Білки, що зв’язуються з cgrp-рецепторами людини
Номер патенту: 108066
Опубліковано: 25.03.2015
Автори: Ху Шо-Фен Сильвія, Бун Томас С., Лью Хсієнг Сен, Кінг Чєдвік Т., Ксу Сен, Бренкоу Девід В., Ши Лічєнг, Гег Дж. Колін В.
Формула / Реферат
1. Виділене антитіло або антигензв'язуючнй фрагмент антитіла, що містить:
(a) CDRL послідовності SEQ ID NO: 42, 43 та 44 і CDRН послідовності SEQ ID NO: 73, 74 та 75,
(b) CDRL послідовності SEQ ID NO: 45, 46 та 47 і CDRH послідовності SEQ ID NO: 76, 77 та 78,
(c) CDRL послідовності SEQ ID NO: 48, 49 та 50 і CDRH послідовності SEQ ID NO: 76, 77 та 78,
(d) CDRL послідовпості SEQ ID NO: 51, 52 та 53 і CDRН послідовпості SEQ ID NO: 82, 83 та 84,
(е) CDRL послідовності SEQ ID NO: 54, 55 та 56 і CDRH послідовності SEQ ID NO:85, 86 та 87,
(f) CDRL послідовності SEQ ID NO: 57, 58 та 59 і CDRH послідовності SEQ ID NO: 88, 89 та 90,
(g) CDRL послідовності SEQ ID NO: 60, 55 та 56 і CDRН послідовності SEQ ID NO: 85, 86 та 87,
(h) CDRL послідовності SEQ ID NO: 45, 61 та 47 і CDRH послідовності SEQ ID NO: 76,91 та 78,
(j) CDRL послідовності SEQ ID NO: 42, 43 та 44 і CDRH послідовності SEQ ID NO: 73, 74 та 75,
g) CDRL послідовності SEQ ID NO: 62, 63 та 64 і CDRН послідовпості SEQ ID NO: 92, 93 та 94,
(k) CDRL послідовності SEQ ID NO: 45, 61 та 47 і CDRH послідовності SEQ ID NO: 76, 95 та 78,
(1) CDRL послідовності SEQ ID NO: 65, 55 та 56 і CDRH послідовпості SEQ ID NO: 85, 86 та 87,
(m) CDRL послідовності SEQ ID NO: 42, 43 та 44 і CDRH послідовності SEQ ID NO: 73, 74 та 96,
(n) CDRL послідовності SEQ ID NO: 66, 67 та 68 і CDRIН послідовпості SEQ ID NO: 97, 98 та 99,
(о) CDRL послідовності SEQ ID NO: 69, 70 та 71 і CDRH послідовності SEQ ID NO: 100,101 та 102, або
(p) CDRL послідовності SEQ ID NO: 69, 70 та 72 і CDRН послідовності SEQ ID NO: 100, 101 та 102.
2. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за п. 1, яке відрізняється тим, що антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла вибірково інгібує людський рецептор CGRP.
3. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за п. 2, яке відрізняється тим, що антитіло або антнгензв'язуючий фрагмент антитіла вибірково інгібує людський рецептор CGRP у порівнянні з людськими рецепторами AM1, AМ2, hAMY1.
4. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за п. 3, яке відрізняється тим, що вибірково інгібує людський рецептор CGRP з індексом вибірковості 100.
5. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким з пп. 1-4, яке відрізняється тим, що антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла вибірково інгібує людський рецептор CGRP R з показником КD ≤100 нМ.
6. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 1-5, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить (і) CDRL послідовності SEQ ID NO: 42, 43 та 44 і (іі) CDRH послідовності SEQ ID NO: 73, 74 та 75.
7. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за п. 6, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить варіабельну ділянку (VН) важкого ланцюга, яка щонайменше на 90 % ідентична послідовності SEQ ID NO: 158.
8. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за п. 7, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить варіабельну ділянку (VH) важкого ланцюга, яка щонайменше на 95 % ідентична послідовності SEQ ID NO: 158.
9. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за п. 6, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить варіабельну ділянку (VH) важкого ланцюга, яка щонайменше на 98 % ідентична послідовності SEQ ID NO: 158.
10. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 6-9, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить варіабельну ділянку (VL) легкого ланцюга, яка щонайменше на 90 % ідентична послідовності SEQ ID NO:142.
11. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 6-10, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить варіабельну ділянку (VL) легкого ланцюга, яка щонайменше на 95 % ідентична послідовності SEQ ID NO: 142.
12. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 6-11, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить варіабельну ділянку (VL) легкого ланцюга, яка щонайменше на 98 % ідентична послідовності SEQ ID NO: 142.
13. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 6-12, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить послідовність легкого ланцюга, яка щонайменше на 90 % ідентична послідовності SEQ ID NO: 17.
14. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 6-13, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить послідовність легкого ланцюга, яка щонайменше на 95 % ідентична послідовності SEQ ID NO: 17.
15. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 6-14, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить послідовність легкого ланцюга, яка щонайменше на 98 % ідентична послідовності SEQ ID NO: 17.
16. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 6-15, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить послідовність важкого ланцюга, яка щонайменше на 90 % ідентична послідовності SEQ ID NO: 29.
17. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 6-16, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить послідовність важкого ланцюга, яка щонайменше на 95 % ідентична послідовності SEQ ID NO: 29.
18. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 6-17, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить послідовність важкого ланцюга, яка щонайменше на 98 % ідентична послідовності SEQ ID NO: 29.
19. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 1-5, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить VH послідовність, яка щонайменше на 90 % ідентична амінокислотній послідовності, яка вибрана з групи, що складається з SEQ ID NO: 158-170.
20. Антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким з пп. 1-5, яке відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла містить послідовність варіабельної ділянки (VL) легкого ланцюга, яка на 90 % ідентична з амінокислотною послідовністю, яка вибрана з групи, що складається з SEQ ID NO: 137-153.
21. Виділене антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 1-20, яке відрізняється тим, що виділене антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла є вибраним з групи, що складається з моноклонального антитіла, Fab фрагмента, Fab' фрагмента, F(ab')2 фрагмента, Fv фрагмента, діатіла та одноланцюгового антитіла.
22. Виділене антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за п. 21, яке відрізняється тим, що антигензв'язуючий білок є моноклональним антитілом, вибраним з групи, що складається з повністю людського антитіла, гуманізованого антитіла та химерного антитіла.
23. Виділене антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за п. 22, яке відрізняється тим, що моноклональне антитіло є антитілом типу IgGl, IgG2, IgG3 або IgG4.
24. Виділене антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за п. 23, яке відрізняється тим, що моноклональне антитіло є IgGl або IgG2 антитілом.
25. Виділений полінуклеотид, який кодує антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла за будь-яким із пп. 1-24.
26. Виділений полінуклеотид за п. 25, який відрізняється тим, що полінуклеотид містить послідовність, що на 80 % або більше ідентична послідовності, вибраної з групи, що складається з SEQ ID NO: 175, 176, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 186, 187, 188, 189, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209 та 210.
27. Виділений полінуклеотид за п. 25, який відрізняється тим, що полінуклеотид містить послідовність, що на 80 % або більше ідентична послідовності, вибраної з групи, що складається з SEQ ID NO: 224-258.
28. Виділений полінуклеотид за п. 25, який відрізняється тим, що полінуклеотид містить послідовність, що зазнає гібридизації за жорстких умов гібридизації з послідовністю, вибраною з групи, що складаєтеся з SEQ ID NO: 224-258.
29. Вектор експресії, який містить виділений полінуклеотид за будь-яким із пп. 25-28.
30. Лінія клітин, трансформована вектором експресії за п. 29.
31. Спосіб одержання антитіла або антигензв'язуючого фрагмента антитіла за будь-яким з пп. 1-24, який включає одержання антигензв'язуючого фрагмента антитіла з клітини-хазяїна, яка секретує антитіло або антигензв'язуючий фрагмент антитіла.
32. Спосіб за п. 31, який відрізняється тим, що зазначене антитіло або зазначений антигензв'язуючий фрагмент антитіла одержують з використанням імуногена, який містить розчинний CGRP рецептор.
33. Спосіб за п. 32, який відрізняється тим, що зазначений розчинний CGRP рецептор одержують шляхом співекспресії та очищення N-кінцевого екстрацелюлярного домену (ЕЦД) людського CRLR і ЕЦД людського RAMP1.
34. Спосіб за п. 33, який відрізняється тим, що зазначений ЕЦД людського CRLR містить SEQ ID NO: 6, і зазначений ЕЦД RAMP1 містить SEQ ID NO: 8.
35. Фармацевтична композиція, яка містить терапевтично ефективну кількість антитіла або антигензв'язуючого фрагмента антитіла за будь-яким з пп. 1-24 та фармацевтично прийнятну допоміжну речовину.
36. Спосіб лікування або попередження стану, обумовленого CGRP R, у пацієнта, який включає введення пацієнтові ефективної кількості антитіла або виділеного антигензв'язуючого фрагмента антитіла за будь-яким із пп. 1-27.
37. Спосіб поліпшення ефектів обумовлених CGRP R захворювань або розладів у пацієнта, який включає введення пацієнтові ефективної кількості антитіла або антигензв'язуючого фрагмента антитіла за будь-яким із пп. 1-27.
38. Спосіб за п. 36 або п. 37, який відрізняється тим, що стан є головним болем.
39. Спосіб за п. 38, який відрізняється тим, що стан є мігренню.
40. Спосіб за будь-яким із пп. 36-39, який відрізняється тим, що даний спосіб є профілактичним лікуванням.
Текст
Реферат: UA 108066 C2 (12) UA 108066 C2 Даний винахід описує антигензв'язуючі білки, що зв'язуються з людським рецептором CGRP (CGRP R). Даний винахід також описує нуклеїнові кислоти, що кодують антигензв'язуючий білок, вектори та клітини. Антигензв'язуючі білки можуть інгібувати зв'язування CGRP R і CGRP, що є корисним при цілому ряді розладів, які визначені CGRP R, включаючи лікування та/або профілактику головного болю, що викликаються мігренню. UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 РІВЕНЬ ТЕХНІКИ Розглянута заявка на патент містить перелік послідовностей, який був наданий за допомогою веб-додатку Efs-web, і, таким чином, повністю включений у даний документ за допомогою посилання. Згадана копія ASCII, створена 14 грудня 2009 р., названа A1472PCT.txt і має розмір 312 447 байт. Суперсімейство білків кальцітоніну включає, як мінімум, п'ять відомих членів: кальцітонін, амілин, адреномедулін і два пептиди, які кодуються геном кальцітоніну ("CGRP"): CGRP1 (також відомий як ctcgrp або CGRP) і CGRP2 (також відомий як βCGRP). CGRP є вазоактивним нейропептидом, що складається з 37 амінокислот і експресуючим у центральній і периферичній нервовій системі; було показано, що даний нейропептид є сильним вазодилятатором периферичних судин, де нейрони, що містять CGRP, тісно пов'язані з кровоносними судинами. Опосередковане CGRP розширення судин також пов'язане з нейрогенним запаленням як частина каскаду подій, що приводять до екстравазації плазми та вазодилятації мікроциркуляторної частини судинного русла й, зрештою, мігрені. Амілин також має специфічні ділянки зв'язування в ЦНС і, як вважається, регулює спорожнювання шлунку та відіграє роль у метаболізмі вуглеводів. Адреномедулін є сильним судинорозширювальним агентом і має специфічні рецептори на астроцитах, чия мРНК характеризується підвищеною експресією в тканинах ЦНС, підданих ішемії. (Zimmermann, et al., Identification of adrenomedullin receptors in cultured rat astrocytes and in neuroblastoma glioma hybrid cells (NG108-15), Brain Res., 724:238-245 (1996); Wang et al., Discovery of adrenomedullin in rat ischemic cortex and evidence for its role in exacerbating focal brain ischemic damage, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92:11480-11484 (1995)). Кальцітонін задіяний у контролі метаболізму кістки та має активність у центральній нервовій системі (ЦНС). Біологічна активність CGRP включає регулювання нервово-м'язових сполук, зображення антигену в імунній системі, участь у тонусі судин і сенсорної нейротрансмісії. (Poyner, D. R., Calcitonin gene-related peptide: multiple actions, multiple receptors, Pharmacol. Ther., 56:23-51 (1992); Muff et al., Calcitonin, calcitonin gene related peptide, adrenomedullin and amylin: homologous peptides, separate receptors and overlapping biological actions, Eur. J. Endocrinol., 133: 17-20 (1995)). У цілого ряду видів ссавців було виявлено три пептиди, що стимулюють рецептори до кальцітоніну (ПСРК); ПСРК можуть утворювати нове підсімейство в сімействі ПСРК. (Katafuchi, T and Minamino, N, Structure and biological properties of three calcitonin receptorstimulating peptides, novel members of the calcitonin gene-related peptide family, Peptides, 25(11):2039-2045 (2004)). Суперсімейство білків кальцітоніну діє за допомогою 7-сегментних трансмембранних доменів рецепторів, пов'язаних з G-Білком (GPCR). Рецептор до кальцітоніну ("CT", "CTR" або "Кт-Рецептор") і рецептори CGRP є рецепторами GPCR II типу ("сімейство B"); дане сімейство включає інші GPCR регуляторні пептиди, що розпізнають, такі як секретин, глюкагон і вазоактивний інтестинальний поліпептид (ВІП). Добре вивчені сплайс-варіанти людського рецептору до кальцітоніну відрізняються залежно від наявності (раніше позначалося як CTRII + або CTR1, зараз відомий як CT (b)) або відсутності (основний сплайс-варіант, раніше позначався як CTRII- або CTR2, зараз відомий як CT(a)) 16 амінокислот у першій інтрацелюлярній петлі. (Gorn et al., Expression of two human skeletal calcitonin receptor isoforms cloned from a giant cell tumor of bone: the first intracellular domain modulates ligand binding and signal transduction, J. Clin. Invest., 95:2680-2691 (1995); Hay et al., Amylin receptors: molecular composition and pharmacology, Biochem. Soc. Trans., 32:865-867 (2004); Poyner et al., 2002). Існування як мінімум двох підтипів рецепторів CGRP було припущено, виходячи з існування диференціальної спорідненості антагоністів і дієвості агоністів, встановлених у ряді in vivo та in vitro біологічних аналізів. (Dennis et al., CGRP8-37, A calcitonin gene-related peptide antagonist revealing calcitonin gene-related peptide receptor heterogeneity in brain and periphery, J. Pharmacol. Exp. Ther., 254:123-128 (1990); Dennis et al., Structure-activity profile of calcitonin gene-related peptide in peripheral and brain tissues. Evidence for multiplicity, J. Pharmacol. Exp. Ther., 251:718-725 (1989); Dumont et al., A potent and selective CGRP2 agonist, [Cys(Et)2,7]hCGRP: comparison in prototypical CGRP 1 and CGRP2 in vitro assays, Can. J. Physiol. Pharmacol., 75:671-676 (1997)). Було виявлено, що підтип рецептору CGRP1 чутливий до фрагменту антагоніста CGRP(837). (Chiba et al., Calcitonin gene-related peptide receptor antagonist human CGRP-(8-37), Am. J. Physiol., 256:E331-E335 (1989); Dennis et al. (1990); Mimeault et al., Comparative affinities and antagonistic potencies of various human calcitonin gene-related peptide fragments on calcitonin generelated peptide receptors in brain and periphery, J. Pharmacol. Exp. Ther., 258:1084-1090 (1991)). На відміну від цього, рецептор CGRP2 був чутливий до лінійних аналогів людського CGRP (hCGRP), у яких цистеїнові залишки в положеннях 2 і 7 були піддані дериватизації (наприклад, 2,7 2,7 за допомогою ацетамінометилу [Cys(ACM) ] або етиламіду [Cys(Et) ]), однак рецептор CGRP2 1 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 був нечутливий до фрагменту CGRP(8-37). (Dennis et al. (1989); Dennis et al. (1990); Dumont et al. (1997)). Специфічність рецептору кальцітоніну або кальцітонін-подібного рецептору до ліганду ("CL", "CLR" або "CRLR") залежить від ко-експресії членів сімейства акцесорних білків, названих білками, що модифікують активність рецептору (БМАР). Сімейство БМАР включає три поліпептиди (RAMP1, RAMP2 і RAMP3), що діють у якості модуляторів рецепторів і які визначають специфічність лігандів рецепторів для членів сімейства кальцітоніну. БМАР є трансмембранними білками I типу, які мають приблизно 30 % однакової амінокислотної послідовності та загальну прогностичну топологію, короткий цитоплазматичний C-Кінець, один трансмембранний домен і великий екстрацелюлярний N-Кінець, відповідальні за специфічність. (Mclatchie et al., (1998) Ramps regulate the transport and ligand specificity of the calcitonin-receptorlike receptor, Nature, 393:333-339; Fraser et al., (1999) The amino terminus of receptor activity modifying proteins is a critical determinant of glycosylation state and ligand binding of calcitonin receptor-like receptor, Molecular Pharmacology, 55:1054-1059). В 1998 р. рецептор CGRP1 був визначений як гетеродимер, що складався з раніше невідомого трансмембранного домену акцесорного білка, білка 1, що модифікує активність ферменту (RAMP1), і CRLR. (Mclatchie et al., supra). Тести утворення перехресних зв'язків дозволили припустити, що рецептор CGRP складається з стехіометрично розташованих CRLR і RAMP1 у співвідношенні 1:1 (Hilairet et al. JBC 276, 42182-42190 (2001)), а проведені недавно дослідження з використанням декількох методологій, таких як BRET і Bifc, виявили, що функціональний комплекс рецептору CGRP може складатися з асиметричного гомоолігомеру CRLR і мономеру RAMP1 (Heroux et al. JBC 282, 31610-31620 (2007)). 