Штам бактерій bradyrhizobium japonicum для одержання добрив під сою

Изобретение относится к микробиологическим средствам повышения урожайности бобовых культур и касается выделения нового штамма клубеньковых бактерий сои, предназначенного для изготовления бактериального препарата ризоторфина под сою. Наиболее близким к предлагаемому изобретению является штамм 634б (2490)[1]. Этот штамм, наряду с указанными выше испытывался в 1987-1989 гг. в закрытых конкурсных испытаниях Географической сети опытов с бактериальными удобрениями (ВНИИСХМ. Санкт-Петербург). В соотве тствии с существующими правилами все штаммы, проходящие эти испытания, оцениваются только в виде бактериального удобрения - ризоторфина, приготовленного по технологии [2]. По результатам конкурсных испытаний в полевых опытах научно-исследовательских учреждений Географической сети опытов. Решением межведомственной комиссии от 16 января 1990 года штамм 6346 (2490) в список производственных штаммов не включен, т.к. в ряде регионов не дал достоверных прибавок урожая сои. В основу изобретения поставлена задача создания нового штамма клубеньковых бактерий сои, который, отличаясь высокой азотфиксирующей активностью и эффективностью и будучи основной бактериального препарата - ризоторфина, обеспечивал бы стабильно высокие урожаи сои и способствовал повышению содержания в ней белка. Поставленная задача решается тем, что на основе аналитической селекции создан новый штамм бактерий Bradyrhizobium Japonicum ВНИИСХМ № 24108 для получения удобрения под сою. Штамм Bradyrhizobium japonicum 24108 депонирован во Всесоюзной коллекции клубеньковых бактерий ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии (г. Ленинград). Морфолого - к ультуральные свойства Bradyrhizobium Japonicum 24108 - культура неслороносная, аэробная, грамотрицательная, подвижная (монотрих). Растет на питательных средах следующего состава. Гороховый агар (гл): горох - 100; сахароза - 20; агар - 15-20; NaCl - 1,0; рН 6,8-7,0; оптимум роста - 26-28°С. Люпиновый агар (г/л): К2НРO4 - 0,5; NaCl - 0,2; MgSO4 - 0,2; CaSO 4 - 0,1; (NH4)2 MoO 4 - следы; сахароза -10,0; глюкоза - 10,0; люпиновая мука - 10,0; агар - 15-20; рН среды 6,8-7,0; оптимум температуры - 26-28°С. Среда Исварана г/л: маннит или сахароза - 10,0; К2НРO4 - 0,5; MgO 4 - 0,2 ; NaCl - 0,1; глюконат кальция - 1,5; FеСl3 - 0,01; дрожжевой экстракт - 2,0; агар - 15,0-20,0; рН - 7,0. Оптимум температуры - 26-28°С. Величина клеток пятисуточной культуры на люпиновом агаре 2,0-2,4 х 0,6 мкм. Палочки в возрасте 1-3х суток подвижные, монотрихи грамотрицательные. Медленнорастущая культура. Штри х на люпиновом агаре обильный, беловатый, слизистый, выпуклый. Слизь не тянется. Колонии на гороховом агаре на 5-й день мелкие, круглые, выпуклые, беловатые, блестящие. Оптимум температуры 26-28°С. Оптимальное значение рН 6,5-7,0. Физиолого-биохимические признаки. Молоко с лакмусом не пептонизирует. Желатину не разжижает. Аэроб. Отношение к углеводам На жидкой среде Норриса идет слабое подщелачивание, рН - 7,7. Активно использует лактозу, мальтозу, сорбит, сахарозу, слабее - маннит, глюкозу, очень слабо - ксилозу. Отношение к источникам азота Растет на средах с аммонийными солями, азотнокислым калием, глицином и тирозином, но предпочтительно использует восстановленные формы азота. На МПА не растет. Признаки штамма устойчивы. Штамм не патогенен. Пересевается один раз в 6 месяцев и хранится на люпиновой среде при 4-5°С. Эффективность штамма 24108 проверена в вегетационных и полевых опытах. В вегетационном опыте при использовании сорта сои Терезинская-24 изучали влияние бактеризации на ацетиленредуктазную активность клубеньков, величину ассимиляционной поверхности растений и содержание в листьях хлорофилла "а". Данные представлены в табл. 1. Как видно из данных таблицы 1, заявляемый штамм по влиянию на содержание хлорофилла "а" в листьях превышает штамм-эталон, а по двум другим показателям - равен ему. Влияние бактеризации на урожай зеленой массы сои в условиях вегетационного опыта учитывалось на двух сортах и представлено в табл.2. Как видно из представленных данных, заявляемый штамм на обоих сортах превысил эталонный не только по влиянию на урожай, но и его качество. В растениях, инокулированных заявляемым штаммом содержание белка было на 1,3-1,9% больше. Штамм клубеньковых бактерий сои 24108 испытывали в полевых опытах в хозяйствах Сумской и Киевской областей Украины. Результаты приведены в табл. 3. Приведенные в таблице 3 данные показывают, что при использовании заявляемого штамма прибавки урожая зерна в 2,1-2,4 раза выше, чем при использовании штамма-эталона. Хорошо показал себя штамм и при испытаниях в др уги х регионах. Штамм клубеньковых бактерий сои 24108 испытывался в соответствии с правилами ввиде препарата, приготовленного нами с соблюдением условий [2]. В качестве носителя использовался торф. По результатам конкурсных испытаний 1987-1989 гг. в Географической сети опытов с бактериальными удобрениями Решением межведомственной комиссии от 16 января 1990 г. штамм № 24108 рекомендован для производства ризоторфина, что свидетельствуете его преимущества х и существенных отличиях.