Схема комбінованого дозування для еритропоетину

1. Застосування еритропоетину (ЕПО) для лікування станів, які потребують підвищення загальної кількості еритроцитів та концентрації гемоглобіну у пацієнтів, які потребують такого лікування, шляхом введення вказаному суб'єкту 2 (19) 1 3 89630 4 12. Застосування за п. 11, яке відрізняється тим, 17. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що схему комбінованого дозування повторюють що використовується для лікування суб'єкта, котпринаймні приблизно 4 рази. рий потерпає від травматичного ушкодження. 13. Застосування за п. 12, яке відрізняється тим, 18. Набір, що включає компоненти схеми комбінощо схему комбінованого дозування повторюють ваного дозування, які містять першу дозувальну принаймні приблизно 2 рази. одиницю ЕПО, придатну для запровадження пер14. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, шої експозиції ЕПО у вигляді одиничної дози у що використовується для лікування суб'єкта, котдіапазоні від приблизно 150 IU/кг до приблизно рий потерпає від анемії. 2400 IU/кг, другу дозувальну одиницю ЕПО, прида15. Застосування за п. 14, яке відрізняється тим, тну для запровадження другої експозиції ЕПО у що анемія являє собою хронічну анемію. вигляді одиночної чи множинних доз низького рів16. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, ня, менших ніж приблизно 100 IU/кг/добу, та інщо використовується для лікування суб'єкта, котструкцію, що дозволяє проводити лікування за рий піддається хіміотерапії. індивідуальною схемою. Даний винахід запроваджує схему комбінованого дозування для еритропоетину, що є ефективною для збільшення продукування та збереження зрілих еритроцитів, і таким чином також, типово, для підвищення концентрації гемоглобіну. Корисним також є те, що дана схема комбінованого дозування може періодично повторюватись для підтримки підвищення концентрації гемоглобіну або для контролю концентрації гемоглобіну на потрібному рівні. Так, може бути вироблена схема дозування, що задовольняє особливі потреби різновиду пацієнтів, на відміну від звичайних схем дозування для еритропоетину (ΕΠΟ). Як такий, даний винахід також розкриває і запроваджує способи та засоби лікування, такі як набори для реалізації зазначеної схеми комбінованого дозування. Оксигенація тканин та органів тіла є комплексним процесом і базується на ефективній реалізації кількох функцій, наприклад, поглинання кисню, доставка кисню до тканин через оксигеновану артеріальну кров, вміст кисню у венозній крові і т.д. Неефективне виконання цих функцій, що і може відбуватись через будь-яку із множини причин, наприклад, аномальну пульмональну функцію, артеріолярну обструкцію або вазоконстрікцію, або знижену концентрацію гемоглобіну, може спричинювати недостатню оксигенацію тканин або тканинну гіпоксію. Через численні та складні задіяні функції тканинна оксигенація може оцінюватись, у найкращому випадку, лише посередньо. Проте, лікування тканинної гіпоксії є гранично важливим для будьякого пацієнта, оскільки тривала тканинна гіпоксія, яку інколи називають аноксією, може спричинити необоротне руйнування тканини. Розроблена множина способів лікування тканинної гіпоксії, і хоча, загалом, оптимальне лікування цієї хвороби базується, принаймні частково, на знанні причини, що її викликала, багато пацієнтів із тканинною гіпоксією отримують деяку користь від збільшення загальної кількості еритроцитів та, як правило, пов'язаного з ним супутнього підвищення концентрації гемоглобіну. Проте, стимуляція, продукування та підтримання потрібної загальної кількості еритроцитів також є складними проблемами. Тобто кожен тип клітин, що циркулюють у кровоносній системі, утворюється із депо вельми примітивних гемопоетичних стовбурових клітин і розмивається за будь яким із множини шляхів диференціації. Так, до будь-якого даного шляху у будь-який момент часу комітована, звичайно, обмежена кількість клітин. Після комітування визрівання та виживання цих комітованих попередників не гарантоване, і навіть якщо дозрівання досягнуто, зрілі клітини, звичайно, мають обмежений термін життя. Навіть якщо більший відсоток стовбурових клітин зміг би стати комітованими попередниками, наприклад, еритроїдального шляху, що веде до зрілих еритроцитів, лише деяка кількість цих комітованих попередників, або ретикулоцитів, досягне стадії інфантильних еритроцитів, або стане неоцитами. Подібно до цього, лише деяка кількість таких утворених неоцитів фактично виживе і перетворіться у зрілі еритроцити. Звичайні схеми дозування для ΕΠΟ ілюструють труднощі стимулювання та підтримки підвищеної кількості еритроцитів. Тобто, хоча такі схеми дозування ефективні для підвищення концентрації ретикулоцитів, що циркулюють у кровотоці, звичайно вони не дають тривалого підвищення, або взагалі не дають будь-якого підвищення загальної кількості еритроцитів та/або концентрації гемоглобіну. Такий результат не є дивним у світлі сучасного розуміння фармакології ΕΠΟ; даний ΕΠΟ зв'язується з рецепторами на комітованих попередниках, відвертаючи апоптоз та підтримуючи розвиток попередників у ретикулоцити. Наприклад, одна зі звичайних схем дозування для ΕΠΟ, наприклад, одна підшкірна ін'єкція ΕΠΟ, дійсно підвищує концентрацію ретикулоцитів у кровотоці, як можна було б очікувати, виходячи зі звичайних знань. Проте, дані, отримані від суб'єктів, котрі піддавались лікуванню за цією схемою дозування, демонструють, що підвищення загальної кількості еритроцитів та/або концентрації гемоглобіну невеликі, нетривалі або те й друге. Друга звичайна схема тижневого дозування підшкірних ін'єкцій такої самої дози ΕΠΟ може підвищити загальну кількість еритроцитів та дати підвищену концентрацію гемоглобіну; проте, така жорстка схема дозування може бути субоптимальною у плані негативного відношення пацієнта та/або занадто високої вартості. Крім того, така схема дозування не надає будь-якої гнучкості щодо відпрацювання способу лікування згідно зі специфічною етіологією окремого суб'єкта або бажаним результатом лікування. 