125 Було показано, що очищений N-Термінальний домен CRLR специфічно зв'язується з ICGRP (Chauhan et al. Biochemistry 44, 782 (2005)), що підтверджує важливу та безпосередню взаємодію між CRLR і лігандом CGRP. Зокрема, вважається, що Лей 24 і Лей 34 CRLR утворюють ділянку розміщення Фен 37 на C-Кінці CGRP (Banerjee et al. BMC Pharmacol. 6, 9 (2006)). Більше того, Koller і соавт. (FEBS Lett. 531, 464-468 (2002)) був отриманий доказ того, що 18 залишків амінокислот на N-Кінці CRLR сприяють селективній взаємодії з CGRP або адреномедуліном, а Ittner і соавт. (Biochemistry 44, 5749-5754 (2005)) припустили, що 23-60 амінокислотні залишки N-Кінця CRLR опосередковують взаємозв'язок з RAMP1. Структурно-функціональний аналіз RAMP1 визначив залишки 91-103, які корелюють з "спіраллю 3" (Simms et al. Biophys. J. 91, 662 – 669 (2006)) і є потенційно важливими для взаємодії з CRLR, а залишки Трп 74 і Фен 92 як потенційно взаємодіючі з лігандом CGRP при його зв'язуванні з комплексом рецептору CGRP. Дослідження зв'язування з лігандом, що використовують людську/щурячу химеру RAMP1, показали, що ділянка зв'язування для певних низькомолекулярних інгібіторів CGRP R (наприклад, BIBN4096BS), розташовується в ділянці, що включає амінокислоти 66-102 RAMP1 (Mallee et al. JBC 277, 14294 – 14298 (2002)). У цілому, CRLR має 55 % ідентичної амінокислотної послідовності в порівнянні з CTR, при цьому ідентичні приблизно 80 % трансмембранних доменів. (Mclatchie et al. (1998); Poyner et al., International union of pharmacology. XXXII. The mammalian calcitonin gene-related peptides, adrenomedullin, amylin and calcitonin receptors, Pharmacol. Rev., 54:233-246 (2002)). Було показано, що CRLR утворює високоафінний рецептор для CGRP за його зв'язування з RAMP1, або для кращого зв'язування з адреномедуліном за його зв'язування з RAMP2 або RAMP3. (Mclatchie et al. (1998); Sexton et al., Receptor activity modifying proteins, Cellular Signaling, 13:73-83 (2001); Conner et al., Interaction of calcitonin-gene-related peptide with its receptors, Biochemical Society Transactions 30(Part 4): 451-454 (2002)). Стан глікозування CRLR обумовлен його фармакологічними властивостями. RAMP 1, 2 і 3 транспортують CRLR на цитоплазматичну мембрану з подібним ступенем ефективності, однак RAMP1 представляє CRLR у вигляді термінально глікозилірованого, зрілого гликопротеїну та рецептору CGRP, у той час як RAMP 2 і RAMP 3 представляють CRLR у вигляді незрілого, корового глікозилірованого рецептору адреномедуліну ("AM" або "AMR", або "Am-Рецептора", (Fraser et al. (1999)). Характеристика рецепторів CRLR/RAMP2 і CRLR/RAMP3 у клітинах лінії HEK293T способом 125 Iзв'язування радіоліганду (у якості його використовувався Адреномедулін), функціональний аналіз (вимір цАМФ) або біохімічні аналізи (електрофорез у поліакріламідному гелі в присутності додецилсульфата натрію) виявили, що такі рецептори не відрізняються, навіть при подібності 30 % амінокислотної послідовності в RAMP2 і RAMP3 (Fraser et al. 1999)). Відмінності були виявлені у фармакологічних показниках CRLR, виражених за допомогою RAMP 2 у порівнянні з RAMP 3. Як CGRP, так і CGRP8-37, а також адреномедулін і отриманий з адреномедуліну пептид AM 22-52 є активнимивідносно гетеродимеру RAMP 3, вказуючи на те, що даний комплекс може діяти у вигляді CGRP-рецептору та Am-Рецептора. (Howitt et al., British 2 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 Journal of Pharmacology, 140:477-486 (2003); Muff et al., Hypertens. Res., 26:S3-S8 (2003)). Коекспресія людського CRLR з щурячим RAMP1 і навпаки дозволила припустити, що види RAMP1 визначали фармакологічні характеристики комплексу CRLR/RAMP1 щодо деяких досліджуваних низькомолекулярних антагоністів рецептору CGRP. (Mallee et al., Receptor Activity-Modifying Protein 1 determines the species selectivity of non-peptide CGRP receptor antagonists, J. Biol. Chem., 277(16):14294-14298 (2002)). За винятком випадків зв'язування з RAMP, невідомо, зв'язується чи CRLR з яким-небудь ендогенним лігандом; у цей час вважається, що тільки один GPCR поводиться подібним чином. (Conner et al., A key role for transmembrane prolines in calcitonin receptor-like agonist binding and signaling: implications for family B G-protein-coupled receptors, Molec. Pharmacol., 67(1):20-31 (2005)). Було показано, що рецептор кальцітоніну (CT) також утворює гетеродимерні комплекси з RAMP, відомі як рецептори амілину ("AMY", "AMY R" або "Amy-Рецептор"). Як правило, рецептори CT/RAMP1 (називані "AMY1" або "AMY1") мають високий ступінь афінності відносно кальцітоніну лососевих риб, амілину та CGRP. Для рецепторів CT/RAMP2 ("AMY 2" або "AMY2") і рецепторів CT/RAMP3 ("AMY3" або "AMY3") спостерігається аналогічна картина, незважаючи на те, що афінність відносно CGRP нижче та не може бути значною при фізіологічно значимих концентраціях ліганду. Точний фенотип рецептору залежить від типу клітини та слайс-варіанта CTR (CT(a) або CT(b)), особливо для амілінових рецепторів, утворених при участі RAMP2. Наприклад, за наявним даними чиста популяція остеокласт-подібних клітин експресує RAMP2, CTR, і CRLR, але не RAMP1 або RAMP3. (Hay et al. (2004); Christopoulos et al., Multiple amylin receptors arise from receptor activity-modifying protein interaction with the calcitonin receptor gene product, Molecular Pharmacology, 56:235-242 (1999); Muff et al., An amylin receptor is revealed following co-transfection of a calcitonin receptor with receptor activity modifying proteins-1 or-3, Endocrinology, 140:2924-2927 (1999); Sexton et al. (2001); Leuthauser et al., Receptor-activitymodifying protein 1 forms heterodimers with two G-protein-coupled receptors to define ligand recognition, Biochem. J., 351:347-351 (2000); Tilakaratne et al., Amylin receptor phenotypes derived from human calcitonin receptor/RAMP co-expression exhibit pharmacological differences dependent on receptor isoform and host cell environment, J. Pharmacol. Exp. Ther., 294:61-72 (2000); Nakamura et al., Osteoclast-like cells express receptor activity modifying protein 2: application of laser capture microdissection, J. Molec. Endocrinol., 34:257-261 (2005)). У Таблиці 1 нижче узагальнюється взаємозв'язок обговорених вище компонентів рецептору. Таблиця 1 Компонент рецептору RAMP1 RAMP2 RAMP3 35 40 45 50 CRLR (CL) Рецептор CGRP Рецептор AM1 Рецептор AM2 CT (рецептор кальцітоніну) Рецептор AMY1 Рецептор AMY2 Рецептор AMY3 Було припущено терапевтичне використання антагоністів CGRP. Noda et al. описали використання похідних CGRP або CGRP для інгібування агрегації тромбоцитів і для лікування або профілактики артеріосклерозу або тромбозу. (EP 0385712 B1). Liu і соавт. виявили терапевтичні агенти, що модулюють активність CTR, включаючи кон'югування з носієм пептиди, такі як кальцітонін і людський αCGRP. (WO 01/83526 A2; US 2002/0090646 A1). Вазоактивні пептидні антагоністи CGRP і їх використання в способі для інгібування зв'язування CGRP з рецепторами CGRP були виявлені Smith і соавт.; такі пептидні антагоністи CGRP інгібують зв'язування CGRP з мембранами коронарної артерії та розслаблюють коронарні артерії у свиней, підданих впливу капсаицину. (патент США No. 6268474 B1; і патент США No. 6756205 B2). Rist і соавт. виявили пептидні аналоги з активністю антагоніста рецепторів CGRP, а також показали їхнє використання в препаратах для лікування та профілактики ряду розладів (DE 19732944 A1). CGRP є сильним судинорозширювальним агентом, задіяним у патології цілого ряду вазомоторних симптомів, такі як усі форми судиного головного болю, включаючи мігрені (з/ без аури) і сильні приступоутворюючі головні болі (Durham, N. Engl. J. Med. 350:1073-1 075, 2004). Патофізіологія мігрені включає активацію ганглія тройничного нерву, де локалізований CGRP, при цьому під час приступів мігрені концентрації CGRP значно підвищуються. Це, у свою чергу, сприяє розширенню кровоносних судин голови, нейрогенному запаленню та сенсибілізації (Doods, H., Curr. Opin. Investig. Drugs, 2:1261-1268 (2001)). Крім того, у ході приступів мігрені в пацієнтів підвищуються сироваткові концентрації CGRP у зовнішній яремній вені (Goadsby et al., Ann. Neurol. 28:183-7, 1990). Внутрішньовенне введення людського ci-cgrp індуцирувало 3 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 головний біль і мігрень у пацієнтів, що страждають мігренню без аури, що підтримує поглад про те, що CGRP має причинну роль у розвитку мігрені (Lassen et al, Cephalalgia 22:54-61, 2002). Мігрень є складним, загальним неврологічним станом, який характеризується важкими, епізодичними приступами головного болю та асоційованих симптомів, які можуть включати нудоту, блювоту, чутливість до світла, звуку або руху. У деяких пацієнтів головного болю передує аура, або аура може супроводжувати головний біль. У деяких пацієнтів головний біль може бути важким та однобічним. Приступи мігрені руйнують щоденне життя. У США та Західній Європі загальна кількість людей, що страждають мігренню, становить 11 % від загального населення (6 % чоловіків, 15-18 % жінок). Більше того, медіана частоти приступів в окремої людини становить 1,5 приступу/місяць. У той час як існує цілий ряд способів лікування для полегшення або зниження симптомів, для пацієнтів, що мають більш 3-4 приступів мігрені на місяць, рекомендується проведення профілактичної терапії (Goadsby, et al. New Engl. J. Med. 346(4): 257-275, 2002). Деякі пацієнти з мігренню були піддані лікуванню топіраматом, протисудорожним засобом, який блокує потенційно залежні натрієві канали та певні рецептори глутамату (Ampa-Каинат), підсилює активність рецептору ГАМК-A і блокує карбоангидразу. Досягнутий відносно недавно успіх використання серотоніну 5HT-I B/ID та/або агоністів рецептору 5HT-1, таких як суматриптан, у деяких пацієнтів дозволив дослідникам припустити серотонінергичну етіологию розладу. На жаль, у той час як у деяких пацієнтів відзначалася гарна відповідь на таке лікування, інші залишалися відносно резистентними до його ефектів. Можлива участь CGRP у мігрені стало основою для розробки та випробувань цілого ряду сполук, які інгібують вивільнення CGRP (наприклад, суматриптан), антагонізують рецептор CGRP (наприклад, дипептидне похідне BIBN4096BS (Boehringer Ingelheim), CGRP(8-37)) або взаємодіють з одним або декількома пов'язаними з рецепторами білками, наприклад, RAMP1 (Brain, S. et al., Trends in Pharmacological Sciences 23:51-53, 2002. Alpha-2 adrenoceptor subtypes and adenosine Al receptors also control (inhibit) CGRP release and trigeminal activation (Goadsby et al., Brain 125:1392-401, 2002). З іншого боку, лікування сполуками, які винятково інгібують нейрогенне запалення (наприклад, антагоністи рецептору тахикініну NKI) або активацію ганглія тройничного нерву (наприклад, антагоністи рецептору 5HT10), виявилося відносно неефективним у якості гострого лікування мігрені, що приводить в деяких випадках до сумніву, є чи інгібуюче вивільнення CGRP основою для ефективних способів лікування мігрені (Arulmani et al., Eur. J. Pharmacol. 500:315-330, 2004). Незважаючи на те, що точна патофізіологія мігрені ще остаточно не вивчена, терапевтичне використання антагоністів CGRP і Cgrp-спрямованих аптамерів було запропоновано для лікування мігрені та інших розладів (наприклад, Olesen et al., Calcitonin gene-related peptide receptor antagonist BIBN 4096 BS for the acute treatment of migraine, New Engl. J. Med., 350:11041110 (2004); Perspective: Cgrp-receptor antagonists--a fresh approach to migraine, New Engl. J. Med., 350:1075 (2004); Vater et al., Short bioactive Spiegelmers to migraine-associated calcitonin gene-related peptide rapidly identified by a novel approach: tailored-selex, Nuc. Acids Res., 31(21 e130):1-7 (2003); WO 96/03993). Більше того, у ході недавно проведеного клінічного дослідження III фази було показано, що сильний низькомолекулярний антагоніст CGRP полегшує помірні/сильні приступи мігрені, включаючи біль, ака була викликана мігренню, і пов'язані з мігренню симптоми (Connor, et al. Efficacy and Safety of telcagepant (MK-0974), a Novel Oral CGRP Receptor Antagonist, for Acute Migraine Attacks. Poster, European Headache and Migraine Trust International Congress, London, England, September 2008). CGRP також може брати участь в інших синдромах хронічного болю, крім мігрені. У гризунів при інтратекальному уведенні CGRP відзначався сильний біль, а рівні CGRP у цілому ряді болючих моделей були підвищені. Крім того, антагоністи CGRP частково блокують ноціцепцію при гострому панкреатиті в гризунів (Wick, et al., (2006) Surgery, Volume 139, Issue 2, Pages 197201). У цілому, з таких спостережень випливає, що сильний антагоніст рецептору CGRP виборчої дії може виявитися ефективним для лікування хронічного болю, включаючи мігрень. СУТНІСТЬ ВИНАХОДУ Даний винахід описує ізольовані антитіла або їх антигензв'язуючі фрагменти та інші ізольовані антигензв'язуючі білки, які зв'язують CGRP R, зокрема CGRP R приматів, наприклад, людський CGRP R. Такі ізольовані антигензв'язуючі білки можуть вибірково інгібувати CGRP R приматів (у порівнянні з рецепторами приматів AM1, AM2, CT або рецепторами амілину) і зв'язувати як CRLR, так і RAMP 1-компоненти CGRP R. Було виявлено, що CGRP R-єднальні білки інгібують, впливають на або модулюють як мінімум один з біологічних відповідей, пов'язаних з CGRP R, і, таким чином, можуть використовуватися для поліпшення ефектів обумовлених CGRP R захворювань або розладів. Таким чином, зв'язування певних антигензв'язуючих білків з CGRP R приведе до одного або декількох наступним ефектам: 4 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 інгібування, взаємодія або модулювання CGRP R, інгібування розширення судин, зниження нейрогенного запалення та полегшення, зм'якшення симптомів, лікування, профілактика або зниження симптомів хронічному болю або мігрені. В одному зразковому прикладі ізольовані антигензв'язуючі білки селективно інгібують людський рецептор CGRP (у порівнянні з людськими рецепторами AM1, AM2 або рецепторами амілину). У деяких варіантах здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок вибірково інгібує людський рецептор CGRP з індексом вибірковості 50 або більше, 75 або більше, 100 або більше, 150 або більше, 200 або більше, 250 або більше, 300 або більше, 400 або більше, 500 або більше, 750 або більше, або 1000 або більше. Ступінь виборчого інгібування може визначатися з використанням будь-якого придатного способу, наприклад, з використанням аналізу цАМФ, як це описане в наведених в даному тексті прикладах. У деяких варіантах здійснення ізольований антигензв'язуючий білок специфічно зв'язується з людськими рецепторами CRLR і RAMP1, але не зв'язується специфічно з людськими рецепторами AM1, AM2 або людським рецептором амілину (наприклад, AMY1 або AMY2). Наприклад, ізольований антигензв'язуючий білок може специфічно зв'язуватися з людським рецептором CGRP R з показником KD≤1 мкмоль, ≤100 нмоль, ≤10 нмоль або ≤5 нмоль. У деяких варіантах здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок специфічно зв'язується з людським рецептором CGRP R з показником KD≤100 нмоль, ≤10 нмоль або ≤5 нмоль, як це визначається з використанням аналізу зв'язування FACS і аналізується, наприклад, з використанням способів, описаних Rathanaswami, et al., Biochemical and Biophysical Research Communications 334 (2005) 1004–1013. У деяких варіантах здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок має показник Ki≤100 нмоль, ≤10 нмоль, ≤1 нмоль, ≤0,5 нмоль або ≤0,1 нмоль, встановлений у ході аналізу конкурентного зв'язування CGRP. У деяких варіантах здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок має показник Ki≤100 нмоль, ≤50 нмоль, ≤20 нмоль, ≤10 нмоль, ≤1 нмоль, ≤0,5 нмоль або ≤0,1 нмоль, встановлений у ході аналізу конкурентного зв'язування 125 CGRP з використанням радіопоміченого I-CGRP, що зв'язується з мембранами клітин, експресуючих людський CGRP R (аналіз описано в Прикладі 5 даної заявки на винахід). В іншому типовому прикладі ізольовані антигензв'язуючі білки конкурують за зв'язування з людським CGRP R, наприклад, екстрацелюлярною частиною CGRP R, і еталонним антитілом, що складається з варіабельної ділянки важкого ланцюга, що включає послідовність, обрану з групи, що складається з SEQ ID NO:158-170, і варіабельної ділянки легкого ланцюга, що включає послідовність, відібрану з групи, що складається з SEQ ID NO:137-153. У деяких варіантах здійснення винаходу конкурування за зв'язування оцінюється з використанням кількісних вимірів ступені зв'язування, наприклад, з використанням аналізу Biacore, як це описано в Прикладі 7 даної заявки на винахід. У деяких варіантах здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок конкурує за зв'язування з людським CGRP R з еталонним антитілом, що складається з (i) варіабельної ділянки важкого ланцюга, що включає послідовність, відібрану з групи, що складається