Спосіб визначення цинку в гранулоцитах крові

Спосіб визначення цинку в гранулоцитах крові, що включає забір крові, підготовку мазка, його забарвлення, промивання в дистильованій воді, замикання у середовище, визначення за 3 Ознаками, спільними із заявленим рішенням, є: забір крові, підготовка мазків, їх забарвлення, мікроскопування, оцінка інтенсивності цитохімічної реакції за забарвленням цитоплазми зернистих лейкоцитів. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити спосіб визначення цинку в гранулоцитах крові, який шляхом використання селективної реакції дозволяє отримати стабільні і порівняльні результати. Суттєвими ознаками способу є: забір крові; нанесення на предметне скло шару яєчного білка, а на нього мазку крові; фіксування мазка у висхідних парах формаліну протягом 5хв.; забарвлення протягом 3±0,5год. при 70±5°С сумішшю, яка містить 10 об’ємних частин 1% водного розчину сульфарсазену, 10 об’ємних частин 4% водного розчину ацетату натрію, 0,04 об’ємних частин 25% водного розчину гідроксиду амонію; промивання мазка протягом 1±0,5хв. дистильованою водою та замикання у желатин; мікроскопування мазка; визначення в зернистих лейкоцитах оранжевих гранул, кількість яких є показником вмісту цинку в клітинах. Відмінними від прототипу ознаками є: нанесення на предметні стекла яєчного білка, фіксація мазків у парах формаліну, забарвлення мазка сумішшю, яка містить ацетат натрію, сульфарсазен, гідроксид амонію й дистильовану воду, замикання в желатині, визначення в зернистих лейкоцитах оранжевих гранул, кількість яких є показником вмісту цинку в клітинах. Спосіб здійснюють таким чином: проводять забір 1 краплі крові, на предметне скло наносять тонкий шар яєчного білка, а на нього мазок крові, мазок фіксують у висхідних парах формаліну протягом 5±1хв., для чого у чашку Петрі кладуть дві скляні палички та наливають 20±5мл розчину формаліну, на паличках розміщують предметне скло мазками донизу, чашку покривають кришкою, після закінчення терміну фіксації кришку знімають з чашки, мазок витягують з неї і занурюють у суміш для забарвлення де витримують протягом 3±0,5год при температурі 70±5°С у суміші, яка містить 10 об’ємних частин 1% водного розчину сульфарсазену, 10 об’ємних частин 4% водного розчину ацетату натрію, 0,04 об’ємних частин 25% водного розчину гідроксиду амонію, мазок промивають протягом 1±0,5хв у дистильованій воді та замикають у желатин; мазок розглядають під світловим мікроскопом; на препаратах у зернистих лейкоцитах визначають оранжеві гранули, кількість яких - показник вмісту цинку в клітинах, оцінку інтенсивності цитохімічної реакції проводять в умовних одиницях (у.о.) за трибальною системою: за один бал приймають слабопозитивну, два бали -помірну, три бали виражену за інтенсивністю реакцію. Середню величину вмісту цинку в клітинах встановлюють підрахунком на 100 клітинах. 30461 4 Приклад 1. У здорової (контрольної) особи проводили забір крові із кінчика пальця. Краплю крові наносили на предметне скло, покрите шаром яєчного білка. Готували мазок, який фіксували протягом 5хв у парах формаліну, занурювали в суміш, яка містить 10 об’ємних частин 1% водного розчину сульфарсазену, 0,04 об’ємних частин 25% водного розчину гідроксиду амонію, 10 об’ємних частин 4% водного розчину ацетату натрію. Потім мазки промивали протягом 1хв у дистильованій воді, замикали в желатин та розглядали під світловим мікроскопом. На препаратах у цитоплазмі зернистих лейкоцитів визначали оранжеві гранули. Інтенсивність цитохімічної реакції сульфарсазену складає 1,0±0,07у.о. Приклад 2. Ухворої на цукровий діабет особи мазки крові обробляли, як вказано у випадку зі здоровою особою. Інтенсивність цитохімічної реакції сульфарсазену була нижча, ніж у здорової особи і складала 0,7±0,06у.о. (р