Експрес-метод прижиттєвої діагностики пастерельозу птиці

Експрес-метод прижиттєвої діагностики пастерельозу птиці, що включає імунологічну реакцію з гемаглютинуючим антигеном, введення антигену у дозі 0,1-0,3мл, штам бактерій, який відрізняється тим, що використовують як носій штам Pasteurella multocida №19-31 у реакції РНГА (реакції непрямої гемаглютинації) з титром 1:8-1:1024, постановку біопроби проводять на птахомолодняку 120-денного віку, вводять антиген підшкірно або у грудний м'яз. (19) (21) u200813545 (22) 24.11.2008 (24) 25.03.2009 (46) 25.03.2009, Бюл.№ 6, 2009 р. (72) СТЕГНІЙ БОРИС ТИМОФІЙОВИЧ, UA, СІКАЧИНА ВАСИЛЬ ІВАНОВИЧ, UA, ПЛИС В'ЯЧЕСЛАВ МИКОЛАЙОВИЧ, UA (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ НАУКОВИЙ ЦЕНТР "ІНСТИТУТ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЇ І КЛІНІЧНОЇ ВЕТЕРИНАРНОЇ МЕДИЦИНИ", UA 3 40245 виявлення в благополучних і неблагополучних стадах субклінічно хворих і птиць - пастерелоносіїв при титруванні антитіл в сироватці крові птиці (метод серодіагностики) та при виявленні бактеріального антигену в патологічному матеріалі (метод швидкого прямого виявлення бактерії пастерельозу). Порівняльний аналіз прототипу з рішенням, яке пропонується дозволяє зробити висновок, що метод експрес-діагностики пастерельозу птиці є новим і оригінальним і до цього часу ніким не розроблений, що відповідає критерію "новизна". Спосіб виконується таким чином. Спочатку готують антиген антитільний еритроцитарний використовуючи Pasteurella multocida №19-31. Для постановки РИГА (реакції непрямої гемаглютинації) готують подвійне розведення досліджуваних сироваток від 1:2 і вище. Для цього в ряд лунок панелі наливають об'єм 0,05 або 0,2см3 гліцеринізованого фізіологічного розчину рН 7,2, потім в першу лунку вносять об'єм досліджуваної сироватки, старанно піпеткують вмістиме і переносять об'єм в другу лунку, потім в третю і т.д. З останньої лунки титрований об'єм вилучають в дезрозчин. Після цього в кожну лунку вносять об'єм антигену в робочому розведенні (1:5). Панелі витримують при температурі +20+24°С протягом 40-60 хвилин. Рекцію враховують у тому випадку, якщо контроль - фізіологічний розчин з 0,5% гліцерину і рівний об'єм антигену в робочому розведенні протягом 60 хвилин осідає на дні лунки у вигляді ґудзика Комп’ютерна верстка Л. Купенко 4 (крапки). Позитивна реакція з досліджуваними сироватками характеризується появою осаду еритроцитів у вигляді парасольки на дні лунки з рівними або зубчастими краями. Негативна реакція з досліджуваними сироватками характеризується випаданням еритроцитів у вигляді ґудзика (крапки) на дні лунки. Діагностичним титром є 1:8. Приклад 1. Для досліду брали курей віком 120 днів без клінічних ознак пастерельозу. Антиген вводили внутрішньом'язово у дозі 0,1 мл, титр в РНГА 1: 64. Через 12 годин позитивна реакція була відмічена у 87% курей. Приклад 2. Для досліду брали курей віком 120 днів без клінічних ознак пастерельозу. Антиген вводили внутрішньом'язово у дозі 0,2мл, титр в РНГА 1:81:1024. Через 2 години позитивна реакція була відмічена у 90% курей. Приклад 3. Контрольна група віком 120 днів становила десять голів. Контакту з бактеріями пастерельозу не мала ( птиця була взята з господарствпостачальників, благополучних щодо інфекційних хвороб у т.ч. і до пастерельозу птиці). Антиген вводили внутрішньом'язово у дозі 0,1мл у РНГА 1:2-1:4. Через 24 години негативна реакція була відмічена у 100% курей. У вітчизняній практиці метод експресдіагностики пастерельозу птиці є новим і оригінальним і до цього часу ніким не розроблений. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601