуков Віктор Іванович, М'ясоедов Валерій Васильович, Клименко Микола Олексійович, Щербань Микола Гаврилович, Горбач Татьяна Вікторівна (73) Каліман Віктор Павлович 3 20167 хвилин на гліцериновій лазні при t° 100°С. Через 10 хвилин нагрівання з пробок виймають ін'єкційні голки. Після закінчення дегідратації пробірки охолоджують в проточній воді або на крижаній лазні протягом 10 хвилин, потім додають розчин трихлороцтової кислоти. Після перемішування пробу інкубують на водяній лазні протягом 40 хвилин при t° 37°C. Потім вимірюють оптичну щільність розчину. Враховуючи, що реакція неферментативного глікування білків крові неспецифічна і при стані гіперглікемії глюкоза крові взаємодіє не тільки з гемоглобіном, але і з іншими білками крові, що впливає на інтегральний терміновий показник компенсації метаболізму глюкози, нами було поставлено завдання - розробити клініко-лабораторну методику визначення неферментативного глікування білка, який має короткий період напіврозпаду і може слугувати адекватним інтегральним показником компенсації метаболізму глюкози за короткій проміжок часу. Завдання, покладене в основу корисної моделі вирішується тим, що одним із зворотних глікованих білків є фібриноген, з періодом напіврозпаду три-чотири доби, визначення якого відображає рівень глікемії за короткий проміжок часу і може слугувати адекватним інтегральним показником компенсації вуглеводного обміну у хворих на цукровий діабет. Позитивний ефект корисної моделі обумовлений тим, що на процес глікування фібриногену не впливають такі численні чинники, як гемоліз, ку Комп’ютерна в ерстка Д. Шев ерун 4 ріння, уремія, вагітність і т.д., крім того, заявлений спосіб визначення глікованого фібриногену дозволяє отримати інтегральний показник метаболізму глюкози за три-чотири доби та оперативно скоректувати гіпоглікемічну терапію, а також розширити арсенал клініко-лабораторних методів визначення фр уктозаміну. Спосіб виконується наступним чином. У пацієнта беруть з вени 3 мл крові, змішують з 0,3 мл 3,7% цитрату натрію. З плазми виділяють фібриноген. Потім виділені 10 міліграм фібриногену інкубують на протязі трьох з половиною годин при t° 100°С з 2мл насиченої щавлевої кислоти (1 ммоль/л). Після охолоджування 1 мл 20% трихлороцтової кислоти додають в пробірку і центрифугують протягом 15 хвилин при 3000 об/хв. 2 проби супернатанта (по 1 мл кожна) відбирають і відставляють. Одну інкубують з 0,25мл насиченого розчину тіобарбітурової кислоти (дослідна проба), іншу - з 0,25мл дистильованої води (контрольна проба). Обидві пробірки інкубують протягом 50 хвилин при t° 40°С. Вимірювання проводять на спектрофотометрі в кюветах з довжиною оптичного шляху 1см, проти контролю, на хвилі 443нм. Для калібрування використовують серію розчинів по 1 ммоль/л фруктози. Одиниці вимірювання: мікромоль фруктозаміну на 10 міліграм фібриногену/фібрину (мкмоль ФA/10 міліграм). Допускаються незначні відхилення в температурному, кількісному та часовому діапазоні. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601