Спосіб оцінки функціональної активності культур оваріальної тканини
Номер патенту: 55070
Опубліковано: 17.03.2003
Автори: Друпп Юрій Григорович, Слободюк Ігор Вікторович, Слюсарев Олексій Аркадійович, Зябліцев Сергій Володимирович, Ракша-Слюсарева Олена Анатоліївна, Ніколенко Юрій Іванович
Формула / Реферат
Спосіб оцінки функціональної активності культури оваріальної тканини шляхом введення у культуру оваріальної тканини синтетичного аналогу стимулюючого гормону та наступної інкубації культури оваріальної тканини, після чого визначають концентрацію гормону та порівнюють її з контролем, який відрізняється тим, що як синтетичний аналог гормону гіпофізу використовують гонадотропін менопаузний, інкубацію проводять протягом 3-4 годин та за умови збільшення концентрації естрадіолу-17 бета (Е2) у 2 рази або більше порівняно з контролем вважають культуру оваріальної тканини функціонально активною.
Текст
Спосіб оцінки функціональної активності культури оваріальної тканини шляхом введення у культуру оваріальної тканини синтетичного аналогу стимулюючого гормону та наступної інкубації культури оваріальної тканини, після чого визначають концентрацію гормону та порівнюють її з контролем, який відрізняється тим, що як синтетичний аналог гормону гіпофізу використовують гонадотропін менопаузний, інкубацію проводять протягом 3-4 годин та за умови збільшення концентрації естрадюлу-17 бета (Е2) у 2 рази або більше порівняно з контролем вважають культуру оваріальної тканини функціонально активною Спосіб оцінки функціональної активності культур оваріальної тканини, що заявляється, відноситься до області медицини, зокрема до досліджень в експериментальній медицині і може бути використаний для оцінки активності культур тканин в експериментальній і КЛІНІЧНІЙ медицині Найбільш близьким по технічній суті способу, що заявляється, є спосіб оцінки функціональної активності культур оваріальної тканини [І Е І Легач "Синтез кортизолу тканинними і клітинними культурами кори надниркових залоз новонароджених і статевозрілих свинь" / Проблеми кріобюлопі, 1997, №3] шляхом відбирання 2мл надосадкової рідини з подальшим визначенням в ній концентрації гормону (контроль), потім введенням у культуру стимулюючого гормону - синтетичного аналогу гормону гіпофіза з подальшою інкубацією протягом 1-4 годин, після чого визначали КІЛЬКІСТЬ гормону в надосадковій рідині і порівнювали отримані дані з контролем, культуру вважали функціонально активною за умови збільшення концентрації гормону у 2 рази і більше При цьому в якості стимулюючого гормону використовували синтетичний аналог АКТГ синактен, в надосадковій рідині визначали гормон кори надниркових залоз кортизол, а в якості контролю використовували надосадкову рідину культури без додання синактена В основу винаходу поставлена задача створення способу оцінки функціональної активності культур оваріальної тканини шляхом попереднього визначення концентрації естрадюлу-17бета(Е2) у культуральній рідині (контроль), потім вибірної стимуляції клітин синтетичним аналогом фолікулостимулюючого гормону (ФСГ) гонадотропшу менопаузного з подальшою інкубацією протягом 34 годин і визначенням у надосадковій рідині гормону естрадюлу - 17бета (Е2) та порівнянням з контролем, що дає можливість підвищення точності оцінки функціональної активності клітин культури оваріальної тканини та їх рецепторного апарату зв'язування ФСГ Недоліком відомого способу є порівняно низька точність визначення функціональної активності культури у зв'язку з великою різницею в термінах інкубації і невибірним стимулюванням культури Суть способу полягає в тому, що визначення функціональної активності культур оваріальної тканини здійснюють шляхом попереднього відбирання 2мл культуральної рідини з подальшим визначенням у ній естрадюлу-17бета (Е2) методом імуноферментного аналізу, потім введенням у культуру оваріальної тканини синтетичного аналогу ФСГ гонадотропшу менопаузного з подальшою інкубацією її протягом 3-4 годин, потім визначенням у надосадковій рідині естрадюлу - 17бета (Е2) методом імуноферментного аналізу (ІФА) і порівнянням отриманих даних з контролем, культуру оваріальної тканини вважали функціонально активною у разі двократного наростання концентрації естрадюлу - 17бета (Е2) у надосадковій рідині в порівнянні з контролем Новим в способі, що заявляється, є те, що в о ю ю 55070 якості стимулюючого гормону використовували синтетичний аналог ФСГ гонадотропш менопаузний, а інкубацію проводили протягом 3-4 годин Використання гонадотропшу менопаузного дозволяє здійснити вибірну стимуляцію синтезу естрадюлу клітинами культури оваріальної тканини, інкубація протягом 3-4 годин є оптимальною для синтезу такої КІЛЬКОСТІ естрадюлу, яка дозволить порівняно точно оцінити функціональну активність культури оваріальної тканини Спосіб реалізовують таким чином Проводять відбирання 2мл