з SEQ ID Nos:161, 163, 164, 166 і 168; і (ii) варіабельної ділянки легкого ланцюга, що включає послідовність, відібрану з групи, що складається з SEQ ID Nos: 140, 143, 146, 148 і 150. У певних варіантах здійснення винаходу еталонне антитіло складається з (i) важкого ланцюга, який визначається по послідовності, обраної з групи, що складається з SEQ ID Nos:32, 34, 35, 37 і 39; і (ii) легкого ланцюга, який визначається по послідовності, обраної з групи, що складається з SEQ ID Nos: 15, 18, 21, 23 і 25. У більш специфічних варіантах здійснення винаходу еталонне антитіло складається з важкого ланцюга та легкого ланцюга, які визначені по одній з наступних пар послідовностей: (i) SEQ ID NO: 32 і SEQ ID NO: 15; (ii) SEQ ID NO: 34 і SEQ ID NO: 18; (iii) SEQ ID NO: 35 і SEQ ID NO: 21; (iv) SEQ ID NO: 37 і SEQ ID NO: 23; і (v) SEQ ID NO: 39 і SEQ ID NO: 25. В одному такому варіанті здійснення винаходу еталонне антитіло складається з важкого ланцюга, що складається з SEQ ID NO: 32, і легкого ланцюга, що складається з SEQ ID NO: 15. Ще в одному такому варіанті здійснення винаходу еталонне антитіло складається з важкого ланцюга, що складається з SEQ ID NO: 34, і легкого ланцюга, що складається з SEQ ID NO: 18. Ще в одному такому варіанті здійснення винаходу еталонне антитіло складається з важкого ланцюга, що складається з SEQ ID NO: 35, і легкого ланцюга, що складається з SEQ ID NO: 21. Ще в одному такому варіанті здійснення винаходу еталонне антитіло складається з важкого ланцюга, що складається з SEQ ID NO: 37, і легкого ланцюга, що складається з SEQ ID NO: 23. Ще в одному такому варіанті здійснення винаходу еталонне антитіло складається з важкого ланцюга, що складається з SEQ ID NO: 39, і легкого ланцюга, що складається з SEQ ID NO: 25. У певних варіантах здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки, які конкурують за зв'язування з людським CGRP R, також вибірково інгібують людський рецептор CGRP, наприклад, з індексом вибірковості 100 або більше, 250 або більше, 500 або більше, 750 або 5 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 більше, 1000 або більше, 2500 або більше, 5000 або більше, або 10 000 або більше, і така вибірковість може бути визначена, наприклад, з використанням аналізу цАМФ, як це описане в Прикладах тексту даної заявки на винахід. У подібних варіантах здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки, що конкурують за зв'язування з людським CGRP R, специфічно зв'язуються з людським CGRP R з показником KD≤1 мкмоль, ≤100 нмоль, ≤10 нмоль або ≤5 нмоль, наприклад, як це визначається з використанням аналізу зв'язування FACS і проаналізоване з використанням, наприклад, способів, описаних Rathanaswami, et al., Biochemical and Biophysical Research Communications 334 (2005) 1004–1013. У подібних варіантах здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки, що конкурують за зв'язування з людським CGRP R, мають показник Ki≤100 нмоль, ≤10 нмоль, ≤1 нмоль, ≤0,5 нмоль або ≤0,1 нмоль, встановлений у ході аналізу конкурентного зв'язування CGRP з використанням 125 радіопоміченого I-CGRP, що зв'язується з мембранами клітин, експресуючих людський CGRP R (аналіз описано в Прикладі 5 даної заявки на винахід). У кожному з зазначених вище варіантах здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок, що конкурує за зв'язування з людським CGRP R, може бути представлений, наприклад, моноклональним антитілом, поліклональним антитілом, рекомбінантним антитілом, людським (тобто повністю людським) антитілом, гуманізованим антитілом, химерним антитілом, мультіспецифічним антитілом або їх антигензв'язуючими фрагментами. Крім того, фрагмент ізольованого антигензв'язуючого білка, що конкурує за зв'язування з людським CGRP R, може бути представлений Fab фрагментом, Fab' фрагментом, F(ab')2 фрагментом, Fv фрагментом, диатілом або одноланцюговою молекулою антитіла; також він може бути представлений людським моноклональним антитілом, наприклад, антитілом типу Igg1-, Igg2-, Igg3- або Igg4-. У певних варіантах здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки, що конкурують за зв'язування з людським CGRP R, можуть бути представлені нейтралізуючими антигензв'язуючими білками. У певних типових прикладах описані ізольовані антигензв'язуючі білки, наприклад, ізольовані антитіла або їх фрагменти, складаються з (A) одного або декількох ділянок важкого ланцюга, що визначають комплементарність (або гіперваріабельних ділянок, CDRH) і обраних з групи, що включає: (i) CDRH1 з SEQ ID NO:134; (ii) CDRH2 з SEQ ID NO:135; (iii) CDRH3 з SEQ ID NO:136; і, у деяких випадках, (iv) CDRH з (i), (ii) і (iii), які включають одну або кілька заміщених амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делеції або вставки, які в сукупності становлять не більш чотирьох амінокислот; (B) одного або декількох ділянок важкого ланцюга, що визначають комплементарність (або гіперваріабельних ділянок, CDRL), обраних з групи, що включає: (i) CDRL1 обрані з групи з SEQ ID Nos:107, 111 і 118; (ii) CDRL2 обрані з групи з SEQ ID Nos: 108, 112 і 119; (iii) CDRL3 обрані з групи з SEQ ID Nos: 109, 113 і 120; і, у деяких випадках, (iv) CDRL з (i), (ii) і (iii), які включають одну або декілька, наприклад, одну, дві, три, чотири або більше, заміщених амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делеції або вставки, які в сукупності становлять не більш чотирьох амінокислот; або (C) одного або декількох CDRH важких ланцюгів (A) і одного або декількох CDRL легких ланцюгів (B). У деяких варіантах здійснення винаходу, CDRH надалі вибирається з групи, що включає: (i) CDRH1 з SEQ ID NO:131; (ii) CDRH2 з SEQ ID NO:132; (iii) CDRH3 з SEQ ID NO:133; і, у деяких випадках, (iv) CDRH з (i), (ii) і (iii), які включають одну або декілька, наприклад, одну, дві, три, чотири або більше, заміщених амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делеції або вставки, які в сукупності становлять не більш трьох амінокислот. У подібних варіантах здійснення винаходу, CDRH надалі вибирається з групи, що включає: (i) CDRH1 обрані з групи з SEQ ID NO:76, 88, 100, 121, 125 і 128; (ii) CDRH2 обрані з групи з SEQ ID NO:89, 101, 122, 124, 126 і 129; (iii) CDRH3 обрані з групи з SEQ ID NO:78, 90, 102, 123, 127 і 130; і, у деяких випадках, (iv) CDRH з (i), (ii) і (iii), які включають одну або декілька, наприклад, одну, дві, три, чотири або більше, заміщених амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делеції або вставки, які в сукупності становлять не більш двох амінокислот. В інших подібних варіантах здійснення винаходу CDRH надалі вибирається з групи, що включає: (i) CDRH1, обрані з групи з SEQ ID NO:73, 76, 79, 82, 85, 88, 92, 97 і 100; (ii) CDRH2, обрані з групи з SEQ ID NO:74, 77, 80, 83, 86, 89, 91, 93, 95, 98, 101 і 129; (iii) CDRH3, обрані з групи з SEQ ID NO:75, 78, 81, 84, 87, 90, 96, 99, 102 і 123; і, у деяких випадках, (iv) CDRH з (i), (ii) і (iii), які включають одну або декілька, наприклад, одну, дві, три, чотири або більше, заміщених амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делеції або вставки, які в сукупності становлять не більш двох амінокислот. У деяких варіантах здійснення винаходу, CDRL надалі вибирається з групи, що включає: (i) CDRL1, обрані з групи з SEQ ID NO:107, 111 і 115; (ii) CDRL2, обрані з групи з SEQ ID NO:108, 6 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 112 і 116; (iii) CDRL3, обрані з групи з SEQ ID NO:109, 113 і 117; і, у деяких випадках, (iv) CDRL з (i), (ii) і (iii), які включають одну або декілька, наприклад, одну, дві, три, чотири або більше, заміщених амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делеції або вставки. У деяких варіантах здійснення винаходу заміни амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делеції або вставки у своїй сукупності становлять не більш трьох амінокислот на CDRL. У деяких варіантах здійснення винаходу заміни амінокислот, делеції або вставки у своїй сукупності становлять не більш двох амінокислот на CDRL. У подібних варіантах здійснення винаходу, CDRL надалі вибирається з групи, що включає: (i) CDRL1, обрані з групи з SEQ ID NO:42, 45, 51, 57, 62, 69, 103 і 110; (ii) CDRL2, обрані з групи з SEQ ID NO:43, 52, 55, 58, 63, 70, 104, 108 і 114; (iii) CDRL3, обрані з групи з SEQ ID NO:44, 47, 53, 56, 59, 64, 105 і 106; і, у деяких випадках, (iv) CDRL з (i), (ii) і (iii), які включають одну або декілька, наприклад, одну, дві, три, чотири або більше, заміщених амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делеції або вставки, які в сукупності становлять не більш двох амінокислот. В інших подібних варіантах здійснення винаходу, CDRL надалі вибирається з групи, що включає: (i) CDRL1, обрані з групи з SEQ ID NO:42, 45, 48, 51, 54, 57, 62, 65, 66 і 69; (ii) CDRL2, обрані з групи з SEQ ID NO:43, 46, 49, 52, 55, 58, 61, 63, 67 і 70; (iii) CDRL3, обрані з групи з SEQ ID NO:44, 47, 50, 53, 56, 59, 64, 68, 71 і 72; і, у деяких випадках, (iv) CDRL з (i), (ii) і (iii), які включають одну або декілька, наприклад, одну, дві, три, чотири або більше, заміщених амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делеції або вставки. В одному варіанті здійснення винаходу загальний кількість замін амінокислот, делецій або вставок у своїй сукупності становить не більш двох амінокислот на CDR. В іншому варіанті здійснення винаходу заміни амінокислот представлені консервативними замінами. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається як мінімум з одного або двох CDRH кожного з зазначених ланцюгів (A) і як мінімум одного або двох CDRL кожного з зазначених ланцюгів (B). Ще в одному варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з (i) як мінімум трьох CDRH кожного з зазначених вище ланцюгів (A), при цьому три CDRH включають CDRH1, CDRH2 і CDRH3, і (ii) як мінімум трьох CDRL кожного з зазначених вище ланцюгів (B), при цьому три CDRL включають CDRL1, CDRL2 і CDRL3. У додаткових варіантах здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки, описані вище, складаються з першої амінокислотної послідовності, що включає як мінімум один CDRH, і другої амінокислотної послідовності, що включає як мінімум один CDRL. В одному варіанті здійснення винаходу перша та друга амінокислотні послідовності ковалентно зв'язані один з одним. В іншому аспекті винаходу ізольований антигензв'язуючий білок включає CDRH1, CDRH2 і CDRH3. В одному варіанті здійснення винаходу CDRH1 складається з SEQ ID NO:73, CDRH2 складається з SEQ ID NO:74 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:75. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRH1 складається з SEQ ID NO:76, CDRH2 складається з SEQ ID NO:77 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:78. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRH1 складається з SEQ ID NO:79, CDRH2 складається з SEQ ID NO:80 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:81. В іншому варіанті здійснення винаходу, CDRH1 складається з SEQ ID NO:82, CDRH2 складається з SEQ ID NO:83 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:84. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRH1 складається з SEQ ID NO:85, CDRH2 складається з SEQ ID NO:86 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:87. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRH1 складається з SEQ ID NO:88, CDRH2 складається з SEQ ID NO:89 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:90. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRH1 складається з SEQ ID NO:76, CDRH2 складається з SEQ ID NO:91 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:78. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRH1 складається з SEQ ID NO:92, CDRH2 складається з SEQ ID NO:93 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:94. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRH1 складається з SEQ ID NO:76, CDRH2 складається з SEQ ID NO:95 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:78. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRH1 складається з SEQ ID NO:73, CDRH2 складається з SEQ ID NO:74 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:96. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRH1 складається з SEQ ID NO:97, CDRH2 складається з SEQ ID NO:98 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:99. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRH1 складається з SEQ ID NO:100, CDRH2 складається з SEQ ID NO:101 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:102. В іншому аспекті винаходу ізольований антигензв'язуючий білок включає послідовність CDRL1, послідовність CDRL2 і послідовність CDRL3. В одному варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:42, CDRL2 складається з SEQ ID NO:43 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:44. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:45, CDRL2 складається з SEQ ID NO:46 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:47. В іншому варіанті 7 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:48, CDRL2 складається з SEQ ID NO:49 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:50. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:51, CDRL2 складається з SEQ ID NO:52 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:53. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:54, CDRL2 складається з SEQ ID NO:55 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:56. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:57, CDRL2 складається з SEQ ID NO:58 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:59. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:60, CDRL2 складається з SEQ ID NO:55 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:56. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:45, CDRL2 складається з SEQ ID NO:61 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:47. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:62, CDRL2 складається з SEQ ID NO:63 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:64. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:65, CDRL2 складається з SEQ ID NO:55 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:56. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:66, CDRL2 складається з SEQ ID NO:67 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:68. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:69, CDRL2 складається з SEQ ID NO:70 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:71. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:69, CDRL2 складається з SEQ ID NO:70 і CDRL3 складається з SEQ ID NO:72. В іншому аспекті винаходу ізольований антигензв'язуючий білок включає послідовність CDRL1, послідовність CDRL2, послідовність CDRL3, послідовність CDRH1, послідовність CDRH2 і послідовність CDRH3. В одному варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:42, CDRL2 складається з SEQ ID NO:43, CDRL3 складається з SEQ ID NO:44, CDRH1 складається з SEQ ID NO:73, CDRH2 складається з SEQ ID NO:74 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:75. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:45, CDRL2 складається з SEQ ID NO:46, CDRL3 складається з SEQ ID NO:47, CDRH1 складається з SEQ ID NO:76, CDRH2 складається з SEQ ID NO:77 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:78. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:48, CDRL2 складається з SEQ ID NO:49, CDRL3 складається з SEQ ID NO:50, CDRH1 складається з SEQ ID NO:79, CDRH2 складається з SEQ ID NO:80 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:81. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:51, CDRL2 складається з SEQ ID NO:52, CDRL3 складається з SEQ ID NO:53, CDRH1 складається з SEQ ID NO:82, CDRH2 складається з SEQ ID NO:83 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:84. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:54, CDRL2 складається з SEQ ID NO:55, CDRL3 складається з SEQ ID NO:56, CDRH1 складається з SEQ ID NO:85, CDRH2 складається з SEQ ID NO:86 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:87. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:57, CDRL2 складається з SEQ ID NO:58, CDRL3 складається з SEQ ID NO:59, CDRH1 складається з SEQ ID NO:88, CDRH2 складається з SEQ ID NO:89 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:90. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:60, CDRL2 складається з SEQ ID NO:55, CDRL3 складається з SEQ ID NO:56, CDRH1 складається з SEQ ID NO:85, CDRH2 складається з SEQ ID NO:86 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:87. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:45, CDRL2 складається з SEQ ID NO:61, CDRL3 складається з SEQ ID NO:47, CDRH1 складається з SEQ ID NO:76, CDRH2 складається з SEQ ID NO:91 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:78. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:62, CDRL2 складається з SEQ ID NO:63, CDRL3 складається з SEQ ID NO:64, CDRH1 складається з SEQ ID NO:92, CDRH2 складається з SEQ ID NO:93 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:94. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:45, CDRL2 складається з SEQ ID NO:61, CDRL3 складається з SEQ ID NO:47, CDRH1 складається з SEQ ID NO:76, CDRH2 складається з SEQ ID NO:95 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:78. