Штам бактерій rhizobium leguminosarum bv viccae для одержання добрив під горох

Изобретение относится к микробиологическим средствам повышения урожайности бобовых культур и касается выделения нового штамма клубеньковых бактерий гороха, предназначенного для изготовления бактериального препарата нитрагина (ризоторфина) под горох. Известны штаммы Rhizobium leguminosarum bv. viceae [1], которые обладают модулирующей и азотфиксирующей активностью, а также в ряде случаев положительно влияют на фотоассимиляционные свойства растений-хозяев. Их недостатком является неспособность обеспечить стабильно высокий урожай гороха. Наиболее близким к предлагаемому изобретению является штамм-прототип Rhizoblim leguminosarum bv. vicear 240б (1056) [2]. Штамм является эффективным симбиотическим азотфиксатором, способствуе т накоплению азота в растениях гороха. Однако в закрытых конкурсных испытаниях Географической сети опытов с бактериальными препаратами в 1987-1989 гг не подтвердил высокой эффективности в сравнении со штаммомэталоном и был выведен из числа производственных штаммов, используемых для производства бактериального удобрения под горох. В основу изобретения поставлена задача получения нового высокоэффективного штамма клубеньковых бактерий гороха, который, являясь основой бактериального удобрения, способен обеспечивать высокие урожаи гороха при одновременном улучшении его качества. Поставленная задача решается тем, что в результате аналитической селекции выделен новый штамм бактерий Rhizobium leguminosarum bv. viceae для получения удобрения под горох. По результатам испытаний в Географической сети опытов Решением межведомственной комиссии от 16 января 1990 года заявляемый штамм 1070 (4046) рекомендован для передачи производству. Заявляемый штамм 1070 выделен из клубеньков растений гороха сорта Рамонский, произраставшего в Бородинском районе Киевской области на дерново-подзолистой почве. Штамм 1070 под номером 31 хранится в коллекции Института микробиологии и вирусологии АН УССР (г. Киева). Настоящий номер 1070 присвоен ему в 1988 году после депонирования во Всесоюзной коллекции клубеньковых бактерий ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии (г. Ленинград). Идентифицирован по "Краткому определению бактерий" Берги. Морфологокультуральные признаки Штамм Rhizobium leguminosarum bv. viceae 1070 хорошо растет при температуре 26-28° на жидкой и твердой среде следующего состава, г/л: фасоль (горох) - 100; са хароза - 20; NaCl - 1,0; агар - 15,0; рН 6,8-7,0. В жидкой среде культура выращивается на качалках при 220 об/мин. При посеве штрихом на бобовом агаре рост обильный, слизистый. Размер колоний 2-3-суточных культур не превышает 5 мм. Колонии молочного цвета с блестящей поверхностью и ровными краями. В более позднем возрасте колонии ослизняются и растекаются. Культура быстрорастущая, неоспороносная, грамотрицательная. Размер клеток 3,5 х 0,6 мкм, форма - палочковидная. Характер жгутикования перитрихиальный. Физиолого-биохимические свойства Аэроб. Оптимальное значение рН среды 6,8-7,2. На МПА и МПБ культура не растет. Желатину не разжижает. Лакмусовое молоко подщелачивает, образуя сывороточную зону в виде кольца. Отношение к углеводам. Хорошо усваивает глюкозу, лактозу, маннозу, мальтозу, фр уктозу, галактозу и маннит. Несколько слабее - глицерин и сорбит с образование кислоты. На жидкой среде Норисса при выращивании на качалках идет подкисление до рН 5,0. Крахмал не усваивает. Отношение к источникам азота устанавливалось на регламентной заводской среде. Эффективность штамма 1070 проверена в вегетационных и полевых опытах. Данные по влиянию заявляемого штамма на урожай гороха сортов Уладовский юбилейный и Альбатрос в условиях вегетационного опыта представлены в таблице 1. Как видно из приведенных данных, заявляемый штамм обладает более высокой азотфиксирующей активностью, чем штамм - прототип. Это свойство положительно влияет на урожай гороха и содержание в нем белка. В вариантах с использование для инокуляции заявляемого штамма 1070 соответственно взятым в опыт сортам оно было на 16,5 и 13,9% большим, чем при использовании штаммаэталона. В вегатационных опытах с сортами гороха Стрелецкий и Малиновка заявляемый штамм также проявил более высокую эффективность по сравнению со штаммом-эталоном (табл. 2). Испытание штамма Rhizobium leguminosarum bv. viceae 1070 в полевых опытах проводилось в течение ряда лет. Данные по влиянию предпосевной инокуляции семян гороха сорта Уладовский юбилейный на урожай и качество зеленой массы представлены в таблице 3. Таким образом, полевые испытания подтвердили высокую эффективность заявляемого штамма. По сравнению со штаммом-прототипом он повышал урожай зеленой массы гороха на 28 и 40 ц/га и способствовал увеличению сбора сырого протеина соответственно на 7,3 и 27,9 ц/га.