Спосіб визначення стадій циклу сперматогенного епітелію

Спосіб визначення стадій циклу сперматогенного епітелію шляхом гістологічного дослідження, який відрізняється тим, що тканину яєчка миші забарвлюють гематоксилін-еозином, після цього в сім'яному канальці ідентифікують відповідну стадію циклу сперматогенного епітелію методом виявлення кількості та сполучення шарів в сперматогенному епітелії. (19) (21) u200911257 (22) 06.11.2009 (24) 11.01.2010 (46) 11.01.2010, Бюл.№ 1, 2010 р. (72) ЗАПОРОЖАН ВАЛЕРІЙ МИКОЛАЙОВИЧ, ХОЛОДКОВА ОЛЕНА ЛЕОНІДІВНА, ЩЕРБАТЮК АЛІНА ЛЕОНІДІВНА, ПИХТЄЄВ ДМИТРО МИХАЙЛОВИЧ (73) ОДЕСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ 3 47116 4 гематоксиліном. Відомо, що для будь-яких дослікож морфологічно відрізняються один від одного, і, джень з метою зберігання максимальної достовірв залежності від етапу формування, їх підрозділяності отриманих результатів, обираються дві поють на три типи: тип а представлений клітинами лярні е за морфологічними властивостями стадії. круглої або овальної форми, більший діаметр яких Отже, визначивши стадію сперматогенезу на презнаходиться в радіальному напрямку, тип b паратах, забарвлених ШИК-гематоксиліном, опипредставлений клітинами із витягнутою цитоплазсову частину досліджень доводиться проводити на мою вздовж радіуса канальця, яка майже не ствопрепаратах, забарвлених гематоксилін-еозином. рює обідка навколо базальної частини ядра. Ядра В основу корисної моделі поставлено задачу овальної форми, менші ніж ядра клітин типу а, вдосконалення способу оцінки морфобільший діаметр яких направлений у бік спермафункціонального стану тестикулярної тканини тид. Для клітин типу с притаманні витягнуті в радішляхом ідентифікації стадій циклу СЕ на гістологіальному напрямку ядра, практично не обведені чних препаратах, що їх забарвлюють гематоксицитоплазмою, тільки з боку просвіту. лін-еозином, а потім визначають стадійність, при На одному зрізі канальця не завжди можливо відносно малому збільшенні (х 200), що зручно виявити наявність всіх вказаних шарів та типів для морфометричних досліджень, так як при цьосперматозоїдів. Тому, знаючи послідовність прому до одного полю зору потрапляє більша кільцесу сперматогенезу та морфологічні характерискість сім'яних канальців. Це зменшує кількість потики клітин кожного шару СЕ, визначають їх сполів зору, що необхідні для дослідження, без лучення, яке відповідає конкретній стадії циклу СЕ. зниження статистичної вірогідності отриманих реРозрізняють 7 стадій циклу СЕ для мишей, козультатів. жну з яких позначають формулою, де арабськими Поставлена задача вирішується тим, що, згідцифрами послідовно через кому відображають но корисної моделі, тканину яєчка миші забарвномери шарів, що присутні в даному канальці, і в люють гематоксилін-еозином, після чого в сім'янотих канальцях, в яких присутній четвертий шар СЕ, му канальці ідентифікують відповідну стадію циклу поряд з номером помічають його тип - a, b чи с І сперматогенного епітелію методом виявлення стадії сперматогенезу відповідає формула 1, 2, 3; кількості та сполучення шарів в сперматогенному II стадії - 1 2 4а; III стадії -1 2 4b; IV стадії - 1 2 4с; епітелії. V стадії - 1 2 3 4с; VI стадії - 1 3 4с; VII стадії - 1 3. Спосіб здійснюється наступним чином. При вивченні різних факторів, що впливають на Вилучають тестикули 60 мишей лінії ICR віком сперматогенез, найзручніше використовувати V та 6-7 місяців, які знаходились в стандартних умовах VII стадії, так як вони є протилежними за кількістю віварію, та поміщають їх у 10% розчин формаліну. шарів СЕ, що в них присутні. Через добу поперечним розтином вирізають сереТаким чином, доведено, що запропонований дню частину органу та протягом наступної доби спосіб розподілення циклу СЕ на стадії є більш дофіксовують в 10% розчині формаліну. Провопрактичним за прототип, тому що він є простим, дять спиртами зростаючої концентрації, роблять економічним та дозволяє вивчати сім'яні канальці, парафінові зрізи завтовшки 3-5мкм та зафарблюзберігаючи комплексність підходу до вивчення ють гематоксилін-еозином. Структуру яєчок виморфологічного стану яєчок. вчають під світловим мікроскопом (збільшення х У порівнянні з прототипом, запропоноване те100; х 200). хнічне рішення дозволяє також за рахунок визнаНа поперечних зрізах канальців існує 3-5 почення стадійності на зрізах яєчок, зафарбленні пуляцій клітин СЕ, що розташовані концентричнигематоксилін-еозином та на порівняно малому ми шарами, при цьому клітини більш ранніх попузбільшені досягти значного прогресу у вивченні ляцій знаходяться ближче до базальної мембрани стану яєчок, а саме, проводити як морфометричні, сім'яного канальця. Розподілення статевих клітин так і описові дослідження на одному препараті. різних стадій розвитку в складі СЕ не є випадкоЛітература: вим, вони створюють сполучення строго постійно1. Leblond С.Р. Spermiogenesis in rat, mouse, го складу. Згідно до корисної моделі, весь пласт hamster and guinea pig as revealed by the "periodic СЕ умовно підрозділяють на чотири шари, перший acid-fuchsin sulfurous acid" technigue / С. Р. Leblond, з яких представлений сперматогоніями (зона розY. Clermont // American journal of anatomy. - 1952. поділення), другий шар -сперматоцитами І порядку V.90 - P.167-215. (зона росту), третій шар - сперматоцитами II по2. Leblond C.P. Definition of the stages of the рядку та сперматидами (зона дозрівання) та четcycle the seminiferous epithelium in rat / С.P. вертий шар - сперматозоїдами (зона формування). Leblond, Y. Clermont // Ann. N. Y. Acad. Sci. - 1952. Сперматозоїди в окремих сім'яних канальцях таV.55-P.548-573. Комп’ютерна верстка В. Мацело Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601