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:65, CDRL2 складається з SEQ ID NO:55, CDRL3 складається з SEQ ID NO:56, CDRH1 складається з SEQ ID NO:85, CDRH2 складається з SEQ ID NO:86 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:87. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:42, CDRL2 складається з SEQ ID NO:43, CDRL3 складається з SEQ ID NO:44, CDRH1 складається з SEQ ID NO:73, CDRH2 складається з SEQ ID NO:74 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:96. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:66, CDRL2 складається з SEQ ID NO:67, CDRL3 складається з SEQ ID NO:68, CDRH1 складається з SEQ ID NO:97, CDRH2 складається з SEQ ID NO:98 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:99. В іншому варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:69,CDRL2 складається з SEQ ID NO:70, CDRL3 складається з SEQ ID NO:71, CDRH1 складається з SEQ ID NO:100, CDRH2 складається з SEQ ID NO:101 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:102. В іншому 8 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 варіанті здійснення винаходу CDRL1 складається з SEQ ID NO:69, CDRL2 складається з SEQ ID NO:70, CDRL3 складається з SEQ ID NO:72, CDRH1 складається з SEQ ID NO:100, CDRH2 складається з SEQ ID NO:101 і CDRH3 складається з SEQ ID NO:102. У кожному з зазначених вище варіантах здійснення винаходу, які визначені за послідовністю, ізольований антигензв'язуючий білок може бути представлений, наприклад, моноклональним антитілом, поліклональним антитілом, рекомбінантним антитілом, людським (тобто повністю людським) антитілом, гуманізованим антитілом, химерним антитілом, мультіспецифічним антитілом або їх антигензв'язуючими фрагментами. Крім того, фрагмент ізольованого антигензв'язуючого білка може бути представлений Fab фрагментом, Fab' фрагментом, F(ab')2 фрагментом, Fv фрагментом, диатілом або одноланцюговою молекулою антитіла. Наприклад, ізольований антигензв'язуючий білок може бути представлений людським моноклональним антитілом або, наприклад, антитілом типу Igg1-, Igg2-, Igg3- або Igg4-. Крім того, ізольовані антигензв'язуючі білки можуть бути представлені нейтралізуючими антигензв'язуючими білками. У кожному з зазначених вище варіантах здійснення винаходу, які визначені по послідовності, ізольований антигензв'язуючий білок може специфічно зв'язуватися з людськими CRLR і RAMP1, але не зв'язуватися специфічно з AM1, AM2 або людським рецептором амілину (наприклад, AMY1), наприклад, ізольований антигензв'язуючий білок може специфічно зв'язуватися з людським CGRP R з показником KD≤1 мкмоль, ≤100 нмоль, ≤10 нмоль або ≤5 нмоль, наприклад, як це визначене з використанням аналізу зв'язування FACS і проаналізоване з використанням способів, описаних, наприклад, Rathanaswami, et al., Biochemical and Biophysical Research Communications 334 (2005) 1004–1013. У кожному з зазначених вище варіантах здійснення винаходу, які визначені по послідовності, ізольований антигензв'язуючий білок може вибірково інгібувати людський рецептор CGRP R щодо людських рецепторів AM1, AM2 або AMY1, наприклад, з індексом вибірковості 100 або більше, 250 або більше, 500 або більше, 750 або більше, 1000 або більше, 2500 або більше, 5000 або більше, або 10 000 або більше, і така вибірковість може бути визначена будь-яким належним способом, наприклад, з використанням аналізу цАМФ, як це описане в Прикладах тексту даної заявки на винахід. У кожному з зазначених вище варіантах здійснення винаходу, які визначені по послідовності, ізольований антигензв'язуючий білок може мати показник Ki≤100 нмоль, ≤10 нмоль, ≤1 нмоль, ≤0,5 нмоль або ≤0,1 нмоль, встановлений у ході аналізу конкурентного зв'язування CGRP з 125 використанням радіопоміченого I-CGRP, що зв'язується з мембранами клітин, експресуючих людський CGRP R (аналіз описано в Прикладі 5 даної заявки на винахід). Інший набір варіанта здійснення винаходу описує ізольовані антигензв'язуючі білки, що включають один ГВД (гіперваріабельна ділянка) або комбінацію ГВД разом з консенсусною послідовністю, представленою нижче, і, у деяких випадках, що зв'язують людський CGRP R. Консенсусні послідовності одержують з філогенетично родинних послідовностей ГВД. В одному аспекті винаходу ГВД з різних груп можуть бути змішані та зіставлені з яким-небудь окремим ізольованим антигензв'язуючим білком, який зв'язується з людським CGRP R. В іншому аспекті винаходу антигензв'язуючий білок складається з ГВД важкої та легкої ланцюгів, отриманих з однієї та тієї ж філогенетично родинної групи клонів антитіла. Типові консенсусні послідовності ГВД представлені нижче. Консенсусна послідовність K1 CDR1 RASQGIRX1DLG (SEQ ID NO:103), де X1 вибирається з групи, що складається з N і K. CDR2 X1ASSLQS (SEQ ID NO:104), де X1 вибирається з групи, що складається з A і G. CDR3 LQYNX1X2PWT (SEQ ID NO:105), де X1 вибирається з групи, що складається з I і S, а X2 вибирається з групи, що складається з Y і F. Консенсусна послідовність K4 CDR3 QQYGNSLX1R (SEQ ID NO:106), де X1 вибирається з групи, що складається з S і C. Консенсусна послідовність K1,4 CDR1 RASQX1X2X3X4GX5LX6 (SEQ ID NO:107), де X1 вибирається з групи, що складається з S і G, X2 вибирається з групи, що складається з V і I, X 3 вибирається з групи, що складається з S і R, X4 вибирається з групи, що складається з S, N і K, X 5 вибирається з групи, що складається з Y і D, і X6 вибирається з групи, що складається з T і G. CDR2 X1ASSX2X3X4 (SEQ ID NO:108), де X1 вибирається з групи, що складається з G і A, X 2 вибирається з групи, що складається з R і L, X3 вибирається з групи, що складається з A і Q, і X 4 вибирається з групи, що складається з T і S. CDR3 X1QYX2X3X4X5X6X7 (SEQ ID NO:109), де X1 вибирається з групи, що складається з Q і L, X2 вибирається з групи, що складається з G і N, X3 вибирається з групи, що складається з N і T, X4 вибирається з групи, що складається з S, Y і F, X 5 вибирається з групи, що складається з L 9 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 і P, і X6 вибирається з групи, що складається з C, W і S, і X 7 вибирається з групи, що складається з R і T. Консенсусна послідовність K3 CDR1 KSSQSLLHSX1GX2X3YLY (SEQ ID NO:110), де X1 вибирається з групи, що складається з D і A, X2 вибирається з групи, що складається з R і K, і X 3 вибирається з групи, що складається з N і T. Консенсусна послідовність K2,3 CDR1 X1SSQSLLHSX2GX3X4YLX5 (SEQ ID NO:111), де X1 вибирається з групи, що складається з R і K, X2 вибирається з групи, що складається з F, D і A, X 3 вибирається з групи, що складається з Y, R і K, X4 вибирається з групи, що складається з N і T, і X 5 вибирається з групи, що складається з D і Y. CDR2 X1X2SNRX3S (SEQ ID NO:112), де X1 вибирається з групи, що складається з L і E, X 2 вибирається з групи, що складається з G і V, і X 3 вибирається з групи, що складається з A і F. CDR3 MQX1X2X3X4PX5T (SEQ ID NO:113), де X1 вибирається з групи, що складається з A і S, X2 вибирається з групи, що складається з L і F, X 3 вибирається з групи, що складається з Q і P, X4 вибирається з групи, що складається з T і L, і X 5 вибирається з групи, що складається з F і L. Консенсусна послідовність Lm3 CDR2 RX1NQRPS (SEQ ID NO:114), де X1 вибирається з групи, що складається з N і S. Консенсусна послідовність Lm1,2,3 CDR1 SGSSSNIGX1NX2VX3 (SEQ ID NO:115), де X1 вибирається з групи, що складається з N і S, X2 вибирається з групи, що складається з Y і T, і X3 вибирається з групи, що складається з S, N і Y. CDR2 X1X2NX3RPS (SEQ ID NO:116), де X1 вибирається з групи, що складається з D, T і R, X2 вибирається з групи, що складається з N і S, і X 3 вибирається з групи, що складається з K і Q. CDR3 X1QYX2X3X4X5X6X7 (SEQ ID NO:117), де X1 вибирається з групи, що складається з G і A, X2 вибирається з групи, що складається з T і A, X 3 вибирається з групи, що складається з W і R, X4 вибирається з групи, що складається з S і D, X 5 вибирається з групи, що складається з R і S, і X6 вибирається з групи, що складається з S і N, і X 7 вибирається з групи, що складається з A і G. Консенсусна послідовність Lmall CDR1 X1GX2X3SX4X5X6X7X8X9X10X11 (SEQ ID NO:118), де X1 вибирається з групи, що складається з S і Q, X2 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то представлений S, X 3 вибирається з групи, що складається з S і D, X 4 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, те представлений N, X5 вибирається з групи, що складається з I і L, X 6 вибирається з групи, що складається з G і R, X7 вибирається з групи, що складається з N і S, X 8 вибирається з групи, що складається з N і F, X9 вибирається з групи, що складається з Y і T, X 10 вибирається з групи, що складається з V і A, і X11 вибирається з групи, що складається з S, N і Y. CDR2 X1X2NX3RPS (SEQ ID NO:119), де X1 вибирається з групи, що складається з D, G, T і R, X2 вибирається з групи, що складається з N, K і S, і X 3 вибирається з групи, що складається з K, N і Q. CDR3 X1X2X3DX4X5X6X7X8X9V (SEQ ID NO:120), де X1 вибирається з групи, що складається з G, N і A, X2 вибирається з групи, що складається з T, S і A, X 3 вибирається з групи, що складається з W і R, X4 вибирається з групи, що складається з S і D, X 5 вибирається з групи, що складається з R і S, X6 вибирається з групи, що складається з L і V, X 7 вибирається з групи, що складається з S, Y і N, X 8 вибирається з групи, що складається з A, H і G, і X 9 вибирається з групи, що складається з V і L. Консенсусна послідовність HC1 CDR1 X1YYMX2 (SEQ ID NO:121), де X1 вибирається з групи, що складається з G і D, а X 2 вибирається з групи, що складається з H і Y. CDR2 WIX1PNSGGTNYAQKFQG (SEQ ID NO:122), де X 1 вибирається з групи, що складається з N і S. CDR3 X1X2X3SX4X5X6X7X8GX9X10X11X12YYX13GMDV (SEQ ID NO:123), де X1 вибирається з групи, що складається з D і G, X2 вибирається з групи, що складається з Q і G, X 3 вибирається з групи, що складається з M і Y, X4 вибирається з групи, що складається з I і G, X 5 вибирається з групи, що складається з I і Y, X6 вибирається з групи, що складається з M і A, X7 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то представлений L, X 8 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то представлений R, X9 вибирається з групи, що складається з V і L, X 10 вибирається з групи, що складається з F і Y, X11 вибирається з групи, що складається з P і S, X 12 вибирається з групи, що складається з P і H, і X 13 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то представлений Y. 10 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Консенсусна послідовність HC2 CDR2 RIKSX1TDGGTTDYX2APVKG (SEQ ID NO:124), де X1 вибирається з групи, що складається з K і T, а X2 вибирається з групи, що складається з T і A. Консенсусна послідовність HC3 CDR1 X1YX2MX3 (SEQ ID NO:125), де X1 вибирається з групи, що складається з T і S, X 2 вибирається з групи, що складається з S і A, і X3 вибирається з групи, що складається з N і S. CDR2 X1ISX2SX3X4X5X6YYADSVKG (SEQ ID NO:126), де X1 вибирається з групи, що складається з S і A, X2 вибирається з групи, що складається з S і G, X 3 вибирається з групи, що складається з S і G, X4 вибирається з групи, що складається з S і G, X 5 вибирається з групи, що складається з Y і R, і X6 вибирається з групи, що складається з R і T. CDR3 X1X2X3X4X5X6X7PYSX8X9WYDYYYGMDV (SEQ ID NO:127), де X1 вибирається з групи, що складається з E і D, X 2 вибирається з групи, що складається з G і Q, X 3 вибирається з групи, що складається з V і R, X 4 вибирається з групи, що складається з S і E, X 5 вибирається з групи, що складається з G і V, і X6 вибирається з групи, що складається з S і G, X 7 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то представлений S, X 8 вибирається з групи, що складається з I і S, і X9 вибирається з групи, що складається з S і G. Консенсусна послідовність HC4 CDR1 SX1GMH (SEQ ID NO:128), де X1 вибирається з групи, що складається з F і Y. CDR2 VISX1DGSX2KYX3X4DSVKG (SEQ ID NO:129), де X1 вибирається з групи, що складається з F і Y, X2 вибирається з групи, що складається з I і H, X 3 вибирається з групи, що складається з S і Y, і X4 вибирається з групи, що складається з V і A. CDR3 X1RX2X3X4X5X6SX7X8YYX9X10X11YYGX12X13V (SEQ ID NO:130), де X1 вибирається з групи, що складається з D і E, X2 вибирається з групи, що складається з L і K, X 3 вибирається з групи, що складається з N і R, X4 вибирається з групи, що складається з Y і V, X 5 вибирається з групи, що складається з Y і T, X6 вибирається з групи, що складається з D і M, X 7 вибирається з групи, що складається з S і T, X8 вибирається з групи, що складається з G і L, X 9 вибирається з групи, що складається з H і Y, X10 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то представлений Y, X11 вибирається з групи, що складається з K і F, X 12 вибирається з групи, що складається з M і L, і X13 вибирається з групи, що складається з A і D. Консенсусна послідовність HCA CDR2 X1X2X3MX4 (SEQ ID NO:131), де X1 вибирається з групи, що складається з N і S, X2 вибирається з групи, що складається з A, Y і F, X 3 вибирається з групи, що складається з W, A і G, і X4 вибирається з групи, що складається з S і H. CDR2 X1IX2X3X4X5X6GX7X8X9X10X11X12X13X14VKG (SEQ ID NO:132), де X1 вибирається з групи, що складається з R, A і V, X2 вибирається з групи, що складається з K, S і W, X 3 вибирається з групи, що складається з S, G, F і Y, X 4 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то вибирається з групи, що складається з K і T, X 5 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то представлений T, X6 вибирається з групи, що складається з D і S, X 7 вибирається з групи, що складається з G і S, X8 вибирається з групи, що складається з T, R, I, N і H, X 9 вибирається з групи, що складається з T і K, X10 вибирається з групи, що складається з D і Y, X 11 вибирається з групи, що складається з Y і S, X12 вибирається з групи, що складається з T, A і V, X 13 вибирається з групи, що складається з A і D, і X14 вибирається з групи, що складається з P і S. CDR3 X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16X17GX18X19V (SEQ ID NO:133), де X1 вибирається з групи, що складається з D, A і E, X 2 вибирається з групи, що складається з R, Q і G, X3 вибирається з групи, що складається з T, R, L, G і K, X 4 вибирається з групи, що складається з G, E, N, I і R, X5 вибирається з групи, що складається з Y, V і A, X 6 вибирається з групи, що складається з S, G, Y, A і T, X 7 вибирається з групи, що складається з I, P, D, A і M, X 8 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то вибирається з групи, що складається з S і Y, X 9 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то вибирається з групи, що складається з W, S і T, X10 вибирається з групи, що складається з S, G і L, X 11 вибирається з групи, що складається з S, G, L і Y, X12 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то вибирається з групи, що складається з W і Y, X13 вибирається з групи, що складається з Y і H, X 14 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то вибирається з групи, що складається з Y і D, X 15 вибирається з групи, що складається з Y, K і F, X16 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то представлений Y, X17 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то представлений Y, X 18 вибирається з групи, що складається з M і L, і X19 вибирається з групи, що складається з D і A. Консенсусна послідовність HCB CDR3 X1X2X3X4X5 (SEQ ID NO:134), де X1 вибирається з групи, що складається з N, G, D, S і A, X2 вибирається з групи, що складається з A, F і Y, X 3 вибирається з групи, що складається з W, Y, A і G, X4 вибирається з групи, що складається з M і L, і X 5 вибирається з групи, що 11 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 складається з S і H. CDR2 X1IX2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16X17G (SEQ ID NO:135), де X 1 вибирається з групи, що складається з R, W, A, V, S і F, X 2 вибирається з групи, що складається з K, N, S, W і R, X3 вибирається з групи, що складається з S, P, G, F і Y, X 4 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то вибирається з групи, що складається з K, T і R, X 5 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то вибирається з групи, що складається з T і A, X6 вибирається з групи, що складається з D, N, H, S і Y, X7 вибирається з групи, що складається з G і S, X 8 вибирається з групи, що складається з G і S, X9 вибирається з групи, що складається з T, G, R, I, N, H і Y, X 10 вибирається з групи, що складається з T, K, R і P, X 11 вибирається з групи, що складається з D, N, Y і E, X12 вибирається з групи, що складається з Y і S, X 13 вибирається з групи, що складається з T, A і V, X 14 вибирається з групи, що складається з A, Q і D, X 15 вибирається з групи, що складається з P, K і S, X 16 вибирається з групи, що складається з V і F, і X 17 вибирається з групи, що складається з K і Q. CDR3 X1X2X3X4X5SX6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16GX17X18V (SEQ ID NO:136), де X1 вибирається з групи, що складається з D, G, A і E, X2 вибирається з групи, що складається з R, G і Q, X3 вибирається з групи, що складається з