5 89630 6 Таким чином, бажано запровадити таку схему загальної кількості еритроцитів та/або концентрації дозування та/або спосіб лікування із застосувангемоглобіну. ням ΕΠΟ, що зумовлять підвищення продукування У другому аспекті даний винахід запроваджує ретикулоцитів і також підвищать кількість ретикуспосіб для підсилення продукування та збереженлоцитів, які дозрівають до неоцитів, і далі підвиня зрілих еритроцитів, і як результат, типово, тащать число цих неоцитів, які виживають та стають кож підвищення концентрації гемоглобіну. Більш зрілими еритроцитами. Така схема дозування моконкретно, даний спосіб включає застосування же запровадити додаткові вигоди, якщо вона здатпринаймні першого дозувального сегмента, який на підтримувати будь-яке таке підвищення протявключає першу експозицію до ΕΠΟ, що є ефективгом будь-якого бажаного або потрібного часу, при ною в плані принаймні маргінального підвищення менш жорсткому, більш гнучкому графіку, ніж тижпродукування ретикулоцитів, з наступною другою неві еквівалентні дозування. експозицією до ΕΠΟ, що є ефективною у плані Даний винахід запроваджує схему комбіновадемонстрації принаймні деякого збільшення здатного дозування ΕΠΟ, котра забезпечує підвищену ності ретикулоцитів дозрівати до зрілих еритроциефективність і також надає більшу гнучкість у дотів. Застосування другої експозиції до ΕΠΟ бажано зуванні, ніж звичайні схеми дозування ΕΠΟ. Більш ініціювати у межах приблизно 3 діб, але не пізніше, конкретно, дана схема дозування може бути ефекніж приблизно 10 діб після першої експозиції, для тивною для підвищення продукування та підтримтого, щоб експонувати ΕΠΟ щодо будь-яких неоки зрілих еритроцитів, і таким чином, для підвицитів, котрі утворились протягом першої експозищення концентрації гемоглобіну. Корисним також є ції, у той час, коли, як очікується, неоцити дозріте, що дана схема комбінованого дозування може вають до зрілих еритроцитів. У деяких варіантах періодично повторюватись для підтримки таких може бути бажаним піддати новоутворені неоцити підвищень або для дійсного запровадження потрітривалій експозиції до ΕΠΟ, наприклад, викорисбних результатів лікування, так що може бути витовуючи множинні низькі добові дози, імплантат роблена така схема дозування, що задовольняє ΕΠΟ або петч, або ΕΠΟ тривалої дії. особливі потреби більш широкого різновиду пацієЗазначений дозувальний сегмент може бути нтів, на відміну від звичайних схем дозування для потім повторений з будь-яким погрібним інтерваΕΠΟ. лом для запровадження будь-якого бажаного реТаким чином, у першому аспекті даний винахід зультату, як може бути визначено особливими запроваджує схему дозування ΕΠΟ. Дана схема потребами суб'єкта, наприклад, з інтервалами, що дозування включає застосування принаймні перзабезпечують суттєве збереження, підвищення шого дозувального сегмента, який включає першу або зниження кількості еритроцитів. Такий менеекспозицію до ΕΠΟ, що є ефективною в плані приджмент кількості еритроцитів та/або концентрації наймні маргінального підвищення продукування гемоглобіну може бути корисним для різновиду ретикулоцитів, з наступною другою експозицією до суб'єктів, включаючи, проте не обмежуючись цим, ΕΠΟ, що є принаймні маргінально ефективною у таких суб'єктів, що потерпають від тканинної гіпоксенсі збереження зазначених ретикулоцитів у міру, сії, зумовленої будь-якою причиною, наприклад, як вони дозрівають до еритроцитів. Бажано, щоб анемією або хронічною анемією, суб'єктів, котрі застосування другої експозиції ініціювалось у меодержують хіміотерапію, і суб'єктів, що потерпажах приблизно 3 діб, але не пізніше, ніж приблизно ють від травматичних ушкоджень. Способи даного 10 діб після першої експозиції. Таким чином, кожен винаходу можуть застосовуватись для лікування дозувальний сегмент дає ефект підвищення загавсіх перелічених хвороб. льної кількості еритроциіів та/або концентрації Компоненти для реалізації схеми дозування та гемоглобіну. Крім того, даний дозувальний сегмент способу даного винаходу, тобто лікарські форми може періодично повторюватись стільки разів, ΕΠΟ, легко доступні і є у продажу. Проте, для біскільки бажано або потрібно, щоб підтримувати льшої зручності, гнучкості, доступності та придатабо регулювати загальну кількість еритроцитів або ності зазначених схеми дозування та способів рівня гемоглобіну. Крім того, перша та друга екскомпоненти, потрібні для практичної реалізації позиції можуть включати будь-яку лікарську форму нових схеми та способів, можуть бути запроваі будь-яку величину дози, і можуть бути однаковиджені сумісно у формі набору, і такий набір, як ми або різними. мається на думці, підпадає під обсяг даного винаНа відміну від звичайних схем дозування, дана ходу. нова схема дозування може не тільки запроваджуБажано, щоб зазначений набір даного винаховати значне первинне підвищення загальної кільду включав принаймні перший дозувальний сегкості еритроцитів та/або концентрації гемоглобіну, мент ЕПО, який включає перший дозувальний але також може бути використана для підтримки пристрій ΕΠΟ, придатний для запровадження