Штам paenibacillus polymyxa – продуцент гетерополісахариду

Штам бактерій Paenibacillus polymyxa IMBB7027, який продукує гетерополісахарид. (19) (21) 20031212435 (22) 25.12.2003 (24) 15.11.2004 (46) 15.11.2004, Бюл. № 11, 2004 р. (72) Болоховська Валентина Антонівна, Болоховський Владислав Вікторович, Воцелко Світлана 3 71374 4 Ріст можливий при температурі від +20°С до Середня молекулярна маса гетерополісаха+40°С, оптимальний ріст при+(28±1)°С. риду ІMB В 7027, визначена методом седиментації Примітний ріст та біосинтез гетерополісахарита дифузії, складає 8·104-2,8·106 Дальтон і вища за ду можливий при рН6,0-8,0, оптимальні умови молекулярну масу ГПС В-4902 (3·104-1,0·106). рН7,0-7,5. Приклад 1. Клітини штаму Paenibacillus poМаксимум накопичення Енпосаму (25-30г/л) lymyxa В-7027. а також штаму-прототипу В-4902, досягається на 30-38 години росту, ефективна вирощені при 30°С протягом 2 діб на картоплянов'язкість культуральної рідини 256сП. му агарі петлею вносять в колби об'ємом 750мл з Отримання гетерополісахариду з використан150мл середовища наступного складу мас.%: в ням штаму Paenibacillus polymyxa ІMB В-7027 відякості джерела вуглецю мелясу (освітлена) - 10, бувається наступним чином. зелену патоку - 10, гідролізований (різніого ступеКультуру вирощують на середовищі, яке місню) кукурудзяний крохмаль – 30, цукор - 50 або тить джерело вуглецю, азоту та мікроелементи, глюкозу - 70, в якості джерела азоту - кормові дрікрохмаль кукурудзяний або цукор-пісок, дріжджі жджі - 0,15-0,75, кукурудзяний екстракт - 0.75-1.5, кормові, калій фосфорнокислий одно -та двозаміавтолізт дріжджів - 0.5-0,75. пептон - 0,15-0,5, сущений, магній сірчанокислий, кальцій хлористий, льфат амонію – 0,03-0,08, нітрат натрію крейда). В якості вихідного матеріалу використо0,0500,12, одно - та двозамісний фосфат калію по вують 48-годинну культуру, що виросла на карто0,05, сульфат магнію - 0,2 та хлористий кальцій пляному агарі при температурі (30±1)°С. Розмно0,02. ження культури проводять у 750мл колбах з 150мл Культивування проводять на обертаючій качасередовища (за складом аналогічним ферменталці (220об/хв), при температурі 30°С протягом 24ційному середовищу) при (30±1)°С в умовах аера28 годин. Вирощеним і перевіреним на чистоту ції на качалках (220-240)об/хв протягом 32 годин. інокулюмом засівають (5,0%) ферментаційне сеПосівний матеріал асептично вносять в колби з редовище і вирощують 38 годин при тих самих ферментаційним середовищем. Ферментацію проумовах, що й інокулюм. водять в колбах на качалках при температурі Вихід ГПС визначають ваговим методом в г/л. (30±1)°С та рН середовища 7,0 в умовах аерації Один з найхарактерніших показників якості на качалках 220-240об/хв протягом 38-40 годин. В ГПС - в'язкість культуральної рідини (к.р.) виза у кінці інкубації бактеріальні клітини відокремлюють ГПС, що продукується штамом ІMB В-7027 ніж центрифугуванням або фільтруванням. Гетеропоштамом В 4902. В'язкість к.р. визначають віскозилісахарид із культуральної рідини осаджують етаметром капілярного типу (ВПЖ-2). нолом. Рівень накопичення гетерополісахариду в Приклад 2. Вирощування посівного матеріалу культуральній рідині - 25-30г/л. та ферментацію штамів ІMB В-7027 та В-4902 проПісля висушування гетерополісахарид має виводять по прикладу 1, скорочуючи час культивугляд легкого пухнастого порошку жовтуватого відвання до 30 годин. тінку, який легко розчиняється у воді, утворюючи Результати по рівню накопичення ГПС та в'язв'язкі розчини. Препарат складається з глюкози кості в культуральній рідині наведено в таблиці 1. (44±4,5)% манози (34±3) 6%, глюкози (22±2,3)%. а також глюкуронова і піровиноградна кислоти. Таблиця 1 Показники Накопичення гетерополісахарида на стадії біосинтезу, г/л Оптимальна тривалість процесу культивування, год. Ефективна в'язкість культуральної рідини, сСт Оптимальна температура, °С Оптимальний рН Запропоновані приклади показують, що штам Paenibacillus polymyxa ІMB В-7027 перевищує по виходу ГПС штам-прототип В-4902 на 25-30%. При Комп’ютерна в ерстка В. Мацело Штам-прототип 15-20 36-40 4±0,5 28±1 7,0±0,2 Запропонований штам 20-30 30-38 5±0,5 28±1 7,0±0,2 цьому ефективна в'язкість культуральної рідини штаму ІMB В 7027 на 10-20% вища, ніж у штаму В4902. Підписне Тираж 37 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601