Застосування il-18 як діагностичного маркера серцевої недостатності

1. Застосування IL-18 як діагностичного маркера поганого клінічного прогнозу виживання при серцевій недостатності. 2. Застосування IL-18 як діагностичного маркера рецидивних випадків після першого прояву серцевої недостатності. (19) (21) a200507913 (22) 30.04.2001 (24) 10.08.2009 (31) 00109606.4 (32) 05.05.2000 (33) EP (62) 2002129704, 30.04.2001 (46) 10.08.2009, Бюл.№ 15, 2009 р. (72) ШВАТШКО ЙОЛАНД, CH, ТЕДГІ АЛАН, FR, МАЛЛАТ ЗІАД, FR (73) АППЛАЙД РЕЗЕЧ СІСТЕМЗ АРС ХОЛДІНГ Н.В., NL, ЕНСЕРМ-ЕНСТІТЮ НАСЬОНАЛЬ ДЕ ЛЯ РЕШЕРШ МЕДІКАЛЬ, FR (56) SETA Y ET AL: "Interleukin 18 in acute myocardial infarction" HEART, BMJ, LONDON,, GB, 3 87658 4 або інсульт і пошкодження кровоносних судин, ли, що взаємодії між клітинами судини і клітинами м'язової тканини або органів. запалення є вирішальними в атерогенезі [1]. ЗокАневризми, які являють собою постійні аномарема, інгібування окремих прозапальних шляхів льні розширення кровоносних судин, також є шисповільнює розвиток атеросклерозу [1]. роко поширеними наслідками атеросклерозу. АтеЗапалення також відіграє головну роль в розросклеротичні аневризми черевної аорти звичайно паді атеросклеротичної бляшки і тромбозі [2-5], і розвиваються у пацієнтів похилого віку. Вони мотому впливає на появу гострих ішемічних синдрожуть розриватися в заочеревинному просторі. В мів і пов'язану з ними летальність [6]. Дійсно тяжкі атеросклеротичних аневризмах звичайно присутні клінічні прояви атеросклерозу, що включають інрізко виражена втрата еластичної тканини і фіброз фаркти серця, мозку і будь-яких інших органів, середньої оболонки, в основному внаслідок ішемії уражених атеросклерозом, в основному є резульм'язової тканини середньої оболонки аорти, що татом оклюзії просвіту судини тромбом, утвореним супроводжується вивільненням макрофагальних при взаємодії із зруйнованою атеросклеротичною ферментів, що приводять до фрагментації еластибляшкою [3, 4]. Патологічні дослідження показали, чних волокон. що вразливі або нестабільні бляшки, тобто бляшЛікарські засоби, рекомендовані для лікування ки, схильні до розпаду або, що розпадаються, сиабо запобігання атеросклерозу, направлені на льно відрізняються за клітинним і матриксним зниження рівня ліпідів/холестерину в крові. Зокрескладом в порівнянні зі стабільними бляшками, не ма, широко застосовується терапія, направлена на схильними до розпаду [7]. Вразливі бляшки багаті зниження LDL-холестерину. В теперішній час найна клітини запалення (макрофаги і Т-лімфоцити), більш широко застосовуються статини, специфічні містять тромбогенне ліпідне ядро і характеризуінгібітори HMG СоА-редуктази. Інші засоби, які ються тонким фіброзним верхнім шаром з істотним знижують рівень ліпідів, включають такі лікарські браком позаклітинного матриксу [7]. засоби, як холестирамін, колестипол, нікотинову Зниження синтезу колагену, опосередковане кислоту, гемфіброзил, пробукол, ловастатин та прозапальним цитокіном IFN-g, і підвищення актиінші. вності макрофагальних металопротеаз, що руйнуІншим підходом є мінімізування ризику утвоють матрикс, є причинами потоншання і крихкості рення тромбу на сталому атероматозному пошкофіброзного верхнього шару [7]. Руйнування крихдженні. Аспірин, який являє собою специфічний кого фіброзного верхнього шару відкриває високо інгібітор тромбоксану А2, що опосередковує агретромбогенне ліпідне ядро для контакту з циркугацію тромбоцитів, або антикоагулянти можуть люючою кров'ю і приводить до утворення оклюзизастосовуватися для зниження ризику утворення вного тромбу [1, 7]. Тому вважають, що щільність тромбу. клітин запалення в певному атеросклеротичному У черезшкірній «балонній ангіопластиці» запошкодженні є хорошим показником його нестабістосовується катетер з балоном на кінці для льності. сплощення бляшки і збільшення току крові після Клінічний прогноз для пацієнта з атеросклерооклюзії. Технологія подібна до технології, що зазом тільки частково залежить від розміру пошкостосовується для відкриття артерій серця, але дження [19, 20]. В цей час широко визнано, що вона може застосовуватися стосовно багатьох якість (склад бляшки) швидше, ніж розмір пошкоінших артерій організму. Стеноз коронарних артедження, може бути навіть кращим показником розрій шунтують за допомогою сегментів підшкірної витку ішемічних випадків. Дійсно, важкі клінічні вени, вшитої в проксимальну частину аорти, або прояви атеросклерозу (інфаркти серця або мозку) за допомогою відсікання внутрішньої грудної артев основному є результатом оклюзії просвіту судирії з боку грудної стінки і створення анастомозу її ни тромбом, утвореним на поверхні атеросклеродистального кінця з артерією на передній поверхні тичної бляшки, що розпадається [19]. Патологічні серця. дослідження показали, що вразливі або нестабіХірургічне видалення відкладень (ендартерекльні бляшки, які схильні до розпаду або які розпатомія) може бути рекомендоване в деяких випадлися, багаті на клітини запалення і характеризуках (наприклад: ендартеректомія сонної артерії). ються істотним браком