T, M, Y, R, L, G і K, X 4 вибирається з групи, що складається з G, S, E, N, I і R, X5 вибирається з групи, що складається з Y, I, G, V і A, X 6 вибирається з групи, що складається з S, I, Y, G, A і T, X 7 вибирається з групи, що складається з I, M, A, P і D, X8 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то вибирається з групи, що складається з S, L і Y, X9 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то вибирається з групи, що складається з W, R, S і T, X10 вибирається з групи, що складається з S, G і L, X 11 вибирається з групи, що складається з S, V, L, G і Y, X 12 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то вибирається з групи, що складається з F, Y і W, X13 вибирається з групи, що складається з Y, P, S і H, X14 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то вибирається з групи, що складається з Y, P, D і H, X15 вибирається з групи, що складається з Y, K і F, X 16 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то представлений Y, X 17 є присутнім або відсутнім, а якщо є присутнім, то представлений Y, і X18 вибирається з групи, що складається з M і L. У кожному з зазначених вище варіантах здійснення винаходу, які визначені по консенсусній послідовності, ізольований антигензв'язуючий білок може бути представлений, наприклад, поліпептидом по типу авімерів, моноклональним антитілом, поліклональним антитілом, рекомбінантним антитілом, людським (тобто повністю людським) антитілом, гуманізованим антитілом, химерним антитілом, мультіспецифічним антитілом або їх антигензв'язуючими фрагментами. Крім того, фрагмент ізольованого антигензв'язуючого білка може бути представлений Fab фрагментом, Fab' фрагментом, F(ab') 2 фрагментом, Fv фрагментом, диатілом або одноланцюговою молекулою антитіла. Наприклад, ізольований антигензв'язуючий білок може бути людським моноклональним антитілом і бути представлений, наприклад, антитілом типу Igg1-, Igg2-, Igg3- або Igg4-. Крім того, ізольовані антигензв'язуючі білки можуть бути представлені нейтралізуючими антигензв'язуючими білками. У кожному з зазначених вище варіантах здійснення винаходу, які визначені по консенсусній послідовності, ізольований антигензв'язуючий білок може специфічно зв'язуватися з людськими CRLR і RAMP1, але не зв'язуватися специфічно з AM1, AM2 або людським рецептором аміліну (наприклад, AMY1), наприклад, ізольований антигензв'язуючий білок може специфічно зв'язуватися з людським CGRP R з показником KD≤1 мкмоль, ≤100 нмоль, ≤10 нмоль або ≤5 нмоль, наприклад, як це визначене з використанням аналізу зв'язування FACS і проаналізоване з використанням способів, описаних, наприклад, Rathanaswami, et al., Biochemical and Biophysical Research Communications 334 (2005) 1004–1013. У кожному з зазначених вище варіантів здійснення винаходу, які визначені по консенсусній послідовності, ізольований антигензв'язуючий білок може вибірково інгібувати людський рецептор CGRP R щодо людських рецепторів AM1, AM2 або AMY1, наприклад, з індексом вибірковості 100 або більше, 250 або більше, 500 або більше, 750 або більше, 1000 або більше, 2500 або більше, 5000 або більше, або 10 000 або більше, і така вибірковість може бути визначена будь-яким належним способом, наприклад, з використанням аналізу цАМФ, як це описане в Прикладах тексту даної заявки на винахід. У кожному з зазначених вище варіантах здійснення винаходу, які визначені по консенсусній послідовності, ізольований антигензв'язуючий білок може мати показник Ki≤100 нмоль, ≤10 нмоль, ≤1 нмоль, ≤0,5 нмоль або ≤0,1 нмоль, встановлений у ході аналізу 125 конкурентного зв'язування CGRP з використанням радіопоміченого I-CGRP, що зв'язується з мембранами клітин, експресуючих людський CGRP R (аналіз описано в Прикладі 5 даної заявки на винахід). Деякі описані ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з послідовності варіабельної ділянки важкого ланцюга (VH), який має ідентичність як мінімум 80 %, 85 % і 90 % або 95 % у 12 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 порівнянні з послідовністю амінокислот, обраної з групи, що складається з SEQ ID Nos:158-170. Деякі описані ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з послідовності варіабельної ділянки легкого ланцюга (VL), який має ідентичність як мінімум 80 %, 85 % і 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю амінокислот, обраної з групи, що складається з SEQ ID Nos:137-153. Деякі описані ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з V H послідовності, яка має ідентичність як мінімум 80 %, 85 %, 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю амінокислот, обраної з групи, що складається з SEQ ID Nos:158-170, і VL послідовності, яка має ідентичність як мінімум 80 %, 85 %, 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю амінокислот, обраної з групи, що складається з SEQ ID Nos:137-153. У деяких варіантах здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) варіабельної ділянки важкого ланцюга (VH), що включає послідовність (i), обрану з групи, що складається з SEQ ID Nos:158-170, або (ii) як це визначене (i) і включаючи одну або декілька (наприклад, п'ять, десять, п'ятнадцять або двадцять) замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; (B) VL, що включає послідовність (iii), обрану з групи, що містить SEQ ID Nos:137-153, або (iv) як це визначене (iii) і включаючи одну або декілька (наприклад, п'ять, десять, п'ятнадцять або двадцять) замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; або (C) VH, що складається з (A), і VL, що складається з (B). У деяких варіантах здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з варіабельної ділянки важкого ланцюга (VH), що включає послідовність, обрану з групи, що містить SEQ ID Nos:158-170, і VL, що включає послідовність, обрану з групи, що містить SEQ ID Nos:137-153. В одному варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки важкого ланцюга (VH), що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:158, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VH, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:159, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VH, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:160, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VH, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:161, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VH, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:162, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VH, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:163, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VH, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:164, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VH, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:165, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або 13 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VH, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:166, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VH, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:167, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VH, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:168, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VH, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:169, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VH, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:170, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В одному варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки легкого ланцюга (VL), що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:137, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:138, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:139, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:140, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:141, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:142, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:143, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить 14 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:144, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:145, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:146, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:147, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:148, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:149, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:150, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:151, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:152, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок складається з варіабельної ділянки VL, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, що містить (i) SEQ ID NO:153, (ii) послідовність, яка як мінімум на 90 % або 95 % ідентична послідовності, яка визначена по (i), і (iii) послідовність, яка визначена по (i) і містить до десяти амінокислотних замін (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. У кожному з зазначених вище варіантів здійснення винаходу, які визначені по послідовностях VL і VH, ізольований антигензв'язуючий білок може бути представлений, наприклад, моноклональним антитілом, поліклональним антитілом, рекомбінантним антитілом, людським (тобто повністю людським) антитілом, гуманізованим антитілом, химерним антитілом, мультіспецифічним антитілом або їх антигензв'язуючими фрагментами. Крім того, фрагмент ізольованого антигензв'язуючого білка може бути представлений Fab фрагментом, Fab' фрагментом, F(ab')2 фрагментом, Fv фрагментом, диатілом або одноланцюговою молекулою антитіла. Наприклад, ізольований антигензв'язуючий білок може бути людським 15 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 моноклональним антитілом і бути представлений, наприклад, антитілом типу IgG1-, IgG2-, IgG3або IgG4-. Крім того, ізольовані антигензв'язуючі білки можуть бути представлені нейтралізуючими антигензв'язуючими білками. У кожному з зазначених вище варіантів здійснення винаходу, які визначені по послідовності VL і VH, ізольований антигензв'язуючий білок може специфічно зв'язуватися з людськими CRLR і RAMP1, але не зв'язуватися специфічно з AM1, AM2 або людським рецептором амілину (наприклад, AMY1), наприклад, ізольований антигензв'язуючий білок може специфічно зв'язуватися з людським CGRP R з показником KD≤1 мкмоль, ≤100 нмоль, ≤10 нмоль або ≤5 нмоль, наприклад, як це визначене з використанням аналізу зв'язування FACS і проаналізоване з використанням способів, описаних, наприклад, Rathanaswami, et al., Biochemical and Biophysical Research Communications 334 (2005) 1004–1013. У кожному з зазначених вище варіантів здійснення винаходу, які визначені по послідовності V L і VH, ізольований антигензв'язуючий білок може вибірково інгібувати людський рецептор CGRP щодо людських рецепторів AM1, AM2 або AMY1, наприклад, з індексом вибірковості 100 або більше, 250 або більше, 500 або більше, 750 або більше, 1000 або більше, 2500 або більше, 5000 або більше, або 10 000 або більше, і така вибірковість може бути визначена будь-яким належним способом, наприклад, з використанням аналізу цАМФ, як це описане в Прикладах тексту даної заявки на винахід. У кожному з зазначених вище варіантів здійснення винаходу, які визначені по послідовності VL і VH, ізольований антигензв'язуючий білок може мати показник Ki≤100 нмоль, ≤10 нмоль, ≤1 нмоль, ≤0,5 нмоль або ≤0,1 нмоль, встановлений у ході аналізу конкурентного 125 зв'язування CGRP з використанням радіопоміченого I-CGRP, що зв'язується з мембранами клітин, експресуючих людський CGRP R (аналіз описано в Прикладі 5 даної заявки на винахід). В одному аспекті винаходу, ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з послідовності важкого ланцюга, який має ідентичність як мінімум 80 %, 85 %, 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю амінокислот, обраної з групи, що складається з SEQ ID Nos:29-41. Деякі описані ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з послідовності легкого ланцюга, який має ідентичність як мінімум 80 %, 85 %, 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю амінокислот, обраної з групи, що складається з SEQ ID Nos:12-28. Деякі ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з послідовності важкого ланцюга, який має ідентичність як мінімум 80 %, 85 %, 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю амінокислот, обраної з групи, що складається з SEQ ID Nos:29-41, і послідовності легкого ланцюга, який має ідентичність як мінімум 80 %, 85 %, 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю амінокислот, обраної з групи, що складається з SEQ ID Nos:12-28. У деяких варіантах здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга (VH), що включає послідовність (i), обрану з групи, що складається з SEQ ID Nos:29-41, або (ii) як це визначене (i) і включаючи одну або декілька (наприклад, п'ять, десять, п'ятнадцять або двадцять) замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; (B) легкого ланцюга, що включає послідовність (iii), обрану з групи, що містить SEQ ID Nos:12-28, або (iv) як це визначене (iii) і включаючи одну або декілька (наприклад, п'ять, десять, п'ятнадцять або двадцять) замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; або (C) важкого ланцюга (A) і легкого ланцюга (B). У деяких варіантах здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з важкого ланцюга, що включає послідовність, обрану з групи, що містить SEQ ID Nos:29-41, і легкого ланцюга, що включає послідовність, обрану з групи, що містить SEQ ID Nos:12-28. У деяких варіантах здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:29, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:12, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:30, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:13, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка 16 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:31, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:14, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:32, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:15, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:33, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад,заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:16, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:29, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:17, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:34, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:18, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:33, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:19, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:29, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін 17 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:20, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:35, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:21, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:36, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:22, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:37, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:23, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:38, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:23, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:33, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:24, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:39, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:25, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) 18 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:40, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:26, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:41, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:27, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольовані антигензв'язуючі білки складаються з (A) важкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:41, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок; і (B) легкого ланцюга, що включає послідовність амінокислот, обрану з групи, що складається з (i) SEQ ID Nos:28, (ii) послідовності, що має ідентичність 90 % або 95 % у порівнянні з послідовністю, яка визначена (i), і (iii) послідовності, яка визначена (i) і містить до десяти замін амінокислот (наприклад, заміни консервативних амінокислот), делецій або вставок. У кожному з зазначених вище варіантах здійснення винаходів, заснованих на послідовностях легких та важких ланцюгів, ізольований антигензв'язуючий білок може складатися з встановленої послідовності важкого та/або легкого ланцюга, але з різною сигнальною послідовністю або без неї. У кожному з зазначених вище варіантів здійснення винаходу, які визначені по послідовностях легкого та важкого ланцюгів, ізольований антигензв'язуючий білок може бути представлений, наприклад, моноклональним антитілом, поліклональним антитілом, рекомбінантним антитілом, людським (тобто повністю людським) антитілом, гуманізованим антитілом, химерним антитілом, мультіспецифічним антитілом або їх антигензв'язуючими фрагментами. Крім того, фрагмент ізольованого антигензв'язуючого білка може бути представлений Fab фрагментом, Fab' фрагментом, F(ab') 2 фрагментом, Fv фрагментом, диатілом або одноланцюговою молекулою антитіла. Наприклад, ізольований антигензв'язуючий білок може бути людським моноклональним антитілом і бути представлений, наприклад, антитілом типу Igg1-, Igg2-, Igg3- або Igg4-. Крім того, ізольовані антигензв'язуючі білки можуть бути представлені нейтралізуючими антигензв'язуючими білками. У кожному з зазначених вище варіантів здійснення винаходу, які визначені по послідовності легкого та важкого ланцюгів, ізольований антигензв'язуючий білок може специфічно зв'язуватися з людськими CRLR і RAMP1, але не зв'язуватися специфічно з AM1, AM2 або людським рецептором амілину (наприклад, AMY1), наприклад, ізольований антигензв'язуючий білок може специфічно зв'язуватися з людським CGRP R з показником K D≤1 мкмоль, ≤100 нмоль, ≤10 нмоль або ≤5 нмоль, наприклад, як це визначене з використанням аналізу зв'язування FACS і проаналізоване з використанням способів, описаних, наприклад, Rathanaswami, et al., Biochemical and Biophysical Research Communications 334 (2005) 1004– 1013. У кожному з зазначених вище варіантів здійснення винаходу, які визначені по послідовності легкого та важкого ланцюгів, ізольований антигензв'язуючий білок може вибірково інгібувати людський рецептор CGRP щодо людських рецепторів AM1, AM2 або AMY1, наприклад, з індексом вибірковості 100 або більше, 250 або більше, 500 або більше, 750 або більше, 1000 або більше, 2500 або більше, 5000 або більше, або 10 000 або більше, і така вибірковість може бути визначена будь-яким належним способом, наприклад, з використанням аналізу цАМФ, як це описане в Прикладах тексту даної заявки на винахід. У кожному з зазначених вище варіантів здійснення винаходу, які визначені по послідовності легкого та важкого ланцюга, ізольований антигензв'язуючий білок може мати показник Ki≤100 нмоль, ≤10 нмоль, ≤1 нмоль, ≤0,5 нмоль або ≤0,1 нмоль, встановлений у ході аналізу конкурентного 125 зв'язування CGRP з використанням радіопоміченого I-CGRP, що зв'язується з мембранами клітин, експресуючих людський CGRP R (аналіз описано в Прикладі 5 даної заявки на винахід). 