Протипухлинна водорозчинна фармацевтична композиція (варіанти) та спосіб лікування (варіанти)

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, которые используются при лечении рака, аутоиммунных болезней и рестеноза. Настоящее изобретение относится также к получению фармацевтических антираковых средств, таких как паклитаксел (таксол) и доцетаксел (таксотер), особенно к получению водо-растворимого паклитаксела, путем конъюгирования этого лекарственного средства с водо-растворимыми фрагментами различных химических соединений. Паклитаксел, как средство против клеточных микротрубок, экстрагированный из игл и коры тикового дерева Taxus brevi-folia, проявил интересное антиопухолевое действие в испытаниях при лечении рака человека в стадии I и в испытаниях при лечении ранней стадии II и III (Horwitz et al., 1933). Это испытание было описано, глазным образом, для запущенного рака яичников и молочной железы. Существенная активность была подтверждена в случаях мелкоклетчатого и немелкоклетчатого рака легкого, рака головы и шеи и метастатической меланомы. Однако, основной трудностью при разработке паклитаксела для использования в клинических испытаниях была его нерастворимость в воде. Доцетаксел полусинтетически получают из 10-деацетилбаккатина III, нецитотоксичного предшественника, экстрагированного из игл Taxus baccata, и этерифицированного химически синтезированной боковой цепью (Cortes and Pazdur, 1995). Было показано, что к доцетакселу восприимчивы различные раковые клеточные линии, включая рак молочной железы, легкого, яичников и колоректальный рак и меланомы. В клинических испытаниях доцетаксел использовали для достижения полной или частичной восприимчивости при раке молочной железы, яичников, головы и шеи и злокачественной меланоме. Паклитаксел, как правило, изготовляют в виде концентрированного раствора, содержащего 6мг паклитаксела на миллилитр кремофора EL (полиоксиэтилированное касторове масло) и обезвоженного спирта (50%, об./об.), его нужно до введения далее разбавить (Goldspiel, 1994). Количество кремофора EL, необходимого для доставки требуемых доз паклитаксела, значительно выше, чем количество, которое вводят с любым другим лекарственным средством, которое изготовляют в кремофоре. Кремофору было приписано несколько токсичных действий, включая расширение кровеносных сосудов, одышку и гипотензию. Было также показано, что этот наполнитель вызывает серьезную повышенную чувствительность у лабораторных животных и людей (Weiss et al., 1990). Действительно, максимальная доза паклитаксела, которую можно ввести мышам внутривенной инъекцией болюса, определяется острой летальной токсичностью наполнителя кремофора (Eisemann et al., 1994). Кроме этого, известно, что кремофор EL, поверхностно-акшвное вещество, выщелачивает фталатные пластификаторы, такие как: ди(2-этилгексил)фталат (ДЭГФ) из поливинилхлоридных мешочков и трубок для внутривенного введения. Известно, что ДЭГФ вызывает гепатотоксичкость у животных и карциногенен для грызунов. Показано также, что этот препарат паклитаксела со временем образует частицы вещества и, таким образом, во время введения необходимо фильтрование (Goldspiel, 1994). Поэтому, для получения и введения растворов паклитаксела необходимы специальные меры предосторожности, чтобы обеспечить безопасную доставку лекарственного средства пациенту, и эти меры предосторожности неизбежно ведут к более высокой стоимости. Предыдущие попытки получения растворимого в воде паклитаксела включали получение пролекарства паклитаксела путем введения солюбилизирующих частей, таких как сукцинат и аминокислота, з положение 2'-гидроксильной группы или 7-гидроксильной группы (Deutsch et al., 1989; Mathew et al., 1992). Однако эти пролекарства оказались недостаточно химически стабильными. Например, Deutsch et al. (1989) сообщают о получении 2'-сукцинатного производного паклитаксела, но растворимость натриевой соли составляет только около 0,1%, а соли триэтаноламина и N-метилглюкамина имели растворимость только около 1%. Кроме того, сообщалось, что эфиры аминокислот нестабильны. Схожие результаты сообщались Mathew et al. (1992). Greenwald et al. описали синтез хорошо растворимых в воде 2'- и 7-эфиров таксола с полиэтиленгликолем (Greenwald et al., 1994), однако не сообщалось ни о каких данных, имеющих отношения к антиопухолевой активности этих соединений ίη κΐνο (Greenwald et al., 1995). Другие попытки разрешить эти проблемы включали микрокапсу-лирование паклитаксела как в липосомах, так и в наносферах (Bartoni and Boitard, 1990). Сообщалось, что липосомная готовая препаративная форма так же эффективна, как свободный паклитаксел, однако физически стабильны были только липосомные готовые препаративные формы, содержащие менее 2% паклитаксела (Sharma and Straubinger, 1994). К сожалению, оказалось, что готовая препаративная форма в виде наносфер токсична. Следовательно, до сих пор имеется потребность в растворимой в воде готовой препаративной форме паклитаксела, которая может доставить эффективные количества паклитаксела и доцетаксела, без недостатков, вызванных нерастворимостью этого лекарственного средства. Другим препятствием широко распространенному использованию паклитаксела являются ограниченные источники его получения, что делает терапию паклитакселом дорогой. Например, курс лечения может стоить несколько тысяч долларов. Имеется дополнительный неблагоприятный момент, заключающийся в том, что не все опухоли восприимчивы к терапии паклитакселом в результате его недоставки в опухоль. Следовательно, существуе т безотлагательная потребность в эффективных го товых препаративных формах паклитаксела и родственных лекарственных средств, которые растворимы в воде и имеют