Засіб для лікування захворювань передміхурової залози

1. Засіб для лікування захворювань передміхурової залози, виконаний у вигляді супозиторію, що містить комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби у формі порошку з вмістом водорозчинних пептидів не менш 20 % і основу, який відрізняється тим, що він додатково містить антимікробний засіб, що являє собою антибіотик або противірусний засіб з групи синтетичних аналогів нуклеозидів, або протипротозойний засіб, або суміш антибіотика й про C2 2 UA 1 3 Простатит - одне з найпоширеніших серед чоловіків урологічних захворювань. Велику роль у розвитку простатиту грають перенесені раніше або існуючі інфекції, які крім залучення в патологічний процес сечівника можуть ускладнити плин запального процесу в простаті. Лікування хворих простатитом спрямовано на ліквідацію інфекції й нормалізацію функцій передміхурової залози. У комплексну програму лікування, як правило, входять антибіотикотерапія, терапія препаратами, що поліпшують тонус судин, фізіотерапевтичні процедури, загальнозміцнювальні засоби, а також хірургічне втручання. Зараз одним з перспективних напрямків у лікуванні простатиту є застосування засобів, спрямованих на стимуляцію неспецифічної реактивності організму, зокрема застосування препаратів природного походження. Для лікування простатиту застосовуються препарати рослинного походження (фітотерапія), ферменти й імуномодулятори, зокрема, цитомедини. Цитомедини - це пептиди з молекулярною масою 1000-10000 дальтонів. Вони мають здатність відновлювати порушені в результаті патологічного процесу або старіння специфічні функції тих органів і тканин, які служать вихідним матеріалом для їхнього одержання. Істотним є наявність у розглянутих пептидів імуномодулюючих властивостей. Крім того, цитомедини не мають молекулярної видоспецифічності, у результаті чого, отримані з їхнім використанням лікарські препарати, не мають антигенних властивостей і, як наслідок, побічних ефектів, що дає можливість відносно вільно варіювати дозування й курси лікування. Одним із представників класу цитомединів є біорегуляторні пептиди передміхурової залози великої рогатої худоби (ВРХ) зі вмістом водорозчинних пептидів не менш 20%. Фармакологічна дія комплексу біорегуляторних пептидів передміхурової залози ВРХ дозволяє здійснювати патогенетичну терапію захворювань передміхурової залози й функціонально пов'язаних з нею органів, тому що біорегуляторні пептиди мають органотропну дію відносно простати. Відомі склади різних лікарських препаратів, що містять комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози ВРХ. Одним з таких засобів є препарат «Раверон», що являє собою екстракт із передміхурової залози статевозрілих тварин, звільнений від андрогенних і естрогенних гормонів і білків. Препарат застосовують у початковій фазі аденоми передміхурової залози й при хронічному неспецифічному простатиті, випускається у вигляді ін'єкцій. Недоліком даного препарату є тривалий курс лікування, а при схильності до алергійних реакцій «Раверон» протипоказаний [Машковский М.Д. Лекарственные средства. М., Медицина 1994, т.2, с.190]. Відомий ректальний засіб для лікування простатитів різної етнології, що містить як біологічно активну речовина рідкий очищений екстракт передміхурової залози ВРХ і наповнювачі: желатин, гліцерин і натрію карбонат-бікарбонатний буфер [патент РФ №2152204 на «Ректальний засіб»]. Цей 86261 4 лікарський засіб сприяє посиленню циркуляції й поліпшенню відтоку секрету з передміхурової залози при корекції порушень, що супроводжують будь-які зміни кровообігу й трофіки передміхурової залози, тобто проявляє органотропні властивості, але при цьому даний лікарський засіб не вирішує проблему ліквідації інфекції. Відомий також ректальний засіб для лікування хронічних простатитів різної етиології, що містить комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози ВРХ, у якості якого використовують концентрат рідкого очищеного екстракту передміхурової залози ВРХ і компонент із активністю άінтерферону людини, стабілізатор і наповнювачі: желатин, гліцерин і натрію карбонат-бікарбонатний буфер [патент РФ №2160114 на «Ректальний засіб для лікування хронічних простатитів»]. Даний лікарський засіб призначений для лікування хронічних простатитів різної етиології , що протікають на тлі імунодефіциту. Засіб являє собою комплексний препарат, що містить два біологічно активних засоби, які забезпечує його поліфункціональність, але при цьому не вирішує проблему ліквідації інфекції. Найбільш близьким до засобу, що заявляється, по сукупності істотних ознак є лікарський засіб для лікування захворювань передміхурової залози «Витапрост» [патент РФ №2112504 на «Засіб для лікування захворювань передміхурової залози «Витапрост»]. Відомий засіб являє собою супозиторій, що містить комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози ВРХ у формі порошку з вмістом водорозчинних пептидів не менш 20%, і основу. Засіб має органотропну дію відносно простати й використовується для лікування захворювань передміхурової залози й функціонально пов'язаних з нею органів. Проте рівень органотропної активності засобу обмежений вмістом у ньому комплексу біорегуляторних пептидів передміхурової залози ВРХ, що обумовлений технологічним процесом. Крім того, засіб не має антимікробної дії. Завданням винаходу є створення комплексного лікарського засобу у вигляді супозиторію для лікування захворювань передміхурової залози, який має високий рівень органотропної активності й високий рівень антимікробної дії. Технічний результат від використання пропонованого засобу полягає в підвищенні його органотропної активності й значному посиленні антимікробної дії, що дозволяє реалізувати етиотропну й патогенетичну терапію бактеріального простатиту. В запропонованому засобі, що містить комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби у формі порошку із вмістом водорозчинних пептидів не менш 20% і основу, поставлене завдання відповідно до винаходу, вирішується тим, що засіб додатково містить антимікробний засіб, який представляє собою антибіотик або противірусний засіб, або протипротозойний засіб, або суміш антибіотика й протипротозойного засобу, узятих у співвідношенні 1:1, або суміш противірусного й протипротозойного засобів, узятих у співвідношенні 1:1, при наступному співвідношенні компонентів, г на один супозиторій: 5 Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,05-0,4 Антимікробний засіб - не більше 0,7 Основа - достатня кількість для одержання супозиторію масою 2,15-2,35г Краще як антибіотик використовувати антибіотик із групи фторхінолінів, наприклад, ломефлоксацин, офлоксацин, або із групи пеніцилінів, наприклад, амоксицилін, ампіцилін, або із групи цефалоспоринів, наприклад, цефаклор, цефіксім, або із групи тетрациклінів, наприклад, доксициклін, тетрациклін, або із класу сульфаніламідів, наприклад, дотримоксазол. Краще як противірусний засіб використовувати, наприклад, рибавірин, ламівудин. Краще як протипротозойний засіб використовувати протипротозойний препарат із групи нітроімідазолів, наприклад, метронідазол, орнідазол, тинідазол. Краще як основу використовувати будь-яку фармацевтично прийнятну основу, яка дозволяє одержати супозиторій, наприклад