19 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Ще в одному аспекті винаходу представлені ізольовані полінуклеотиди (нуклеїнові кислоти), що кодують один з описаних вище антигензв'язуючих білків CGRP R. В одному варіанті здійснення винаходу ізольований полінуклеотид складається з послідовності, обраної з групи, що містить SEQ ID Nos:175, 176, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 186, 187, 188, 189, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209 і 210. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований полінуклеотид складається з послідовності, обраної з групи, що містить SEQ ID Nos:224-258. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований полінуклеотид складається з послідовності, що має здатність до гібридизації при строгих умовах гібридизації та обраної з групи, що містить SEQ ID Nos:224-258. В іншому варіанті здійснення винаходу ізольований полінуклеотид складається з послідовності, що має 80 %, 85 %, 90 %, 95 % або більшу схожість з послідовністю, яка обрана з групи, що складається з послідовності SEQ ID Nos:224-258. У деяких випадках ізольовані молекули нуклеїнових кислот функціонально пов'язані з керуючою послідовністю. У подібних варіантах здійснення винаходу ізольовані полінуклеотиди включені у вектор експресії. Також включені клітинні лінії, трансформовані за допомогою вектора експресії та які містять ізольовані полінуклеотиди, як це описане вище. У подібному аспекті винаходу представлені вектори експресії та клітини-хазяї, трансформовані або трансфіковані векторами експресії, що складаються з зазначених вище ізольованих молекул нуклеїнових кислот, що кодують описані вище антигензв'язуючі білки CGRP R. В іншому аспекті винаходу також описаний спосіб одержання антигензв'язуючих білків, який включає етап одержання антигензв'язуючого білка з клітини-хазяїна, що секретирує антигензв'язуючий білок. У деяких варіантах здійснення винаходу антигензв'язуючий білок одержують з використанням имуногену, що містить розчинний рецептор CGRP. У деяких варіантах здійснення винаходу такий розчинний рецептор CGRP одержують способом коекспресії та очищення N-Термінального екстрацелюлярного домену (ЕЦД) людського CRLR і ЕЦД людського RAMP1, наприклад, ЕЦД людського CRLR включає SEQ ID NO: 6, а ЕЦД RAMP1 включає SEQ ID NO: 8 (як це описано в Прикладах 1 і 2 зазначеної заявки на винахід). Ще в одному аспекті винаходу лікарський препарат складається як мінімум з одного з представлених вище антигензв'язуючих білків і фармацевтично відповідного допоміжного засобу. В одному варіанті здійснення винаходу лікарський препарат може містити додаткову активну речовину, обрану з групи, що включає радіоізотоп, радіонуклід, токсін, або терапевтичної та хіміотерапевтичної групи. В одному аспекті винаходу ізольований антигензв'язуючий білок ефективний в інгібуванні розширення судин та/або зниженні нейрогенного запалення при введенні пацієнтові. В одному варіанті здійснення винаходу ізольований антигензв'язуючий білок ефективний у зниженні частоти та/або ваги головних болів, наприклад, викликаних мігренню. Наприклад, антигензв'язуючий білок може використовуватися в якості засобу невідкладного лікування мігрені та/або в якості профілактичного лікування для запобігання або зниження частоти та/або ваги симптомів, зокрема, болючих симптомів, пов'язаних з приступами мігрені. Інші аспекти винаходу надалі описують способи лікування або профілактики стану, який визначається CGRP R, у пацієнта, і включають уведення пацієнтові ефективної кількості як мінімум одного ізольованого антигензв'язуючого білка, описаного вище. В одному варіанті здійснення винаходу такий стан представлений головним болем, наприклад, головним болем, викликаним мігренню, або приступообразним головним болем, або болем іншого типу, наприклад, хронічним болем; в іншому варіанті здійснення винаходу такий стан представлений цукровим діабетом (II типу); в іншому варіанті здійснення винаходу такий стан представлений запаленням, зокрема, нейрогенним запаленням; в іншому варіанті здійснення винаходу такий стан представлений розладом з боку серцево-судинної системи; в іншому варіанті здійснення винаходу такий стан представлений гемодинамічною дісфункцією, яка визначена ендотоксікозом і сепсисом; в іншому варіанті здійснення винаходу такий стан представлений розширенням судин. В іншому аспекті винаходу також представлений спосіб інгібування зв'язування CGRP з людським CGRP R, наприклад, екстрацелюлярною ділянкою CGRP R, у пацієнта, якому здійснюється введення ефективної кількості як мінімум одного антигензв'язуючого білка, описаного та/або представленого вище. Ці та інші аспекти винаходу будуть описані далі по тексту більш докладно. Кожний аспект винаходу може включати кілька варіантів здійснення, представлених у даній заявці на винахід. Таким чином, очікується, що кожний з варіантів здійснення винаходу, що включає один елемент або комбінації елементів, може бути включений у кожний представлений аспект винаходу, і всі такі комбінації зазначених вище аспектів і варіантів здійснення винаходу описані в 20 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 безпосередній формі. Інші особливості, мети та переваги винаходу очевидні з докладного та представленого нижче опису. КОРОТКИЙ ОПИС ФІГУР На Фігурі 1 представлені послідовності RAMP-1 людини, яванської макаки та пацюка. На Фігурі 2 представлені послідовності CRLR людини, яванської макаки та пацюка. На Фігурах 3A і 3B представлені послідовності ГВД легких ланцюгів на основі філогенетичної ознаки, які отримані за допомогою зазначених клонів антитіл до рецептору CGRP, що мають легуі каппа-ланцюги, і певні відповідні консенсусні послідовності. На Фігурі 4 представлені послідовності ГВД легких ланцюгів на основі філогенетичної ознаки, які отримані за допомогою зазначених клонів антитіл до рецептору CGRP, що мають легкі лямбда-ланцюги, і певні відповідні консенсусні послідовності. На Фігурах 5A, 5B, 5C, 5D і 5E представлені послідовності ГВД легких ланцюгів на основі філогенетичної ознаки, які отримані за допомогою зазначених клонів антитіл до рецептору CGRP, і певні відповідні консенсусні послідовності. На Фігурі 5F представлені консенсусні послідовності типового ГВД важкого ланцюга антитіла до рецептору CGRP, описаного в даному тексті. На Фігурі 6 представлений графік, побудований з даних, які отримані у ході двох експериментів, та що вказують на процентний показник інгібування зв'язування міченого ліганду з CGRP R у надосадовій рідині гібридоми 1092 з антитілами до CGRP R (ромби) і надосадової рідини негативного контролю 68 (квадрати). На Фігурах 7A-D представлений типовий аналіз цАМФ даних IC50, отриманих для клітин, експресуючих рецептор hCGRP (Фіг. 7A), hAM1 (Фіг. 7B), hAM2 (Фіг. 7C) і людські рецептори амілину (Фіг. 7D) для трьох зазначених моноклональних антитіл до CGRP R. 125 На Фігурі 8 приводиться приклад даних по зв'язуванню I-CGRP, які можуть використовуватися для визначення Ki моноклональних антитіл до людського рецептору CGRP. На Фігурах 9A-D представлені порівняльні дані, які отримані за допомогою Biacore для обраних і описаних у даному тексті антитіл. На Фігурі 10 представлене визначення FACS Kd для моноклональних антитіл 12G8 На Фігурі 11 представлене порівняння послідовностей RAMP1 яванської макаки, людини, людської химери, пацюка та макаки-резусу. На Фігурах 12A-B представлене порівняння послідовностей CRLR людини, яванської макаки, макаки-резусу, пацюка, людини, людської химери та консенсусних послідовностей CRLR. На Фігурах 13A-13C наводяться репрезентативні дані Facs-Аналізу, які отримані для різних химерних рецепторів до CGRP, що зв'язуються з антитілами до CGRP R. На Фігурі 14 представлені пептидні карти, які отримані при розщепленні AspN з використанням тільки CGRP R (хроматограмма A) і при розщепленні контрольного зразку, що містить моноклональне антитіло CGRP R 12G8 (хроматограмма B). На Фігурі 15 представлене розщеплення CGRP R у присутності різних концентрацій нейтралізуючого антитіла до CGRP R. На Фігурі 16 представлене розщеплення AspN CGRP R у присутності різних концентрацій нейтралізуючого антитіла до CGRP R (4E4). На Фігурі 17 представлена інтенсивність імуногістохімічного фарбування в клітинах, які експресують різні компоненти рецепторів з антитілом 32H7. ДОКЛАДНИЙ ОПИС Другі заголовки, які використані в тексті даної заявки на винахід, використовуються тільки в організаційних цілях, і не повинні розглядатися в якості обмеження описаного об'єкта винаходу. Якщо інше не зазначене в тексті, наукові та технічні терміни, використовувані у зв'язку з даним винаходом, повинні мати значення, які звичайно зрозумілі фахівцям у даній галузі науки. Крім того, якщо інше не мається на увазі контекстом, терміни в однині можуть включати множинні значення, і терміни в множині можуть включати значення в однині. Як правило, використовувана номенклатура, а також способи одержання клітинних і тканевих культур, способи імунології, мікробіології, генетики, хімії білків і нуклеїнових кислот і гібридизації, описані в даному тексті, широко відомі та використовуються в науці. Способи та способи даної заявки на винахід звичайно виконуються у відповідності з стандартними способами, широко відомими науці та описаними в різних спеціальних посібниках, які цитуються по тексту даної заявки на винахід, якщо інше не зазначене. Див., наприклад, Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (2001), Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates (1992), і Harlow and Lane Antibodies: A Laboratory Manual Cold Spring Harbor 21 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990) (включені в справжню заявку за допомогою посилання). Ферментативні реакції та способи очищення виконуються відповідно до вказівок виробника, як це звичайно здійснюється в науці або описане в тексті даної заявки. Використовувана термінологія та лабораторні процедури та способи аналітичної хімії, органічного синтезу, медичної та фармацевтичної хімії, описані в даній заявці, широко відомі та використовуються в науці. Для хімічного синтезу, хімічних аналізів, приготування лікарських препаратів, розробки рецептури, доставки препаратів і лікування пацієнтів можуть використовуватися стандартні способи. Слід розуміти, що даний винахід не обмежується окремою методологією, протоколами, реагентами і т.д., описуваними в даній заявці на винахід, і, отже, такі методології, протоколи, реагенти і т.д. можуть різнитися. Використовувана в даній заявці термінологія призначена для опису тільки окремих варіантів здійснення винаходу та не повинна обмежувати галузь застосування даного винаходу, обумовлену винятково по формулі винаходу. Крім робочих прикладів або якщо не зазначене інше, представлені кількості інгредієнтів або використовувані умови реакцій повинні вважатися як модифіковані у всіх випадках при наявності слова "приблизно". Слово "зразкове", при його використанні разом з знаком відсотків, позначає 1 %. Визначення Термін "полінуклеотид" або "нуклеїнова кислота" включає одноланцюгові або двохланцюгові нуклеотидні полімери. Нуклеотиди, що утворюють полінуклеотид, можуть бути представлені рибонуклеотидами або дезоксірибонуклеотидами, або модифікованою формою будь-якого типу нуклеотиду. Згадані модифікації включають модифікації основи, наприклад, похідні бромурідину та інозину, модифікації рибози, наприклад, 2",3’-дідезоксірибози, і модифікації міжнуклеотидних зв'язків, такі як фосфотіоат, фосфодитіоат, фосфоселенат, фосфодиселенат, фосфоанілотіоат, фосфоаніладат і фосфоамідат. Термін "олігонуклеотид" означає полінуклеотид, що складається з 200 або менш нуклеотидів. У деяких варіантах здійснення винаходу, олігонуклеотиди мають довжину від 10 до 60 основ. В інших варіантах здійснення винаходу олігонуклеотиди мають у довжину 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 або від 20 до 40 нуклеотидів. Олігонуклеотиди можуть бути одноланцюговими або двохланцюговими, наприклад, для використання в побудові мутантного гену. Олігонуклеотиди можуть бути змістовими або антизмістовими олігонуклеотидами. Олігонуклеотид може містити мітку, включаючи радіомітку, флуоресцируючу мітку, гаптен або антигенну мітку, які використовуються при аналізах виявлення. Олігонуклеотиди можуть використовуватися, наприклад, у якості праймерів ПЦР, праймерів клонування або зондів для гібридизації. Термін "ізольована молекула нуклеїнової кислоти" означає ДНК або РНК геному, мРНК, кДНК, або синтетичний аналог, або певну комбінацію зазначених сполук, які не зв'язані з усім полінуклеотидом або його ділянкою, у якій ізольований полінуклеотид зустрічається в природі, або пов'язані з полінуклеотидом у вигляді, що не зустрічається в природі. З метою зазначеної заявки на винахід слід розуміти, що "молекула нуклеїнової кислоти, що складається з…" позначає окрему нуклеотидну послідовність, що не охоплює інтактні хромосоми. Ізольовані молекули нуклеїнової кислоти "включають" особливі послідовності нуклеїнової кислоти та, крім таких особливих послідовностей, також можуть включати кодуючі послідовності для 10 або навіть 20 інших білків або їх ділянок, або можуть включати функціонально зв'язані регуляторні послідовності, що контролюють експресію кодуючої ділянки перерахованих послідовностей нуклеїнових кислот, та/або можуть включати векторні послідовності. Якщо не зазначене інше, лівий кінець будь-якої одноланцюговоюї полінуклеотидної послідовності, яка зазначена вище, представлено 5’-кінцем; лівосторонній напрямок послідовностей двохланцюгових полінуклеотидів називається 5’-напрямком. Напрямок від 5' до 3' зростаючих транскриптів РНК називається напрямком транскрипції; ділянки послідовності на ланцюзі ДНК, що мають однакову послідовність, що і транскрипт РНК (від 5'-кінця до 5'-кінцю), називаються "висхідними послідовностями"; ділянки послідовності на ланцюзі ДНК, що мають таку ж послідовність, що і транскрипт РНК (від 3'-кінця до 3'-кінцю), називаються "спадними послідовностями". Термін "контрольна послідовність" стосується полінуклеотидної послідовності, яка може впливати на експресію та процесінг комплементарних кодуючих послідовностей. Природа таких кодуючих послідовностей може залежати від організму-хазяїна. В окремих варіантах здійснення винаходу контрольні послідовності в прокаріот можуть включати промотор, ділянку зв'язування рибосом і стоп-кодон транскрипції. Наприклад, контрольні послідовності у прокаріот можуть включати промотори, що складаються з одного або декількох ділянок розпізнавання факторів 22 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 транскрипції, послідовностей енхансерів транскрипції та стоп-кодону транскрипції. "Контрольні послідовності" можуть включати лідерні послідовності та/або послідовності білків злиття. Термін "вектор" позначає будь-яку молекулу або форму (наприклад, нуклеїнова кислота, плазміда, бактеріофаг або вірус), використовувані для переносу інформації з коду білка в кліткухазяїна. Термін "вектор експресії" або "модель експресії" стосується вектора, що підходить для трансформації клітини-хазяїна та який містить послідовності нуклеїнових кислот, що направляють та/або контролюють (у комбінації з