длительный период полувыведения из сыворотки крови, для лечения опухолей, аутоиммунных болезней, таких как ревматоидный артрит, а также для профилактики рестеноза сосудов, подвергнутых травмам, таким как пластические операции на сосудах и реконструкции просветов сосудов. Настоящее изобретение пытается преодолеть эти и другие недостатки, присущие известному уровню техники, путем получения композиций, содержащих химиотерапевтическое и антиангиогенное лекарственное средство, такое как паклитаксел или доцетаксел, конъюгировэнный с растворимым в воде полимером, таким как полиглутаминовая кислота или полиаспарагиновая кислота, или с растворимым в воде хелатообразователем металлов. Показано, что эти композиции эффективны в качестве антиопухолевых средств против моделей опухоли и, как предполагается, по меньшей мере, так же эффективны, как паклитаксел или доцетаксел, против любой из болезней или состояний, для которых, как известно, эффективны таксаны или таксоиды. Композиции этого изобретения обеспечивают растворимые в воде таксоиды, в результате чего преодолеваются недостатки» связанные с нерастворимостью самих этих лекарственных средств, и обеспечивается преимущество регулир уемого высвобождения, так что опухоли на моделях животных исчезают после одного внутривенного введения. Способы, описанные в настоящей заявке, можно также использовать для получения растворимых в воде конъюгатов полимеров с другими терапевтическими средствами, контрастными агентами и лекарственными средствами, включая этопзид, тенипозид, флуда-рабин, доксорубицин, дауномицин, эмодин, 5-фторурацил, FUDR, эстрадиол, камптотецин, ретиноевые кислоты, верапамил, эпоти-лоны и циклоспорин. В частности, эти средства со свободной гидроксильной группой можно конъюгировать с полимерами сходными химическими реакциями, как описано здесь для паклитаксела„ Такое конъюгирование будет вполне в пределах квалификации обычного специалиста в области химии, и, как таковое, будет находиться в пределах объема заявленного изобретения. Эти средства включают, но не ограничиваются ими, такие лекарства, как этопзид, тенипозид, камптотецин и эпотилоны. Используемое здесь выражение "конъюгированный с растворимым в воде полимером" означает ковалентное связывание лекарственного средства с полимером или хелатообразователем. Понятно также, что растворимые в воде конъюгаты настоящего изобретения можно вводить в сочетании с другими лекарственными средствами, включая другие антиопухолевые или антираковые лекарственные средства. Такие комбинации известны в данной области. Растворимый -в воде паклитаксел или доцетаксел настоящего изобретения можно в некоторых видах лечения комбинировать, например, с платиновым лекарственным средством, антибиотиком, таким как доксорубицин или даунорубицин, или другими лекарственными средствами, которые используют в комбинации с таксолом. Конъюгирование химиотерапевтических лекарственных средств с полимерами является привлекательным подходом к снижению системной токсичности и улучшению терапевтического индекса. Полимеры с молекулярной массой выше, чем 30кДа, не способны легко диффундировать через нормальные капилляры ν тломерулярный эндотелий, таким образом оберегая нормальную ткань от неуместной, медиированной лекарственным средством, токсичности (Maeda and Matsumura, 1989; Reynolds, 1995). С другой стороны, хорошо установлено, что злокачественные опухоли часто имеют нарушенный капиллярный эндотелий и более высокую проницаемость, чем сосудистая сеть нормальной ткани (Maeda and Matsumura, 1989; Fidler et al., 1987). Таким образом, конъюгат полимер-лекарственное средство, который будет обычно оставаться в сосудистой сети, может селективно просачиваться из кровеносных сосудов в опухоли, приводя к накоплению в опухоли активного терапевтического лекарственного средства. Кроме того, конъюгаты полимер-лекарственное средство могут действовать в качестве депо лекарственного средства для длительного высвобождения, что приводит к длительному воздействию лекарственного средства на опухолевые клетки.. И наконец, растворимые в воде полимеры можно использовать для стабилизации лекарственных средств, а также для солюбилизации иначе нерастворимых соединений. В настоящее время были исследованы различные синтетические и природные полимеры для изучения их способности повысить опухоль-специфическую доставку лекарственного средства (Kopecek, 1990; Maeda and Matsumura, 1989). Однако, в настоящее время только несколько таких полимеров получили клиническую оценку, включая SMANCS в Японии и HPMA-Do x в Великобритании (Maeda, 1991; Kopecek and Kopeckova, 1993). В настоящем описании подразумевается, что таксоид означает те соединения, которые включают паклитаксел и доцетаксел, и другие химические соединения, которые имеют скелет таксана {Cortes and Pazdur, 1995) и которые можно выделить из природных источников, таких как тис, или из клеточной культуры, или которые могут быть химически синтезированными молекулами, предпочтительно химическим соединением общей химической формулы С 47Н51NO14 , включая 6,12b-бис- (ацетилокси) -12(бензоилокси) -2а, 3, 4, 4а, 5, 6, 9, 10, 11, 12, 12а, 12b-додекагидро-4, 11-дигидрокси-4а, 8, 13, 13тетраметил-5-оксо-7, 11, -метано- 1Н-циклодека [3,4] бенз- [1,2-b]оксет-9-иловый эфир [2aR[2аα,4β,4αβ,6β,9α(αR*,βS*), 11α,12α,-12aα, 12bα]]-β-(бензоиламино) -α-гидроксибензолпропановой кислоты. Понятно, что каждый из паклитаксела и доцетаксела более эффективен, чем другие, против некоторых типов опухолей и что на практике настоящего изобретения следует лечить этим растворимым в воде конъюгатом таксоида те опухоли, которые более восприимчивы к конкретному таксоиду. В тех примерах осуществления изобретения, в которых паклитаксел конъюгируют с растворимым в воде хелатообразователем металла, композиция может дополнительно содержать хелатирован-ный ион металла. Хелатированным ионом металла настоящего изобретения может быть ионная форома любого одного из следующих металлов: алюминия, бора, кальция, хрома, кобальта, меди, диспрозия, эрбия, европия, гадолиния, галлия, германия, гольмия, индия, иридия, железа, магния, марганца, никеля, платины, рения, рубидия, рутения, самария, натрия, технеция, таллия, олова, иттрия и цинка. В некоторых предпочтительных осуществлениях хелатированный ион металла может быть радионуклидом, т.