вітепсол, твердий жир, масло какао. Введення в пропонований засіб одночасно комплексу біорегуляторних пептидів передміхурової залози ВРХ і антимікробного засобу дозволяє одержати засіб у вигляді супозиторію: - з високим рівнем органотропної активності, збільшення якої досягається, з одного боку, за рахунок збільшення в складі кількісного вмісту комплексу біорегуляторних пептидів передміхурової залози ВРХ, а з іншого боку, за рахунок синергічного ефекту, обумовленого тим, що антимікробний засіб прискорює доставку біорегуляторних пептидів передміхурової залози ВРХ до ураженого органа, оскільки антимікробний засіб знімає набряк і поліпшує реологічні властивості крові; - з високим рівнем антимікробної дії, що досягається, з одного боку, за рахунок введення до складу антимікробного засобу з бактерицидною і бактеріостатичною дією на широкий спектр збудників, а з іншого боку, за рахунок синергічного ефекту, обумовленого тим, що біорегуляторні пептиди передміхурової залози, поліпшуючи мікроциркуляцію, нейтрофічні й імунні процеси в тканинах простати, сприяють більш ефективному всмоктуванню й посиленню дії антимікробного засобу. Таким чином, дія пропонованого засобу є комплексною, що впливає як на збудника, так і на всі патологічні процеси в ураженому органі, що веде до підвищення ефективності лікування бактеріального запалення передміхурової залози й функціонально пов'язаних з нею органів. Вміст лікувальних речовин у супозиторії масою (2,15-2,35г) установлено експериментально. Вміст комплексу біорегуляторних пептидів менш 0,05г на супозиторій не забезпечує необхідної лікувальної дії. Вміст комплексу біорегуляторних пептидів більше 0,4г і антимікробних засобів більше 0,7г утрудняє технологічний процес виготовлення супозиторної маси. Спосіб одержання пропонованого засобу Окремо готують концентрати комплексу біорегуляторних пептидів передміхурової залози вели 86261 6 кої рогатої худоби у формі порошку із вмістом водорозчинних пептидів не менш 20% і антимікробного засобу із частиною основи, узяті з основою 1:1. Отримані концентрати змішують із основою, що залишилася, при температурі 3840°С. Однорідну масу заливають у контурне коміркове впакування із полівінілхлоридної плівки і прохолоджують, що надалі дозволяє одержати супозиторії, що відповідають вимогам Державної Фармакопеї, XI видання. Нижче наведені приклади виготовлення пропонованого засобу у вигляді супозиторіїв. Приклад 1 Розплавляють основу - вітепсол у кількості 1,862кг при температурі 55-65°С при перемішуванні. Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби у формі порошку із вмістом водорозчинних пептидів не менш 20% у кількості 0,596кг змішують із частиною, що розплавилась, вітепсолу, взятих у співвідношенні 1:1. Готують концентрат, розтираючи порошок на тривалковій розтиральній машині до 40мкм не менш 95%. Порошок антибіотика - ломефлоксацину в кількості 1,042кг змішують із частиною, що розплавилась, вітепсолу, взятих у співвідношенні 1:1. Готують концентрат, розтираючи порошок на тривалковій розтиральній машині до 40мкм не менш 95%. Отримані концентрати завантажують у вітепсол, що залишився, при перемішуванні до одержання однорідної маси. Готову масу заливають в комірки з полівінілхлоридні плівки й охолоджують. Одержують супозиторії масою 2,35г, що мають наступний склад: Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,4г Ломефлоксацин - 0,7г Основа - решта. Приклад 2 Проведений аналогічно прикладу №1, але при наступних кількостях компонентів: комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,081кг, ломефлоксацину 0,813кг, основи - 2,606кг. Одержують супозиторії масою 2,15г, що мають наступний склад: Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,05г Ломефлоксацин - 0,5г Основа - решта. Приклад 3 Проведений аналогічно прикладу №1, але при наступних кількостях компонентів: комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,622кг, ломефлоксацину 0,777кг, основи - 2,101кг. Одержують супозиторії масою 2,25г, що мають наступний склад: Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби -0,4г Ломефлоксацин - 0,5г Основа - решта. Приклад 4 Проведений аналогічно прикладу №1, але при наступних кількостях компонентів: комплекс біоре 7 гуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,077кг, ломефлоксацину 1,088кг, основи - 2,335кг. Одержують супозиторії масою 2,25г, що мають наступний склад: Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,05г Ломефлоксацин - 0,7г Основа - решта. Приклад 5 Проведений аналогічно прикладу №1, тільки як антимікробний засіб склад містить офлоксацин, а як основу - твердий жир. Приклад 6 Проведений аналогічно прикладу №2, тільки як антимікробний засіб склад містить офлоксацин, а як основу - твердий жир. Приклад 7 Проведений аналогічно прикладу №3, тільки як антимікробний засіб склад містить офлоксацин, а як основу - твердий жир. Приклад 8 Проведений аналогічно прикладу №4, тільки як антимікробний засіб склад містить офлоксацин, а як основу - твердий жир. Приклад 9 Проведений аналогічно прикладу №1, тільки як антимікробний засіб склад містить амоксицилін, а як основу - масло какао. Приклад 10 Проведений аналогічно прикладу №2, тільки як антимікробний засіб склад містить амоксицилін, а як основу - масло какао. Приклад 11 Проведений аналогічно прикладу №3, тільки як антимікробний засіб склад містить амоксицилін, а як основу - масло какао. Приклад 12 Проведений аналогічно прикладу №4, тільки як антимікробний засіб склад містить амоксицилін, а як основу - масло какао. Приклад 13 Проведений аналогічно прикладу №1, тільки як антимікробний засіб склад містить ампіцилін. Приклад 14 Проведений аналогічно прикладу №2, тільки як антимікробний засіб склад містить ампіцилін. Приклад 15 Проведений аналогічно прикладу №3, тільки як антимікробний засіб склад містить ампіцилін. Приклад 16 Проведений аналогічно прикладу №4, тільки як антимікробний засіб склад містить ампіцилін. Приклад 17 Проведений аналогічно прикладу №1, тільки як антимікробний засіб склад містить цефаклор. Приклад 18 Проведений аналогічно прикладу №2, тільки як антимікробний засіб склад містить цефаклор. Приклад 19 Проведений аналогічно прикладу №3, тільки як антимікробний засіб склад містить цефаклор. Приклад 20 Проведений аналогічно прикладу №4, тільки як антимікробний засіб склад містить цефаклор. 