ексзазначеного на будь-якому потрібному рівні. Корипозиції до ΕΠΟ, що є ефективною в плані принайсно, що схема дозування даного винаходу, діючи у мні маргінального підвищення продукування ретитакий спосіб, надає також гнучкість, котра була кулоцитів. Другий дозувальний пристрій ΕΠΟ, який раніше відсутня у застосуванні ΕΠΟ, і дійсно може включає іншу величину дози або форму ΕΠΟ, ніж бути розроблена таким чином, щоб задовольняти перший пристрій, придатний для запровадження особливі потреби будь-якого даного суб'єкта. Таекспозиції до ΕΠΟ, що є принаймні маргінально ким чином, дана схема дозування знаходить заефективною у сенсі збереження зазначених ретистосування у лікуванні будь-якого суб'єкта, що покулоципв у міру, як вони дозрівають до еритроцитребує або бажає підвищення та збереження тів. Даний набір може додатково містити інструкції, котрі зазначають, що застосування другої експо 7 89630 8 зиції має ініціюватись у межах приблизно 3 діб, підшкірної дози 400 IU/кг ΕΠΟ. (іі) добових ін'єкцій але не пізніше приблизно 10 діб після першої екснизького рівня 25 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) дозування позиції. У деяких варіантах дані інструкції можуть згідно з одним варіантом дозувального сегмента; додатково зазначати, що даний дозувальний сегяк передбачається даним винаходом, тобто пермент може повторюватись, наприклад, принаймні шої експозиції до 400 IU/кг ΕΠΟ з наступною дручерез приблизно 2 тижні, або принаймні приблизгою експозицією до 25 IU/кг/добу ΕΠΟ на 4-16 добу но 4 тижні, або навіть принаймні через приблизно після першої експозиції, котре показує, що всі схе8 тижнів після застосування попереднього сегменми дозування давали пік ретикулоцитів, котрий та. Крім того, у деяких варіантах даного набору спадає до ендогенгіих рівнів у межах приблизно 30 можуть бути виготовлені інструкції, які стосуються діб; конкретних суб'єктів, наприклад, суб'єктів, що підФігура 8 являє собою графічне представлендаються хіміотерапії, дані інструкції можуть вказуня, що порівнює зміни рівнів еритроцитів після (і) вати, що зазначений дозувальний сегмент бажано звичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування повторювати погоджено з хіміотерапією. однієї підшкірної дози 400 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових Супровідні фігури ілюструють кілька аспектів ін'єкцій низького рівня 25 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) даного винаходу. Стислий опис фігур наступний: дозування згідно з одним варіантом дозувального Фігура 1 являє собою графічне представлення сегмента, як передбачається даним винаходом, загальнозрозумілої фармакології ΕΠΟ, тобто затобто першої експозиції до 400 IU/кг ΕΠΟ з настустосування однієї підшкірної дози ΕΠΟ до здоропною другою експозицією до 25 IU/кг/добу ΕΠΟ на вих суб'єктів дає середньовідсоткове підвищення 4-16 добу після першої експозиції, котре показує, рівнів ретикулоцитів, що може бути прямо зв'язане що дозування згідно з даним варіантом дозувальз величиною уживаної дози ΕΠΟ (в одиницях плоного сегмента давало суттєве підвищення кількості щі під кривою концентрація-час % регикулоцитів); еритроцитів у порівнянні як зі звичайним дозуванФігура 2 являє собою графічне представлення ням, так і добовим дозуванням низького рівня середніх рівнів ΕΠΟ у сироватці здорових суб'єктів ΕΠΟ; після звичайного дозування ΕΠΟ, наприклад, одніФігура 9 являє собою графічне представленєї підшкірної дози 40000 IU (міжнародних одиниць) ня, що порівнює зміну рівнів гемоглобіну після (і) ΕΠΟ, що показує наявність піка після уведення, звичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування котрий спадає до ендогенних рівнів протягом приоднієї підшкірної дози 400 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових близно 10 діб; ін'єкцій низького рівня 25 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) Фігура 3 являє собою графічне представлення дозування згідно з одним варіантом дозувального середніх рівнів у відсотках ретикулоцитів у здоросегмента, як передбачається даним винаходом, вих осіб після уживання тієї самої звичайної дози тобто першої експозиції до 400 IU/кг ΕΠΟ з настуΕΠΟ, що й на Фігурі 2, котре показує наявність піка пною другою експозицією до 25 IU/кг/добу ΕΠΟ на у рівнях ретикулоцитів за приблизно 7 діб після 4-16 добу після першої експозиції, котре показує, підшкірного уведення однієї дози ΕΠΟ, котрий що дозування згідно з даним варіантом дозувальспадає до рівнів перед уживанням протягом прибного сегмента давало суттєве та тривале підвилизно 15 діб; щення рівнів гемоглобіну у порівнянні як зі звичайФігура 4 являє собою, графічне представленним дозуванням, так і добовим дозуванням ня середньої кількості еритроцитів у здорових сунизького рівня ΕΠΟ; б'єктів після уживання тієї самої звичайної дози Фігура 10 являє собою графічне представленΕΠΟ, що й на Фігурі 2, котре не виявляє суттєвого ня, що порівнює рівні ΕΠΟ у сироватці після (і) підвищення кількості еритроцитів підчас або після звичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування звичайного дозування ΕΠΟ; однієї підшкірної дози 400 IU/кг ЕΠΟ, (іі) добових Фігура 5 являє собою графічне представлення ін'єкцій низького рівня 50 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) середніх рівнів гемоглобіну у здорових осіб після дозування згідно з одним варіантом дозувального уживання тієї самої звичайної дози ΕΠΟ, що й на сегмента, як передбачається даним винаходом, Фігурі 2, котре не виявляє суттєвого або тривалого тобто першої експозиції до 400 IU/кг ΕΠΟ з