е. радиоактивным изотопом одного из перечисленных металлов. Предпочтительные радионуклиды включают, но не ограничиваются ими, такие изотопы, как 67Ga, 68Ga, 111In, 99mTc, 90 Y, 114mIn и 193mPt. Предпочтительные растворимые в воде хелатообразователи, которые используют на практике настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, диэтилентриаминпентауксусную кислоту (DTPA), этилендиаминтетрауксусную кислоту (EDTA), 1,4,-7, 10-тетраазациклододекан-Ν,Ν',N",N"'тетраацетат (DOTA), тетраазациклотетрадекан-Ν,Ν',N",N"'-тетрауксусн ую кислоту (ТЕТА), гидроксиэтилидендифосфонат (HEDP), димеркалтоянтарную кислоту (DMSA), диэтилентриаминтетраметиленфосфоновую кислоту (DTTP) и 1-(п-аминобензил) -DTPA, 1,6диаминогексан-N,Ν,Ν',Ν'-тетрауксусную кислоту (DPDP) и этиленбис(оксизтиленнитрило)тетрауксусную кислоту, причем наиболее предпочтительна DTPA. Предпочтительным осуществлением настоящего изобретения может быть композиция, содержащая 1111n-DТРА-паклитаксел. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения паклитаксел или доцетаксел может быть конъюгирован с растворимым в воде полимером, полимер предпочтительно конъюгируется с 2'- или 7-гидроксилом или с обоими гидроксилами паклитаксела или доцетаксела. Таким образом, когда для конъюгирования лекарственного средства используют функциональные группы, как указано выше, С2' гидроксил паклитаксела, разрушаемую связь, в этом случае эфирную, используют для гарантии того, что активное лекарственное средство высвобождается из полимерного носителя. Предпочтительные полимеры включают, но не ограничиваются ими, полиэтиленгликоль, поли- (1-глутаминовую кислоту), поли(d-глута-миновую кислоту), поли-(dl-глутаминовую кислоту), поли-(1-аспарагиновую кислоту, поли-(dаспарагиновую кислоту), поли-(dl-аспарагиновую кислоту), полиэтиленгликоль, сополимеры перечисленных выше полиаминокислот с полиэтиленгликолем, поликапро-лактоном, лолигликолевой кислотой и полимолочной кислотой, а также полиакриловую кислоту, поли-(2-гидроксиэтил-1-глутамин), карбоксиметилдекстран, гиалуроновую кислоту, сывороточный альбумин человека и альгиновую кислоту, причем особенно предпочтительны полиэтиленгликоль, полиаспарагиновые кислоты и поли-глутаминовые кислоты. Полиглутаминовые кислоты или полиаспарагиновые кислоты по настоящему изобретению предпочтительно имеют молекулярную массу от около 5000 до около 100000, причем более предпочтительно от около 20000 до около 80000 или даже от около 30000 до около 60000. Понятно, что композиции настоящего изобретения можно диспергировать в фармацевтически приемлемом растворе-носителе, как описывается ниже. Такой раствор может быть стерильным или асептическим и может включать воду, буферы, изотонические агенты или другие ингредиенты, известные специалистам данной области, которые не будут вызывать аллергическую или другую вредную реакцию при введении субъекту-животному или человеку.. Кроме того, настоящее изобретение может быть также описано как фармацевтическая композиция, содержащая химиотерапевтическое или антираковое лекарственное средство, такое как паклитаксел или доцетаксел, конъюгированное с высокомолекулярным, растворимым в воде полимером или с хелатообразователем. Фармацевати-ческая композиция может включать полиэтиленгликоль, полиглутаминовые кислоты, полиаспарагиновые кислоты или хелатообразова-тель, предпочтительно DTPA. Понятно также, что в качестве антиопухолевого средства или лекарственного средства можно использовать радионуклид и что данная фармацевтическая композиция может включать терапевтическое количество хелатированного радиоактивного изотопа. Настоящее изобретение может быть представлено в виде способа определения поглощения химиотерапевтического лекарственного средства, такого как паклитаксел или доцетаксел, опухолевой тканью. Этот способ может включать получение конъюгата лекарственного средства и хелатообразователя металла с хелати-рованным ионом металла, контактирование опухолевой ткани с композицией и обнаружение присутствия хелатированного иона металла в опухолевой ткани. Присутствие хелатированного иона металла в опухолевой ткани является указанием на поглощение опухолевой тканью. Хелатированный ион металла может быть радионуклидом и обнаружение может быть сцинтиграфическим. Опухолевая ткань может также быть в организме субъекта-животного или - человека и композицию можно затем ввести субъекту. Настоящее изобретение может также быть представлено в виде способа лечения рака у субъекта. Этот способ включает получение композиции, содержащей химиотерапевтическое лекарственное средство, такое как паклитаксел или доцетаксел, конъюгированное с растворимым в воде полимером или хелатообразователем и диспергированное в фармацевтически приемлемом растворе, и введение раствора субъекту в количестве, эффективном для лечения опухоли. Предпочтительные композиции содержат паклитаксел или доцетаксел, конъюгированный с полиглутаминовыми кислотами или полиаспарагиновыми кислотами, более предпочтительно с поли-(1-глутаминовой кислотой) или поли-(1аспарагиновой кислотой). Понятно, что композиции данного