86261 8 Приклад 21 Проведений аналогічно прикладу №1, тільки як антимікробний засіб склад містить цефіксим. Приклад 22 Проведений аналогічно прикладу №2, тільки як антимікробний засіб склад містить цефіксим. Приклад 23 Проведений аналогічно прикладу №3, тільки як антимікробний засіб склад містить цефіксим. Приклад 24 Проведений аналогічно прикладу №4, тільки як антимікробний засіб склад містить цефіксим. Приклад 25 Проведений аналогічно прикладу №1, тільки як антимікробний засіб склад містить доксициклін. Приклад 26 Проведений аналогічно прикладу №2, тільки як антимікробний засіб склад містить доксициклін. Приклад 27 Проведений аналогічно прикладу №3, тільки як антимікробний засіб склад містить доксициклін. Приклад 28 Проведений аналогічно прикладу №4, тільки як антимікробний засіб склад містить доксициклін. Приклад 29 Проведений аналогічно прикладу №1, тільки як антимікробний засіб склад містить тетрациклін. Приклад 30 Проведений аналогічно прикладу №2, тільки як антимікробний засіб склад містить тетрациклін. Приклад 31 Проведений аналогічно прикладу №3, тільки як антимікробний засіб склад містить тетрациклін. Приклад 32 Проведений аналогічно прикладу №4, тільки як антимікробний засіб склад містить тетрациклін. Приклад 33 Проведений аналогічно прикладу №1, тільки як антимікробний засіб склад містить котримоксазол. Приклад 34 Проведений аналогічно прикладу №2, тільки як антимікробний засіб склад містить котримоксазол. Приклад 35 Проведений аналогічно прикладу №3, тільки як антимікробний засіб склад містить котримоксазол. Приклад 36 Проведений аналогічно прикладу №4, тільки як антимікробний засіб склад містить котримоксазол. Приклад 37 Проведений аналогічно прикладу №1, тільки як антимікробний засіб склад містить рибавірин. Приклад 38 Проведений аналогічно прикладу №2, тільки як антимікробний засіб склад містить рибавірин. Приклад 39 Проведений аналогічно прикладу №3, тільки як антимікробний засіб склад містить рибавірин. Приклад 40 Проведений аналогічно прикладу №4, тільки як антимікробний засіб склад містить рибавірин. 9 Приклад 41 Проведений аналогічно прикладу №1, тільки як антимікробний засіб склад містить ламівудин. Приклад 42 Проведений аналогічно прикладу №2, тільки як антимікробний засіб склад містить ламівудин. Приклад 43 Проведений аналогічно прикладу №3, тільки як антимікробний засіб склад містить ламівудин. Приклад 44 Проведений аналогічно прикладу №4, тільки як антимікробний засіб склад містить ламівудин. Приклад 45 Проведений аналогічно прикладу №1, тільки як антимікробний засіб склад містить метронідазол. Приклад 46 Проведений аналогічно прикладу №2, тільки як антимікробний засіб склад містить метронідазол. Приклад 47 Проведений аналогічно прикладу №3, тільки як антимікробний засіб склад містить метронідазол. Приклад 48 Проведений аналогічно прикладу №4, тільки як антимікробний засіб склад містить метронідазол. Приклад 49 Проведений аналогічно прикладу №1, тільки як антимікробний засіб склад містить тинідазол. Приклад 50 Проведений аналогічно прикладу №2, тільки як антимікробний засіб склад містить тинідазол. Приклад 51 Проведений аналогічно прикладу №3, тільки як антимікробний засіб склад містить тинідазол. Приклад 52 Проведений аналогічно прикладу №4, тільки як антимікробний засіб склад містить тинідазол. Приклад 53 Розплавляють основу - вітепсол у кількості 1,862кг при температурі 55-65°С при перемішуванні. Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби у формі порошку із вмістом водорозчинних пептидів не менш 20% у кількості 0,596кг змішують із частиною, що розплавилась, вітепсолу, взятих у співвідношенні 1:1. Готують концентрат, розтираючи порошок на тривалковій розтиральній машині до 40мкм не менш 95%. Порошок антибіотика - ломефлоксацину в кількості 0,521кг змішують із частиною, що розплавилась, вітепсолу, взятих у співвідношенні 1:1. Готують концентрат, розтираючи порошок на тривалковій розтиральній машині до 40мкм не менш 95%. Протипротозойний засіб метронідазол у вигляді порошку в кількості 0,521кг змішують із частиною, що розплавилась, вітепсолу, взятих у співвідношенні 1:1. Готують концентрат, розтираючи порошок на тривалковій розтиральній машині до 40мкм не менш 95%. Отримані концентрати завантажують у вітепсол, що залишився, при перемішуванні до одержання однорідної маси. Готову масу заливають в комірки з полівінілхлоридної плівки й охолоджують. 86261 10 Одержують супозиторії масою 2,35г, що мають наступний склад: Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,4г Ломефлоксацин - 0,35г Метронідазол - 0,35г Основа - решта. Приклад 54 Проведений аналогічно прикладу №53, але при наступних кількостях компонентів: комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,081кг, ломефлоксацину - 0,244кг, метронідазолу - 0,244кг, основи - 2,931кг. Одержують супозиторії масою 2,15г, що мають наступний склад: Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,05г Ломефлоксацин - 0,15г Метронідазол - 0,15г Основа - решта. Приклад 55 Проведений аналогічно прикладу №53, але при наступних кількостях компонентів: комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,622кг, ломефлоксацину - 0,233кг, метронідазола - 0,233кг, основи - 2,412кг. Одержують супозиторії масою 2,25г, що мають наступний склад: Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,4г Ломефлоксацин - 0,15г Метронідазол - 0,15г Основа - решта. Приклад 56 Проведений аналогічно прикладу №53, але при наступних кількостях компонентів: комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,077кг, ломефлоксацину - 0,544кг, метронідазолу - 0,544кг, основи - 2,335кг. Одержують супозиторії масою 2,25г, що мають наступний склад: Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,05г Ломефлоксацин - 0,35г Метронідазол - 0,35г Основа - решта. Приклад 57 Проведений аналогічно прикладу №53, тільки як антибіотик засіб містить офлоксацин. Приклад 58 Проведений аналогічно прикладу №54, тільки як антибіотик засіб містить офлоксацин. Приклад 59 Проведений аналогічно прикладу №55, тільки як антибіотик засіб містить офлоксацин. Приклад 60 Проведений аналогічно прикладу №56, тільки як антибіотик засіб містить офлоксацин. Приклад 61 Проведений аналогічно прикладу №53, тільки як антибіотик засіб містить амоксицилін. Приклад 62 Проведений аналогічно прикладу №54, тільки як антибіотик засіб містить амоксицилін. 11 Приклад 63 Проведений аналогічно прикладу №55, тільки як антибіотик засіб містить амоксицилін. Приклад 64 Проведений аналогічно прикладу №56, тільки як антибіотик засіб містить амоксицилін. Приклад 65 Проведений аналогічно прикладу №53, тільки як антибіотик засіб містить ампіцилін. Приклад 66 Проведений аналогічно прикладу №54, тільки як антибіотик засіб містить ампіцилін. Приклад 67 Проведений аналогічно прикладу №55, тільки як антибіотик засіб містить ампіцилін. Приклад 68 Проведений аналогічно прикладу · №56, тільки як антибіотик засіб містить ампіцилін. Приклад 69 Проведений аналогічно прикладу №53, тільки як антибіотик засіб містить цефаклор. Приклад 70 Проведений аналогічно прикладу №54, тільки як антибіотик засіб містить цефаклор. Приклад 71 Проведений аналогічно прикладу №55, тільки як антибіотик засіб містить цефаклор. Приклад 72 Проведений аналогічно прикладу №56, тільки як антибіотик засіб містить цефаклор. Приклад 73 Проведений аналогічно прикладу №53, тільки як антибіотик засіб містить цефіксим. Приклад 74 Проведений аналогічно прикладу №54, тільки як антибіотик засіб містить цефіксим. Приклад 75 Проведений аналогічно прикладу №55, тільки як антибіотик засіб містить цефіксим. Приклад 76 Проведений аналогічно прикладу №56, тільки як антибіотик засіб містить цефіксим. Приклад 77 Проведений аналогічно прикладу №53, тільки як антибіотик засіб містить доксициклін. Приклад 78 Проведений аналогічно прикладу №54, тільки як антибіотик засіб містить доксициклін. Приклад 79 Проведений аналогічно прикладу №55, тільки як антибіотик засіб містить доксициклін. Приклад 80 Проведений аналогічно прикладу №56, тільки як антибіотик засіб містить доксициклін. Приклад 81 Проведений аналогічно прикладу №53, тільки як антибіотик засіб містить тетрациклін. Приклад 82 Проведений аналогічно прикладу №54, тільки як антибіотик засіб містить тетрациклін. Приклад 83 Проведений аналогічно прикладу №55, тільки як антибіотик засіб містить тетрациклін. 