наступідвищення рівнів гемоглобіну після звичайного пною другою експозицією до 50 IU/кг/добу ΕΠΟ на дозування ΕΠΟ; 4-16 добу після першої експозиції, котре показує, Фігура 6 являє собою графічне представленщо всі схеми дозування давали пік ΕΠΟ, котрий ня, що порівнює рівні ΕΠΟ у сироватці після (і) спадає до ендогенних рівнів у межах приблизно 5звичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування 7 діб; однієї підшкірної дози 400 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових Фігура 11 являє собою графічне представленін'єкцій низького рівня 25 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) ня, що порівнює рівні ретикулоцитів після (і) звидозування згідно з одним варіантом дозувального чайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування однієї сегмента, як передбачається даним винаходом, підшкірної дози 400 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових ін'єкцій тобто першої експозиції до 400 IU/кг ΕΠΟ з настунизького рівня 50 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) дозування пною другою експозицією до 25 IU/кг/добу ΕΠΟ на згідно з одним варіантом дозувального сегмента, 4-16 добу після першої експозиції, котре показує, як передбачається даним винаходом, тобто перщо всі схеми дозування давали пік ΕΠΟ, котрий шої експозиції до 400 IU/кг ΕΠΟ з наступною друспадає до ендогенних рівнів у межах приблизно 5 гою експозицією до 50 IU/кг/добу ΕΠΟ на 4-16 добу діб; після першої експозиції, котре показує, що всі схеФігура 7 являє собою графічне представленми дозування давали пік ретикулоцитів, котрий ня, що порівнює рівні ретикулоцитів після (і) звиспадає до ендогенних рівнів у межах приблизно 30 чайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування однієї діб; 9 89630 10 Фігура 12, являє собою графічне представщо дозування згідно з даним варіантом дозувальлення, що порівнює зміни рівнів еритроцитів після ного сегмента давало суттєве підвищення кількості (і) звичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування еритроцитів у порівнянні як зі звичайним дозуваноднієї підшкірної дози 400 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових ням, так і добовим дозуванням низького рівня ін'єкцій низького рівня 50 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) ΕΠΟ; дозування згідно з одним варіантом дозувального Фігура 17 являє собою графічне представленсегмента, як передбачається даним винаходом, ня, що порівнює зміни рівнів гемоглобіну після (і) тобто першої експозиції до 400 IU/кг ΕΠΟ з настузвичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування пною другою експозицією до 50 IU/кг/добу ΕΠΟ на однієї підшкірної дож 800 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових 4-16 добу після першої експозиції, котре показує, ін'єкцій низького рівня 25 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) що дозування згідно з даним варіантом дозувальдозування згідно з одним варіантом дозувального ного сегмента давало суттєве підвищення кількості сегмента, як передбачається даним винаходом, еритроцитів у порівнянні як зі звичайним дозувантобто першої експозиції до 800 ІU/кг ΕΠΟ з настуням, так і добовим дозуванням низького рівня пною другою експозицією до 25 IU/кг/добу ΕΠΟ на ΕΠΟ; 4-16 добу після першої експозиції, котре показує, Фігура 13 являє собою графічне представленщо дозування згідно з даним варіантом дозувальня, що порівнює зміну рівнів гемоглобіну після (і) ного сегмента давало суттєве підвищення рівнів звичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування гемоглобіну у порівнянні як зі звичайним дозуваноднієї підшкірної дози 400 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових ням, так і добовим дозуванням низького рівня ін’єкцій низького рівня 50 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) ΕΠΟ; дозування згідно з одним варіантом дозувального Фігура 18 являє собою графічне представленсегмента, як передбачається даним винаходом, ня, що порівнює рівні ΕΠΟ у сироватці після (і) тобто першої експозиції до 400 IU/кг ΕΠΟ з настузвичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування пною другою експозицією до 50 IU/кг/добу ΕΠΟ на однієї підшкірної дози 800 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових 4-16 добу після першої експозиції, котре показує, ін'єкцій низького рівня 50 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) що дозування згідно з даним варіантом дозувальдозування згідно з одним варіантом дозувального ного сегмента давало суттєве підвищення рівнів сегмента, як передбачається даним винаходом, гемоглобіну у порівнянні як зі звичайним дозувантобто першої експозиції до 800 IU/кг ΕΠΟ з настуням, так і добовим дозуванням низького рівня пною другою експозицією до 50 IU/кг/добу ΕΠΟ на ΕΠΟ; 4-16 добу після першої експозиції, котре показує, Фігура 14 являє собою графічне представленщо всі схеми дозування давали пік ΕΠΟ, котрий ня, що порівнює рівні ΕΠΟ у сироватці після (і) спадає до ендогенних рівнів у межах приблизно 5звичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування 7 діб; однієї підшкірної дози 800 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових Фігура 19 являє собою графічне представленін'єкцій низького рівня 25 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) ня, що порівнює рівні ретикулоцитів після (і) звидозування згідно з одним варіантом дозувального чайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування однієї сегмента, як передбачається даним винаходом, підшкірної дози 800 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових ін'єкцій тобто першої експозиції до 800 IU/кг ЕПО з настунизького рівня 50 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) дозування пною другою експозицією до 25 IU/кг/добу ΕΠΟ на згідно з одним варіантом дозувального сегмента, 4-16 добу після першої експозиції, котре показує, як передбачається даним винаходом, тобто перщо всі схеми дозування давали пік ΕΠΟ, котрий шої експозиції до 800 IU/кг ΕΠΟ з наступною друспадає до ендогенних рівнів у межах приблизно 5гою експозицією до 50 IU/кг/добу ΕΠΟ на 4-16 добу 7 діб; після першої експозиції, котре показує, що всі схеФігура 15 являє собою графічне представленми дозування давали пік ретикулоцитів після дозуня, що порівнює рівні ретикулоцитів після (і) звивання, і що, крім того, дозування згідно з одним чайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування однієї варіантом дозувального сегмента давало другий підшкірної дози 800 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових ін'єкцій пік у рівнях ретикулоцитів приблизно на 30 добу; низького рівня 25 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) дозування Фігура 20 являє собоютрафічне представлензгідно з одним варіантом дозувального сегмента, ня, що порівнює зміни рівнів еритроцитів після (і) як передбачається даним винаходом, тобто перзвичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування шої експозиції до 800 IU/кг ΕΠΟ з наступною друоднієї підшкірної дози 800 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових гою експозицією до 25 IU/кг/добу ΕΠΟ на 4-16 добу ін'єкцій низького рівня 50 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) після першої експозиції, котре показує, що всі схедозування згідно з одним варіантом дозувального ми дозування давали пік ретикулоцитів, котрий сегмента, як передбачається даним винаходом, спадає до ендогенних рівнів у межах приблизно 30 тобто першої експозиції до 800 IU/кг ΕΠΟ з настудіб; пною другою експозицією до 50 IU/кг/добу ΕΠΟ на Фігура 16 являє собою графічне представлен4-16 добу після першої експозиції, котре показує, ня, що порівнює зміни рівнів еритроцитів після (і) що дозування згідно з даним варіантом дозувальзвичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування ного сегмента давало суттєве підвищення кількості однієї підшкірної дози 800 IU/кг ΕΠΟ, (іі) добових еритроцитів у порівнянні як зі звичайним дозуванін'єкцій низького рівня 25 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) ням, так і добовим дозуванням низького рівня дозування згідно з одним варіантом дозувального ΕΠΟ; сегмента, як передбачається даним винаходом, Фігура 21 являє собою графічне представлентобто першої експозиції до 800 IU/кг ΕΠΟ з настуня, що порівнює зміни рівнів гемоглобіну після (і) пною другою експозицією до 25 IU/кг/добу ΕΠΟ на звичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування 4-16 добу після першої експозиції, котре показує, однієї підшкірної дози 800 IU/кг НПО, (іі) добових 11 89630 12 ін'єкцій низького рівня 50 IU/кг/добу ΕΠΟ, та (ііі) відкриту активність, частина із яких наведена на дозування згідно з одним варіантом дозувального Фігурах 6-22 даної заявки. Дійсно, звичайне фарсегмента, як передбачається даним винаходом, макологічне розуміння не надає бази для поястобто першої експозиції до 800 IU/кг ΕΠΟ з настунення цієї щойно відкритої активності, оскільки у пною другою експозицією до 50 IU/кг/добу ΕΠΟ на теперішній час невідомо, чи існують будь-які ΕΠΟ 4-16 добу після першої експозиції, котре показує, рецептори на ретикулоцитах або неоцитах, що що дозування згідно з даним варіантом дозувальробить усе зазначене більш дивним та неочікуваного сегмента давало суттєве підвищення рівнів ним. Якщо скористатись перевагами зазначеної гемоглобіну у порівнянні як зі звичайним дозуванщойно відкритої активності, то це відкриває нові ням, так і добовим дозуванням низького рівня шляхи для терапевтичного використання ΕΠΟ, і ΕΠΟ; і будь-яке таке використання, що базується на епіФігура 22 являє собою графічне представлензодичній або безперервній експозиції ретикулоциня, що показує зміни рівнів гемоглобіну після (і) тів та неоцитів до ΕΠΟ для підсилення їх вижизвичайного дозування ΕΠΟ, тобто застосування вання та визрівання у зрілі еритроцити, підшкірних доз 600 IU/кг ΕΠΟ потижнево протягом розглядається як таке, що підпадає під обсяг дано4 тижнів, (іі) 1800 IU/кг ΕΠΟ на 5 тижні і знову на 8 го винаходу. тижні, та (ііі) дозування згідно з одним варіантом Однією із типових переваг, якою можна скорисхеми комбінованого дозування даного винаходу, статись шляхом дозування згідно з цим новим відтобто з дозувальним сегментом першої експозиції криттям, тобто у підтримку виживання та визрівандо 600 IU/кг ΕΠΟ на 5 тиждень та другої експозиції ня ретикулоцитів та неоцитів, є те, що підвищення до 1200 IU/кг на 6 тиждень, з повторенням даного загальної кількості еритроцитів та/або концентрації дозувального сегмента на 8 тижні (600 IU/кг ΕΠΟ) гемоглобіну, котре може бути запроваджено у тата на 9 тижні (1200 IU/кг), котре показує, що для кий спосіб, може підтримуватись або контролювазвичайних схем дозування гемоглобін почав падатись з допомогою набагато більш гнучких та менш ти на 6 тижні, тоді як для схеми комбінованого дожорстких схем дозування, ніж звичайні схеми дозування даного винаходу гемоглобін зберігався на зування для ΕΠΟ. Звичайні схеми дозування, що підвищеному рівні. базуються на звичайній фармакології, припускаВаріанти даного винаходу, що описані нижче, ють, що ΕΠΟ діє як стимулятор переходу попереяк