изобретения эффективны против любого типа рака, для ко-срого, как показано, эффективен неконъюгированный таксоид, и который будет включать, но не ограничиваться ими, рак молочной железы, рак яичников, злокачественную меланому, рак легких, рак желудка, рак ободочной кишки, рак головы и шеи или лейкемию. Способ лечения опухоли может включать некоторое предсказание поглощения паклитаксела или доцетаксела в опухоли до введения терапевтического количества лекарственного средства или пролекарства. Этот способ может включать любую из методик получения изображения, обсужденных выше, в которых субъекту вводят паклитаксел-хелатообразователь-хелатированный металл и обнаруживают его в опухоли. Эта стадия обеспечивает эффективный по стоимости путь определения того, что в те х случаях, когда лекарственное средство не поставляется в опухоль, не следует ожидать, что конкретная опухоль будет восприимчива к терапий конъюгатом DTPA-паклитаксел. Предполагается, что, если методику получения изображения использовать для предсказания восприимчивости к паклитакселу и определения пациентов, которые вряд ли восприимчивы к нему, дорогое критическое время для больного будет сокращено. Предположение состоит в том, что, если не определено приемлемое количество химиотерапевтического средства, осажденного в опухоли, то вероятность восприимчивости опухоли к этому средству о тносительно мала. Настоящее изобретение можно также определить . как способ получения изображения тела субъекта. Изображение тела получают п утем введения пациенту эффективного количества иона радиоактивного металла, хелатированного с конъюгатом паклитаксел-хелато-образователь, и измерения сцинтиграфических сигналов радиоактивного металла для получения изображения. Настоящее изобретение можно также определить в широком смысле как способ снижения, по меньшей мере, одного симптома системной аутоиммунной болезни, включающий введение субъекту, имеющему системную аутоиммунную болезнь, эффективного количества композиции, сожержащей паклитаксел или доцетаксел, конъю-гированныч с поли-1-глутаминовой кислотой или поли-1-аспараги-новой кислотой. Особый интерес в контексте настоящего описания представляет лечение ревматоидного артрита, который, как известно, в некоторых случая х восприимчив к таксолу при введении его в стандартной готовой форме кремофора (патент США 5 583 153) . Как и при лечении опухолей, предполагается, что эффективность растворимых в воде таксоидов настоящего изобретения не будет уменьшаться из-за конъюгации с растворимой в воде частью и что растворимое в воде пролекарство может действовать в качестве готовой препаративной формы с регулируемым высвобождением, которая высвобождает активное лекарственное средство в течение некоторого ,,периода времени. Следовательно, предполагается, что композиции настоящего изобретения так же эффективны, как и таксол, например, против ревматоидного артрита, но будут проявлять преимущество регулируемого высвобождения. Понятно также, что композиции таксоидов настоящего изобретения можно использовать в комбинации с другими лекарственными средствами, такими как ингибитор развития кровеносных сосудов (AGM-1470) (Oliver et al., 1994) или метотрексат. Установление того факта, что паклитаксел ингибирует также рестеноз после баллонной ангиопластики, указывает на то, что растворимые в воде паклитакселы и доцетакселы настоящего изобретения найдут различное применение помимо прямого парентерального введения (W0 962517 6). Например, предполагается, что растворимый в воде паклитаксел можно будет использовать в качестве покрытия для имплантированных медицинских средств, таких как трубки, шунты, катетеры, искусственные имплантаты, шти фты, электрические имплантаты, такие как кардиостимуляторы, и особенно для артериальных или венозных стентов, включая расширяемые баллоном стенты. Предполагается, что водорастворимый паклитаксел может быть связан с имплантируемым медицинским устройством или растворимый в воде паклитаксел может быть пассивно адсорбирован на поверхности имплантируемого устройства. Например, стенты покрывают конъюгатами полимеролекарст-венного средства путем погружения стента а раствор конъюгата "полимер-лекарственное средство" или расширением такого раствора на стент. Подходящие материалы для имплантируемого устройства должны быть биосовместимы и нетоксичны, их можно выбрать из металлов, таких как сплавы, никель-титан, сталь, или биосовместимых полимеров, гидрогелей, полиуретанов, полиэтиле-нов, сополимеров этилен-винилацетат и так далее. В предпочтительном примере осуществления растворимый в воде паклитаксел, особенно конъюгат (PG)-паклитаксел, наносят на стент для введения в артерию или в вену после баллонной ангиопластики. Данное изобретение можно представить в широком аспекте как способ ингибирования артериального рестеноза, или артериальной окклюзии после травмы сосудов, предусматривающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, содержащей паклитаксел или доцетаксел, конъюгированный с поли-1-глутаминовой кислотой или поли-1-аспарагиновой кислотой. На практике это может быть, например, пациент с коронарным шунтированием, хирургической операцией на сосудах, трансплантированным органом или пластической операцией на коронарных или артериальныъх сосуда х; композицию можно вводить непосредственно внутривенно или даже нанести на стент, и стент имплантировать в случае травмы сосудов. Примером осуществления изобретения, следовательно, является имплантируемое медицинское устройство, которое покрывают композицией, содержащей паклитаксел или доцетаксел, конъюгиро-ванный с полиглутаминовой кислотой или полиаспарагиновой кислотой, в количестве, эффективном для ингибирования пролиферации клеток