вмісту гладком'язевих Однак основною рекомендацією залишається клітин і колагену [20, 21]. Більш того, в подібних вплив або контроль над факторами ризику, подіббляшках виявлене збільшення апоптотичної загино підтримці дієти з низьким вмістом жиру, низьбелі клітин, що веде до утворення високо тромбоким вмістом холестерину і низьким вмістом солі і з генного ліпідного ядра [13, 22]. подальшими направленими на підтримку здоровоПрозапальні цитокіни беруть участь у запаго стану рекомендаціями відносно лікування і конленні. Цитокін інтерлейкін 18 (IL-18) спочатку був тролю за гіпертонією, діабетом та іншими захвоописаний як фактор, що індукує інтерферон-g (IFNрюваннями, зниження маси тіла і припинення g) [8]. Він являє собою ранній сигнал розвитку відпаління, так само як і регулярні фізичні вправи для повіді лімфоцитів Т-хелперів типу 1 (Тh1). IL-18 діє поліпшення стану серця і кровообігу. разом з IL-12, IL-2, антигенами, мітогенами і можЗапальний процес присутній на різних стадіях ливо іншими факторами, індукуючи продукцію IFNатеросклерозу [1]. Активація ендотелію за допомоg. IL-18 також посилює продукцію GM-CSF і IL-2, гою ряду факторів, що включають невелике дотипосилює проліферацію Т-клітин, викликану античне напруження, модифіковані ліпопротеїни і проСD3, і підвищує Fas-опосредковану загибель призапальні цитокіни, вважається першою стадією родних кілерів. Зріла форма IL-18 утворюється з атеросклерозу і знаходиться під запальним контйого попередника за допомогою ІL-1bролем [1]. Багато нещодавніх досліджень показаперетворювального ферменту (ICE, каспаза-1). 5 87658 6 Рецептор IL-18 складається, принаймні, з двох Тому, винахід відноситься до застосування інкомпонентів, що беруть участь в зв'язуванні лігангібітору IL-18 для отримання лікарських засобів ду. Високо- і низькоафінні сайти зв'язування IL-18 для запобігання і/або лікування атеросклерозу. були знайдені на мишачих Т-клітинах, стимульоВинахід, крім того, відноситься до способів лікуваних IL-12 [9], передбачаючи існування багатолавання з генним терапевтичним підходом лікування нцюгового рецепторного комплексу. Дві рецепторі/або запобігання атеросклерозу. ні субодиниці ідентифіковані в даний момент, обоє На Фіг.1 представлена гістограма, що відоналежать до сімейства рецептора IL-1 [10]. Перебражає процентне значення здатності до виживання ендотеліальних клітин пупкової вени людидача сигналу IL-18 включає активацію NF-kB [11]. ни після інкубації тільки з окисленими Нещодавно був виділений розчинний білок, що ліпопротеїнами або інкубації разом з комбінацією має високу афінність до IL-18, з сечі людини і були окислених ліпопротеїнів з антитілами до IL-18 або клоновані кДНК миші і людини, так само як і ген IL-18BP відповідно. людини (12; WO 99/09063). Білок був названий ILНа Фіг.2 представлений Вестерн-блот, прове18-зв'язувальний білок (IL-18BP). дений для білкових екстрактів з атеросклеротичIL-18BP не є позаклітинним доменом одного з них артерій в порівнянні з контрольними артеріявідомих рецепторів IL-18, a секретованим природми. У Вестерн-блоті застосовували антитіла проти но циркулюючим білком. Він належить до нового IL-18BP (hIL-18BP), a-субодиницю рецептора IL-18 сімейства секретованих білків, крім того, він включає різні білки, що кодуються Poxvirus [12]. IL-18BP (hlL-18BPa), IL-18 (hIL-18) і каспазу-1 (Caspase-1 постійно експресується в селезінці [12]. Сечовий p10). IL-18BP, так само як і рекомбінантний, специфічно На Фіг.3 представлений агарозний гель, забазв'язує IL-18 з високою афінністю і модулює біолорвлений бромистим етидієм, що показує результат гічну афінність IL-18. ЗТ-ПЛР-аналізу мРНК IL-18 і IL-18BP в клітинах Ген IL-18BP розташований на хромосомі люатеросклеротичної бляшки. дини 11q13, і в геномній послідовності розміром На Фіг.4 представлені результати ЗТ-ПЛР для 8,3т.п.н. не було знайдено екзону, що кодує IL-18BP і IL-18 в атеросклеротичній бляшці в порітрансмембранний домен. Чотири варіанти сплайвнянні з експресією ha-актину (контроль) в симпсингу або ізоформи IL-18BP були знайдені у людитоматичних і асимптоматичних бляшках. ни і позначені як IL-18BP а, b, с і d, всі несуть одНа Фіг.5 представлена карта експресуючого накові N-кінцеві послідовності і відрізняються Свектора, використаного для внутрішньом'язового кінцевими послідовностями [12]. електроперенесення у мишей. Чотири ізоформи IL-18BP людини і дві мишачі На Фіг.6 представлена гістограма, що відоізоформи, отримані в результаті сплайсингу мРНК бражає площу ліпідних плям в атеросклеротичних і знайдені в різних бібліотеках кДНК, експресували, артеріях. Кількісний комп'ютерний аналіз зобраочищали і оцінювали на зв'язування і нейтралізаження ліпідного відкладення. Дані представлені у цію біологічної активності IL-18 [23]. Ізоформа ILвигляді середніх величин зі стандартною помил18BP людини (IL-18BPa) проявила найбільшу кою, (n=19 для вільної плазміди, n=14 для плазміафінність до IL-18 з швидкою активацією (rapid onди, що містить IL-18BP). Чотирма зірочками відміrate), повільною інактивацією (slow off-rate) і консчено р