86261 12 Приклад 84 Проведений аналогічно прикладу №56, тільки як антибіотик засіб містить тетрациклін. Приклад 85 Розплавляють основу - вітепсол у кількості 1,862кг при температурі 55-65°С при перемішуванні. Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби у формі порошку із вмістом водорозчинних пептидів не менш 20% у кількості 0,596кг змішують із частиною, що розплавилась, вітепсолу, взятих у співвідношенні 1:1. Готують концентрат, розтираючи порошок на тривалковій розтиральній машині до 40мкм не менш 95%. Порошок антибіотика - ломефлоксацину в кількості 0,521кг змішують із частиною, що розплавилась, вітепсолу, взятих у співвідношенні 1:1. Готують концентрат, розтираючи порошок на тривалковій розтиральній машині до 40мкм не менш 95%. Протипротозойний засіб тинідазол у вигляді порошку в кількості 0,521кг змішують із частиною, що розплавилась, вітепсолу, узятих у співвідношенні 1:1. Готують концентрат, розтираючи порошок на тривалковій розтиральній машині до 40мкм не менш 95%. Отримані концентрати завантажують у вітепсол, що залишився, при перемішуванні до одержання однорідної маси. Готову масу заливають в комірки з полівінілхлоридної плівки й прохолоджують. Одержують супозиторії масою 2,35г, що мають наступний склад: Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,4г Ломефлоксацин - 0,35г Тинідазол - 0,35г Основа - решта. Приклад 86 Проведений аналогічно прикладу №85, але при наступних кількостях компонентів: комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,081кг, ломефлоксацину - 0,244кг, тинідазолу - 0,244кг, основи - 2,931кг. Одержують супозиторії масою 2,15г, що мають наступний склад: Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,05г Ломефлоксацин - 0,15г Тинідазол-0,15г Основа - решта. Приклад 87 Проведений аналогічно прикладу №85, але при наступних кількостях компонентів: комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,081кг, ломефлоксацину - 0,244кг, тинідазолу - 0,244кг, основи - 2,931кг. Одержують супозиторії масою 2,15г, що мають наступний склад: Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,05г Ломефлоксацин - 0,15г Тинідазол-0,15г Основа - решта. Приклад 88 Проведений аналогічно прикладу №85, але при наступних кількостях компонентів: комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози 13 великої рогатої худоби - 0,077кг, ломефлоксацину - 0,544кг, тинідазолу - 0,544кг, основи - 2,335кг. Одержують супозиторії масою 2,25г, що мають наступний склад: Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби - 0,05г Ломефлоксацин - 0,35г Тинідазол - 0,35г Основа - решта. Приклад 89 Проведений аналогічно прикладу №85, тільки як антибіотик засіб містить офлоксацин. Приклад 90 Проведений аналогічно прикладу №86, тільки як антибіотик засіб містить офлоксацин. Приклад 91 Проведений аналогічно прикладу №87, тільки як антибіотик засіб містить офлоксацин. Приклад 92 Проведений аналогічно прикладу №88, тільки як антибіотик засіб містить офлоксацин. Приклад 93 Проведений аналогічно прикладу №85, тільки як антибіотик засіб містить амоксицилін. Приклад 94 Проведений аналогічно прикладу №86, тільки як антибіотик засіб містить амоксицилін. Приклад 95 Проведений аналогічно прикладу №87, тільки як антибіотик засіб містить амоксицилін. Приклад 96 Проведений аналогічно прикладу №88, тільки як антибіотик засіб містить амоксицилін. Приклад 97 Проведений аналогічно прикладу №85, тільки як антибіотик засіб містить ампіцилін. Приклад 98 Проведений аналогічно прикладу №86, тільки як антибіотик засіб містить ампіцилін. Приклад 99 Проведений аналогічно прикладу №87, тільки як антибіотик засіб містить ампіцилін. Приклад 100 Проведений аналогічно прикладу №88, тільки як антибіотик засіб містить ампіцилін. Приклад 101 Проведений аналогічно прикладу №85, тільки як антибіотик засіб містить цефаклор. Приклад 102 Проведений аналогічно прикладу №86, тільки як антибіотик засіб містить цефаклор. Приклад 103 Проведений аналогічно прикладу №87, тільки як антибіотик засіб містить цефаклор. Приклад 104 Проведений аналогічно прикладу №88, тільки як антибіотик засіб містить цефаклор. Приклад 105 Проведений аналогічно прикладу №85, тільки як антибіотик засіб містить цефіксим. Приклад 106 Проведений аналогічно прикладу №86, тільки як антибіотик засіб містить цефіксим. 86261 14 Приклад 107 Проведений аналогічно прикладу №87, тільки як антибіотик засіб містить цефіксим. Приклад 108 Проведений аналогічно прикладу №88, тільки як антибіотик засіб містить цефіксим. Приклад 109 Проведений аналогічно прикладу №85, тільки як антибіотик засіб містить доксициклін. Приклад 110 Проведений аналогічно прикладу №86, тільки як антибіотик засіб містить доксициклін. Приклад 111 Проведений аналогічно прикладу №87, тільки як антибіотик засіб містить доксициклін. Приклад 112 Проведений аналогічно прикладу №88, тільки як антибіотик засіб містить доксициклін. Приклад 113 Проведений аналогічно прикладу №85, тільки як антибіотик засіб містить тетрациклін. Приклад 114 Проведений аналогічно прикладу №86, тільки як антибіотик засіб містить тетрациклін. Приклад 115 Проведений аналогічно прикладу №87, тільки як антибіотик засіб містить тетрациклін. Приклад 116 Проведений аналогічно прикладу №88, тільки як антибіотик засіб містить тетрациклін. Приклад 117 Проведений аналогічно прикладу №53, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб рибавірин. Приклад 118 Проведений аналогічно прикладу №54, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб рибавірин. Приклад 119 Проведений аналогічно прикладу №55, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб рибавірин. Приклад 120 Проведений аналогічно прикладу №56, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб рибавірин. Приклад 121 Проведений аналогічно прикладу №85, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб рибавірин. Приклад 122 Проведений аналогічно прикладу №86, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб рибавірин. Приклад 123 Проведений аналогічно прикладу №87, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб рибавірин. Приклад 124 Проведений аналогічно прикладу №88, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб рибавірин. 