гладких мышц. Предпочтительное устройство представляет собой стент, покрытый композициями настоящего изобретения, причем в некоторых случаях стент приспособлен для использования после баллонной ангиопластики, а покрытие эффективно для ингибирования рестеноза. В некоторых предпочтительных примерах осуществления изобретение может быть описано как композиция, содержащая полиглутаминовые кислоты, конъюгированные с 2'- или 7-гидроксилом, или тем и другим, паклитаксела, или даже композиция, содержащая полиаспарагиновую кислоту, контролированную с 2'- или 7-гидроксилом, или тем и другим, паклитаксела. Используемые здесь термины "полиглутаминовая кислота" или "полиглутаминовые кислоты" включают поли- (1-глутаминовую кислоту), поли-(d-глутаминовую кислоту) и поли-(dl-глутаминовую кислоту) и термины "полиаспарагиновая кислота" или "полиаспарагиновые кислоты" включают поли-(1-аспарагиновую кислоту), поли-(d-аспарагиновую кислоту) и поли-(dl-аспарагиновую кислоту). Если не указано особо, все используемые здесь технические или научные термины имеют общепринятые значения, которые понятны специалисту в области, к которой относится это изобретение. Хотя на практике или при испытании можно использовать любые способы и материалы, аналогичные или эквивалентные описанным в настоящем изобретении, ниже представлены предпочтительные из них. Фиг.1А. Химическая структура паклитаксела, конъюгата PEG-паклитаксел и DTPA-паклитаксел. Фиг.1B. Химическая структура и реакционная схема получения конъюгата PG-паклитаксел» Фиг.2.Влияние паклитаксела, PEG-паклитаксела и DTPA-паклитаксела на пролиферацию клеток меланомы В16. Фиг.3. Антиопухолевое действие DTPA-паклитаксела на опухоли молочной железы МСа-4. Фиг.4. Среднее время (сутки) для достижения диаметра опухоли 12мм после обработки паклитакселом, DTPA-паклитакселом и PEG-паклитакселом. Фиг.5. Гамма-сцинтиграммы мышей/ имеющих опухоли МСа-4, после внутривенной инъекции 1111nDТРА-паклитаксела и 111In-DTPA-Стрелка обозначает опухоль. Фиг.6. Гидролитическое разложение PG-паклитаксела, определяемое в физиологическом растворе с фосфа тным буфером (PBS) при рН 7,4 и 37°С. растворимому PG; представляет процентное содержание паклитаксола, оставшегося присоединенным к представляет процентное содержание высвобожденного паклитаксела; представляет процентное содержание продуцированного метаболита-1. Фиг.7А. Антиопухолевое действие PG-паклитаксела на крыс с мышиной опухолью молочной железы (13762F) . представляет восприимчивость к одной внутривенной дозе PG (0,3г/кг); представляет восприимчивость к паклитакселу (40мг/кг); 1. представляет восприимчивость к PG-лаклитакселу (60мг эквив.паклитаксела/кг). Фиг.7В. Антиопухолевое действие PG-паклитаксела и паклитаксела на мышей, имеющих опухоли ОСа представляет восприимчивость к одной внутривенной дозе PG(0,8г/кг); представляет восприимчивость к паклитакселу (80мг/кг); представляет восприимчивость к PG-паклитакселу (80мг эквив.паклитаксела/кг); представляет восприимчивость к PG-паклитакселу (160мг эквив.паклитаксела/кг). Фиг.7С. Антиопухолевое действие PG-паклитаксела на мышей, имеющих карциному МСа-4 молочной железы. представляет восприимчивость к одной внутривенной дозе солевого раствора; представляет восприимчивость к одной внутривенной дозе PG (0,6г/кг); представляет восприимчивость к PG-паклитакселу (40мг/кг); представляет восприимчивость к PG-паклитакселу (60мг зквив.паклитаксела/кг); представляет восприимчивость к PG-паклитакселу (120мг/кг). Фиг.7D. Антиопухолевое действие PG-паклитаксела против саркомы (FSA-II) мягких тканей у мышей. представляет восприимчивость к одной внутривенной дозе солевого раствора; представляет восприимчивость к одной внутривенной дозе PG (0,8 мг/кг); представляет восприимчивость к паклитакселу (80 мг/кг); представляет восприимчивость к конъюгату PG-пакли-таксел (160 мг эквив.паклитаксела/кг). Фиг.7E. Ан тиопухолевое действие PG-паклитаксела против сингенной гепатокарциномы (НСа-І) у мышей. представляет восприимчивость к одной внутривенной дозе солевого раствора; представляет восприимчивость к одной внутривенной ДОЗЄ PG (0,8г/кг); представляет восприимчивость к PG-паклитакселу (80мг/кг); представляет восприимчивость к PG-паклитакселу (160мг эквив.паклитаксела/кг). Фиг.8. Профиль высвобождения паклитаксела из PEG-пакли-таксела в фосфатном буфере (рН 7,4). паклитаксел; PEG-паклитаксел. Фиг.9. Антиопухолевое действие PG-паклитаксела на опухоли молочной железы МСа-4. представляет восприимчивость к одной внутривенной инъекции солевого раствора PEG (60мг/кг); представляет восприимчивость к наполнителю кремофор/спирт; представляет одну дозу паклитаксела, 40мг/кг тела; представляет PEG-паклитаксел при дозе 40мг эквив. паклитаксела/кг массы тела. Настоящее изобретение возникает из открытия новых, растворимых в воде готовых препаративных форм паклитаксела и доцетаксела и неожиданной эффективности этих гото вых препаративных форм против опухолевых клеток in vivo. Конъюгированный с поли-(1-глутаминовой кислотой) паклитаксел (PGпаклитаксел), введенный мышам, имеющим карциному яичников (ОСа-1), вызывал значительное замедление роста опухоли по сравнению с такой же дозой паклитаксела без PG. Мы ши, обработанные только паклитакселом или комбинацией свободного паклитаксела и PG, обнаруживали сначала замедленный рост опухоли, но, опухоли снова вырастали до величин, сравнимых с необработанной контрольной группой, через десять суток. Кроме того, при максимально толератной дозе (МТД) конъюгата PG-паклитаксел (160мг эквив.