Спосіб звільнення діагностичних зразків сироваток крові птиці від неспецифічних інгібіторів

Спосіб звільнення діагностичних зразків сироватки крові птиці від неспецифічних інгібіторів, що включає прогрівання протягом 30хв. та охолодження, який відрізняється тим, що прогрівають за температури (56±2)°С та додатково одноразово заморожують та відтаюють до кімнатної температури. (19) (21) u200910681 (22) 22.10.2009 (24) 12.07.2010 (46) 12.07.2010, Бюл.№ 13, 2010 р. (72) ДРАГУТЬ СВІТЛАНА СЕРГІЇВНА, СТЕГНІЙ АНТОН БОРИСОВИЧ, СТЕГНІЙ МАРИНА ЮРІЇВНА (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ НАУКОВИЙ ЦЕНТР "ІНСТИТУТ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЇ І КЛІНІЧНОЇ ВЕТЕРИНАРНОЇ МЕДИЦИНИ" 3 51136 заморожуванню одноразово на будь-який час. Після розморожування до кімнатної температури сироватки використовують у дослідженнях. Приклад 1 Для дослідження в реакціях (РИГА та РЗГА) брали 8 зразків сироваток крові індиків специфічних щодо вірусу інфекційного бронхіту курей (ІБК) з метою звільнення від неспецифічних інгібіторів і готували наступним чином. Оброблення першої партії зразків сироваток крові проводили за допомогою прогрівання у водяній бані за температури 56°С протягом 30 хвилин та охолодження у холодильній камері до кімнатної температури. Другу партію сироваток після прогрівання за температури 56°С протягом 30 хвилин та охолодження у холодильній камері піддавали одноразовому заморожуванню. Досліджували ці сироватки після відтаювання за кімнатної температури. За одержаними результатами встановлено, що середній титр сироваток крові індиків другої партії після оброблення прогріванням за температури 56°С та одноразовим заморожуванням перевищував середній титр сироваток крові індиків, оброблених класичним методом (прогріванням за температури 56°С без наступного заморожування) на 3,23% в РИГА та на 19,4% в РЗГА. При цьому статистичний аналіз рівня вірусспецифічних антитіл, визначеного в РИГА та РЗГА, показав середній рівень їх кореляції, який визначали за коефіцієнтом кореляції (r=0,5). Комп’ютерна верстка О. Рябко 4 Приклад 2 В реакції непрямої гемаглютинації (РНГА) були досліджені дві партії вірусспецифічних сироваток крові птиці щодо ІБК по 10 зразків-аналогів, які піддавали прогріванню у водяній бані впродовж 30 хвилин за температури 56°С, без заморожування та з наступним одноразовим заморожуванням. Зразки сироваток після прогрівання витримували впродовж 18 годин за температури, відповідно, (+4) та (-25)°С. Після розморожування сироваток другої партії та витримування сироваток обох партій за кімнатної температури були визначені рівні вірусспецифічних антитіл. Встановлено, що середній титр вірусспецифічних щодо ІБК антитіл в сироватках крові птиці, які піддавали одноразовому заморожуванню порівняно з сироватками, які не заморожували, перевищував цей показник на (41,2-50)%. При цьому реакція з цими сироватками протікала більш чітко. Більш високий рівень визначених антитіл, а також більша чіткість реакції з сироватками, які заморожували, свідчать про відсутність неспецифічних інгібіторів. Таким чином, перевага даного способу полягає у простоті, надійності отриманих результатів в серологічних реакціях, одержанні прозорих сироваток, які не вимагають подальшого освітлювання центрифугуванням і не потребують спеціального обладнання та реактивів. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601