15 86261 Приклад 125 Проведений аналогічно прикладу №53, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб ламиіудин. Приклад 126 Проведений аналогічно прикладу №54, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб ламівудин. Приклад 127 Проведений аналогічно прикладу №55, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб ламівудин. Приклад 128 Проведений аналогічно прикладу №56, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб ламівудин. Приклад 129 Проведений аналогічно прикладу №85, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб ламівудин. Приклад 130 Проведений аналогічно прикладу №86, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб ламівудин. Приклад 131 Проведений аналогічно прикладу №87, тільки замість антибіотика засіб містить противірусний засіб ламівудин. Приклад 132 Проведений аналогічно прикладу №88, тільки 16 замість антибіотика засіб містить противірусний засіб ламівудин. Визначення вмісту водорозчинних пептидів здійснюють спектрофотометричним методом. Визначення вмісту антибіотика, зокрема ломефлоксацину, проводять методом високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) на рідинному хроматографі фірми Waters (або аналогічному) зі спектрофотометричним детектором. Випробування на мікробіологічну чистоту супозиторіїв проводили відповідно до вимог ГФ XI, вип.2, с.193 і Зміни №3, категорія ЗА. Отримані результати відповідають нормативним вимогам. Отримані супозиторії мають колір від білого або майже білого до світло-кремового із сіруватим відтінком кольору, торпедоподібної форми. За зовнішнім виглядом супозиторії задовольняють вимоги ГФ XI, вип.2. З метою визначення загальтоксичної дії й доказу ефективності пропонованого засобу проведені його доклінічні випробування на базі центральної науково-дослідної лабораторії Нижньогородської державної медичної академії в жовтні 2004 року. Для випробування був представлений засіб у вигляді супозиторію, що містить як діючі речовини комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби й ломефлоксацин, як антимікробний засіб. Вміст компонентів у мг на один супозиторій представлено в таблиці 1. Таблиця 1 Склад пропонованого засобу на один супозиторій, у мг Комплекс біорегуляторних пептидів передміхурової залози великої рогатої худоби (сампроста субстанції (простати екстракт)) (ФСП 0179-2983-02 або інший, зареєстрований в РФ, аналогічної якості) у перерахуванні на 20% вміст водорозчинних пептидів Ломефлоксацину гідрохлориду (НД 42-10824-00 або інший, зареєстрований у РФ, аналогічної якості) Основи для супозиторіїв: Вітепсолу (ТУ 3-2004 або іншого, дозволеного МОЗ РФ для виробництва лікарських засобів, аналогічної якості) Токсикологічні дослідження проводили відповідно до методичних рекомендацій «Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ», 2000. Матеріали експериментів піддавали статистичній обробці загальноприйнятим методом по Стьюденту. У звіті представлені експериментальні дані, отримані від 10-11 тварин у кожній із груп. Визначення гострої токсичності досліджуваної лікарської форми ректально технічно неможливо й недоцільно іншими способами введення. Тривалість субхронічного експерименту протягом 30 днів була вибрана для нової комбінації використовуваних у клінічній практиці компонентів. -100 -400 - достатня кількість до одержання супозиторію масою 2,25г Субхронічний експеримент проводили на рандомбредних білих пацюках-самцях масою 204±5г. Тварин тримали в пластикових клітках площею 2150см2 по 7-8 особин, при природному світловому режимі, годували брикетованими й натуральними кормами відповідно до норм, затвердженими МОЗ РФ. Всі піддослідні тварини були розділені на 3 групи по 11 особин у кожній. Групи формувалися методом випадкових чисел з використанням маси тіла як основна ознака. Схема експерименту наведена в таблиці 2. 17 86261 18 Таблиця 2 Схема субхронічного токсикологічного експерименту на білих пацюках №№груп 1 2 3 Стать тварин самці самці самці Кількість тварин у групі 11 11 11 Пропонований засіб уводили ректально щодня одноразово, протягом 1 місяця в дозах 14 (терапевтична) і 140мг/кг, десятикратно перевищуючу терапевтичну дозу для пацюків і в 70 разів - для людини в мг/кг. Міжвидовий розрахунок доз проводили по Freireich E.J. і співавтори. Загальний стан піддослідних тварин оцінювали за зовнішнім виглядом, поведінковими реакціями і інтегральними показниками (споживання корму й води, динаміка маси тіла). Доза препарату, мг/кг 14мг/кг 140мг/кг контроль Строки зняття показників Фон, 1 місяць Стан серцево-судинної системи вивчали за допомогою електрокардіографії (ЕКГ) у другому стандартному відведенні без наркозу на ЕКЧМПН3051 при швидкості протягання паперу 200мм/сек і відповідності 1мв - 20мм. Через 30 днів введення пропонованого засобу воно не викликало статистично значимих змін з боку параметрів, що вивчалися, електрокардіограми в піддослідних тварин (табл.3, 4). Таблиця 3 Параметри ЕКГ щурів до дії пропонованого засобу (М±m; n=10) № гру- Стать пи Доза мг/кг 1 ♂ 14,0 2 ♂ 140,0 3 ♂ контроль Амплітуда зубців, мв Р R 0,103 ±0,004 0,102 ±0,004 0,103 ±0,005 0,356 ±0,021 0,376 ±0,022 0,364 ±0,029 S Тривалість інтервалів, сек Т 0,017 0,089 ±0,011 ±0,005 0,009 0,094 ±0,009 ±0,003 0,045 0,084 ±0,038 ±0,005 PQ QRS QT 0,0408 ±0,0008 0,0389 ±0,0009 0,0403 ±0,0009 0,0183 ±0,0004 0,0187 ±0,0004 0,0184 ±0,0006 0,0562 ±0,0011 0,0568 ±0,0015 0,0556 ±0,0015 RR ЧСС в хв. 0,1112 540,1±5,9 ±0,0012 0,1122 535,0±3,6 ±0,0008 0,1108 542,4±7,0 ±0,0015 Таблиця 4 Параметри ЕКГ щурів після 30 днів введення пропонованого засобу (М±m; n=10) № гру- Стать пи Доза мг/кг 1 ♂ 14,0 2 ♂ 140,0 3 ♂ контроль Амплітуда зубців, мв Р R 0,096 ±0,004 0,197 ±0,005 0,102 ±0,003 0,383 ±0,016 0,372 ±0,024 0,386 ±0,020 S Тривалість інтервалів, сек Т 0,024 0,091 ±0,018 ±0,006 0,021 0,089 ±0,011 ±0,007 0,067 0,087 ±0,033 ±0,004 Про стан периферичної крові судили по кількості еритроцитів і лейкоцитів (підрахунок у камері Горяєва), тромбоцитів (підрахунок у мазках крові) і ретикулоцитів - підрахунок у мазках крові, пофарбованих брильянтовим крезиловим синім, лейкограмі - підрахунок у мазках крові, пофарбованих по Романовському-Гимза, гемоглобіну (вимір на гемоглобінометрі ГФЗ), параметрах згортання крові (коагулограф Н-334). PQ QRS QT RR 0,0408 ±0,0009 0,0409 ±0,0012 0,0415 ±0,0006 0,0189 ±0,0006 0,0203 ±0,0004 0,0196 ±0,0007 0,0584 ±0,0012 0,0591 ±0,0014 0,0583 ±0,0019 0,1128 ±0,0013 0,1154 ±0,0011 0,1136 ±0,0015 ЧСС в хв. 532,5 ±6,06 520,4 ±5,06 529,0 ±7,08 При впливі пропонованого засобу протягом 30 днів у периферичній крові пацюків всіх піддослідних груп не було істотних відмінностей від контролю з боку показників, що вивчалися (еритроцити, лейкоцити, гемоглобін, ретикулоцити, тромбоцити, лейкоцитарна формула). Дані представлені в таблицях 5, 6. 19 86261 20 Таблиця 5 Стан периферичної крові в пацюків до початку введення пропонованого засобу (M±m; n=10) №№ Стать Доза мг/кг Гемоглобін, г/л Еритроцити, Т/Л Колірний показник Ретикулоцити, % Тромбоцити, Г/л Лейкоцити, Г/л нейтрофіли Лейкограма лімфоцити (Г/л) моноцити еозинофіли п/я с/я 1 ♂ 14,0 121,00±3,75 7,87±0,44 0,797±0,065 28,30±1,76 537,40±34,24 14,16±0,97 0,214±0,028 1,810±0,289 11,82±0,75 0,135±0,049 0,188±0,042 2 ♂ 140,0 120,25±4,26 6,91±0,44 0,905±0,066 29,00±1,92 449,62±31,85 12,94±1,07 0,181±0,026 1,818±0,202 10,73±0,95 0,129±0,046 0,088±0,044 3 ♂ контроль 118,50±3,65 8,02±0,49 0,764±0,050 30,30±1,94 555,48±43,95 14,11±0,93 0,198±0,029 2,185±0,283 11,50±0,72 0,125±0,035 0,101±0,030 Таблиця 6 Стан периферичної крові в пацюків після 30 днів введення пропонованого засобу (M±m; n=10) №№ Стать Доза мг/кг Гемоглобін, г/л Еритроцити, Т/Л Колірний показник Ретикулоцити, % Тромбоцити, Г/л Лейкоцити, Г/л нейтрофіли Лейкограма лімфоцити (Г/л) моноцити еозинофіли п/я с/я 1 ♂ 14,0 127,40±4,63 8,71±0,17 0,736±0,035 24,20±1,81 584,55±16,97 16,99±0,32 0,273±0,029 2,544±0,194 14,01±0,23 0,050±0,026 0,121±0,027 Протягом 30 днів експерименту пропонований засіб не впливав на стан згортання крові піддослі 2 ♂ 140,0 127,25±3,53 8,77±0,24 0,715±0,027 22,10±2,67 569,32±23,33 16,34±0,63 0,212±0,025 2,348±0,273 13,51±0,50 0,103±0,046 0,166±0,043 3 ♂ контроль 127,40±4,01 8,74±0,23 0,734±0,032 23,70±2,62 573,62±21,83 16,38±0,59 0,227±0,025 2,043±0,210 13,85±0,50 0,147±0,052 0,116±0,034 дних тварин, судячи з параметрів коагулограми (табл.7). Таблиця 7 Стан згортання крові в пацюків після 30 днів введення пропонованого засобу (M±m; n=10) №№ групи Стать Доза мг/кг 1 ♂ 14,0 2 ♂ 140,0 3 ♂ контроль Початок 121,70 ±14,44 120,00 ±20,30 120,90 ±17,92 Згортання, сек. Швидкість згортання Кінець Тривалість за 1хв. за 2хв. за 3хв. 305,70 184,00 ±21,51 0,800 ±0,125 0,420 ±0,124 0,080 ±0,055 ±13,89 279,00 159,00 ±42,99 1,680 ±0,403 0,510 ±0,203 0,290 ±0,116 ±60,06 300,30 179,40 ±13,15 0,830 ±0,166 0,690 ±0,157 0,210 ±0,142 ±24,03 Програма вивчення загальнотоксичної дії пропонованого засобу включала набір тестів для оцінки функції печінки. Видільну й поглинальну функції печінки вивчали по БСФ - пробі, білоксинтезуючу функцію - по вмісту загального білка за допомогою біуретової реакції, ліпідну - по вмісту загальних ліпідів колориметричним методом з реактивом, що складається з ваніліну й фосфорної кислоти, вмісту загального холестерину по методу Ілька. Антитоксичну функцію печінки оцінювали по тривалості "гексеналового" сну. 21 86261 Введення пропонованого засобу протягом 30 днів не робило впливу на видільну, поглинальну й 22 білоксинтезуючу функцію печінки у всіх піддослідних тварин (табл.8, 9). Таблиця 8 Стан поглинальної й видільної функції печінки пацюків після 30 днів введення пропонованого засобу (М±m; n=10) №№ групи 1 2 3 Стать ♂ ♂ ♂ Доза мг/кг 14,0 140,0 контроль Ретенція БСФ у крові (%) 14,53±0,29 14,13±0,22 14,42±0,48 Таблиця 9 Вплив пропонованого засобу на концентрацію загального білка в сироватці крові пацюків (M±m; n=10) №№ групи Стать Доза мг/кг 1 2 3 ♂ ♂ ♂ 14,0 140,0 контроль Загальний білок сироватки крові (г/л) До початку введення Після 30 днів введення 85,20±2,59 86,69±1,30 85,07±2,01 90,37±1,53 85,73±1,57 88,34±1,62 Ліпідна функція печінки й вміст глюкози в крові у всіх піддослідних груп не відрізнялися від контролю (табл.10, 11). Таблиця 10 Вплив пропонованого засобу на вміст загальних ліпідів у сироватці крові пацюків (М±m; n=10) №№ групи Стать Доза мг/кг 1 2 3 ♂ ♂ ♂ 14,0 140,0 контроль Загальні ліпіди (г/л) До початку введення Після 30 днів введення 2,542±0,101 2,036±0,115 2,553±0,076 1,988±0,103 2,578±0,091 1,939±0,116 Таблиця 11 Вплив пропонованого засобу на вміст глюкози в сироватці крові (М±m; n=10) №№ групи Стать Доза мг/кг 1 2 3 ♂ ♂ ♂ 14,0 140,0 контроль Глюкоза сироватки крові (мМ/л) До початку введення Після 30 днів введення 3,807±0,0,85 3,865±0,097 3,759±0,101 3,833±0,131 3,837±0,098 3,702±0,112 На концентрацію загального холестерину в сироватці крові тварин всіх піддослідних груп про понований засіб не робив помітного (табл.12). впливу Таблиця 12 Вплив пропонованого засобу на концентрацію загального холестерину в сироватці крові пацюків (М±m; n=10) №№ групи Стать Доза мг/кг 1 2 3 ♂ ♂ ♂ 14,0 140,0 контроль Загальний холестерин (мМ/л) До початку введення Після 30 днів введення 1,81±0,08 1,82±0,08 1,78±0,09 1,76±0,08 1,85±0,08 1,76±0,08 23 86261 Антитоксична функція печінки, судячи із тривалості "гексеналового" сну, у всіх піддослідних 24 тварин не відрізнялася від контролю (табл.13). Таблиця 13 Стан антитоксичної функції печінки пацюків (М±m; n=10) №№ групи 1 2 3 Стать ♂ ♂ ♂ Доза мг/кг 14,0 140,0 контроль Тривалість "гексеналового" сну, хв. 22,60±2,17 19,00±2,31 21,00±3,05 Функціональний стан підшлункової залози й побічно вуглеводну функцію печінки визначали по вмісту глюкози в сироватці крові глюкозооксидазним методом. Функцію видільної системи досліджували по наступній програмі: спонтанний діурез за 18 годин, питома маса сечі вагарним методом, рН сечі, сечовина в сироватці крові й сечі діацетилмонооксимним методом з наступним розрахунком стандартного коефіцієнта очищення сечовини (СКОС); вміст креатиніну в сироватці крові й сечі по реакції Яффе й визначення кліренсу креатиніну як показника клубочкової фільтрації; вміст іонів калію й натрію в сироватці крові і їхнє виведення із сечею методом полум'яної фотометрії на ПФМ-1; навантаження феноловим червоним як показник секреторної функції нирок. Під впливом препарату функціональний стан нирок у всіх піддослідних тварин практично не змінювався (табл.14-20). Таблиця 14 Показники видільної системи пацюків до початку введення пропонованого засобу (М±m; n=10) Концентрація сечовини, мм/л у сир. у сечі крові 40,49± 1,038±0,003 7,00±0,16 0,95 40,63± 1,041±0,002 7,39±0,17 0,88 40,79± 1,043±0,003 7,20±0,13 0,98 Діурез №№ РН сечі, Питома маса Стать Доза мг/кг за 18год., групи од сечі, г/см3 мл 1 ♂ 14,0 2,29±0,18 6,6±0,1 2 ♂ 140,0 2,39±0,26 6,6±0,1 3 ♂ контроль 2,51±0,28 6,6±0,1 Вміст сечовини в сечі, мм/18год. 0,092±0,006 0,098±0,011 0,103±0,013 СКОМ 0,264± 0,008 0,257± 0,018 0,270± 0,018 Таблиця 15 Показники видільної системипацюків після 30 днів введення пропонованого засобу (M±m; n=10) Питома ма- Концентрація сечови- Вміст сечоса сечі, ни, мм/л вини в сечі, г/см3 мм/18 год. у сир. крові у сечі №№ групи Стать Доза мг/кг Діурез рН сечі, за 18год., мл од. 1 ♂ 14,0 3,410±0,421 6,7±0,1 1,041±0,001 7,08±0,18 39,83±0,87 0,135±0,016 2 ♂ 140,0 3,140±0,334 6,7±0,1 1,043±0,002 7,15±0,18 40,15±1,02 0,128±0,016 3 ♂ контроль 3,640±0,499 6,8±0,1 1,041±0,002 7,22±0,17 40,40±0,76 0,148±0,021 СКОМ 0,309± 0,019 0,301± 0,021 0,322± 0,029 Таблиця 16 Стан секреторної функції нирок пацюків після 30 днів введення пропонованого засобу (M±m; n=10) №№ групи 1 2 3 Стать ♂ ♂ ♂ Доза мг/кг 14,0 140,0 контроль Екскреція фенолового червоного мг/2 години 40,18±1,64 39,77±1,71 38,23±0,86 25 86261 26 Таблиця 17 Показники мінерального обміну пацюків до початку введення пропонованого засобу (M±m; n=10) №№ груСтать пи 1 2 3 ♂ ♂ ♂ Калій Доза мг/кг 14,0 140,0 контроль сироватка, мМ/л 6,60±0,16 6,59±0,36 6,50±0,31 Сеча мМ/18год 0,49±0,05 0,47±0,06 0,52±0,06 Натрій сироватка, Сеча мМ/л мМ/18год 167,04±5,16 0,43±0,05 170,52±4,14 0,45±0,07 173,13±4,93 0,50±0,07 Na+/K+ 25,3/1 25,8/1 26,6/1 Таблиця 18 Показники мінерального обміну пацюків після 30 днів введення пропонованого засобу (M±m; n=10) №№ групи Стать Доза мг/кг 1 2 3 ♂ ♂ ♂ 14,0 140,0 контроль Калій сироватка, Сеча мМ/л мМ/18год 6,44±0,34 0,66±0,09 6,44±0,34 0,60±0,07 6,60±0,39 0,69±0,11 Натрій сироватка, Сеча мМ/л мМ/18год 179,18±6,36 0,97±0,14 187,05±7,70 0,89±0,08 182,74±6,60 0,98±0,16 Na+/K+ 27,8/1 29,0/1 27,7/1 Таблиця 19 Клубочкова фільтрація нирок пацюків до початку введення пропонованого засобу (M±m;n=10) №№ групи Стать Доза мг/кг Діурез за 18год, мл 1 2 3 ♂ ♂ ♂ 14,0 140,0 контроль 2,29±0,18 2,39±0,26 2,51±0,28 Концентрація креатиніну, мкм/л мм/л у сироватці крові у сечі 69,60±2,16 10,26±0,24 70,76±2,77 9,98±0,26 71,34±2,94 10,21±0,18 Кліренс креатиніну, мол/хв 0,3163±0,0284 0,3124±0,0327 0,3346±0,0377 Таблиця 20 Клубочкова фільтрація нирок пацюків після 30 днів введення пропонованого засобу (M±m; n=10) №№ групи Стать Доза мг/кг Діурез за 18год, мл 1 2 3 ♂ ♂ ♂ 14,0 140,0 контроль 3,67±0,44 3,14±0,33 3,64±0,50 Функціональний стан нервової системи оцінювали методом "відкритого поля" по Буасьє у власній модифікації, по спонтанній руховій активності, що реєструвалася за допомогою актометра фірми "Ugo Basile" і по сумаційно-граничному показнику. Концентрація креатиніну, мкм/л мм/л у сироватці крові у сечі 71,66±3,62 10,29±0,16 70,52±3,29 9,95±0,24 73,65±2,07 10,39±0,25 Кліренс креатиніну, мол/хв. 0,4832±0,0541 0,4035±0,0360 0,4750±0,0658 Через 30 днів після початку введення параметри "відкритого поля" істотно не відрізнялися від контролю (табл.21, 22). 