мається на думці, не є вичерпними або такими, дників до еритроїдного циклу. Щойно відкрита акщо обмежують даний винахід спеціальними варіативність ΕΠΟ, разом зі знанням того, що нтами, котрі розкриті у наступному детальному тривалість життя зрілих еритроцитів типово склаописі. Скоріше, дані варіанти описані у такий сподає приблизно 120 діб, допускає набагато менш сіб, щоб інші фахівці у даній галузі змогли зрозуміжорстке дозування ΕΠΟ, забезпечуючи у той сати принципи та практичне втілення даного винахомий час схоже або навіть більше підвищення загаду. льної кількості еритроцитів та/або концентрації Даний винахід запроваджує схему комбіновагемоглобіну. ного дозування для ΕΠΟ, котра може не тільки Таким чином, даний винахід запроваджує схестимулювати продукування ретикулоцитів, але й, му комбінованого дозування ΕΠΟ, яка, шляхом як не дивно, підтримувати неоциди, які розвились застосування принаймні одного дозувального сегіз них, так що значна частина зазначених неоцитів мента стимулює перетворення попередників у дозріває до еритроцитів. Як така, дана схема доретикулоцити та неоцити і потім сприяє їх зберезування може запроваджувати первинне підвиженню та визріванню у міру, як вони стають зрілищення загальної кількості еритроцитів та концентми еритроцитами. Термін "дозувальний сегмент" рації гемоглобіну більш значне, ніж те, що стосується графіка дозування, що включає пердосягається при застосуванні однієї звичайної довинну експозицію до ΕΠΟ, де дана експозиція є зи ΕΠΟ. Крім того, схема комбінованого дозування ефективною, щоб стимулювати вимірне підвищенданого винаходу може періодично повторюватись, ня продукування ретикулоцитів, яким би невелисуттєво підтримуючи це первинне підвищення, як ким це вимірне підвищення не було, з наступною не дивно, не шляхом застосування більш жорсткодругою експозицією, що є ефективною для зберего графіка дозування, ніж звичайне дозування раз ження ретикулоцитів та неоцитів та для сприяння на тиждень, але, фактично, з більшим проміжком їх дозріванню у зрілі еритроцити. Оскільки ретикучасу між сегментами дозування. Дійсно, можна лоцити. після їх уведення у кровотік, як очікується, скористатись у широкий різновид способів перевадозрівають до неоцитів приблизно за 2 доби, і негами розкритої тут щойно відкритої фармакологічоциди, як вважають, розпочинають процес дозріної функціональності ΕΠΟ, запроваджуючи таким вання, починаючи принаймні за приблизно 10-15 чином значну гнучкість для лікаря у виборі лікудіб після введення ретикулоцитів у кровотік, бажавання згідно з комбінованим дозуванням даного но і найбільш вигідно, щоб друга експозиція ініціювинаходу, щоб задовольнити будь-які особливі валась за приблизно 3-10 діб після припинення потреби або бажання суб'єкта. першої експозиції. Крім того, оскільки також враБільш конкретно, заявники, як це не дивно, віжають, що експозиція до ΕΠΟ, є цей ΕΠΟ природдкрили, що ΕΠΟ, очевидно, принаймні у деякій ним або екзогенно застосованим ΕΠΟ, може бути мірі, сприяє збереженню неоцитів у міру, як вони потрібною для підтримки виживання неоцитів піддозрівають до еритроцитів. Хоча це й не піддаєтьчас цього періоду дозрівання, бажано і найбільш ся поясненню, виходячи зі звичайного розуміння вигідно, щоб друга експозиція ініціювалась не пізфармакологічної активності ΕΠΟ, заявники усеніше приблизно 10 діб після припинення першої таки отримали дані, що підтверджують цю щойно експозиції, і могла додатково з користю підтриму 13 89630 14 ватись або шляхом повторного застосування, або стерігатись. Тоді, якщо виходити лише із економічзастосування ΕΠΟ тривалої дії, або іншої подовних міркувань, перша експозиція ΕΠΟ у дозувальженої експозиції до ΕΠΟ, тобто такої, як за допоному сегменті може складати від приблизно 150 могою петча або імплантата, протягом принаймні IU/кг до приблизно 2400 IU/кг, або, краще, від приприблизно 7 діб і до принаймні приблизно 15 діб. близно 600 IU/кг до приблизно 1200 IU/кг ΕΠΟ. Як Як застосовується у даному тексті, термін "екзазначалось вище, дана експозиція може бути спозиція", як мається на думці, означає окрему запроваджена у будь-якому відомому або новому дозу, повторні індивідуальні дози, або дозування, розробленому форматі дозування. Можна зазнаяке може запроваджуватись у відносно безперерчити, що оскільки потрібним результатом першої вний спосіб після окремого застосування, наприекспозиції є стимуляція максимальної кількості клад, ΕΠΟ тривалої дії, наприклад, трансдермальретикулоцитів, і оскільки така стимуляція, як вваний петч, що містить ΕΠΟ, або імплантація жають, залежить від дози, перша експозиція ΕΠΟ, імплантату ΕΠΟ. Тобто конкретний спосіб застосубажано, може бути запроваджена у форматі, який вання даної дози і, без сумніву, її величина, не є зможе забезпечити дану експозицію у суттєво миткритичними для практики дозувального сегмента тєвий спосіб, наприклад, такий як шляхом ін'єкції, або схеми даного винаходу. Все, що потрібно, це котра може бути підшкірною, внутрішньом'язовою те, щоб перша експозиція була застосована у або інтраперитонеальною. будь-якій кількості і у будь-який спосіб, котрі є Подібно до цього, і хоча вважають, що чим біефективними для стимуляції продукування ретильша друга експозиція ΕΠΟ, застосована у даному кулоцитів, з наступним призначенням другої ексдозувальному сегменті, тим триваліше зберігаютьпозиції у будь-якій кількості і у будь-який спосіб, ся високі рівні ΕΠΟ у крові і більше вплив на коекотрі є ефективними для підсилення збереження фіцієнт виживаності та дозрівання неоцитів у ерита дозрівання