Спосіб одержання екстракту з коренів тирличу ваточникоподібного, який проявляє гепатозахисну активність

Винахід відноситься до медицини, а саме до фармації і стосується створення нового рослинного засобу, одержаного з коренів тирличу ваточникоподібного (Gentiana asclepiadea L.) з гепатозахисною активністю. Відомий спосіб одержання екстракту тирличу бородатого, який рекомендований при захворюваннях гепатобіліарної системи (Самбуева З.Г. О биологической активности экстракта горечавки бородатой // Оценка биологической активности растений Забайкалья. - Улан-Уде, 1985. - С.51-54). Рід тирлич об'єднує 16 видів рослин, розповсюджених на території України. Офіціальними видами є тирлич жовтий і тирлич крапчастий, а додатковою і рівноцінною сировиною до вказаних видів може бути тирлич ваточникоподібний, який має аналогічний вміст біологічно активних речовин. В науковій та народній медицині широко використовують препарати коренів тирличу жовтого, тирличу крапчастого і тирличу ваточникоподібного у вигляді водних витяжок для загального зміцнення організму, при захворюваннях печінки, жовчнокам'яній хворобі, а також для покращення функціональної активності травних залоз. Тирлич жовтий і тирлич крапчастий занесені до Червоної книги України, тому заготівля сировини заборонена. В основу винаходу поставлено завдання розширення спектру препаратів, які мають гепатозахисну активність, в яких в якості сировини використовують корені тирличу ваточникоподібного, забезпечується нова схема одержання екстракту, який має вищезгадані властивості і за рахунок чого одержаний екстракт можна використовувати при захворюваннях гепатобіліарної системи. Поставлене завдання вирішується тим, що згідно зі способом одержання екстракту з коренів тирличу ваточникоподібного з гепатозахисною активністю, який включає використання підземних органів рослини і органічного екстрагенту, сировину тирличу ваточникоподібного екстрагують 40% етиловим спиртом у співвідношенні сировина-екстрагент 1:10-1:20, одержані витяжки об'єднують і фільтрують. Спосіб одержання екстракту тирличу ваточникоподібного здійснюється наступним чином. Корені тирличу ваточникоподібного попередньо висушують і подрібнюють в грубий порошок з розміром частин 3-5мм. Подрібнену сировину екстрагують 40% спиртом етиловим при температурі 40°С протягом 30-60хв. Або при температурі 20°С протягом 7-10 діб у співвідношенні сировина-екстрагент 1:10-1:20. Екстракцію повторюють 2-3 рази. Об'єднані витяжки фільтрують. Одержана витяжка являє собою прозорий розчин жовто-оранжевого кольору із специфічним запахом та гіркуватим смаком. У екстракті виявлено іридоїди, ксантони, встановлено кількісний вміст екстрактивних речовин. Результати проведених досліджень з встановлення оптимальних умов одержання екстракту з коренів тирличу ваточникоподібного наведені в таблиці 1. Таблиця 1 № з/п 1. 2. 3. 4. 5. 6. Оптимальні умови екстракції біологічно активних речовин з коренів тирличу ваточникоподібного Вміст екстракПоказник тивних речовин, % 5-6мм 12,67 Розмір 3-5мм 18,06 частин 1-3мм 23,92 Вода очищена 19,30 20% спирт етиловий 19,60 Вид 40% спирт етиловий 19,64 екстрагенту 70% спирт етиловий 19,07 90% спирт етиловий 18,48 96% спирт етиловий 14,58 15хв. 13,30 30хв. 13,84 Час 60хв. 14,25 екстракції 90хв. 14,39 180хв. 14,46 1:2,5 6,76 Співвідно1:5 11,77 шення між 1:10 13,32 сиро-виною і 1:15 15,64 екстра1:20 17,74 гентом 1:25 19,67 I 13,83 Кратність II 6,47 екстракції III 2,74 Температурні 20°C 12,65 межі 40°C 13,68 екстракції 60°C 14,43 80°C 14,82 100°C 14,84 Концентрація спирту етилового 40% вибрана тому, що дозволяє максимально екстрагувати діючі речовини; співвідношення сировина-екстрагент 1:10-1:20 тому, що нижче співвідношення не дозволяє максимально екстрагувати діючі речовини, а вище - є технологічно недоцільним; екстракцію проводили при температурі 40°С, оскільки основні діючі речовини - іридоїди, є термолабільними речовинами. Спосіб одержання екстракту з коренів тирличу ваточникоподібного ілюструється наступними прикладами. Приклад 1. 100г попередньо висушених і подрібнених в грубий порошок коренів тирличу ваточникоподібного з діаметром частин 3-5мм екстрагуємо 1000мл 40% етилового спирту в круглодонній колбі зі зворотнім холодильником при температурі 40°С протягом 30хв. Сировину відтискаємо. Екстракцію повторюємо 2 рази. Екстракти об'єднуємо, фільтруємо, доводимо одержану витяжку екстрагентом до попереднього об'єму. Вміст екстрактивних речовин становить 20,4% . Приклад 2. 100г попередньо висушених і подрібнених в грубий порошок коренів тирличу ваточникоподібного з діаметром частин 3-5мм екстрагуємо 1000мл 40% етилового спирту в колбі при температурі 20°С протягом 7 діб. Сировину відтискаємо. Екстракцію повторюємо 2 рази. Екстракти об'єднуємо, фільтруємо, доводимо одержану витяжку екстрагентом до попереднього об'єму. Вміст екстрактивних речовин становить 20,2%. Дослідження гепатозахисних властивостей. Експериментальні дослідження екстракту коренів тирличу ваточникоподібного проводили на моделі гострого токсичного гепатиту, викликаного підшкірним введенням щурам 50% олійного розчину тетрахлорметану протягом 2 діб у дозі 0,8мл на 100г маси тварин. Екстракт коренів тирличу ваточникоподібного в дозі 0,02мг/кг і препарат порівняння - біофлавоноїдий гепатопротектор силібор в дозі 0,04мг/кг вводили в лікувально-профілактичному режимі: за 1год. до введення тетрахлорметану і через 2год. після введення гепатотоксину. Функціональний стан печінки оцінювали за показниками активності ферменту аланінамінотрансферази (АлАТ) у сироватці крові та малонового диальдегіду (МДА) в сироватці крові та гомогенаті печінки. Результати досліджень свідчать, що екстракт коренів тирличу ваточникоподібного проявляє при токсичних ураженнях печінки антиоксидантну та антицитолітичну активність, яка практично не поступається гепатопротекторній дії препарату силібор.