27 86261 28 Таблиця 21 Функціональні показники стану нервової системи пацюків до початку введення пропонованого засобу (М±m; n=11) №№ групи Стать Доза мг/кг Відкрите Перетинання квадполе ратів Стійки Умивання Чищення Обтрушування Дефекації Норко1-5хв. вий ре6-10хв. флекс за 10хв. 1 ♂ 14,0 2 ♂ 140,0 3 ♂ контроль 46,0±9,4 37,4±4,8 63,5±13,1 14,8±2,3 2,8±1,0 1,4±0,4 2,1±0,6 4,3±0,5 4,2±1,0 2,6±1,3 6,8±1,9 10,2±2,4 5,0±0,7 1,7±0,7 1,3±0,6 4,7±0,7 3,5±1,6 1,4±0,8 4,8±2,3 18,5±4,0 4,6±0,9 2,3±0,6 0,9±0,4 4,6±0,5 8,2±2,0 3,0±0,9 11,2±2,6 Таблиця 22 Функціональні показники стану нервової системи пацюків після 30 днів введення пропонованого засобу (М±m; n=11) №№ Стать групи 1 2 3 ♂ ♂ ♂ Відкрите поле Перетинання Стійки Умивання Чищення квадратів 14,0 47,7±11,9 9,3±2,0 3,4±0,7 1,3±0,6 140,0 45,2±14,5 9,9±3,1 3,7±0,8 1,3±0,7 контроль 30,9±12,5 8,3±2,4 1,8±0,6 1,1±0,5 Доза мг/кг Після 1 місяця введення пропонованого засобу показники загальної рухової активності й емо Норковий рефлекс Обтрушу- Дефеза 1-5хв. 6-10хв. вання кації 10хв. 1,1±0,6 2,7±0,6 1,8±0,6 2,0±0,6 3,2±0,9 1,1±0,6 3,3±0,6 1,5±0,9 1,5±0,6 2,9±1,4 1,4±0,7 3,4±0,8 1,0±0,4 1,6±0,7 2,6±0,9 ційного стану істотно не відрізнялися від контролю. Дані наведені в таблиці 23. Таблиця 23 Вплив пропонованого засобу на рухову активність пацюків (М±m; n=11) №№ групи Стать Доза мг/кг 1 2 3 ♂ ♂ ♂ 14,0 140,0 контроль Локомоції Після 14 днів До введення введення 173,45±10,91 127,09±17,43 162,27±8,90 120,45±20,56 188,18±17,43 165,27±20,06 Дефекації Після 14 днів ввеДо введення дення 3,09±0,73 2,55±0,59 3,91±0,72 3,64±0,64 2,36±0,96 1,82±0,92 Пропонований засіб після 30 днів ректального введення не викликав достовірних змін у СГП сумаційно-граничному показнику (табл.24). Таблиця 24 Вплив пропонованого засобу на сумаційно-граничний показник пацюків (М±m; n=11) №№ групи 1 2 3 Стать Доза мг/кг ♂ ♂ ♂ 14,0 140,0 контроль Сумаційно-граничний показник До введення Після 30 днів введення 3,75±0,15 3,42±0,14 3,95±0,16 3,65±0,23 3,76±0,10 3,36±0,17 За час проведення експерименту загибелі тварин не спостерігалося. Огляд тварин показав, що всі вони нормально вгодовані, мають правиль ну статуру, охайні, волосяний покрив і природні отвори чисті. 29 86261 Після завершення експерименту піддослідних тварин умертвляли (дислокація), розтинали, визначали відносну масу органів. При візуальному дослідженні під час розтину, з боку внутрішніх органів істотних розходжень у піддослідних і контрольних пацюків не виявлено. Органи правильно розташовані, вільної рідини в грудній і черевній порожнинах немає. Візуальних ознак патології органів і тканин не виявлено. М'яз серця й клапани без змін. Просвіти трахеї й великих бронхів вільні. Тканина легенів повітряна, рожевого кольору, без ознак набряку. Слизова оболонка шлунка, 12-персної кишки, тонкого й товстого кишечнику, апендикса без виразок і крововиливів. Капсула нирок знімається легко, на розрізі коркова й мозкова речовини гарно помітні. Тимус сіро-рожевого кольору, не збільшений. Щитовидна 30 залоза рожевого кольору з добре помітною паращитовидною залозою. Наднирковики без змін. Оболонки головного мозку не напружені, звивини добре виражені. Статеві органи без бодай-яких відхилень. Для патоморфологічних досліджень були взяті від піддослідних тварин всіх груп наступні органи: головний мозок, серце, лімфатичні вузли, селезінка, щитовидна й паращитовидна залози, тимус, наднирковики, гіпофіз, шлунок, тонкий і товстий кишечники, підшлункова залоза, печінка, легені, нирки, насінники, передміхурова залоза. Визначення відносної маси органів піддослідних тварин не виявило істотних відмінностей від контролю при впливі пропонованого засобу в зазначених дозах (табл.25). Таблиця 25 Відносна маса органів пацюків в експерименті по вивченню загальтоксичної дії пропонованого засобу (М±m; n=10) №№ Стать Доза мг/кг Печінка Серце Селезінка ВідноНирки шення маси Наднирковики органів до маси тіла (%) насінники Щитовидна залоза Мозок Гіпофіз ліва права лівий правий лівий правий 1 ♂ 14,0 3,76±0,16 0,380±0,017 0,588±0,044 0,402±0,017 0,401±0,016 0,0137±0,0023 0,0155±0,0022 0,5165±0,0188 0,5169±0,0174 0,0066±0,0011 0,618±0,025 0,00347±0,00008 Морфологічна структура вивчених органів контрольних тварин відповідає нормі. У порівнянні з контрольною групою у тварин 2ї групи (140мг/кг) відзначена невелика макрофагальна реакція в мозковому шарі лімфовузлів, добре виражені реактивні центри. У наднирковиках невелике й помірне венозне повнокров'я мозкового шару. У місці введення пропонованого засобу патологічних змін немає. Для вивчення специфічної фармакологічної дії пропонованого засобу у вигляді супозиторіїв ректальних були проведені експерименти з використанням статевозрілих безпородних білих пацюків (розплідник «Столбовая» ГУ НЦ БМТ РАМН). Утримання тварин відповідало правилам облаштування, устаткування й утримання експериментально-біологічних клінік (віваріїв). Годували тварин натуральними й брикетованими кормами відповідно до затверджених норм. Тварини пройшли карантин і акліматизацію в умовах віварію протягом 14 доби. Експериментальні групи тварин формували методом випадкової вибірки з урахуванням маси тіла як визначального показника. Експерименти проводилися в жовтні 2004р. 2 ♂ 140,0 3,87±0,12 0,383±0,014 0,494±0,045 0,403±0,007 0,403±0,007 0,0115±0,0006 0,0137±0,0013 0,5229±0,0201 0,5227±0,0173 0,0076±0,0008 0,679±0,019 0,00352±0,00014 3 ♂ контроль 3,71±0,10 0,356±0,013 0,501±0,055 0,392±0,015 0,384±0,014 0,0101±0,0007 0,0113±0,0010 0,5111±0,0199 0,5137±0,0199 0,0080±0,0003 0,661±0,033 0,00356±0,00019 Порядок ідентифікації особин: маркування тварин по групах здійснювалося за допомогою надсічок на вушній раковині й фарбування барвниками (еозин і метиленовий синій) поверхні хвоста за розробленими схемами, відповідно до наявних рекомендацій. Спосіб евтаназії тварин: декапітація. Кількість тварин у досліджуваних групах - 10. Для оцінки ефективності вивчена дія пропонованого засобу при ректальному застосуванні. Пропонований засіб уводився у вигляді спеціально виготовлених маленьких ректальних супозиторіїв, що містять діючу й допоміжну речовини у відповідному дозуванні, закладеному в нормативній документації на даний лікарський засіб. Як контрольна речовина при ректальному застосуванні використовувалися супозиторії, спеціально виготовлені з основи лікарського засобу. Супозиторії ректальні вводили пацюкам 1 раз на добу після спорожнювання кишечнику. Вибір доз препарату для дослідження здійснювався з урахуванням передбачуваного курсу застосування пропонованого засобу в людини. Тривалість введення лікарського засобу твариною протягом експерименту склала 10 днів. 31 При розрахунку доз виходили з добової дози препарату Ломефлоксацин: 400мг на людину масою 70кг і з урахуванням коефіцієнта перерахування на пацюків 5,9. Таким чином еквітерапевтична доза по ломефлоксацину становить: 400/70×5,9=33,7мг/кг. Специфічна фармакологічна дія препарату вивчена при моделюванні септичного простатиту в пацюків. Перед проведенням моделювання простатиту визначали бактеростатичну й бактерицидну активність препарату в тесті in vitro. Для визначення виразності бактерицидного ефекту препарату в системах in vitro вивчали його вплив на чутливі мікроорганізми, зазначені в регламенті фірмивиготовлювача. В експериментах використовували типові штами: Staphylococcus aureus штам 7М (ННИЭМ, Н.