паклитаксела/кг) рост опухолей полностью подавляли, опухоли сжимались, и мыши, наблюдаемые в течение двух месяцев после обработки, оставались без опухоли (МТД: определяется как максимальная доза, которая вызывает 15% или менее потерю массы тела в течение двух недель после одной внутривенной инъекции). В параллельном исследовании изучали антиопухолевую активность конъюгата PG-паклитаксел у крыс с аДу-енокарциномой молочной железы (13762F) крыс. И снова, полную ликвидацию опухоли наблюдали при дозе 40-60мг эквив. паклитаксела/кг конъюгата PG-паклитаксел. Эти неожиданные результаты показывают, что конъюгат "полимерлекарственное средство", PG-паклитаксел,. успешно ликвидирует вполне установленные твердые опухоли как у мышей, так и у крыс, после одной внутривенной инъекции. Кроме того, с периодом полупревращения 40 суток при рН 7,4 PG-паклитаксел представляет собой одно из наиболее стабильных, растворимых в воде известных производных паклитаксела (Deutsch et al., 1989; Mathew et al., 1992; Zhao and Kingston, 1991). Показано также, что DTPA-паклитаксел эффективен, так же, как и паклитаксел, в анализе антиопухолевой активности in vitro с использованием клеточной линии меланомы В16. DTPA-паклитаксел не проявляет никакого значительного отличия в актиопухолевой активности при сравнении с паклитакселом в действии против опухоли молочной железы при дозе 40мг/кг массы тела в виде одной инъекции. Кроме того, было показано, что меченый 111индием DTPA-паклитаксел аккумулируется в опухоли МСа-4, что показала гамма-сцинтиграфия, демонстрируя, что конъюгированные с хелато-образователем антиопухолевые лекарственные средства настоящего изобретения пригодны и эффективны для получения изображения опухолей. Новые соединения и способы настоящего изобретения обеспечивают значительный прогресс, по сравнению с предшествующими, так как предполагается, что растворимые в воде паклитакселы повышают эффективность антираковой терапии на основе паклитаксела путем получения водорастворимых композиций с регулируемым высвобождением, полученных из паклитаксела. Такие композиции исключают необходимость использования растворителей, которые ассоциируются с побочными действиями, наблюдаемыми для предыдущи х композиций паклитаксела. Кроме того, паклитаксел, меченый радиоактивным изотопом/ который, как показано, сохраняет антиопухолевую активность, можно также использовать для получения изображения опухолей. Кроме того, настоящее изобретение позволяет определить, будет ли паклитаксел поглощаться конкретной опухолью, посредством сцинтиграфии, однофотонной эмиссионной компьютерной томографии (SPECT) или позитронной эмиссионной томографии(PET). Это определение можно затем использовать для принятия решения об эффективности антиракового лечения. Эта информация может быть полезной при проведении практикующим врачом отбора пациентов, которых нужно подвергать терапии паклитакселом. Паклитаксел можно сделать водорастворимым двумя путями: путем конъюгирования паклитаксела с водорастворимыми полимерами, которые служат в качестве носителей лекарственных средств, и п утем превращения антиопухолевого средства в его производные с помощью водорастворимых хелатир ующих агентов. Последний подход предоставляет также возможность для мечения радионуклидами (например, 111 In, 90 Y, 166Ho, 68 Ga, 99mTc) для нуклеарного изображения и/или радиотерапии. Структуры паклитаксела, конъюгата полиэтиленгликоль-паклитаксел (PEG-паклитак-сел), полиглутаминовая кислота-паклитаксел (PG-паклитаксел) и диэтилентриаминпентауксусная кислота-паклитаксел (DTPA-паклитак-сел) приводятся на фиг.1. В некоторых осушествлениях настоящего изобретения DTPA-пак-литаксел или другие конъюгаты паклитаксел-хелатирующий агент, такие как, например, EDTA-паклитаксел, ΟΤΤΡ-паклитаксел или DОТАпакли - таксел, можно получить, например, в форме растворимых в воде солей (натриевой, калиевой соли, тетрабутиламмониевой и кальциевой соли, соли железа (III) и так далее). Эти соли можно будет использовать в качестве терапевтических средств для лечения опухолей. Во-вторых, DTPA-паклитаксел или другие конъюгаты паклитаксел-хелатирующие агенты можно будет использовать в качестве диагностических средств, которые, когда их метят радионуклидами, такими как 111ln или 99mТс, можно использовать в качестве радиоактивных меток для обнаружения некоторых опухолей в сочетании с нуклеарными методиками получения изображения. Понятно, что, кроме паклитаксела (таксола) и доцетаксела (таксотера), для использования в композициях и способах настоящего изобретения можно приспособить другие производные таксана, и что все такие композиции и способы должны включаться в прилагаемую формулу изобретения. Изучения токсичности, фармакокинетика и распределение в тканях DTPA-паклитаксела показало, что у мышей значение LD50 (50% летальная доза) DTPA-паклитаксела, наблюдаемое с внутривенной (iv) инъекцией одной дозы, составляет около 110мг/кг массы телао Прямое сравнение с паклитакселом трудно провести из-за ограничений доза-объем, налагаемых ограниченной растворимостью паклитаксела и токсичностью наполнителя, связанными с внутривенным введением. Однако, в свете раскрытия настоящего изобретения, специалист в области химиотерапии может определить эффективные и максимально переносимые дозы в клинических исследованиях для использования при лечении людей. В некоторых осуществлениях данного изобретения стент с покрытием из конъюгатов "полимерпаклитаксел" можно использовать для профилактики рестеноза, непроходимости артерий после баллонной ангиопластики. Недавние результаты клинических испытаний, использующих расширяемые стенты в пластической операции на коронарных сосуда х, показали существенную пользу такого стента в раскрытии просвета сосудов и снижении рестеноза по сравнению со стандартной баллонной ангиопластикой (Serruys et al., 1994). В соответствии с гипотезой восприимчивости к повреждению, образование