Спосіб визначення стимулюючої активності цервікального слизу на ріст грибів роду кандида

Спосіб визначення стимулюючої активності цервікального слизу на ріст грибів роду Кандида, який здійснюється шляхом дослідження кількості колоній грибів роду Кандида, що виросли на щільному поживному середовищі після сумісного культивування з цервікальним слизом, і оцінюється в порівнянні з контролем; при концентрації грибів роду Кандида 106-108 КУО/мл стимулюючу активність цервікального слизу вважають високою, помірною при концентрації грибів роду Кандида 104 КУО/мл, негативний результат реєструють при концентрації грибів роду Кандида 102 КУО/мл, що відповідає показникам контролю. (19) (21) u200812978 (22) 07.11.2008 (24) 25.02.2009 (46) 25.02.2009, Бюл.№ 4, 2009 р. (72) ПОДОЛЬСЬКИЙ ВАСИЛІЙ ВАСИЛЬОВИЧ, UA, ЛІСЯНА ТАМАРА ОЛЕКСАНДРІВН А, UA, ПОНОМАРЬОВА ІНН А ГЕОРГІЇВНА, UA, ДРОНОВА ВІКТОРІЯ ЛЕОНІДІВН А, UA, ТЕТЕРІН ВАЛЕНТИН ВОЛОДИМИРОВИЧ, U A, ЛУЦЕНКО ОЛЕНА ВІКТОРІВН А, U A (73) ДЕРЖАВН А УСТАНОВА "ІНСТИТУТ ПЕДІАТРІЇ, АКУШЕРСТВА І ГІНЕКОЛОГІЇ АМН УКРАЇНИ", UA 3 39532 ся в ньому за допомогою бактеріального мембранного фільтра (Filltropurs). З чистої культури грибів роду Кандіда виділених з статеви х органів жінки готують суспензію мікроорганізмів за стандартом мутності 5 ОД (ГІСКу ім. Л. О. Тарасевича).3 робочої завісі готують серію десятикратних розведень на фізіологічному розчині. При дослідженні використовують розведення 102 для створення на поверхні агаризованого середовища ізольованих колоній. По 1мл суспензії з даного розведення, що відповідає 102КУО/мл вносять в пробірку з 1мл підготовленого розчину цервікального слизу з подальшим сумісним культивуванням на протязі 2 годин при температурі 22°С і висівом на щільне поживне середовище Сабуро. Контролем служать гриби роду Кандіда, засіяні на середовище Сабуро в концентрації 102КУО/мл без додавання цервікального слизу. Чашки інкубують в термостаті при t 22°C протягом 24 годин. Облік результатів проводять за кількістю колоній, що виросли на щільному середовищі після попередньої інкубації. Кількість мікроорганізмів виражають в колонієутворюючих одиницях в 1мл (КУО/мл) біологічного матеріалу. В результаті підрахунку колоній стимулюючу активність цервікального слизу вважають високою при концентрації грибів роду Кандіда 106-108КУО/мл, помірною при концентрації грибів роду Кандіда 104КУО/мл, негативний результат реєструють при концентрації грибів роду Кандіда 102КУО/мл, що відповідає показникам контролю. Приклад 1. Хвора 020315, знаходилась на лікуванні в міському центрі СНІДу. Клінічний діагноз: хронічний сальпінгоофарит. При мікробіологічному дослідженні виділень з статевих органів виявлено значне зниження кількості представників індигенної мікрофлори - лактобацил до 102КУО/мл. Вивчення кількісного рівня умовно-патогенної флори свідчило про активну контамінацію піхви грибами роду Кандіда 106КУО/г. Для визначення стимулюючої активності цервікального слизу на ріст грибів роду Кандіда, 1мл суспензії грибів роду Кандіда що відповідає 102КУО/мл вносили в пробірку з 1мл підготовленого розчину цервікального слизу з подальшим сумісним культивуванням на протязі 2 годин при температурі 22°С і висівом на щільне поживне середовище Сабуро. Контролем служили гриби роду Кандіда, засіяні на середовище Сабуро в концентрації 102КУО/мл без додавання цервікального слизу. Чашки інкубували в термостаті при t 22°C протягом 24 годин. Облік результатів проводили за кількістю колоній, що виросли після інкубації. Кількість мікроорганізмів виражали в колонієутворюючих одиницях в 1мл (КУО/мл) біологічного матеріалу. Згідно розробленого споКомп’ютерна в ерстка А. Крулевський 4 собу, в результаті підрахунку колоній стимулюючу активність цервікального слизу вважали високою при концентрації грибів роду Кандіда 106108КУО/мл, помірною при концентрації грибів роду Кандіда 104КУО/мл, негативний результат реєстрували при концентрації грибів роду Кандіда 102КУО/мл, що відповідає показникам контролю. Цервікальний слиз хворої 020315 стимулював ріст грибів роду Кандіда. Концентрація грибів роду Кандіда після сумісного культивування з цервікальним слизом складала 106КУО/мл (контроль 102КУО/мл), що свідчить про високу стимулюючу активності цервікального слизу. Приклад 2. Хвора 050101,знаходилась на лікуванні в міському центрі СНІДу. Клінічний діагноз: хронічний ендоцервіцит. При мікробіологічному дослідженні виділень виявлено суттєве зниження концентрації лактобацил - до 102КУО/мл. Концентрація стафілококу сапрофітного становила 102КУО/мл. На цьому фоні відмічено збільшення кількості грибів роду Кандіда - 106КУО/мл. Для визначення стимулюючої активності цервікального слизу на ріст грибів роду Кандіда, 1мл суспензії грибів роду Кандіда що відповідає 102КУО/мл вносили в пробірку з 1мл підготовленого розчину цервікального слизу з подальшим сумісним культивуванням на протязі 2 годин при температурі 22°С і висівом на щільне поживне середовище Сабуро. Контролем служили гриби роду Кандіда, засіяні на середовище Сабуро в концентрації 102КУО/мл без додавання цервікального слизу. Чашки інкубували в термостаті при t 22°C протягом 24 годин. Облік результатів проводили за кількістю колоній, що виросли після інкубації. Кількість мікроорганізмів виражали в колонієутворюючих одиницях в 1мл (КУО/мл) біологічного матеріалу. Згідно розробленого способу, в результаті підрахунку колоній стимулюючу активність цервікального слизу вважали високою при концентрації грибів роду Кандіда 106108КУО/мл, помірною при концентрації грибів роду Кандіда 104КУО/мл, негативний результат реєстрували при концентрації грибів роду Кандіда 102КУО/мл, що відповідає показникам контролю. Цервікальний слиз хворої 050101 стимулював ріст грибів роду Кандіда. Концентрація грибів роду Кандіда після сумісного культивування з цервікальним слизом складала 108КУО/мл (контроль 102КУО/мл), що свідчить про високу стимулюючу активності цервікального слизу. Як видно з прикладів, спосіб визначення стимулюючої активності цервікального слизу на ріст грибів роду Кандіда сприяє вияву патологічних змін секрету статевих шля хів у ВІЛ інфікованих жінок та може бути здійснений в лабораторіях мікробіології клінічної та наукової галузі. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601