Новгород) і Esherichia coli штам 18М (кафедра мікробіології й імунології, ГОУ ВПО НижГМА). Для вирощування стафілококів і кишкової палички використовували м'ясо-пептонний бульйон (МПБ) і м'ясо-пептонний агар (МПА). Суспензію мікроорганізмів, що містить 107 мікробних тіл в 1мол (початкова концентрація) готували шляхом змиву забуференим фізіологічним розчином (pH 7, 2-7,4) 24-годинної агарової культури. Стандартизація мікробної суспензії проводилася за стандартом мутності Державного контрольного інституту медичних біологічних препаратів ім. Л.А. Тарасевича для бактерій. Вивчення бактерицидної й бактеріостатичної активності здійснювали відповідно до раніше описаних рекомендацій у власній модифікації. Метод серійних розведень. Готували розведення матеріалу супозиторіїв у живильному середовищі. Для цього препарат розчиняли в м'ясопептонному бульйоні в співвідношенні 1:30. У пробірки із середовищем (3мол), що містить препарат і без препарату (контроль), вносили по 0,3мол суспензії мікроорганізмів для одержання різних кінцевих концентрацій (1×107, ×106, 1×105, 1×104, 1×103). Пробірки інкубували (37°С, 24год). Всі експерименти ставилися в 3-х повторах. Ураховували пробірки, у яких спостерігався ріст мікроорганізмів. Дифузійний метод. Метод використовували для виявлення бактерицидної активності нативної речовини ректальних супозиторіїв на Esherichia coli - одного із провідних збудників піогенних урогенітальних інфекцій. Розливали простий агар у чашки Петрі (20мол на чашку). Після застигання, у центрі агару пробивали 4 лунки (діаметр 5мм). На поверхню агару поміщали 0,1мол суспензії Esherichia coli штам 17Μ (початкова концентрація 1×109) і засівали суцільним газоном по методу Дригальского. Потім у кожну лунку вносили по 100мг речовини супозиторіїв. Чашки з агаром термостатували (37°С, 24год). Результати враховували шляхом вимірювання діаметра зони (мм) затримання росту грибів навколо лунки із препаратом. Всі експерименти ставили в трьох повторах. Ураховували середній результат експериментів. Для моделювання септичного простатиту були обрані мікроорганізми Escherichia coli, як найбільш імовірні збудники інфекційних простатитів, тому 86261 32 що набагато рідше зустрічаються інші представники сімейства Enterobacteriaceae і Pseudomonas sp. Як матеріал для інфікування використовували суспензію чутливих до препарату (за даними тестів in vitro) Esherichia coli штам 18M у фізіологічному розчині (1×109КОЕ/мол.). Використовувані для експерименту фетрові диски розмірами 2´1´1мм занурювали у фізіологічний розчин суспензії бактерій. Під нембуталовим наркозом (40мг/кг) проводилася операція з розкриттям черевної порожнини експериментальних тварин і підшиванням фетрового диска, насиченого мікроорганізмами, до передміхурової залози. Через 3 доби розвивався септичний простатит, і в експериментальних групах починалося лікування пропонованим засобом, супозиторіями ректальними (ОАО «Нижфарм», Росія); лікування проводилося протягом 10 діб. Після проходження повного курсу лікування у тварин брали біопсію простати (100мг тканини) і ретельно розтирали й робили розведення 1:10, 1:100 у стерильному фізіологічному розчині. Засівали по 0,1мол розведеної суспензії на селективний агар Ендо за методом Дригальского (суцільним газоном). Всі експерименти ставили в трьох повторах. Ураховували середній результат експериментів. Підраховували кількість КОЕ Ε. coli після інкубації (24год, 37°С). Оцінка стану тварин і розвитку експериментального простатиту без лікування й на тлі лікування проводилося щодня за параметрами зовнішнього вигляду тварин, а на третю, сьому й чотирнадцяту добу розвитку простатиту за параметрами маси тіла, аналізу фагоцитарної активності крові, підрахунку лейкоцитів і лейкоцитарної формули, вмісту загального білка в сироватці крові, патоморфологічних досліджень простати. Аналіз фагоцитарної активності крові здійснювався за допомогою методу люмінолзалежної хемілюміністенції. Метод базується на виділенні активних форм кисню стимульованими клітинами. Яскравим спалахом хемілюміністенції супроводжується реакція взаємодії люмінолу з гіпохлоритом. За величиною інтегрального показника S (світлосума) оцінюється кількість утворених форм кисню, це значення пропорційне фагоцитарній активності. Як стимулятор фагоцитозу використовувався латекс із діаметром часток ~1мкм. Перед проведенням аналізу 48мг люмінолу розчиняли в 1мол 0,1н КОН. Після розчинення доводили до 100мол дистильованою водою. Наступного дня фільтрували через паперовий фільтр. Цільна гепаринізована кров розводилася в 100 разів (розчин Хенкса без барвника). Латекс перед уживанням відмивали до прозорого надосаду. Брали 1мол латексної суміші, додавали 10мол розчину Хенкса без барвника й центрифугували при 3000об. 15-20хв. У ході роботи зливали 0,7мол розведеної крові й 0,1мол основного розчинника. Далі в кювету в кюветному відділенні додавали 0,2мол люмінолу, 0,002мол латекса. Вимірювання проводилось протягом 15хв, кожна проба на приладі «БХЛ-06», з'єднаному з ПК. Протягом цього часу відбувалася реєстрація піка й підрахунок площі під піком (показник S) за допомо 33 86261 гою спеціалізованої програми LUM. Пік реєструвався в інтервалі 5-10хв від початку стимуляції й відображував повну фагоцитарну відповідь. Фагоцитарна активність оцінювалася в значеннях S-інтегрального показника сумарної світлосуми. Для вивчення структури простати при хронічному простатиті й лікуванні препаратами наприкінці експерименту простату висікали й фіксували в 10% розчині нейтрального формаліну протягом 48 годин. Після фіксації зразки простати промивали в проточній водопровідній воді протягом 12 годин і проводили зневоднювання в спиртах висхідної концентрації. Після зневоднювання зразки тканин проводили через проміжні середовища (суміш 100° спирт + хлороформ = 1:1, хлороформ + парафін = 1:1), просочували в 2-х порціях парафіну при t = 60°С і заливали в парафін «Пласт 54». Зрізи товщиною 5-7мкм готували на санному мікротомі Leica SM 2000R, наклеювали на знежирені сумішшю Нікіфорова (100° спирт + етиловий ефір = 1:1), предметні стекла підсушували в термостаті 34 при t = 37°С протягом 24 годин. Після депарафінування зрізи офарблювали гематоксиліном і еозином, збезводнювали в спиртах висхідної концентрації, просвітлювали в ксилолі й поміщували в канадський бальзам. Готові гістологічні препарати витримували в горизонтальному положенні протягом 24 годин до підсихання смоли й переглядали за допомогою світлового мікроскопа Leica DMLS при збільшенні 100 і 200. Методи статистичної обробки даних. Отримані результати були оброблені на ІВМ PC/AT за допомогою пакетів прикладних програм Statistica 6.O. Імовірність розходжень показників середніх у групах визначали з використанням критерію tСт'юдента. Розходження вважали достовірними при рівні значимості р