клітиною-хазяїном) експресію однієї або декількох функціонально зв'язаних гетерологічних кодуючих ділянок. Вектор експресії може включати (але не обмежуватися) послідовності, які впливають або контролюють транскрипцію, трансляцію та, у випадку присутності інтронів, впливають на сплайсинг РНК у функціонально зв'язаній кодуючій ділянці. Використане тут поняття "функціонально зв'язаний" означає, що компоненти, до яких застосуємо даний термін, перебувають у взаємозв'язку, який дозволяє їм виконувати відповідні функції у відповідних умовах. Наприклад, контрольна послідовність у векторі, який "функціонально зв'язаний" з кодуючою білок послідовністю, пов'язана з таким вектором і таким чином, що експресія послідовності, що кодує білок, досягається в умовах, відповідних до транскрипційної активності контрольних послідовностей. Термін "клітина-хазяїн" позначає клітину, яка піддана трансформації або, що має здатність до трансформації послідовність, що містить, нуклеїнової кислоти й, отже, експресуючий необхідний ген. Термін включає потомство материнської клітини, незалежно від того, чи ідентична морфологія материнської клітини потомству, доти, поки в такому потомстві присутній відповідний ген. Термін "трансдукція" позначає перенос генів від однієї бактерії в іншу, звичайно за допомогою бактеріофага. "Трансдукція" також стосується одержання та переносу еукаріотичних клітинних послідовностей шляхом реплікації неповноцінних ретровірусов. Термін "трансфекція" позначає захоплення чужорідної або екзогенної ДНК клітиною, при цьому клітина виявляється "транфіцируваною" екзогенної ДНК при її проходженні усередину клітини через клітинну мембрану. Науці відомий цілий ряд технологій трансфекції, що приводяться в даному тексті. Див., наприклад, Graham et al., 1973, Virology 52:456; Sambrook et al., 2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, supra; Davis et al., 1986, Basic Methods in Molecular Biology, Elsevier; Chu et al., 1981, Gene 13:197. Такі способи можуть використовуватися для введення однієї або декількох фрагментів екзогенної ДНК усередину відповідних клітин-хазяїв. Термін "трансформація" відноситься до зміни генних параметрів клітини, при цьому клітина виявляється трансформованою, маючи модифіковану (нову) ДНК або РНК. Наприклад, клітина виявляється трансформованої у випадку генної модифікації в порівнянні з своїм натівним станом шляхом уведення нового генного матеріалу шляхом трансфекції, трансдукції або іншими способами. Після трансфекції або трансдукції, що трансформує ДНК може рекомбінувати з ДНК клітини шляхом фізичного вбудовування в хромосому клітини, або може тимчасово зберігатися в епісомальних елементах без реплікації, або репліціруватися незалежним образом у якості плазміди. Клітина вважається "стабільно трансформованою", якщо, трансформуюча ДНК реплиціруєтсья в клітині. Терміни "поліпептид" або "білок" використовуються в тексті на рівних підставах, означаючи полімер, що складається з залишків амінокислот. Терміни також застосовні до полімерів амінокислот, у яких один або кілька амінокислотних залишків є аналогами або міметиками відповідної амінокислоти, що зустрічається в природі, а також таких полімерів амінокислот, що також зустрічаються в природі, . Терміни також описують полімери амінокислот, які піддані модифікації, наприклад, шляхом додавання вуглеводневих залишків для утворення глікопротеінів або фосфориліруванія. Поліпептиди та білки можуть бути отримані за допомогою представлених у природі та не підданих рекомбінації клітин; також вони можуть бути отримані за допомогою підданих генної інженерії або рекомбінації клітин, полягаючи з молекул, що мають амінокислотну послідовність натівного білка, або молекул, що мають делеції, вставки та/або заміни однієї або декількох амінокислот натівної послідовності. Терміни "поліпептид" і "білок" описують, зокрема, антигензв'язуючі білки, наприклад, антигензв'язуючі білки CGRP R, що зв'язуються з CGRP R білки, антитіла або послідовності, що мають делеції, вставки та/або заміни однієї або декількох амінокислот антигензв'язуючого білка. Термін "фрагмент поліпептиду" відноситься до поліпептиду, що має делецию амінокислоти на термінальному кінці, делецию карбоксільної групи на термінальному кінці та/або внутрішню делецию в порівнянні з білком, що мають повну довжину. Такі фрагменти також можуть включати 23 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 модифіковані амінокислоти в порівнянні з білком, що мають повну довжину. У деяких варіантах здійснення винаходу фрагменти містять від 5 до 500 амінокислот. Наприклад, фрагменти можуть містити як мінімум 5, 6, 8, 10, 14, 20, 50, 70, 100, 110, 150, 200, 250, 300, 350, 400 або 450 амінокислот. Корисні фрагменти поліпептиду включають імунологічно функціональні фрагменти антитіл, включаючи домени зв'язування. У випадку CGRP R- антитіла, що зв'язується, корисні фрагменти включають (але не обмежуються) ГВД, варіабельний домен важкого або легкого ланцюга, ділянку ланцюга антитіла або тільки його варіабельний домен, включаючи два ГВД та т.п. Під поняттям "CGRP-рецептор" або "CGRP" мається на увазі зміст RAMP1 і CRLR. Термін "ізольований білок" (наприклад, ізольований антигензв'язуючий білок), "ізольований поліпептид" або "ізольоване антитіло" позначає, що зазначений білок, поліпептид або антитіло (1) не містять як мінімум інших білків, з якими вони звичайно зв'язані, (2) переважно не містять інших білків з цього ж джерела, наприклад, тих самих видів, (3) експресуються клітиною, яка отримана у різних видів, (4) були сепаровані від як мінімум 50 % полінуклеотидів, ліпідів, вуглеводів або інших матеріалів, з якими вони звичайно зустрічаються в природі, (5) функціонально зв'язані (ковалентними або нековалентними зв'язками) з поліпептидом, з яким не зустрічаються в природі, або (6) не зустрічаються в природі. Як правило, "ізольований білок", "ізольований поліпептид" або "ізольоване антитіло" становлять як мінімум близько 5 %, як мінімум близько 10 %, як мінімум близько 25 %, або як мінімум близько 50 % зазначеної вибірки. Такий ізольований білок може кодуватися геномною ДНК, кДНК, мРНК або іншою РНК, включаючи нуклеїнові кислоти синтетичного походження, або їх комбінацією. Переважно, щоб ізольований білок, поліпептид або антитіло не містили інші білки або інші поліпептиди, або інші домішки, які зустрічаються в природі і які перешкодили б терапевтичному, діагностичному, профілактичному, дослідницькому або іншому застосуванню. "Варіант" поліпептиду (наприклад, антигензв'язуючий білок або антитіло) включає послідовність амінокислот, у якої є вставка, делеція та/або заміна одного або декількох амінокислотних залишків щодо іншої поліпептидної послідовності. Варіанти включають білки злиття. "Похідне" поліпептиду є поліпептидом (наприклад, антигензв'язуючий білок або антитіло), який був хімічно модифікований певним чином і відрізняється від варіантів з вставкою, делецією або заміною, наприклад, за допомогою кон'югації з іншої хімічною групою. Термін ", що зустрічається в природі", який використовується у тексті даної заявки стосовно біологічних матеріалів, таким як поліпептиди, нуклеїнові кислоти, клітини-хазяї та т.п., відноситься до матеріалів, що є присутніми у природі. Термін "антигензв'язуючий білок", використовуваний у тексті даної заявки, відноситься до білка, який специфічно зв'язується з антигеном-мішенню, наприклад, CGRP R, зокрема, приматів, наприклад, людський CGRP R. Антигензв'язуючий білок CGRP R специфічно зв'язується з людським рецептором CGRP. -6 Коли константа дисоціації (KD) становить ≤10 M, говориться, що антигензв'язуючий білок "специфічно зв'язаний" з своєю мішенню. Антитіло специфічно зв'язується з антигеном-мішенню -8 з високої "афінністю", коли KD становить ≤1×10 M. В одному варіанті здійснення винаходу антитіла будуть зв'язуватися з CGRP R, або людським CGRP R з KD≤5×10-7; в іншому варіанті здійснення винаходу антитіла будуть зв'язуватися з KD≤1×10-7; в іншому варіанті здійснення винаходу антитіла будуть зв'язуватися з KD≤5×10-8; в іншому варіанті здійснення винаходу антитіла будуть зв'язуватися з KD≤1×10-8; в іншому варіанті здійснення винаходу антитіла будуть зв'язуватися з KD≤5×10-9; в іншому варіанті здійснення винаходу антитіла будуть зв'язуватися з KD≤1×10-9; в іншому варіанті здійснення винаходу антитіла будуть зв'язуватися з KD≤5×10-10; в іншому варіанті здійснення винаходу антитіла будуть зв'язуватися з K D≤1×10-10. Антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент, або антигензв'язуючий білок "вибірково інгібує" специфічний рецептор у порівнянні з іншими рецепторами, коли показник IC50 антитіла, його антигензв'язуючого фрагменту або антигензв'язуючого білка, встановлений у ході аналізу інгібування специфічного рецептору, як мінімум в 50 раз менше, чим показник IC50, встановлений у ході аналізу інгібування іншого "еталонного" рецептору. "Індекс вибірковості" являє собою частку від розподілу значення IC50 еталонного рецептору на значення IC50 специфічного рецептору. Антитіло, його антигензв'язуючий фрагмент або антигензв'язуючий білок вибірково інгібує людський рецептор CGRP у тому випадку, коли значення IC50 антитіла, його антигензв'язуючого фрагменту або антигензв'язуючого білка, встановлене в ході цАМФаналізу, наприклад, цАМФ-аналізу інгібування, описаного в Прикладі 4, як мінімум в 50 раз менше, чим значення IC50 такого ж антитіла, його антигензв'язуючого фрагменту або антигензв'язуючого білка, встановлене в ході аналізу інгібування людських рецепторів AM1, 24 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 AM2 або рецептору амілину (наприклад, AMY1). У якості необмежуючого прикладу: якщо значення IC50 специфічного антитіла до CGRP R, встановлене в ході цАМФ-аналізу hCGRP R, становить, наприклад, від 0,1 нмоль до 20 нмоль, і значення IC50 для цього ж антитіла, встановлене в ході цАМФ-аналізу ham1, ham2 або людського рецептору AMY1, становить 1000 нмоль або більше, таке антитіло виборче інгібує рецептор hCGRP. Під антигензв'язуючим білком, який вибірково інгібує специфічний рецептор, також розуміється нейтралізуючий антигензв'язуючий білок щодо окремого рецептору. "Антигензв'язуюча ділянка" позначає білок або його ділянку, яка специфічно зв'язується з специфічним антигеном. Наприклад, ділянка антигензв'язуючого білка, що містить амінокислотні залишки, що взаємодіє з антигеном і відповідальна за специфічність і афінність антигензв'язуючого білка, називається "антигензв'язуючою ділянкою". Антигензв'язуюча ділянка включає, як правило, один або декілька "комплементарно єднальних ділянок" (або гіперваріабельних ділянок, ГВД). Певні антигензв'язуючі ділянки також включають одну або декілька "каркасних" ділянок. "ГВД" представлена послідовністю амінокислот, яка вносить свій внесок у специфічність і афінність зв'язування антигену. "Каркасні" ділянки можуть допомагати в підтримці належної конформації ГВД для забезпечення зв'язування між антигензв'язуючим ділянкою та антигеном. У певних аспектах винаходу представлені рекомбінантні антигензв'язуючі білки, що зв'язують білок CGRP R або людський CGRP R. У такому контексті "рекомбінантний білок" представлений білком, який одержується за допомогою способів рекомбінації, наприклад, за допомогою експресії рекомбінантної нуклеїнової кислоти, як це описане в тексті даної заявки на винахід. Способи одержання рекомбінантних білків добре відомі науці. Термін "антитіло" стосується інтактного імуноглобуліну будь-якого ізотипу або його антигензв'язуючому фрагменту, який може конкурувати з інтактним антитілом за специфічне зв'язування з антигеном-мішенню, і включати, наприклад, химерні, гуманізирувані, повністю людські та біспецифічні антитіла. Таким чином, "антитіло" є одним з видів антигензв'язуючого білка. Як правило, інтактне антитіло буде стосується як мінімум з двох повних важких ланцюгів і двох повних легких ланцюгів, але в деяких випадках може включати меньшу кількість ланцюгів, як, наприклад, антитіла сімейства верблюдових, що полягають тільки з важких ланцюгів. Антитіла можуть бути отримані тільки з одного джерела, або можуть бути "химерними", тобто різні частини антитіла можуть бути отримані з двох різних антитіл, як це буде надалі описане нижче. Антигензв'язуючі білки, антитіла або їх єднальні фрагменти можуть бути отримані за допомогою гібриду, способами рекомбінації ДНК, або ферментативним або хімічним розщепленням інтактних антитіл. Якщо не зазначене інше, термін "антитіло" включає, крім антитіл з двох повних важких ланцюгів і двох повних легких ланцюгів, похідні, варіанти, фрагменти і їх мутації, приклади яких приводяться нижче. Термін "легкий ланцюг" включає повний легкий ланцюг і його фрагменти, що мають послідовність варіабельної ділянки, достатню для забезпечення специфічності зв'язування. Повний легкий ланцюг включає домен варіабельної ділянки (VL) і домен константної області (CL). Домен варіабельної ділянки легкого ланцюга перебуває на N-Кінці поліпептиду. Легкі ланцюги включають каппа-ланцюги та лямбда-ланцюги. Термін "важкий ланцюг" включає повний важкий ланцюг і його фрагменти, що мають послідовність варіабельної ділянки, достатню для забезпечення специфічності зв'язування. Повний важкий ланцюг включає домен варіабельної ділянки (V H) і три домену константної області (CH1, CH2 і CH3). Домен VH перебуває на N-Кінці поліпептиду, а домени CH перебувають на C-Кінці, причому домен CH3 найбільше ближче розташований до C-Кінцю поліпептиду. Важкі ланцюги можуть мати будь-який ізотип, включаючи Igg (включаючи підтипи IgG1, IgG2, IgG3 та IgG4), Iga (включаючи підтипи IgA1 та IgA2), IgM та IgE. Термін "сигнальна послідовність", "лідерна послідовність" або "сигнальний пептид" ставляться до короткого пептидного ланцюга (3-60 амінокислот), що регулює транспорт білка. Сигнальні пептиди також можуть називатися сигналами таргетингу, сигнальними послідовностями, транзитними пептидами або сигналами локалізації. Деякі сигнальні пептиди відщепляються від білка за допомогою сигнальної пептидази після транспорту білків, у результаті чого відщепляється біологічно активна та більш коротка форма білка (наприклад, описаного антигензв'язуючого білка). Відповідно до цього, такі терміни як "антитіло складається з важкого ланцюга…", "антитіло складається з легкого ланцюга…" і т.д., коли антитіло характеризується, що як має важку та/або легкий ланцюг з окремою визначеною послідовністю, розуміються в такий спосіб: антитіло, що має специфічно визначені послідовності, антитіло, що має специфічні визначені послідовності за винятком заміни сигнальних послідовностей іншими сигнальними послідовностями, а також антитіло, що має визначені послідовності за винятком 25 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 будь-якої сигнальної послідовності. Термін "антигензв'язуючий фрагмент" (або просто "фрагмент") антитіла або ланцюга імуноглобуліну (важкого або легкого ланцюга), як це використовується в даному тексті, описує ділянку (залежно від способу одержання або синтезу такої ділянки) антитіла з відсутністю певних амінокислот, які присутні у повному ланцюзі, здатний специфічно зв'язуватися з антигеном. Такі фрагменти є біологічно активними щодо специфічного зв'язування з антигеноммішенню та можуть конкурувати з іншими антигензв'язуючими білками, включаючи інтактні антитіла, щодо специфічного зв'язування з заданою антигенною детермінантою. В одному аспекті винаходу такий фрагмент буде містити як мінімум ГВД, присутній у повному та важкому ланцюзі, і в деяких варіантах здійснення винаходу він буде складатися з єдиного важкого ланцюга та/або легкого ланцюга, або ділянки ланцюга. Такі біологічно активні фрагменти можуть бути отримані за допомогою способів рекомбінації ДНК, або можуть бути отримані за допомогою ферментативного або хімічного розщеплення антигензв'язуючих білків, включаючи інтактні антитіла. Імунологічно функціональні фрагменти імуноглобуліну включають, але не обмежуються, Fab, Fab', F(ab')2, Fv, доменні антитіла та одноланцюгові антитіла, і можуть бути отримані з будь-якого джерела (виду ссавця), включаючи, але не обмежуючись, людину, мишу, пацюка, верблюда або кролика. Надалі передбачається, що функціональна ділянка описуваних тут антигензв'язуючих білків, наприклад, одного або декількох ГВД, може бути ковалентно зв'язана з другим білком або невеликою молекулою для створення лікарського препарату, спрямованого на певну мішень в організмі, що та володіє біфункціональними терапевтичними властивостями, або, що має подовжений час напівжиття в сироватці. "Fab-Фрагмент" складається з одного легкого ланцюга, CH1 і варіабельних ділянок одного важкого ланцюга. Важкий ланцюг Fab молекули не може утворювати дисульфідний місток з важким ланцюгом іншої молекули. "Fc-Ділянка" складається з двох фрагментів важкого ланцюга, що включає домени CH1 і CH2 антитіла. Два фрагменти важкого ланцюга втримуються разом за допомогою двох або декількох дисульфідних містків і гідрофобними взаємодіями доменів C H3. "Fab'-Фрагмент" складається з одного легкого ланцюга та ділянки важкого ланцюга, що містить домен VH і домен CH1, а також ділянку між доменами CH1 і CH2, таким чином, між двома важкими ланцюгами двох Fab'-Фрагментів може утворюватися дисульфідний зв'язок, формуючи F(ab')2-молекулу. "F(ab')2-фрагмент" містить два легких ланцюги та два важких ланцюги, що складаються з константної ділянки між доменами CH1 і CH2; таким чином, між двома важкими ланцюгами утворюється дисульфідний місток. Отже, F(ab') 2-фрагмент складається з двох Fab'-Фрагментів, які втримуються разом за допомогою дисульфідного містка між двома важкими ланцюгами. "Fv-Ділянка" складається з варіабельних ділянок важких і легких ланцюгів за винятком константних ділянок. "Одноланцюгові антитіла" представлені Fv молекулами, у яких варіабельні ділянки важкого та легкого ланцюгів з'єднані гнучким лінкером з утворенням одного поліпептидного ланцюга, що формує антигензв'язуючу ділянку. Одноланцюгові антитіла докладно обговорюються в Міжнародній заявці на патент, Публікація Nowo 88/01649 і Патенті США No4946778 і No5260203 (представлені в даному тексті за допомогою посилання). "Доменне антитіло" є імунологічно функціональним фрагментом імуноглобуліну, що містить тільки варіабельну ділянку важкого ланцюга або варіабельну ділянку легкого ланцюга. У деяких випадках два або кілька ділянок VH ковалентно пов'язані з пептидним лінкером з створенням бівалентного доменного антитіла. Дві ділянки VH бівалентного доменного антитіла можуть зв'язуватися з тим самим або декількома антигенами. "Бівалентний антигензв'язуючий білок" або "бівалентне антитіло" містить дві антигензв'язуючих ділянки. У деяких випадках два центри зв'язування можуть мати ту саму специфічність щодо антигену. Бівалентні антигензв'язуючі білки та бівалентні антитіла можуть бути біспецифічними (див. нижче). "Мультіспецифичний антигензв'язуючий білок" або "мультіспецифічне антитіло" у якості своєї мішені має більш одного антигену або епітопа (антигенної детермінанти). "Біспецифічний", "подвійний специфічний" або "біфункціональний" антигензв'язуючий білок або антитіло представлене гібридним антигензв'язуючим білком або антитілом, відповідно, з наявністю двох різних центрів зв'язування антигену. Біспецифічні антигензв'язуючі білки та антитіла є видами мультіспецифичного антигензв'язуючого білка або мультіспецифичного антитіла, і можуть бути отримані з використанням різних способів, включаючи, але не обмежуючись, злиття гібридом або зв'язування Fab'-Фрагментів. Див., наприклад, Songsivilai and Lachmann, 1990, Clin. Exp. Immunol. 