ретикулоцитів та неоцитів у зрілі троцити, насичення дози, як можна припустити, еритроцити. Крім того, для будь-якої експозиції відбувається при експозиціях, що запроваджують може використовуватись будь-який спосіб застобільше приблизно 2400 IU/кг ΕΠΟ. Тому придатні сування, включаючи ті, що відомі на теперішній кількості ΕΠΟ для застосування як другої експозичас, і ті, що можуть бути розроблені у майбутньоції дозувального сегмента можуть складати від му. Більш того, термін "експозиція" стосується приблизно 600 IU/кг до приблизно 2400 IU/кг, або, призначення дози ΕΠΟ пацієнту, яка має відрізнякраще, від приблизно 900 IU/кг до приблизно 1500 тись від експозицій, котрі може мати пацієнт, до їх IU/кг ΕΠΟ. власних природних рівнів ендогенного ΕΠΟ. Як зазначалось вище, заявники несподівано Звичайні фахівці у даній галузі можуть легко відкрили, що ця друга експозиція ΕΠΟ, призначена визначити відповідні величини та способи експодля застосування у такий проміжок часу, щоб співзиції у кожному випадку. Можна зазначити, і лише падати з дозріванням ретикулоцитів та/або неоциз метою запровадження додаткових рекомендацій тів до зрілих еритроцитів, може посприяти їм у та без будь-яких обмежень, що виходячи із загацьому. На основі досліджень заявників можна тальних терапевтичних міркувань, бажана конценткож припустити, що тривалість експозиції на цій рація гемоглобіну у суб'єктів має перевищувати стадії може бути такою ж або навіть більш важлипринаймні приблизно 9г/дл, і придатними дозами вою, ніж загальна величина самої дози, до якої ΕΠΟ є такі, що здатні запровадити зазначений експонуються ретикулоцити/неоцити. Як така, друрівень гемоглобіну, і вони можуть бути легко вига експозиція може бути з користю запроваджена у значені звичайними фахівцями у даній галузі. Як, вигляді множинних експозицій низького рівня, назагалом, відомо у даній галузі, підвищені рівні геприклад, менше приблизно 100 IU/кг/добу або мемоглобіну, котрі перевищують сучасні норми клінінше приблизно 50 IU/кг/добу, або навіть менше чної медицини, можуть асоціюватись у деяких виприблизно 25 IU/кг/добу, як може бути запровападках з підвищеним ризиком тромбоваскулярних джено, наприклад, шляхом підшкірних ін'єкцій, за подій для пацієнта. Тому фахівцям у даній галузі допомогою трансдермального петча, імплантата, зрозуміло, що підчас застосування будь-якої схезастосування ЕРО тривалої дії і такого подібного. ми лікування ΕΠΟ рівні гемоглобіну мають регуляВідомо багато ΕΠΟ тривалої дії, котрі наявні у рно відстежуватись. продажу, і будь-який із них може бути використаЯк така, кількість ΕΠΟ, котра має застосовуваний. тись у будь-якій конкретній експозиції будь-якого Кожен дозувальний сегмент, призначений згідозувального сегмента, обмежується лише міркудно зі схемою комбінованого дозування даного ваннями безпеки пацієнта, і будь-яка кількість ΕΠΟ винаходу, може запровадити залежне від дози може призначатись на дану експозицію, дозувальпідвищення концентрації ретикулоцитів шляхом ний сегмент або схему комбінованого дозування першої експозиції, як можна очікувати, виходячи зі доти, поки не виявляється ніяких суттєво токсичзвичайного фармакологічного розуміння ΕΠΟ. Коних ефектів, спричинених застосуванням ΕΠΟ. жен дозувальний сегмент, як не дивно, може також Проте, вважають, що хоча стимуляція ретикулоцисприяти збереженню та дозріванню значного відтів при застосуванні першої експозиції дозувальсотку ретикулоцитів та неоцитів до зрілих еритроного сегмента чутлива до дози, насичення дози цитів, результат, що не очікувався, виходячи зі може досягатись при дозах, які перевищують призвичайного розуміння, і не спостерігався після близно 2400 IU/кг. Таким чином, якщо перша ексзвичайної дози, наприклад, однієї підшкірної дози позиція застосовується з перевищенням зазначеΕΠΟ. ної кількості, то хоча ніякої шкоди не буде Хоча цей підвищений коефіцієнт дозрівання заподіяно, додаткової користі також не буде спонеоцитів сам по собі є корисним, він може бути 15 89630 16 додатково використаний для запровадження дольований аналог рекомбінантного еритропоетину даткових переваг. Тобто, оскільки зазначене підлюдину (Epoetin), такий як ті, що описані в заявці силене дозрівання неоцитів може продукувати європейського патенту ЕР 640619, так само як підвищені кількості зрілих еритроцитів, це надає CERA , аналоги еритропоетину людини (такі як більшої гнучкості у дозуванні ΕΠΟ для підтримки злиті сироваткові альбумінові білки людини, що зрілих еритроцитів. Це відрізняється від сучасних описані у міжнародній патентній заявці WO схем, котрі сфокусовані на застосуванні великих 99/66054), еритропоетинові мутанти, що описані у потижневих доз ΕΠΟ для безперервної стимуляції міжнародній патентній заявці WO 99/38890, еритретикулоцитів. Крім того, коли бажано або потрібропоетин омега, котрий може бути одержаний із но збільшення або зменшення загальної кількості рестрикційного фрагмента Ара І гена еритропоееритроцитів та/або концентрації гемоглобіну, затину людини, що описаний у патенті США стосування дозувального сегмента або сегментів 5688679, видозмінений глікозильований еритропоможе відповідним чином варіюватись. Як така, етин людини, що описаний у міжнародній патентсхема комбінованого дозування даного винаходу ній публікації WO 99/11781 та ЕР 1064951, і PEG може бути пристосована до особливих потреб або (поліетиленгліколь) кон'юговані еритропоетинові бажань суб'єкта. аналоги, що описані у WO 98/05363, WO 01/76640, Крім того, корисно, що потім даний дозувальабо патенті США 5643575. Специфічні