неоинтима связывается с повышенной пролиферацией клеток. В настоящее время популярное мнение заключается в том, что критическим процессом, приводящим к повреждениям сосудов, как при самопроизвольном, так и ускоренном атеросклерозе, является пролиферация клеток гладких мышц (SMC) (Phillips-Hughes and Kandarpa, 1996). Поскольку фенотипическая пролиферация SMC после артериального повреждения имитирует фенотипическую пролиферацию опухолевых клеток, возможно, что антираковые лекарственные средства можно использовать для профилактики аккумуляции неоинтимальных SMC. Стенты, покрытые связанными с полимером антипролиферативными средствами, которые способны высвобождать эти средства в течение пролонгированного периода времени с достаточной концентрацией, будут, таким образом, предупреждать прорастание гиперпластичной интимы и среды внутрь просвета, тем самым, снижая рестеноз. Поскольку было показано, что паклитаксел подавляет индуцированный коллагеном артрит на модели мыши (Oliver et al., 1994), предполагается, что готовые препаративные формы по настоящему изобретению можно также использовать при лечении аутоиммунных и/или воспалительных болезней, таких как ревматоидный артрит. Паклитаксел, связанный с тубулином, смещает равновесие в сторону стабильных микротрубчатых полимеров и депает это лекарственное средство сильным ингибитором репликации эукариотных клеток путем блокирования клеток в поздней миотической стадии G2. В подавлении артрита паклитакселом могут принимать участие несколько механизмов. Например, фазово-специ-фическое цитотоксическое действие паклитаксела может воздействовать на быстро пролиферирующие воспалительные клетки, и, кроме того, паклитаксел ингибирует митоз, миграцию, хемотак-сис# внутриклеточный перенос клеток и продуцирование Н 2О2 нейтрофилами. Кроме того, паклитаксел может иметь антиангио-генную активность (активность, направленную против развития кровеносных сосудов), осуществляемую п утем блокирования миграции координированных эндотелиальных, клеток (Oliver et al, 1994). Следовательно, предполагается, что конъюгированные с полимерами пролекарства настоящего изобретения так же полезны, как свободный паклитаксел, при лечении ревматоидного артрита» Описанная здесь готовая препаративная форма конъюгированного с полимером паклитаксела будет иметь также преимущество, заключающееся в замедленном или длительном высвобождении этого лекарственного средства и более высокой растворимости. Аспект лечения артрита заключается также в том, что готовую препаративную форму можно инъецировать или имплантировать непосредственно в участки пораженных суставов. Фармацевтические композиции паклитаксела или доцетаксела, пригодные для инъекционного использования, включают стерильные водные растворы или дисперсии и стерильные порошки для приготовления стерильных инъецируемых растворов или дисперсий. Во всех случаях форма должна быть стерильна и должна быть жидкой для инъекции. Она должна быть стабильной в условиях производства и хранения и должна предохраняться от загрязняющего воздействия микроорганизмов, таких как бактерии и грибы. Носителем может быть растворитель или дисперсионная среда, содержащая, например, воду, этанол, полиол (например глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль и тому подобное), пригодные смеси их и растительные масла, Предохранение от действия микроорганизмов можно осуществить при помощи различных антибактериальных и антигрибковых средств, например парабенов, хлорбутанола, фенола, сорбиновой кислоты, тимерозала и тому подобное. Во многих случаях может быть предпочтительно включение изотонических агентов, например Сахаров или хлорида натрия. Стерильные инъецируемые растворы получают введением активных соединений в требуемом количестве в подходящий растворитель, когда требуется, с различными другими ингредиентами, перечисленными выше, с последующей стерилизацией фильтрованием. Обычно дисперсии получают введением различных стерилизованных активных ингредиентов в стерильный наполнитель, который содержит основную дисперсионную среду и требуемые другие ингредиенты из ингредиентов, перечисленных выше. В случае стерильных порошков для получения стерильных инъецируемых растворов предпочтительные способы получения представляют методики сушки в вакууме и сушки распылением, которые дают порошок активного ингредиента плюс любого дополнительного требуемого ингредиента из их предварительно фильтрованного для стерилизации раствора. Используемый здесь термин "фармацевтически приемлемый носитель" включает любой и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и антигрибковые средства и изотонические агенты и тому подобное. Использование таких сред и агентов для фармацевтически активных веществ хорошо известно в данной области. В терапевтических композициях предполагается использование любой общепринятой среды или агента, за исключением среды или агента, не совместимого с активным ингредиентом. В композиции можно также ввести дополнительные активные ингредиенты. Термин "фармацевтически приемлемый" относится также к молекулярным частицам и композициям, которые не вызывают аллергическую или похожую неблагоприятную реакцию при введении животному или человеку. Для парентерального введения, например в водном растворе, раствор следует, осли необходимо, подходящим образом забуферить и жидкий разбавитель сначала сделать изотоническим при помощи достаточного количества солевого раствора или глюкозы. Эти определенные водные растворы особенно подходят для внутривенного и внутрибрюшинного введения. В связи с этим, стерильные водные среды, которые можно применять, должны быть хорошо известны специалисту данной области в свете раскрытия настоящего