надосадкової рідини від культури оваріальної тканини у пробірку (контроль), потім у флакон з культурою оваріальної тканини додають гонадотропін менопаузний піпеткою з розрахунку 0 2МО/мл, після чого флакон вміщують у термостат та шкубують при температурі 36-37°С протягом 3-4 годин, по закінченні відбирають 2мл надосадкової рідини піпеткою в пробірку, потім в цій та контрольній пробірках визначають концентрацію естрадюлу-17 бета (Е2), культуру вважають функціонально активною за умов двократного збільшення концентрації естрадюлу-17 бета (Е2) у ДОСЛІДНІЙ пробірці у порівнянні з контролем У результаті використання гонадотропіну менопаузного добиваються вибірної стимуляції синтезу естрадюлу клітинами культури оваріальної тканини, оскільки ця речовина є синтетичним аналогом ФСГ, а інкубація протягом 3-4 годин є оптимальною для синтезу достатньої КІЛЬКОСТІ естрадіолу-17бета (Е2) Приклад 1 3 флакона з культурою оваріальної тканини відбирали 2мл надосадкової рідини піпеткою у пробірку (контрольний зразок) У флакон додавали піпеткою гонадотропін менопаузний із розрахунку 0 2МО/мл Флакон з культурою оваріальної тканини вміщували у термостат та шкубували протягом 4 годин при температурі 37°С Після закінчення терміну інкубації з флакона піпеткою відбирали 2мл надосадкової рідини у пробірку (дослідний зразок) В обох пробірках визначали концентрацію естрадюлу-17 бета (Е2) методом ІФА У контрольному зразку вона становила 0 114нмоль/л, а у дослідному зразку 0 229нмоль/л Таким чином, спостерігали двократне збільшення концентрації естрадюлу-17бета (Е2) у дослідному зразку у порівнянні з контрольним і на підставі цього вважали культуру функціонально активною культурою оваріальної тканини піпеткою додавали гонадотропін менопаузний із розрахунку 0 2МО /мл Флакон вміщували в термостат та шкубували протягом 1 години при температурі 37°С По закінченні терміну інкубації з флакона піпеткою відбирали 2мл надосадкової рідини у пробірку (дослідний зразок) В обох пробірках визначали концентрацію естрадюлу-17 бета (Е2) методом ІФА У контрольному зразку вона становила 0 11нмоль/л, а у дослідному 0 152нмоль/л Таким чином, спостерігали збільшення концентрації естрадюлу-17 бета (Е2) у дослідному зразку в порівнянні з контрольним менш ніж в два рази і на підставі цього вважали культуру оваріальної тканини недостатньо активною внаслідок малого терміну її інкубації Приклад З З флакона з культурою оваріальної тканини відбирали піпеткою 2мл надосадкової рідини у пробірку (контрольний зразок) У флакон з культурою оваріальної тканини піпеткою додавали гонадотропін менопаузний з розрахунку 0 2МО/мл Флакон вміщували у термостат та шкубували протягом 2 годин при температурі 37°С По закінченні терміну інкубації з флакона піпеткою відбирали 2мл надосадкової рідини у пробірку (дослідний зразок) В обох пробірках визначали концентрацію естрадюлу - 17 бета (Е2) методом ІФА У контрольному зразку вона становила 0 112нмоль/л, а у дослідному 0 167нмоль/л Таким чином, спостерігали збільшення концентрації естрадюлу-17 бета (Е2) у дослідному зразку у порівнянні з контрольним менш ніж у два рази і на підставі цього вважали культуру оваріальної тканини недостатньо активною внаслідок малого терміну и інкубації Використання заявленого способу оцінки функціональної активності культур оваріальної тканини дозволяє досить точно виявити стан клітин, що культивуються і за умов збереження їх функціональної активності розраховувати на позитивний ефект від трансплантації такої культури для замісноі гормонотерапії Джерела інформації 1 Е І Легач " Синтез кортизолу тканинними і клітинними культурами кори надниркових залоз новонароджених і статевозрілих свинь" // Проблеми крюбиологґі 1997, №3 Приклад 2 3 флакона з культурою оваріальної тканини відбирали піпеткою 2мл надосадкової рідини у пробірку (контрольний зразок) У флакон з Підписано до друку 03 04 2003 р Тираж 39 прим ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethod for assessing functional activity of ovarian culture
Автори англійськоюSlusarev Oleksii Arkadiiovych, Raksha-Sliusareva Olena Anatoliivna, Nikolenko Yurii Ivanovych
Назва патенту російськоюСпособ оценки функциональной активности культуры овариальной ткани
Автори російськоюСлюсарев Алексей Аркадьевич, Ракша-Слюсарева Елена Анатолиевна, Николенко Юрий Иванович
МПК / Мітки
МПК: A61K 35/50
Мітки: активності, функціонально, спосіб, оцінки, тканини, культур, оваріальної
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/2-55070-sposib-ocinki-funkcionalno-aktivnosti-kultur-ovarialno-tkanini.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб оцінки функціональної активності культур оваріальної тканини</a>
Попередній патент: Роторно-пульсаційний апарат
Наступний патент: Спосіб вибілювання зубів (варіанти)
Випадковий патент: Спосіб улаштування монолітного залізобетонного безбалкового перекриття