приклади ний сегмент може бути повторений після відповідклітинних ліній для експресії ендогенного еритроного проміжку часу для отримання потрібного репоетину людини описані у міжнародній патентній зультату, або за принаймні приблизно 2 тижні, або заявці WO 99/05268 та WO 94/12650. Формою навіть приблизно 4 тижні, і, фактично, повторення ΕΠΟ, якій віддається перевага, є очищений рекоданого дозувального сегмента за приблизно 8 тимбінантний ΕΠΟ людини (r-HuEPO), що складажнів може бути достатнім у деяких випадках для ється та розповсюджується під торгівельними мапідтримки підвищення загальної кількості еритрорками EPREX , ERYPO , PROCRIT або цитів та/або концентрації гемоглобіну, запроваARANESP . джених безпосередньо попереднім дозувальним Передбачаються також форми ΕΠΟ тривалої сегментом. Подібно до цього, даний дозувальний дії, і дійсно. їм може віддаватись перевага у десегмент може повторюватись стільки разів, скільки яких варіантах даного винаходу для застосування бажано або потрібно для запровадження схеми як другої експозиції у дозувальному сегменті. Як комбінованого дозування, що здатна охопити застосовується у даному тексті. "ΕΠΟ тривалої дії" будь-який період лікування, і кількість повторень включає композиції тривалого виділення та препане обмежується у будь-який спосіб. рати ΕΠΟ з підвищеним півперіодом циркуляції, Як застосовується у даному тексті, термін що звичайно досягається шляхом модифікацій, "еритропоетин" або "ΕΠΟ" включає такі поліпептикотрі знижують імуногенність або змінюють коефіди та білки, що мають біологічну активність рекомцієнт очищення. Включений також ΕΠΟ, інкапсубінантного еритропоетину людини (r-HuEPO), тобльований у полімерні мікросфери. Приклади "ΕΠΟ то вони зв'язуються з ΕΠΟ рецептором і у тривалої дії" включають, проте не обмежуючись кінцевому рахунку стимулюють підсилення продуцим, кон'югати еритропоетину з поліетиленглікокування гемоглобіну. Термін ΕΠΟ, як використовулем (PLG). що розкриті у РСТ публікації WO ється у даному тексті, також стосується еритропо2002049673 (Burg et al.). PEG-модифікований етинових аналогів, еритропоетинових ізоформ, ΕΠΟ, що розкритий у РСТ публікації WO 02/32957 еритропоетипових міметиків, еритіропоетинових (Nakamura et al.), кон’югати глікопротеїнів, які мафрагментів, гібридних еритіропоетинових білків, ють еритропоетичну активність та принаймні одну злитих білків, олігомерів та мультимерів перелічеокиснену вуглеводну складову, що ковалентно ного вище, гомологів переліченого вище, варіантів зв'язана з неантигениим полімером, розкритим у глікозильованих конфігурацій переліченого вище, РСТ публікації WO 94/28024 (Chyi et al.). та інші включаючи поліетиленглікольований ЕРО, мутеїни PEG-ΕΠΟ молекули, одержані з використанням переліченого вище, і, крім того, незалежно від їх SCM-PEG, SPA-PEG та SBA-PEG. способу синтезу або виробництва, включаючи, Поліетиленгліколеві складові, яким віддається проте не обмежуючись цим, рекомбінантний перевага, являють собою метоксиполіетиленгліко(отриманий із кДНК або геномної ДНК), синтетичлеві (mPEG) складові. Дані складові, краще, доданий, трансгенний способи та способи з активовають з використанням сукцинімідил-ефірних похідними генами, і, крім того, ті ΕΠΟ молекули, що них метоксиполіетиленгліколевих молекул. В містять незначні модифікації, перелічені вище. одному із прикладів сукцинімідил-ефірна похідна Способи конструювання та синтезу, наприклад, метоксиполіетиленових молекул, якій віддається пептидних міметиків, добре відомі звичайним фаперевага. включає: сукцинімідилові ефіри карбокхівцям у даній галузі і описані, наприклад, у патенсиметильованого поліетиленгліколю (SCM-PEG) тах США за номерами 4833092, 4859765, 4853871 наступної формули, та 4863857. Особлива перевага віддається таким молекулам ΕΠΟ, що здатні стимулювати еритропоез у ссавців. Спеціальні приклади еритропоетину включають епоетин альфа (Epoetin alfa) (FPREX , ERYPO , PROCRIT ), так само як і білок, що стимулює еритропоез (NESP , ARANESP , дарбепоетин альфа (darbepoetin alfa)) та гіперглікози 17 89630 18 (SBA-PEG) CH3O-(OCH2CH2)N-O-CH2CH2CH2-COOSU + ЕРО (NH2)M СН3О-(СОСН2СН2)N-О-СН2СН2СН2-СО-NН-ЕРО сукцинімідилові похідні полі(етиленгліколь) пропіонової кислоти (SPA-PEG) наступної формули, де R являє собою С1-8алкіл, і n - ціле число, (R-(OCH2CH2)n-O-CH2CH2-CO-OSu); та сукцинімідилові похідні полі(етиленгліколь)масляної кислоти (SBA-PEG) наступної формули, де R являє собою С1-8алкіл, і n ціле число, Способи одержання SCM-PEG, SPA-PEG та SBA-PEG добре відомі у даній галузі. Наприклад, у патенті США за номером 5672662 Harris et al. описують активні ефіри PEG кислот і споріднених полімерів, що мають єдину складову пропіонової або масляної кислоти і не мають інших ефірних зв'язків. Одержання SCM-PEG описано, наприклад. Veronese et al. (1989). Journal of Controlled Release, 110:145-54. Використання терміна "SPA-PEG" включає mPEG-SPA (метокси-PEG-сукцинімідил пропіонат). і використання терміна "SBA-PEG" включає mPEGSBA (метокси-PEG-сукцинімідил бутаноат). Активовані полімери, такі як SBA-PEG та SPA-PEG, є у продажу, і можуть бути отримані від, наприклад, фірми Nektar, Inc., Huntsville, Alabama, U.S.A. Використання терміна "SCM-PEG" (R(OCH2CH2)n-O-CH2-CO-OSu; R являє собою С18алкіл, і n -·ціле число) включає метокси-PEGсукцинімідиловий ефір карбокиметильованого PEG (mPEG-SCM). Згідно з Greenwald et al., "реакція SCM-PEG з білком може привести до утворення стійкого аміду, але у Nektar, Huntsville, AL, Jan 1996 catalog, p. 46, доповідалось про t1/2 гідроліз як