Спосіб отримання засобу, який має секретиноподібну дію

Спосіб отримання засобу, який має секрети ноподібну дію, що включає заморожування дванадцятипалих кишок свиней, їх подрібнення, екстракцію кислотою, центрифугування, фільтрацію та висушування, який відрізняється тим, що подрібнення сировини проводять до гомогенату, екстрагують кислотою протягом 2 - 5 годин, для очистки продукту центрифугують рідину при 2500 об/хв і температурі 0 - 4°С, надосадову рідину діалізують, до діалізату додають адсорбент, а цільовий продукт осаджують ацетоном Винахід відноситься до медицини, а саме до способів отримання біологічно активних речовин із тваринної сировини і може бути використаний для отримання засобу, який має секретиноподібну дію Травні гормони які є біологічно активними речовинами, здійснюють суттєвий вплив на функції органів травлення, їх широко застосовують як для діагностики, так і для лікування ряду захворювань органів травлення Проводяться численні досліди по їх отриманню ХІМІЧНИМ шляхом, а також з природної сировини Відомий спосіб отримання препарату поліпептидної природи із дванадцятипалих кишок тварин, який включає автоліз сировини екстрагування продукту, осад активної фракції та очистку цільового продукту (Патент Великобританії 1348335 МПК-А61К35/38, 1974) Відомий також спосіб отримання препарату для діагностики підшлункової залози, який включає гомогенізацію попередньо замороженої та подрібненої сировини, автоліз, який проводять при температурі від 40°С до 45°С протягом 72 годин в присутності соляної кислоти, добавленої із розрахунку 50мл на 1кг сировини (Патент Франції № 153619 МПК А61К 35/38) Цей спосіб включає велику КІЛЬКІСТЬ трудомістких операцій, має значну тривалість процесу в часі (майже 200 годин), одержання цільового продукту у вигляді екстракту, що перешкоджає його тривалому зберіганню Відомий спосіб одержання засобу для діагностики захворювань підшлункової залози, який враховує прогрів сировини перед заморожуванням при 97 - 100°С, екстрагування оцтовою кислотою при рН 3,0 - 4,0 і температурі 20 - 25°С, центрифугування, очищення надосадкової рідини активованим вугіллям та осадження баластних білків при температурі 2 - 6°С і рН 4,0 - 5,0 протягом 1 6 - 1 8 годин, стабілізацію розчину, фільтрацію та ліофільне висушення (Авт Свід СРСР № 683746 кл А 61 К35/12.1979) Цей засіб прийнятий за прототип Однак цей засіб трудомісткий, тривалий, супроводжується великими затратами та включає в процес обладнання, яке дорого коштує, та дотримання ряду умов, які забезпечують одержання цільового продукту, придатного для внутрішнього застосування В основу винаходу поставлене завдання створити такий спосіб одержання засобу, який має секретиноподібну дію, в якому нове сполучення операцій дозволило б скоротити тривалість процесу, спростити його виконання та одержати активний цільовий продукт для перорального застосування Вирішення поставленого завдання згідно з предметом винаходу здійснюється заморожуванням дванадцятипалих кишок свиней, їх наступним подрібненням, екстракцією активних речовин оцтовою кислотою, центрифугуванням, фільтрацією та висушуванням, при цьому подрібнення сировини призводить до гомогената Екстракцію оцтовою кислотою здійснюють протягом 2 - 5 годин, центрифугування проводять при 0 - 4°С та швидкості не менше 2500об/хв Надосадкову рідину діалізують, до діалізату додають адсорбент, а цільовий продукт осаджують ацетоном При зіставленому аналізу ознак прототипу та ю 51410 способу, який заявляється, встановлено, що вони мають загальні ознаки До їх числа відносять - заморожування сировини, - и подрібнення, - екстрагування активних речовин оцтовою кислотою, - центрифугування, - фільтрація, - висушування, ВІДМІННИМИ ознаками є - подрібнення сировини проводять до утворення гомогенату, - екстрагування кислотою проводять протягом 2 - 5 годин, - центрифугування проводять при температурі 0 - 4°С, - проведення діалізу надосадкової рідини, - до діалізату додають адсорбент, - цільовий продукт осаджують ацетоном, Сполучення загальних і ВІДМІННИХ ознак дозволяє вирішити завдання винаходу і при його використанні одержати технічний результат Спосіб, який заявляється, відповідає критеріям винаходу Спосіб одержання засобу, який має секретиноподібну дію, здійснюється таким чином Дванадцятипалі кишки свиней піддають кип'яченню протягом 10 хвилин з послідуючим заморожуванням при -20°С Перед початком технологічного процесу сировину подрібнюють до гомогенної маси, проводять екстракцію 0,5М оцтовою кислотою в співвідношенні 1 частина сировини та 3 частини кислоти, протягом 2 - 5 годин при температурі 20 - 25°С, потім проводять фільтрацію і центрифугування протягом ЗО хвилин при температурі 0 - 4°С та швидкості не менше 2500об/хв 3 наступним прогрівом центрифугата при 60°С протягом 1 години, його охолодженням та повторним центрифугуванням за тих же умов Центрифугат діалізують проти поліетиленгліколю протягом 1 години, додають адсорбент в співвідношенні 1 100 Активний продукт осаджують ацетоном, ВІДДІЛЯЮТЬ вакуумною фільтрацією та осад сушать ацетоном палі кишки свиней після вилучення в убійному цеху промивають холодною водою і кип'ятять 10 хвилин Прокип'ячені кишки заморожують при температурі -20°С Перед початком технологічного процесу сировину подрібнюють до гомогенної маси і до 5кг подрібненої сировини додають 15л 0,5М оцтової кислоти при постійному помішуванні Екстракцію здійснюють протягом 2 - 5 годин, температурі 20 - 25°С Після закінчення екстрагування сировину фільтрують крізь два шари марлі, фільтрат центрифугують на рефрижераторній центрифузі ЗО хвилин при температурі 0 - 4°С і 2500об/хв Надосадкову рідину прогрівають на водяній бані при 60°С протягом 1 години, охолоджують і для осаду баластних білків знову центрифугують при 0 - 4°С протягом ЗО хвилин 2500об/хвилину Проводять діаліз надосадкової рідини проти поліетиленгліколю протягом 1 години До діалізату додають адсорбент, наприклад у співвідношенні 1 100 Осаджують активний продукт ацетоном, розділяють вакуумною фільтрацією і осад висушують ацетоном Вихід ЦІЛЬОВОГО продукту 70г з активністю 1,5 кл од/мг Активність продукту перевіряють відомим методом (Svatos A// Jehnek V Gastromtestinalm hormom, II Titrace secretmu na Krysach // Ceskoslovenska, Fiziologie —1957 — z VI — № 2 — s 220 - 223 Отриманий кінцевий продукт являє собою порошок білого кольору, з активністю 1 - 2 кл од/мг, придатний до таблетування Перевірка відкриття, проведена в лабораторії біохімії Інституту гастроентерології АМН України і у цеху медпрепаратів Дніпропетровського м'ясокомбінату, показала, що тривалість технологічного процесу виробництва препарату складає 1 2 - 1 5 годин, що дозволяє інтенсифікувати технологічний процес в 10 - 12 разів в порівнянні з відомими способами Крім того, винахід який заявляється, виключає використання трудомістких операцій, дефіцитних реактивів та приладів Спосіб дозволяє отримати засіб, який може бути використаним для діагностики та лікування захворювань органів травлення, наприклад, хронічного панкреатиту Приклад конкретного виконання дванадцяти ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71