изобретения. Следующие примеры включаются для иллюстрации предпочтительных примеров осуществления изобретения. Специалистам должно быть понятно, что методики, описанные в примерах, которые следуют далее, представляют описанные автором изобретения методики для нормального функционирования на практике изобретения и, следовательно, могут рассматриваться как предпочтительные методики для его применения на практике. Однако, специалистам данной области, в свете настоящего описания, должно быть понятно, что можно сделать много изменений в конкретных описанных осуществлениях и все же получить такой же или сходный результат без отступления от сущности и объема изобретения. ПРИМЕР 1. DTPA-Пахлютахсел Синтез конъюгата РТРА-паклитаксел: К раствору паклитаксела (100мг, 0,117ммоль) в сухом ДМФ (2,2мл) добавляли ангидрид диэтилентриаминпентауксусной кислоты (DTPA А) (210мг, 0,585ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 4°С в течение ночи. Суспензию фильтровали (фильтр Millipore 0,2мкм) для удаления непрореагировавшего ангидрида DTPA. Фильтрат выливали в дистиллированную воду, перемешивали при 4°С в течение 20мин. и собирали осадок. Сырой продукт очищали препаративной ТСХ на пластинках с С 18силикагель и проявляли в смеси ацетонитрил/вода (1:1). Паклитаксел имел величину Rf 0,34. Полосу, вы ше полосы паклитаксела, с величиной Rf от 0,65 до 0,75 удаляли соскабливанием и элюировали смесью ацетонитрил/вода (1:1), и удаляли растворитель, получая 15мг DTPA-паклитаксела в качестве продукта (выход 10,3%): т.пл.>226°С (разложение). УФ-спектр (натриевая соль в воде) имел максимальное поглощение у 228нм, которое характеристично также для паклитаксела. Масс-спектр: (FAB) m/е 1229 (М+Н)+, 1251 (M+Na), 1267 (М+К). В 1Н ЯМР-спектре (DMSO-d6) резонанс групп NCH2CH2N и СН2СООН у DTPA появлялся в виде сложного ряда сигналов у δ 2,71-2,96м.д. и в виде мультиплета у δ 3,42м.д., соответственно. Резонанс С7-Н у 4,10м.д. в паклитакселе смещается к 5,51м.д., что позволяет предполагать этерификацию в 7-положении. Остальная часть спектра была в согласии со структурой паклитаксела. Натриевую соль DTPA-паклитаксела также получают добавлением раствора DTPA-паклитаксела в этаноле в эквивалентное количество 0,05М NaHCO3 с последующей лиофилизацией. Соль получают в виде растворимого в воде твердого порошка (растворимость >20мг эквивалентного паклитаксела/мл). Гидролитическая стабильность конъюгата РТРА-паклитаксел: Гидролитическую стабильность DTPA-паклитаксела изучали в ускоренных условиях. Говоря кратко, 1мг DTPA-паклитаксела растворяли в 1мл 0,5М водного раствора NaHCO3 (pH 9,3) и анализировали ВЭЖХ. Система для ВЭЖХ состояла иэ колонки Nova-Рак 150x3,9 (внутренний диаметр) мм Waters, заполненной C18-силикагелем 4мкм, изократного насоса LC Perkin-Elmer, интерфейса РЕ Nelson серии 900, УФ/Вид-детектора и системы данных. Элюент (ацетонитрил/метанол/0,02М ацетат аммония=4:1:5) пропускали со скоростью 1,0мл/мин с УФ-детектированием у 228нм. Время удерживания DTPAпаклитаксела и паклитаксела было 1,38 и 8,83мин, соответственно. Площади пиков определяли количественно и сравнивали со стандартными кривыми для определения концентраций DTPAпаклитаксела и паклитаксела. Оцененный период полупревращения в 0,5М растворе NaHCO3 составляет около 16 дней при комнатной температуре. Влияние DTPA-паклитаксела на рост клеток меланомы мышей В16 in vitro: Клетки засевали в планшетах на 24 лунки при концентрации 2,5х104клеток/мл и выращивали в смеси 50:50 минимальной поддерживающей среды (DEM), модифицированной Дульбекко, и среды F12, содержащей 10% телячьей сыворотки, при 37°С в течение 24 часов в имеющей влажность 97% атмосфере с 5,5% СO2. Среду затем заменяли свежей средой, содержащей паклитаксел или DTPA-паклитаксел в диапазоне концентраций от 5х10-9М до 75х10-9М. Через 40 часов клетки высвобождали обработкой трипсином и подсчитывали в счетчике Coulter. Конечные концентрации ДМСО (использовали для растворения паклитаксела) и 0,05М раствора бикарбоната натрия (использовали для растворения DTPAпаклитаксела) в клеточной среде были меньше, чем 0,01%. Это количество растворителя не оказывало какое-либо влияние на рост клеток, как определено контрольными исследованиями. Влияние DTPA-паклитаксела на рост клеток меланомы В16 представлено на фиг.2. После 40час. инкубации с различными концентрациями DTPA-паклитаксел и паклитаксел сравнивали в отношении цитотоксичности.lС50 для паклитаксела иDТРА -паклитаксела составляют 15нМ и 7,5нМ, соответственно. Антиопухолевое действие на модель карциномы молочной железы (МСа-4): Самок мышей C3Hf/Kam инокулировали карциномой молочной железы (Мса-4) в мышцы правого бедра (5х105клеток/мьшь) . Когда опухоли вырастали до 8мм (приблизительно через 2 недели), давали одну дозу паклитаксела или DTPA-паклитаксела с 10, 20 и 40мг эквивалентного паклитаксела/кг массы тела. В контрольных исследованиях использовали солевой раствор и смесь абсолютный спирт/кремофор, 50/50, разбавленную солевым раствором (1:4). Рост опухоли определяли ежедневно путем измерения трех ортогональных диаметров опухоли. Когда размер опухоли достигал 12мм в диаметре, вычисляли задержку роста опухоли. Мышей умерщвляли, когда размер опухолей был приблизительно 15мм. Кривая роста опухоли приводится на фиг.3. По сравнению с контрольными экспериментами, как паклитаксел, так и DTPA-пакли-таксел, проявляли антиопухолевое действие при дозе 40 мг/кг. Эти данные анализировали также для определения среднего числа дней, необходимых для того, чтобы опухоль достигла в диаметре 12мм. Статистический анализ показал, что DTPA-паклитаксел значительно задерживал рост опухоли по сравнению с контролем, где обрабатывали солевым раствором, при дозах 40мг/кг (р