79:315-321; Kostelny et al., 1992, J. Immunol. 148:1547-1553. 26 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Два центри зв'язування біспецифічного антигензв'язуючого білка або антитіла будуть зв'язуватися з двома різними антигенними детермінантами, які можуть бути спрямовані на ту саму або різні білкові мішені. Термін "нейтралізуючий антигензв'язуючий білок" або "нейтралізуюче антитіло" відноситься до антигензв'язуючого білку або антитілу, відповідно, яке зв'язується з лігандом, запобігає зв'язуванню ліганду з своїм партнером по зв'язуванню, а також перериває біологічну відповідь, який у протилежному випадку може виникнути в результаті зв'язування ліганду з партнером по зв'язуванню. При оцінці зв'язування та специфічності антигензв'язуючого білка, наприклад, антитіла або імунологічно функціонального антигензв'язуючого фрагмента, антитіло або фрагмент буде значно інгібувати зв'язування ліганду з його партнером по зв'язуванню, при цьому надлишкова кількість антитіла знижує кількість партнера по зв'язуванню, пов'язаного з лігандом, як мінімум на 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, 97 %, 99 % або більше (обмірюване в ході in vitro аналізу конкурентного зв'язування). У випадку білка зв'язування CGRP R, така нейтралізуюча молекула буде знижувати здатність CGRP R зв'язувати CGRP. Термін "конкуренція", за його використання в контексті антигензв'язуючих білків, що можуть зв'язуватися з тою ж самою ділянкою антигену-мішені, означає конкуренцію між антигензв'язуючими білками, визначену за допомогою аналізу, у ході якого антигензв'язуючий білок (наприклад, антитіло або його імунологічно функціональний антигензв'язуючий фрагмент), підданий випробуванню, запобігає або інгібує специфічне зв'язування еталонного антигензв'язуючого білка (наприклад, ліганду або еталонного антитіла) з звичайним антигеном (наприклад, CGRP R або його антигензв'язуючим фрагментом). Може використовуватися будьякий аналіз з числа аналізів конкурентного зв'язування, наприклад: твердофазний прямий або непрямий радіоімунологічний аналіз (РІА), твердофазний прямій або непрямий імуноферментний аналіз (ІФА), сендвич-аналіз конкурентного зв'язування (див., напр., Stahli et al., 1983, Methods in Enzymology 9:242-253); твердофазний прямій ІФА з біотином і авідином (див., напр., Kirkland et al., 1986, J. Immunol. 137:3614-3619), твердофазний прямій аналіз, твердофазний прямій сендвич-аналіз (див., напр., Harlow and Lane, 1988, Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press); твердофазний прямій РІА з використанням мітки I125 (див., напр., Morel et al., 1988, Molec. Immunol. 25:7-15); твердофазний прямій ІФА з біотином і авідином (див., напр., Cheung, et al., 1990, Virology 176:546-552); твердофазний РІА (Moldenhauer et al., 1990, Scand. J. Immunol. 32:77-82). Такий аналіз може включати використання очищеного антигену, пов'язаного з твердою поверхнею або клітинами, що несуть немічений досліджуваний антигензв'язуючий білок або мічений еталонний антигензв'язуючий білок. Конкурентне інгібування може бути обмірюване шляхом визначення кількості мітки, пов'язаної з твердою поверхнею або клітинами в присутності досліджуваного антигензв'язуючого білка. Антигензв'язуючі білки, які визначені з використанням аналізу конкурентного зв'язування (конкуруючі антигензв'язуючі білки), включають антигензв'язуючі білки, що зв'язуються з тим самим епітопом, точно так само, як і еталонні антигензв'язуючі білки та антигензв'язуючі білки, що зв'язуються з прилягаючою антигенною детермінантою, що розташовується досить проксімально до епітопу, зв'язаному еталонним антигензв'язуючим білком для виникнення стеричної невідповідності. Звичайно при надлишку конкуруючого антигензв'язуючого білка останній приведе до інгібування специфічного зв'язування еталонного антигензв'язуючого білка з звичайним антигеном як мінімум на 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 % або 75 %. У деяких випадках зв'язування інгібується як мінімум на 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, 97 % або більше. Конкурентне зв'язування також може бути обмірюване шляхом іммобілізації еталонного антигензв'язуючого білка на субстраті, наприклад, за допомогою "сенсорного чипу", що захоплює антиген на субстраті за допомогою зв'язування з еталонним антитілом; надалі проводиться аналіз можливості додаткового зв'язування різних антигензв'язуючих білків (конкуруючих антигензв'язуючих білків) з антигеном. Приклад такого конкурентного антигензв'язуючого аналізу може включати аналіз Biacore (описано в Прикладі 7 зазначеної заявки на винахід). Термін "антиген" або "імуноген" стосується молекули або ділянки молекули, яка здатна зв'язуватися з селективним єднальним агентом, наприклад, антигензв'язуючим білком (включаючи, наприклад, антитіло або його імунологічно функціональний антигензв'язуючий фрагмент), і, крім того, що можуть використовуватися у тварин для одержання антитіл, здатних зв'язуватися з таким антигеном. Антиген може характеризуватися одним або декількома епітопами, які здатні взаємодіяти з різними антигензв'язуючими білками, наприклад, антитілами. Термін "епітоп" (антигенна детермінанта) позначає ділянку молекули, яка зв'язується з антигензв'язуючим білком (наприклад, антитілом). Термін включає будь-яку антигенну 27 UA 108066 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 детермінанту, здатну специфічно зв'язуватися з антигензв'язуючим білком, наприклад, антитілом або T-Клітинним рецептором. Детермінанта (епітоп) може бути секвенціальною (безперервною) або переривчастого типу (наприклад, (i) в одноланцюговому поліпептиді амінокислотні залишки, незамінні відносно одна іншої в поліпептиді, служать ділянкою зв'язування з антигензв'язуючим білком, або (ii) у мультімерном рецепторі, наприклад, CGRP R, що складаються з двох або декількох окремих компонентів, наприклад, RAMP1 і CRLR, амінокислотні залишки, що присутні в двох або декількох окремих компонентах, у контексті мультімерного рецептору зв'язуються антигензв'язуючим білком). У певних варіантах здійснення винаходу епітопи можуть бути міметичними, тобто вони мають тривимірну структуру, яка подібна для епітопа, який використовується для одержання антигензв'язуючого білка, при цьому вони не містять (або містять усього лише трохи) амінокислотних залишків, що перебувають в епітопі, використовуваному для одержання антигензв'язуючого білка. Найбільше часто епітопи розташовуються на білках, але в деяких випадках можуть розташовуватися і на молекулах іншого типу, наприклад, нуклеїнових кислотах. Антигенні детермінанти можуть включати хімічно активні поверхневі групи молекул, наприклад, амінокислот, бічні ланцюги цукрів, фосфорильні або сульфонильні групи, і можуть мати специфічні тривимірні структурні характеристики, та/або також специфічні показники заряду. Як правило, антитіла, специфічні щодо зв'язування з окремим антигеном-мішенню, будуть здебільшого розпізнавати епітоп на антигені-мішені в складній суміші білків та/абомакромолекул. Термін "ідентичність" відноситься до взаємозв'язку між послідовностями двох або декількох поліпептидних молекул або двох або декількох молекул нуклеїнових кислот, що визначається по вирівнюванню та порівнянню послідовностей. "Процентний показник ідентичності" позначає процентний показник ідентичних залишків між амінокислотами або нуклеотидами в порівнюваних молекулах і розраховується на основі розміру найменшої з порівнюваних молекул. Для таких розрахунків розриви при вирівнюванні (у випадку їх наявності) повинні пояснюватися окремою математичною моделлю або комп'ютерною програмою (тобто за допомогою "алгоритму"). Способи, які можуть використовуватися для розрахунків ідентичності вирівняних нуклеїнових кислот або поліпептидів включають способи, описані в Computational Molecular Biology, (Lesk, A. M., ed.), 1988, New York: Oxford University Press; Biocomputing Informatics and Genome Projects, (Smith, D. W., ed.), 1993, New York: Academic Press; Computer Analysis of Sequence Data, Part I, (Griffin, A. M., and Griffin, H. G., eds.), 1994, New Jersey: Humana Press; von Heinje, G., 1987, Sequence Analysis in Molecular Biology, New York: Academic Press; Sequence Analysis Primer, (Gribskov, M. and Devereux, J., eds.), 1991, New York: M. Stockton Press; і Carillo et al., 1988, SIAM J. Applied Math. 48:1073. При розрахунках процентного показника ідентичності, порівнювані послідовності вирівнюються таким чином, щоб можна було одержати найбільшу відповідність між послідовностями. Використовувана для визначення процентного показника ідентичності комп'ютерна програма представлена пакетом програм GCG, що включають GAP (Devereux et al., 1984, Nucl. Acid Res. 12:387; Genetics Computer Group, University of Wisconsin, Madison, WI). Комп'ютерний алгоритм GAP використовується для вирівнювання двох поліпептидів або полінуклеотидів, для яких необхідно визначити процентний показник ідентичності послідовності. Послідовності вирівнюються для оптимального визначення подібності їх відповідних амінокислот або нуклеотиду ("діапазон відповідності", обумовлений алгоритмом). Штраф за відкриття пропусків (який розраховується як 3x середня діагональ, де "середня діагональ" являє собою середнє значення діагоналі використовуваної матриці порівняння; "діагональ" є показником або числом, який надається кожній відповідній до амінокислоти в окремій матриці порівняння) і штраф за продовження пропусків (складовий звичайно 1/10 штрафу за відкриття пропусків) разом з матрицею порівняння, наприклад, PAM 250 або BLOSUM 62, використовуються в комбінації з даним алгоритмом. У певних варіантах здійснення винаходу алгоритмом також використовується стандартна матриця порівняння (див. Dayhoff et al., 1978, Atlas of Protein Sequence and Structure 5:345-352 для матриці порівняння PAM 250; Henikoff et al., 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89:10915-10919 для матриці порівняння BLOSUM 62). Рекомендовані параметри для визначення процентного показника ідентичності для поліпептидів або нуклеотидних послідовностей з використанням програми GAP наступні: Алгоритм: Needleman et al., 1970, J. Mol. Biol. 48:443-453; Матриця порівняння: BLOSUM 62 від Henikoff et al., 1992, див. вище; Штраф за пропуск: 12 (але без штрафу за кінцеві пропуски) Штраф за довжину пропуску: 4 Поріг подібності: 0 Певні схеми вирівнювання для вирівнювання двох послідовностей амінокислот можуть 28
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюHuman cgrp receptor binding protiens
Автори англійськоюBoone, Thomas C., Brankow, David W., Gegg, Jr., Colin V., Hu, Shaw-Fen Sylvia, King, Chadwick T., Lu, Hsieng Sen, Shi, Licheng, Xu, Cen
Автори російськоюХу Шо-Фен Сильвия
МПК / Мітки
МПК: C07K 16/28, A61K 39/395, A61P 25/06, C07K 14/72
Мітки: зв'язуються, білки, людини, cgrp-рецепторами
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/298-108066-bilki-shho-zvyazuyutsya-z-cgrp-receptorami-lyudini.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Білки, що зв’язуються з cgrp-рецепторами людини</a>
Cgrp-антагоністи, спосіб їх одержання, а також їх застосування як лікарських засобів
Номер патенту: 88163
Опубліковано: 25.09.2009
Автори: Лустенбергер Філіпп, Доодс Хенрі, Палеарі Фабіо, Рудольф Клаус, Арндт Кірстен, Дрейер Александер, Штенкамп Дірк, Мюллер Штефан Георг, Сантагостіно Марко, Шенцле Герхард
МПК: A61P 25/06, A61K 31/551, C07D 401/14, C07D 401/04
Мітки: cgrp-антагоністи, одержання, лікарських, засобів, застосування, спосіб, також
Застосування антагоністів cgrp та інгібіторів вивільнення cgrp для усунення припливів у період менопаузи
Номер патенту: 73137
Опубліковано: 15.06.2005
Автори: Енгель Вольфганг, Рудольф Клаус, Дудс Хенрі, Еберлейн Вольфганг
МПК: A61K 31/00, A61P 15/12
Мітки: інгібіторів, менопаузи, вивільнення, застосування, період, припливів, усунення, антагоністів
Формула / Реферат:
1. Застосування діючої речовини, вибраної з антагоністів CGRP та інгібіторів вивільнення CGRP, для усунення припливів у період менопаузи.2. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що воно являє собою монотерапію з використанням однієї діючої речовини.3. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що воно являє собою доповнення до гормонзамісної терапії.4. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що діюча...
Білки, які зв’язуються з b-амілоїдним пептидом та полінуклеотиди, що їх кодують
Номер патенту: 72875
Опубліковано: 16.05.2005
Автори: Кажковскі Ейлін Марі, Волкер Стефен Гленн, Бард Джонатан Адам, Джекобсен Джек Стівен, Софіа Хейді, Озенбергер Бредлі Елтон
МПК: A61K 38/00, A01K 67/027, G01N 33/15, C12N 15/09, C12N 1/21, G01N 33/50, C07K 16/18, C07K 19/00, C12Q 1/68, A61P 25/28, C12N 5/10, C07K 14/47
Мітки: кодують, b-амілоїдним, білки, полінуклеотиди, зв'язуються, пептидом
Формула / Реферат:
1. Виділений полінуклеотид, який вибирають з групи, що включає:(a) полінуклеотид, що включає нуклеотидну послідовність за SEQ ID NO 1,(b) полінуклеотид, який включає нуклеотидну послідовність білка, що зв’язується з -амілоїдним пептидом (ВВР), клону BBP1-fI, внесеного за депозитарним номером АТСС 98617,(c) полінуклеотид, який кодує білок, що зв’язується...
Анти-cgrp антагоністичне антитіло та фармацевтична композиція, що його включає
Номер патенту: 94244
Опубліковано: 26.04.2011
Автори: Поульсен Крістіан Тодд, Абдіче Ясміна Нубіа, Розенталь Арнон, Понс Хауме, Колльєр С'єрра Джонс, Целлєр Йорг
МПК: A61K 39/395, C07K 16/18, A61P 25/06
Мітки: композиція, антитіло, анти-cgrp, антагоністичне, включає, фармацевтична
Формула / Реферат:
1. Анти-CGRP антагоністичне антитіло з афінністю зв'язування (KD) з людським α-CGRP 50 нМ або менше, як вимірюється за допомогою поверхневого плазмонного резонансу при 37 °C, що включає:a) VН CDR3, як представлено у SEQ ID NO: 5, або послідовність, яка відрізняється від SEQ ID NO: 5 1 або 2 консервативними амінокислотними замінами; таb) VL CDR3, як представлено у SEQ ID NO: 8, або послідовність, яка відрізняється від SEQ ID...
Чутливі до сульфонілсечовини репресорні білки
Номер патенту: 105017
Опубліковано: 10.04.2014
Автори: Макбрайд Кевін Е., Ласснер Майкл, Лугер Лорен Л., МакГонігл Брайан
МПК: C07K 14/195
Мітки: сульфонілсечовини, білки, репресорні, чутливі
Формула / Реферат:
1. Ізольований поліпептид, який включає чутливий до сульфонілсечовини репресор, що специфічно зв'язується з полінуклеотидом, який включає послідовність оператора, де зв'язування регулюється сполукою сульфонілсечовини, причому зазначений поліпептид включає амінокислотну послідовність, яка має принаймні 95 % ідентичності послідовності до SEQ ID NO:1240, де ідентичність послідовності визначається на повній довжині поліпептиду.2....
Попередній патент: Спосіб боротьби з фітопатогенними нематодами за допомогою спор pasteuria в покриттях для насіння
Випадковий патент: Механізм повороту лопаток осьової турбомашини