Спосіб виявлення підвищеної радіації грунту за еколого-гігієнічними змінами

Способ относится к санитарной микробиологии почвы и радиационной гигиене и может быть использован для эколого-гигиенического контроля почвы вблизи источников радиации: АЭС, добычи уранового топлива, захоронения радиоактивных отходов и др. Известен способ выявления экстремальных условий образования активного ила при очистке и переработке сточных вод по относительно меньшему содержанию простейших (4%), но высокому - бактерий и их малое видовое разнообразие [FoissnerW. Microorganismen in extremen Lebensraumen Protozoen in Belebtschlamm Microaerobier und Bioindikatoren//Biol. unserer Zelt. -1991. - 24, Ns 6. - С 326-328]. Недостатком известного способа является то, что он рассматривает поведение простейших и бактерий, характерных для активного ила городских сточных вод, которые не соответствуют микробиоценозам почвы и не могут быть индикатором ее загрязнения. Наиболее близким к заявленному способу является способ выявления преобладания меланинсодержащих грибов в комплексе почвенных микромицетов для определения радиоактивного загрязнения почвы, включающий посев почвы на специальную среду с последующей инкубацией, дифференциацией и идентификацией почвенных грибов [Жданова Н.Н. и др. Комплексы почвенных микромицетов в зоне влияния Чернобыльской АЭС//Микробиол. журнал. - 1991. -Т. 53, № 4. - С. 3-8]. К недостаткам этого способа относится его сравнительная длительность (более 10-ти суток) и отражение изменений при повышенной радиации лишь грибковой, малочисленной части всего разнообразного комплекса почвенных микробиоценозов. В основу изобретения поставлена задача создания способа выявления эколого-гигиенических изменений в почве при повышенной радиации по комплексу изменений в различных физиологических группах микроорганизмов вегетативных и споровых форм, свидетельствующих о существенных сдвигах в биоценозе почвы, в частности значительном уменьшении споровых форм микроорганизмов на фоне остальных, что говорит о радиационном загрязнении почвы в пределах -от 1 до 10 Ки/км2 по изотопу Cs 137/134. Эффективность способа заключается в его наглядности, сравнительной быстроте определения (3-5 суток), а также в доступности для практических лабораторий санэпидемстанций, особенно в регионах, подвергнутых загрязнению в результате аварии на ЧАЭС. Поставленная задача решается тем, что в способе выявления повышенной радиации почвы по экологогигиеническим изменениям включающим посев почвы на плотную питательную среду с последующей инкубацией, выявление количества физиологических групп микроорганизмов, согласно изобретению засевают прогретую и непрогретую взвесь почвы, выявляют наличие ще-лоче-, кислотообразующих и нейтральных колоний вегетативных и споровых форм и при количестве последних ниже 20% на фоне снижения физиологических групп с 5-6 до 2~4-х устанавливают зону радиоэкологического риска с уровнем радиации по изотопу Cs 137/134 от 1 до 10 Ки/км2. Предлагаемый способ позволяет выявить наибольшую чувствительность споровых форм микроорганизмов к повышенному радиоактивному загрязнению почвы, что проявляется в существенном уменьшении их количества по отношению к другим представителям физиологических групп микробиоценоза почвы. Это обеспечивает наглядность способа, его относительную быстроту и доступность для практических определений радиоактивного загрязнения почвы. Пример осуществления предлагаемого способа. Практически исследована почва в зоне радиоактивного загрязнения с повышенным уровнем радиации от 1 до 10 Ки/км2 и в местах с естественным фоном менее 1 Ки/км2. Отбор и предварительную обработку проб проводили общепринятыми традиционными методами. Приготовленную 10%-ую взвесь почвы в фосфатнобуферном растворе с рН 8,2 делили на две части. Одну часть засевали поверхностно в непрогретом виде по 0,1 см на 3 чашки с 1% глюкозним агаром, содержащем в 200 см3 по 1 см3 0,1 % спиртовых растворов метиленовой синьки и нейтрального красного. Вторую часть засевали так же, но после прогревания в термобане ТБ-11 при 80°С 20 мин для уничтожения вегетативных форм и выявления количества споровых микроорганизмов. После равномерного распределения посевного материала по поверхности питательной среды в чашках все посевы инкубировали 48 ч при 37°С в термостате ТС-80 и проводили предварительный визуальный учет результатов - подсчет всех выросших колоний вегетативных и споровых форм. Окончательный учет и коррекцию результатов проводили после дополнительного выдерживания чашек 3 суток при комнатной температуре в затемненном месте для лучшего проявления окраски колоний. Затем подсчитывали отдельно розовые, голубые и бесцветные колонии, соответствующие кислото-, щелочеобразующим и нейтральным вегетативным и споровым формам. Высчитывали процент споровых форм по отношению к сумме всех выросших колоний и общее количество выявленных физиологических групп из шести определяемых. Результаты типичных 12-ти контрольных и опытных проб представлены в таблице. Таким образом, наиболее информативными показателями экологогигиенических сдвигов в загрязненной радионуклидами изотопа Cs 137/134 в интервале 1-10 Ки/км2 является существенное по сравнению с контролем(t=—10.5) снижение проценoй колоний споровых форм ниже 20 на фоне уменьшения количества физиологических групп с 5-6 до 2-4.